茶多酚的檢測方法

1、茶多酚檢驗操作規(guī)程1、目的：規(guī)定茶多酚檢驗的操作規(guī)程。2、適用范圍：適用于茶多酚的檢驗。3、職責：檢驗人員嚴格按該操作規(guī)程執(zhí)行。4、內(nèi)容：4.1取樣4.1.1取樣器：不銹鋼長匙。4.1.2取樣方法：混合縮分法。4.1.3取樣量：混合縮分后，取符合檢測全項目及留樣的樣品數(shù)量。4.2 操作方法：4.2.1樣品制備：取混合均勻后的樣品適量，于自封塑料袋中備用4.2.2制備好的留樣袋上貼上該產(chǎn)品生產(chǎn)批號、名稱、留樣時間。4.3茶多酚含量測定：依據(jù)：QB215495。4.3.3檢驗方法：分光光度法。4.3.3儀器和用具：分析天平、分光光度儀、移液管、比色皿（1cm）。4.3.4試劑和溶液：蒸餾水、酒石酸

2、亞鐵溶液、PH7.5磷酸鹽緩沖液。4.3.5酒石酸亞鐵溶液的配制：稱取硫酸亞鐵1.0g、酒石酸鉀鈉5.0g、加水溶解并溶至1L。4.3.6 PH7.5磷酸鹽緩沖液配制：a液：1/15moL/L磷酸氫二鈉溶液：稱取23.877g加水溶解并稀至1L。b液：1/15moL/L的磷酸二氫鉀液：稱取經(jīng)110C烘干的磷酸二氫鉀9.078g, 加水溶解1L。取a液85mL和b液15mL混勻，即待PH7.5緩沖液。4.3.7操作方法：4.3.7.1準確稱取樣品約100mg，精密稱定于100mL容量瓶中，加水溶解后稀至 刻度。4.3.7.2準確吸取上述試液1mL于25mL容量瓶中，加水4mL，加酒石酸亞鐵溶 液

3、5mL，充分混勻后，用PH7.5緩沖液稀至刻度。4.3.7.3以試劑空白液作為參比液，于540mm波長處，測定試液吸光度A。4.3.8結(jié)果計算:人曰 AX2.884X100茶多酚含量=X100%1000 X W4.4兒茶素中各組成及咖啡堿含量測定：4.4.1依據(jù)：茶多酚中兒茶素、咖啡堿含量高相液譜法4.4.2方法：面積歸一法4.4.3儀器和用具：（1）P1201高相液相色譜儀、EC2006色譜工作站、100mL進樣器、柱溫箱、 紫外分光檢測器、電子天平。（2）色譜操作條件：色譜柱：250mmX4.6mmHYPERSIL BDS.C18 0.5|J m；流動相：甲醇：水：磷酸=29ml ： 71

4、mL ： 0.1mL柱溫：32 C流速：1.00mL/min檢測波長：280nm進樣量：滿量程進樣（20p L）4.4.4操作方法：4.4.4.1精密稱取樣品0.15g，置于500mL容量瓶中，溫水溶解，加水稀至刻度、 搖勻，用0.5p m針頭過濾器過濾，得液譜分析試樣。4.4.4.2用流動相沖柱查看基線，待基線走平穩(wěn)后，用100mL液譜進樣器吸上述 試樣液滿量程，按色譜操作規(guī)定進行進樣。4.4.4.3根據(jù)上述進樣液及各組份圖譜，在EC2006色譜工作站上將譜圖面積積 分，根據(jù)譜圖出峰的保留時間確立測試樣品中對應(yīng)的每一種組分峰面積，輸入響 應(yīng)組分的校正因子，計算出該組分的濃度及百分含量，各組分

5、含量總和為兒茶素 總量。4.4.5計算：CX104兒茶素各組分及咖啡堿含量=一wx 100%允許差：取其算術(shù)平均值為測定結(jié)果，平行測定結(jié)果之差不得大于0.2%， 結(jié)果保留小數(shù)點后兩位。4.5干燥失重測定：依據(jù)：GB/T8304-20024.5.2檢驗方法：干燥恒溫法4.5.3儀器和用具：鼓風恒溫干燥箱、玻璃稱量瓶、干燥器、分析天平。4.5.4操作方法：稱取茶多酚樣品12g精密稱定，置于已干燥恒重的稱量瓶中，于103C 土 2C恒溫干燥4小時，加蓋取出置干燥器中冷至室溫，稱重，再于干燥箱中繼續(xù) 加熱1小時，直至恒重。4.5.5結(jié)果計算：p =MM2 乂100%式中：M1試樣+稱瓶重；M2，恒重后

6、試樣+稱瓶重；M0空稱瓶 重允許差：同一樣品測定值之差，每100g不得超過0.2g，取符合重復(fù)性要求 兩次測定值的算術(shù)平均值作為測定結(jié)果，結(jié)果精確至小數(shù)點后兩位。依據(jù)：GB/T8306-2002檢驗方法：灼燒恒重儀器和用具：高溫爐、帶蓋坩鍋、電子天平、干燥器 操作方法：4.6灼燒殘渣測定：4.6.24.6.34.6.14.6.44.6.4.1取帶蓋坩鍋置高溫爐中，在525C25C下灼燒至恒重。4.6.4.2用灼燒恒重后的已知重量坩鍋，精密稱取樣品23g放入坩鍋中。4.6.4.3將樣和坩鍋預(yù)先在電爐上小火加熱，使樣品充分碳化無煙后，置高溫爐 中在525C土25C下灼燒至恒重后，關(guān)掉高溫爐，讓樣品在高溫爐中自然冷至 200C以下后，取出放入干燥器中，冷至室溫后稱重。（注：所用坩鍋都已灼燒至 恒重）4.6.5計算：灰份=M2M0 X10。式中：M1試樣+