商品肉豆蔻藥材的指紋圖譜研究

1、商品肉豆蔻藥材的指紋圖譜研究袁子民,賈天柱,張艷秋,祖鳳英【摘要】目的創(chuàng)立商品肉豆蔻藥材甲醇提取液的指紋圖譜闡發(fā)要領(lǐng),以觀察差異地域市售肉豆蔻藥材質(zhì)量的均一性。要領(lǐng)接納高效液相色譜法,色譜柱為zrbaxelipsexdb-18(4.6150,5)；活動(dòng)相：甲醇-乙腈-水(253540),流速1l/in,柱溫：30；檢測(cè)波長(zhǎng)：270n。以去氫二異丁香酚為參照物。效果創(chuàng)立了肉豆蔻藥材的指紋圖譜,共有17個(gè)共有峰,指紋圖譜相似度均在0.9以上。結(jié)論差異地域市售的商品肉豆蔻藥材無(wú)差異性,該法正確、可靠,為肉豆蔻藥材的質(zhì)量操縱提供了科學(xué)根據(jù)?！娟P(guān)鍵詞】肉豆蔻；去氫二異丁香酚；指紋圖譜；高效液相色譜法ke

2、yrds：nuteg；dehydrdiiseugenl；fingerprint；hpl肉豆蔻為肉豆蔻植物肉豆蔻yristiafragranshutt.的枯燥種仁1。由于受到產(chǎn)地泉源、貯存時(shí)間不詳、質(zhì)量操縱尺度較低等緣故原由影響,因此,肉豆蔻藥材內(nèi)涵質(zhì)量的不變、均一、可控研究尤為緊張。本試驗(yàn)接納高效液相色譜法(hpl),以差異地域商品肉豆蔻藥材為研究工具,創(chuàng)立其甲醇提取液的指紋圖譜闡發(fā)要領(lǐng),該法輕便、敏捷、正確,為肉豆蔻藥材的質(zhì)量尺度研究提供了科學(xué)根據(jù)。1質(zhì)料1.1儀器agilent1100高效液相色譜儀(heistatinsyste事情站)。1.2試藥去氫二異丁香酚比擬品2,沈陽(yáng)藥科大學(xué)提供,

3、經(jīng)高效液相色譜法面積歸一化法測(cè)定,純度98.0%；肉豆蔻藥材購(gòu)于差異地域,經(jīng)斷定為肉豆蔻科植物肉豆蔻(ystiafragranshutt.)的枯燥種仁,肉豆蔻比擬藥材購(gòu)于中國(guó)藥品生物成品檢定所,批號(hào)120926-202204。甲醇、乙腈為色譜純,水為重蒸水。1.3數(shù)據(jù)處置懲罰軟件國(guó)度藥典委員會(huì)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)體系(2022)a版(中南大學(xué)方案)。2要領(lǐng)與效果2.1色譜條件色譜柱為zrbaxelipsexdb-18(4.6150,5)；活動(dòng)相：甲醇-乙腈-水(253540),流速1.0l/in；柱溫：30；檢測(cè)波長(zhǎng)：270n。2.2參照物溶液的制備細(xì)密稱(chēng)取去氫二異丁香酚比擬品適量,加甲

4、醇制成每1l含去氫二異丁香酚0.10g的溶液,即得。2.3供試品溶液的制備取肉豆蔻粉末(過(guò)40目篩)0.5g,細(xì)密稱(chēng)定,置具塞三角瓶中,細(xì)密參加甲醇25l,稱(chēng)定重量,超聲處置懲罰30in,取出,放冷,再稱(chēng)定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液過(guò)0.45濾膜,即得供試品溶液。2.4檢測(cè)要領(lǐng)參照?中華人民共和國(guó)藥典?2022年版(一部)附錄d試驗(yàn),別離細(xì)密汲取參照物溶液及供試品溶液各10l,注入液相色譜儀,記載70in的色譜圖,即得。2.5細(xì)密度試驗(yàn)細(xì)密汲取同一供試品溶液10l,在所創(chuàng)立的測(cè)定條件下一連進(jìn)樣5次,接納中藥色譜指紋圖譜的相似性盤(pán)算軟件盤(pán)算,效果5次進(jìn)樣的色譜圖其相似度均為

5、0.9以上,表白儀器細(xì)密度精良,切合指紋圖譜要求。2.6重復(fù)性試驗(yàn)細(xì)密稱(chēng)取同一批樣品各5分,別離按供試品溶液制備要領(lǐng),細(xì)密汲取各供試品溶液10l,別離注入液相色譜儀,測(cè)定指紋圖譜。接納中藥色譜指紋圖譜的相似性盤(pán)算軟件對(duì)5次測(cè)定效果舉行盤(pán)算,效果各供試品色譜圖其相似度均為0.9以上,表白要領(lǐng)的重復(fù)性精良,切合指紋圖譜要求。2.7不變性試驗(yàn)細(xì)密汲取同一供試品溶液5l,按0、2、4、6、8、12、24h所創(chuàng)立的測(cè)定條件舉行檢測(cè),接納中藥色譜指紋圖譜的相似性盤(pán)算軟件對(duì)所得效果舉行盤(pán)算,其相似度均為0.9以上,效果表白,在24h內(nèi)肉豆蔻的色譜指紋圖譜根本不變,沒(méi)有顯著的變革,切合指紋圖譜的要求。2.8樣

6、品測(cè)定按上述樣品溶液的制備要領(lǐng)及測(cè)定要領(lǐng),對(duì)10批差異地域商品肉豆蔻藥材舉行測(cè)定,記載色譜圖,接納中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)體系,對(duì)測(cè)定效果舉行處置懲罰,得到各批次樣品的相似度。效果見(jiàn)表1。表110批商品肉豆蔻藥材指紋圖譜的相似度略2.9指紋圖譜的創(chuàng)立及闡發(fā)(見(jiàn)圖1圖4)按上述要領(lǐng)檢測(cè)10批肉豆蔻的指紋圖譜,效果表白,10批肉豆蔻藥材的指紋圖譜有17個(gè)比力不變的特性峰,此中4號(hào)峰為去氫二異丁香酚色譜峰。由相似度評(píng)價(jià)效果可以看出,10批差異地域商品肉豆蔻藥材hpl指紋圖譜的相似度均在0.9以上,未創(chuàng)造離群樣本。表白各藥材之間相似性精良,開(kāi)端說(shuō)明如今各地域市售的商品肉豆蔻藥材無(wú)差異性,質(zhì)量較為不變

7、。3討論試驗(yàn)中對(duì)活動(dòng)相舉行了觀察,別離接納甲醇-水(7030)、甲醇-乙腈-水(303040)、甲醇-乙腈-水(253540)為活動(dòng)相,效果創(chuàng)造以甲醇-乙腈-水(253540)為活動(dòng)相條件下,分散度好,特性峰全面；要領(lǐng)學(xué)觀察試驗(yàn)效果證實(shí),該要領(lǐng)正確、可靠,可用于肉豆蔻藥材指紋圖譜的闡發(fā)測(cè)定3。供試品溶液制備時(shí),曾對(duì)提取要領(lǐng)(回流、索氏提娶超聲)、提取時(shí)間、提取溶劑(甲醇、乙醇、70%乙醇)舉行了觀察,效果接納甲醇超聲處置懲罰30in即可提取完全,要領(lǐng)輕便、可行,且甲醇對(duì)肉豆蔻中揮發(fā)性及非揮發(fā)性身分均能提取,色譜峰較多。去氫二異丁香酚是肉豆蔻中非揮發(fā)性身分,含量較高,具有較強(qiáng)的抑菌作用,為肉豆蔻

8、中的活性身分,且性子不變,應(yīng)選擇其為參照物峰,同時(shí)結(jié)合其汲取波長(zhǎng)及色譜峰數(shù)目、分散程度,經(jīng)挑選確定測(cè)定波長(zhǎng)為270n。肉豆蔻重要含有揮發(fā)油、脂肪油、木脂素類(lèi)等多種有用身分,本試驗(yàn)接納hpl法對(duì)其舉行指紋圖譜的開(kāi)端研究。指紋峰不但包羅非揮發(fā)性身分,還能包羅揮發(fā)性身分,化學(xué)身分檢測(cè)的較多,比擬接納氣相色譜法,更能代表肉豆蔻化學(xué)身分的團(tuán)體性。肉豆蔻藥材多為入口,其產(chǎn)地、貯存時(shí)間等不太明白,在指紋圖譜研究中創(chuàng)造固然相似性均在0.9以上,但10批商品肉豆蔻藥材共有指紋蜂相對(duì)峰面積變革變異較大,同時(shí)也反響差異地域商品肉豆蔻化學(xué)身分及自己個(gè)別種仁間也大概存在差異,還需進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1國(guó)度藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)s.北京：化學(xué)產(chǎn)業(yè)