專題21基因工程doc(共12頁(yè))

1、選修(xunxi)3第10單元(dnyun)現(xiàn)代生物科技專題專題(zhunt)21基因工程考點(diǎn)六十三 基因工程的原理及技術(shù)高考試題 1.(2013年安徽理綜,T6,6分,)如圖為通過DNA分子雜交鑒定含有某特定DNA的細(xì)菌克隆示意圖。下列敘述正確的是()A.根據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)可以準(zhǔn)確計(jì)算樣品中含有的活菌實(shí)際數(shù)目B.外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行復(fù)制C.重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)镈NA分子脫氧核糖和磷酸交替連接D.放射自顯影結(jié)果可以顯示原培養(yǎng)皿中含有特定DNA的細(xì)菌菌落位置點(diǎn)睛:本題考查了微生物的分離和培養(yǎng)及某種微生物數(shù)量的測(cè)定。意在考查考生對(duì)微生物分離、培養(yǎng)、數(shù)

2、量測(cè)定等操作過程的理解能力。解析:據(jù)圖可知,該操作為稀釋涂布平板法,只能估算樣品中的活細(xì)菌數(shù),不能準(zhǔn)確計(jì)算,A錯(cuò)誤;轉(zhuǎn)錄從啟動(dòng)子開始,到終止子結(jié)束,故外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行表達(dá),B錯(cuò)誤;重組質(zhì)粒與探針之間的雜交原理是堿基互補(bǔ)配對(duì),C錯(cuò)誤;放射自顯影結(jié)果顯示的雜交鏈位置與原培養(yǎng)皿中含有特定DNA的細(xì)菌菌落位置相同,D正確。答案:D2.(2012年浙江理綜,T6,6分,)天然的玫瑰沒有藍(lán)色花,這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B,而開藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B。現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰,下列操作正確的是()A.提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)

3、的DNA,再擴(kuò)增基因BB.利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取基因BC.利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D.將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌,然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞點(diǎn)睛:本題主要考查基因工程技術(shù)中目的基因的獲取和轉(zhuǎn)化的方法,是對(duì)識(shí)記能力和理解能力的考查。解析:提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA,逆轉(zhuǎn)錄得到DNA,然后擴(kuò)增,可獲得大量的基因B,A正確。從基因文庫(kù)中獲取目的基因,只要根據(jù)目的基因的相關(guān)信息和基因文庫(kù)中的信息進(jìn)行篩選對(duì)比即可,不需要用限制酶進(jìn)行切割,B錯(cuò)誤。目的基因與質(zhì)粒的連接需要用DNA連接酶,而不是DNA聚合酶,C錯(cuò)誤。目的基因需要和運(yùn)載體連接后形成重組質(zhì)粒再導(dǎo)入

4、,而且應(yīng)該用農(nóng)桿菌進(jìn)行感染,而不是大腸桿菌,D錯(cuò)誤。答案:A3.(2011年浙江理綜,T6,6分,)將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒B.每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)C.每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)adaD.每個(gè)插入的ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子點(diǎn)睛:本題主要考查基因表達(dá)載體的構(gòu)建及目的基因的表達(dá),是對(duì)理解能力的考查。解析:題干所述轉(zhuǎn)基因操作已經(jīng)成功,故每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞中都導(dǎo)入了重組質(zhì)粒且目的基因成功表達(dá),A、D正確。重組質(zhì)粒是由同種限制酶切割開的質(zhì)粒

5、和目的基因連接而成,因此重組質(zhì)粒上仍含限制酶識(shí)別位點(diǎn),B正確。每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)只能插入一個(gè)ada,C錯(cuò)誤。答案:C4.(2013年新課標(biāo)全國(guó)(qun u)理綜,T40(1),15分,)閱讀(yud)如下資料:資料甲:科學(xué)家將牛生長(zhǎng)激素(shn chn j s)基因?qū)胄∈笫芫阎?得到了體型巨大的“超級(jí)小鼠”;科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草?；卮鹣铝袉栴}:資料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用法。構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶是和。在培育有些轉(zhuǎn)基因植物時(shí),常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,農(nóng)桿菌的作用是。點(diǎn)睛:本題主要考查基因工程的知識(shí)點(diǎn),意在考查考生對(duì)知識(shí)的識(shí)記理解

6、能力和從資料中獲取信息的能力。解析:顯微注射技術(shù)是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中采用最多,也是最為有效的一種將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法;構(gòu)建基因表達(dá)載體需要限制性內(nèi)切酶對(duì)目的基因所在的DNA和載體進(jìn)行切割,還需要DNA連接酶將目的基因與載體結(jié)合;農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的TDNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上,故可用農(nóng)桿菌感染植物,將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞。答案:顯微注射限制性內(nèi)切酶DNA連接酶農(nóng)桿菌可感染植物,將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中5.(2013年四川理綜,T10,12分,)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人將地衣芽孢桿菌的淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中,經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母

7、菌菌種(過程如圖甲所示)。(1)圖甲中,過程需要的酶有。為達(dá)到篩選目的,平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以作為唯一碳源。、過程需重復(fù)幾次,目的是 。(2)某同學(xué)嘗試過程的操作,其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是;推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是。(3)以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,接種菌的發(fā)酵罐需要先排氣,其原因是 。(4)用凝膠色譜法分離淀粉酶時(shí),在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì),相對(duì)分子質(zhì)量較。點(diǎn)睛:本題考查基因工程的相關(guān)操作及分離純化菌種的基本技能、微生物的培養(yǎng)、蛋白質(zhì)的分離等相關(guān)知識(shí),意在考查考生對(duì)實(shí)驗(yàn)原理及具體操作的理解。解析:(1)在

8、構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),需要用限制性核酸內(nèi)切酶切割和DNA連接酶進(jìn)行連接,過程重復(fù)的目的是因?yàn)橐岣咿D(zhuǎn)基因酵母菌的純度,需要多次篩選。(2)由菌落的分布情況可以看出,該同學(xué)采用的是稀釋涂布平板法,由于涂布不均勻造成圖乙現(xiàn)象。(3)工程酵母菌和普通酵母菌的區(qū)別在于:工程酵母菌利用淀粉的能力強(qiáng),發(fā)酵產(chǎn)生酒精和CO2的速度較快,故需要先排氣。(4)當(dāng)相對(duì)分子質(zhì)量較小時(shí),擴(kuò)散進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部而被滯留,洗脫所需時(shí)間較長(zhǎng)。答案:(1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶淀粉進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌(2)稀釋涂布平板法涂布不均勻(3)工程酵母工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng),導(dǎo)致酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速

9、率更快(4)小6.(2012年新課標(biāo)全國(guó)理綜,T40,15分,)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí),回答下列問題:(1)限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有和。(2)質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoR切割后產(chǎn)生的片段如下:AATTCGGCTTAA為使運(yùn)載體與目的基因(jyn)相連,含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割,該酶必須(bx)具有的特點(diǎn)是 。(3)按其來源不同,基因工程(jyn gngchng)中所使用的DNA連接酶有兩類,即DNA連接酶和DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是,產(chǎn)物是。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,常采用技術(shù)。(5)基因工程中除質(zhì)粒外,和也可作

10、為運(yùn)載體。(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,一般情況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,原因是 。點(diǎn)睛:本題考查基因工程的工具及其作用,是對(duì)識(shí)記能力和理解分析能力的考查。解析:(1)當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時(shí),產(chǎn)生的是黏性末端,而當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線處切開時(shí),產(chǎn)生的則是平末端。(2)為使運(yùn)載體與目的基因相連,不同的限制酶應(yīng)切割出相同的黏性末端,它們必須要能識(shí)別相同的核苷酸序列,并且使每條鏈中相同的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(3)根據(jù)酶的來源不同,DNA連接酶分為兩類:一類是從大腸桿菌中分離得到的,稱為Ecoli DNA連接酶;另一類是從T

11、4噬菌體中分離出來的,稱為T4DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄是以RNA為模板來合成DNA的過程?？梢栽隗w外短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增DNA的技術(shù)叫PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))。(5)基因工程中除質(zhì)粒外,還有噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。(6)大腸桿菌細(xì)胞外有細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,能阻止其他物質(zhì)的進(jìn)入,可通過Ca2+處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞。答案:(1)黏性末端平末端(2)切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoR切割產(chǎn)生的黏性末端相同(3)大腸桿菌(Ecoli)T4(4)mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR(5)噬菌體動(dòng)植物病毒(6)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(

12、外源DNA)的能力極弱7.(2012年江蘇單科,T32,9分,)圖1表示含有目的基因D的DNA片段長(zhǎng)度(bp即堿基對(duì))和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有Msp、BamH、Mbo、Sma 4種限制性核酸內(nèi)切酶,它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。請(qǐng)回答下列問題:(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由連接。(2)若用限制酶Sma完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是末端,其產(chǎn)物長(zhǎng)度為 。(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被TA堿基對(duì)替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子中分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段,用限制酶Sm

13、a完全切割,產(chǎn)物中共有種不同長(zhǎng)度的DNA片段。(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進(jìn)行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè),部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá),其最可能的原因是 。點(diǎn)睛:本題主要考查基因工程的基本操作過程、限制酶的作用及特點(diǎn)、目的(md)基因的檢測(cè)和篩選等,是對(duì)理解能力和識(shí)圖、分析推理能力的考查。解析(ji x):(1)DNA單鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間通過“脫氧核糖-磷酸(ln sun)-脫氧核糖”連接。(2)Sma識(shí)別的序列為GGGCCC,切割后會(huì)產(chǎn)生

14、平末端;圖1所示的DNA分子中含有兩個(gè)Sma的識(shí)別位點(diǎn),第一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在左端534 bp序列向右三個(gè)堿基對(duì)的位置;第二個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在右端658 bp序列向左三個(gè)堿基對(duì)的位置,從這兩個(gè)位點(diǎn)切割后產(chǎn)生的DNA片段長(zhǎng)度分別為534+3,796-3-3,658+3,即得到的DNA片段長(zhǎng)度分別為537 bp、790 bp和661 bp。(3)在雜合子體內(nèi)含有基因D和基因d,基因D的序列中含有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn),經(jīng)過Sma完全切割會(huì)產(chǎn)生537 bp、790 bp和661 bp三種不同長(zhǎng)度的片段;基因d的序列中含有一個(gè)識(shí)別位點(diǎn),經(jīng)過切割后會(huì)產(chǎn)生1 327 bp和661 bp兩種長(zhǎng)度的片段;綜上,雜合子中分離到該基因

15、的DNA片段經(jīng)過切割后會(huì)產(chǎn)生4種不同長(zhǎng)度的DNA片段。(4)能夠獲取目的基因并切開質(zhì)粒的限制酶有識(shí)別序列為GGATCC的BamH和識(shí)別序列為GATC的Mbo,若使用Mbo會(huì)同時(shí)破壞質(zhì)粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamH來切割目的基因和質(zhì)粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌。因?yàn)槟康幕蚝瓦\(yùn)載體是用同種限制酶切割的,目的基因兩端的末端和質(zhì)粒切割后的兩個(gè)末端都能進(jìn)行互補(bǔ),可能出現(xiàn)目的基因反向連接在運(yùn)載體上的情況,導(dǎo)致基因D不能正確表達(dá)。答案:(1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2)平537 bp、790 bp、661 bp(3)4(4)BamH

16、抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接8.(2011年安徽理綜,T31,9分,)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用酶短時(shí)處理幼蠶組織,以便獲得單個(gè)細(xì)胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的和之間。(3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、和。(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí),貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制

17、。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。點(diǎn)睛:本題考查基因工程和細(xì)胞工程相關(guān)知識(shí),是對(duì)識(shí)記能力和理解能力的考查。解析:(1)利用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織可獲得單個(gè)細(xì)胞。(2)來自cDNA文庫(kù)中的目的基因不含復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子等,故需將該目的基因插入到啟動(dòng)子和終止子之間。(3)PCR技術(shù)是在體外高溫條件下進(jìn)行的,需利用熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(如Taq DNA聚合酶)。由于DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連接在一個(gè)片段上,所以在PCR反應(yīng)體系中還需加入引物。(4)據(jù)題意可知,反應(yīng)器中放入多孔中空薄壁小玻璃珠可擴(kuò)大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的

18、附著面積,有利于細(xì)胞增殖。答案:(1)胰蛋白(或膠原蛋白)(2)啟動(dòng)子終止子(3)對(duì)干擾素基因特異的DNA引物Taq DNA聚合酶(4)擴(kuò)大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積模擬試題1.(2013廣東四校聯(lián)考)下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是()A.目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,一定能穩(wěn)定遺傳B.DNA連接酶的作用是將兩個(gè)黏性末端的堿基連接起來C.基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心D.常用的運(yùn)載體有大腸桿菌、噬菌體和動(dòng)植物病毒等解析:目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,必須整合在受體細(xì)胞的染色體DNA上才能穩(wěn)定遺傳,A錯(cuò)誤。不同的DNA連接酶作用不同,如T4DNA連接酶既能連接黏性末端也能連接平末端,B錯(cuò)誤。大腸桿菌常作為

19、基因工程的受體細(xì)胞,而非載體,D錯(cuò)誤。答案:C2.(2012金華十校聯(lián)考)下列不屬于有效篩選出含目的基因受體細(xì)胞的方法是()A.檢測(cè)受體細(xì)胞是否有質(zhì)粒B.檢測(cè)受體細(xì)胞是否有目的基因C.檢測(cè)受體細(xì)胞是否有目的基因表達(dá)產(chǎn)物D.檢測(cè)受體細(xì)胞是否有目的基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA解析:質(zhì)粒上不一定含目的基因,因此受體細(xì)胞中檢測(cè)到質(zhì)粒并不意味著一定含目的基因,A錯(cuò)誤?？芍苯訖z測(cè)目的基因或檢測(cè)其轉(zhuǎn)錄、翻譯(fny)的產(chǎn)物,B、C、D正確。答案(d n):A3.(2013杭州一檢)基因工程利用某目的基因(圖甲)和Pl噬菌體載體(zit)(圖乙)構(gòu)建重組DNA。限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是Bgl、EcoR和Sau

20、3A。下列分析錯(cuò)誤的是()A.構(gòu)建重組DNA時(shí),可用Bgl和Sau3A切割目的基因和Pl噬菌體載體B.構(gòu)建重組DNA時(shí),可用EcoR和Sau3A切割目的基因和Pl噬菌體載體C.圖乙中的Pl噬菌體載體只用EcoR切割后,含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D.用EcoR切割目的基因和Pl噬菌體載體,再用DNA連接酶連接,只能產(chǎn)生一種重組DNA解析:據(jù)圖可知,目的基因兩側(cè)和載體上都有三種限制酶的切割位點(diǎn),但Bgl和Sau3A必須同時(shí)使用;EcoR可單獨(dú)使用,也可與Bgl或Sau3A同時(shí)使用。若圖乙中的Pl噬菌體載體只用EcoR切割,可形成1個(gè)切口,含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán),C正確;此時(shí),可能形成目的基因-目的基因

21、、目的基因-載體、載體-載體至少3種重組DNA,D錯(cuò)誤。答案:D4.(2013威海模擬)科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與某種細(xì)菌(不含抗生素抗性基因)的DNA分子進(jìn)行重組,并成功地在該細(xì)菌中得以表達(dá)(如下圖)。請(qǐng)據(jù)圖分析回答:(1)過程所示獲取目的基因的方法是。(2)細(xì)菌是理想的受體細(xì)胞,這是因?yàn)樗?。(3)質(zhì)粒A與目的基因結(jié)合時(shí),首先需要用酶將質(zhì)粒切開“缺口”,然后用酶將質(zhì)粒與目的基因“縫合”起來。(4)若將細(xì)菌B先接種在含有的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng),說明該細(xì)菌中已經(jīng)導(dǎo)入外源質(zhì)粒,但不能說明外源質(zhì)粒是否成功插入目的基因;若將細(xì)菌B再重新接種在含有的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng),則說明細(xì)菌B中已經(jīng)導(dǎo)入了插入目的基因的重

22、組質(zhì)粒。(5)檢測(cè)工程菌中的生長(zhǎng)激素基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA和是否翻譯出生長(zhǎng)激素,可采用的技術(shù)分別是、。解析:(1)圖中過程是以RNA為模板,通過反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因。(2)細(xì)菌具有繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少等優(yōu)點(diǎn),因此是基因工程中的理想的受體細(xì)胞。(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),需先用限制酶分別切割目的基因和載體,再用DNA連接酶將兩者連接起來。(4)質(zhì)粒A和重組質(zhì)粒中都有完整的抗氨芐青霉素基因,因此細(xì)菌有氨芐青霉素抗性說明該細(xì)菌中已經(jīng)導(dǎo)入外源質(zhì)粒,但不能說明外源質(zhì)粒是否成功插入目的基因;重組質(zhì)粒中抗四環(huán)素基因內(nèi)插入了目的基因,不能表達(dá),因此細(xì)菌對(duì)四環(huán)素?zé)o抗性則說明細(xì)菌B中已經(jīng)導(dǎo)入了插入目的基

23、因的重組質(zhì)粒。(5)檢測(cè)mRNA和生長(zhǎng)激素(蛋白質(zhì))的技術(shù)分別是分子雜交和抗原-抗體雜交。答案(d n):(1)反轉(zhuǎn)錄法(逆轉(zhuǎn)錄法)(2)繁殖(fnzh)快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少(3)限制性內(nèi)切酶DNA連接(linji)(4)氨芐青霉素四環(huán)素(5)分子雜交抗原抗體雜交5.(2011山西四校聯(lián)考)在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里,一種被稱為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲。這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補(bǔ)充每天必需的維生素A。由于含有可以生成維生素A的胡蘿卜素,它呈現(xiàn)金黃色澤,故稱“金色大米”?！敖鹕竺住钡呐嘤鞒倘鐖D所示,請(qǐng)回答下列問題。(已知酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GGATCC,酶的識(shí)別

24、序列和切點(diǎn)是GATC)。(1)培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中,其核心是,通過該操作形成了圖中的(填字母),它的構(gòu)成至少包括等。(2)在研究過程中獲取了目的基因后采用技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。在構(gòu)建c的過程中目的基因用(填“限制酶”或“限制酶”)進(jìn)行了切割。檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功,需要利用作為標(biāo)記基因。(3)過程d通常采用法,過程e運(yùn)用了技術(shù),在該技術(shù)應(yīng)用的過程中,關(guān)鍵步驟是利用含有一定營(yíng)養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行和。(4)若希望該轉(zhuǎn)基因水稻生產(chǎn)的“金色大米”含維生素A含量更高、效果更好,則需要通過工程手段對(duì)合成維生素A的相關(guān)目的基因進(jìn)行設(shè)計(jì)。該工程是一項(xiàng)難度很大的工程,目前成功的例子不多,

25、主要原因是 。解析:(1)基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建,構(gòu)建成的基因表達(dá)載體可用圖中c表示,其結(jié)構(gòu)中至少包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。(2)擴(kuò)增目的基因應(yīng)采用PCR技術(shù)。據(jù)圖可知,限制酶的識(shí)別序列中包含了限制酶的識(shí)別序列,若使用限制酶進(jìn)行切割,則基因和基因都會(huì)被破壞,因此應(yīng)使用限制酶進(jìn)行切割。此時(shí)基因結(jié)構(gòu)完整,可作為標(biāo)記基因。(3)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞(過程d)通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,將受體細(xì)胞培育為完整植株需用植物組織培養(yǎng)技術(shù),該技術(shù)的核心是脫分化和再分化。(4)對(duì)自然界原有基因的修飾、改造需通過蛋白質(zhì)工程。由于蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜,目前對(duì)很多蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)還不了解

26、,目前蛋白質(zhì)工程成功的例子不多。答案:(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建c目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因(2)PCR限制酶基因(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物組織培養(yǎng)脫分化再分化(4)蛋白質(zhì)因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜,目前對(duì)很多蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)還不了解考點(diǎn)六十四 基因工程的應(yīng)用高考試題 1.(2013年廣東理綜,T3,4分,)從某海洋動(dòng)物中獲得一基因,其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1。目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物,首先要做的是()A.合成編碼目的肽的DNA片段B.構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體C.依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽D.篩選出具有優(yōu)良活性的模擬(mn)肽作為目

27、的肽點(diǎn)睛:本題考查了蛋白質(zhì)工程的原理和流程,意在考查考生提取題干中信息(xnx),運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決問題的能力。解析:蛋白質(zhì)工程是設(shè)計(jì)自然界中不存在的蛋白質(zhì),其具體的流程(lichng)為:預(yù)期的蛋白質(zhì)功能預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。所以要先設(shè)計(jì)P1的多肽鏈,改造DNA序列,之后將新DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞中表達(dá)。答案:C2.(2011年四川理綜,T5,6分,)北極比目魚中有抗凍基因,其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列,該序列重復(fù)次數(shù)越多,抗凍能力越強(qiáng),下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖,有關(guān)敘述正確的是()A.過程獲取的目的基因,可用于基因工程和比目

28、魚基因組測(cè)序B.將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因,不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C.過程構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因,需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D.應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)點(diǎn)睛:本題考查基因工程的操作步驟和應(yīng)用,是對(duì)理解能力和應(yīng)用能力的考查。解析:過程獲得的目的基因已不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子,因此不能用于比目魚基因組測(cè)序,A錯(cuò)誤。多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因表達(dá)的是多個(gè)抗凍蛋白的重復(fù)序列,而不是抗凍蛋白中11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列,因此不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白,B正確。導(dǎo)入農(nóng)桿菌是為了擴(kuò)增和更易導(dǎo)入番茄細(xì)胞,C錯(cuò)誤。DNA探針技術(shù)

29、不能檢測(cè)基因是否完全表達(dá),目的基因的完全表達(dá)應(yīng)該檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì),D錯(cuò)誤。答案:B3.(2009年安徽理綜,T4,6分,)2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白”的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個(gè)融合基因,再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi),表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是()A.追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過程B.追蹤目的基因插入到染色體上的位置C.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布D.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)點(diǎn)睛:本題考查蛋白質(zhì)工程的應(yīng)用,是對(duì)理解和應(yīng)用能力的考查。解析:將綠色熒光蛋白基因的片段

30、與目的基因連接起來組成一個(gè)融合基因,將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi),表達(dá)出的蛋白質(zhì)帶有綠色熒光,從而可以追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布,故C正確。目的基因本身并不帶綠色熒光,無法直接追蹤、檢測(cè)。答案:C4.(2013年新課標(biāo)全國(guó)理綜,T40(2),15分,)閱讀如下資料:資料乙:T4溶菌酶在溫度較高時(shí)易失去活性?？茖W(xué)家對(duì)編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行了改造,使其表達(dá)的T4溶菌酶第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個(gè)二硫鍵,提高了T4溶菌酶的耐熱性?；卮鹣铝袉栴}:資料乙屬于工程的范疇。該工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對(duì)進(jìn)行改造

31、,或制造一種的技術(shù)。在該實(shí)例中,引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的序列發(fā)生了改變。點(diǎn)睛:本題主要考查蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識(shí),意在考查考生對(duì)知識(shí)識(shí)記理解能力和從資料中獲取信息的能力。解析:從資料乙中可以得出的是對(duì)基因進(jìn)行改造,結(jié)果得到耐熱性提高的蛋白質(zhì),因此屬于蛋白質(zhì)工程的范疇。蛋白質(zhì)工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新蛋白質(zhì)的技術(shù)。對(duì)基因進(jìn)行改造后,第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了二硫鍵,引起了空間結(jié)構(gòu)的改變,所以最終是由于氨基酸序列的改變導(dǎo)致了空間結(jié)構(gòu)的改變。答案(d n):蛋白質(zhì)現(xiàn)

32、有的蛋白質(zhì)新蛋白質(zhì)氨基酸5.(2013年北京(bi jn)理綜,T30,18分,)斑馬魚的酶D由17號(hào)染色體上的D基因編碼。具有純合突變基因(dd)的斑馬魚胚胎會(huì)發(fā)出紅色熒光(ynggung)。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白(G)基因整合到斑馬魚17號(hào)染色體上,帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對(duì)應(yīng)位點(diǎn)表示為g。用個(gè)體M和N進(jìn)行如下雜交實(shí)驗(yàn)。(1)在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中,將G基因與質(zhì)粒重組,需要的兩類酶是和。將重組質(zhì)粒顯微注射到斑馬魚中,整合到染色體上的G基因后,使胚胎發(fā)出綠色熒光。(2)根據(jù)上述雜交實(shí)驗(yàn)推測(cè):親代M的基因型是(選填選項(xiàng)前的符號(hào))。a.DDggb.Ddgg子代中

33、只發(fā)出綠色熒光的胚胎基因型包括(選填選項(xiàng)前的符號(hào))。a.DDGGb.DDGgc.DdGGd.DdGg(3)雜交后,出現(xiàn)紅綠熒光(既有紅色又有綠色熒光)胚胎的原因是親代(填“M”或“N”)的初級(jí)精(卵)母細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中,同源染色體的發(fā)生了交換,導(dǎo)致染色體上的基因重組。通過記錄子代中紅綠熒光胚胎數(shù)量與胚胎總數(shù),可計(jì)算得到該親本產(chǎn)生的重組配子占其全部配子的比例,算式為 。點(diǎn)睛:本題考查的知識(shí)點(diǎn)包括:基因工程的流程和應(yīng)用,雜交實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用,連鎖互換定律的實(shí)質(zhì)。意在綜合考查考生對(duì)遺傳變異規(guī)律的理解能力、提取信息和分析推理能力、綜合運(yùn)用能力。解析:(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建需要兩種工具酶:限制性核酸內(nèi)切

34、酶(簡(jiǎn)稱限制酶)和DNA連接酶。動(dòng)物細(xì)胞工程的受體細(xì)胞是受精卵。斑馬魚胚胎發(fā)出綠色熒光是由于G基因(目的基因)表達(dá)產(chǎn)生了綠色熒光蛋白。(2)由題意,對(duì)雜交子代性狀進(jìn)行分析,子代出現(xiàn)紅色熒光胚胎基因型為ddgg、綠色熒光胚胎基因型為DG,根據(jù)親本的表現(xiàn)型,推出親代M(胚胎期無熒光)的基因型為Ddgg,親代N的基因型為DdGg,子代只發(fā)出綠色熒光的胚胎基因型為DDGg或DdGg。(3)結(jié)合圖示,M個(gè)體無論是否發(fā)生交叉互換,產(chǎn)生的配子都為Dg和dg,N個(gè)體在不發(fā)生交叉互換時(shí)產(chǎn)生的配子為DG和dg,正常情況下M、N交配不會(huì)產(chǎn)生紅綠熒光子代胚胎。但若N個(gè)體在發(fā)生交叉互換(如圖所示)后,則子代會(huì)出現(xiàn)紅綠熒

35、光胚胎(ddGg)。若親代N產(chǎn)生的配子(piz)中重組的配子(dG和Dg)占的比例為x,則dG占的比例為x2,又因?yàn)橛H代M產(chǎn)生兩種比例相等的配子Dg、dg,可知子代(zdi)胚胎中紅綠熒光胚胎(piti)(ddGg)的概率為x4,即x4=紅綠熒光胚胎數(shù)量胚胎總數(shù),可推出重組的配子占全部配子的比例x=4紅綠熒光胚胎數(shù)量胚胎總數(shù)答案:(1)限制性核酸內(nèi)切酶/限制酶DNA連接酶受精卵表達(dá)(2)bb、d(3)N非姐妹染色單體4紅綠熒光胚胎數(shù)量胚胎總數(shù)6.(2012年福建理綜,T32,10分,)肺細(xì)胞中的let7基因表達(dá)減弱,癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng),會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let7基因?qū)敕?/p>

36、癌細(xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá),發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。請(qǐng)回答:(1)進(jìn)行過程時(shí),需用酶切開載體以插入let7基因。載體應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動(dòng)let7基因轉(zhuǎn)錄,該部位稱為 。(2)進(jìn)行過程時(shí),需用酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞,以利于傳代培養(yǎng)。(3)研究發(fā)現(xiàn),let7基因能影響癌基因RAS的表達(dá),其影響機(jī)理如圖2。據(jù)圖分析,可從細(xì)胞中提取進(jìn)行分子雜交,以直接檢測(cè)let7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制,可能是由于細(xì)胞中(RAS mRNA/RAS蛋白)含量減少引起的。點(diǎn)睛:本題主要考查有關(guān)基因工程和細(xì)胞工程中的知識(shí),涉及的知識(shí)點(diǎn)主要有表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因的

37、檢測(cè)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等,是對(duì)識(shí)記能力的考查。解析:(1)過程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建,在該過程中需要用限制酶對(duì)載體進(jìn)行切割以便于目的基因的插入。啟動(dòng)子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶結(jié)合和識(shí)別的位點(diǎn),RNA聚合酶結(jié)合到該位點(diǎn),可驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程。(2)過程表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制后可以用胰蛋白酶處理,使之分散成單個(gè)的細(xì)胞,之后分裝到其他培養(yǎng)瓶里面進(jìn)行傳代培養(yǎng)。(3)判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄,可用分子雜交技術(shù)來進(jìn)行,從細(xì)胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒光標(biāo)記的目的基因單鏈DNA片段進(jìn)行雜交。根據(jù)題中信息“肺細(xì)胞中的let7基因表達(dá)減弱,癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng),會(huì)引發(fā)肺癌

38、”,導(dǎo)入let7基因后,肺癌細(xì)胞受到抑制,說明RAS基因表達(dá)減弱,導(dǎo)致細(xì)胞中的RAS蛋白含量減少進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞受抑制。答案:(1)限制性核酸內(nèi)切(或限制)啟動(dòng)子(2)胰蛋白(3)RNARAS蛋白7.(2012年天津(tin jn)理綜,T7,13分,)生物分子間特異性結(jié)合(jih)的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實(shí)例為體外處理“蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體”獲得(hud)DNA片段信息的過程圖。據(jù)圖回答:(1)過程酶作用的部位是鍵。此過程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA,過程酶作用的部位是鍵。(2)、兩過程利用了酶的特性。(3)若將得到的DNA片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒,需要將過程的測(cè)序結(jié)果與酶的識(shí)別序列進(jìn)行比對(duì),以

39、確定選用何種酶。(4)如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為RNA聚合酶,則其識(shí)別、結(jié)合的DNA序列區(qū)為基因的。(5)以下研究利用了生物分子間特異性結(jié)合性質(zhì)的有(多選)。A.分離得到核糖體,用蛋白酶酶解后提取rRNAB.用無水乙醇處理菠菜葉片,提取葉綠體基粒膜上的光合色素C.通過分子雜交手段,用熒光物質(zhì)標(biāo)記的目的基因進(jìn)行染色體基因定位D.將抑制成熟基因?qū)敕?其mRNA與催化成熟酶基因的mRNA互補(bǔ)結(jié)合,終止后者翻譯,延遲果實(shí)成熟點(diǎn)睛:本題考查了基因工程的相關(guān)知識(shí),主要考查學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解和應(yīng)用能力,難度較小。解析:(1)DNA酶作用的部位是DNA中的磷酸二酯鍵,蛋白酶作用的部位是肽鍵。(2)過程利用了各種

40、酶催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的特性,即專一性。(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)要使用限制酶和DNA連接酶,其中限制酶需要根據(jù)要切割的序列進(jìn)行選擇,因?yàn)橄拗泼傅淖饔镁哂刑禺愋浴?4)RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合在基因的啟動(dòng)子上,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。(5)蛋白酶能特異性地酶解蛋白質(zhì);分子雜交手段也是利用各物質(zhì)分子結(jié)合的特異性;抑制成熟基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA與催化成熟酶基因的mRNA堿基互補(bǔ)結(jié)合,也具有特異性;光合色素易溶于有機(jī)溶劑,與酒精并不是特異性的溶解。答案:(1)磷酸二酯肽(2)專一性(3)限制性核酸內(nèi)切(4)啟動(dòng)子(或轉(zhuǎn)錄起始區(qū))(5)A、C、D模擬試題1.(2013北京昌平區(qū)模擬)金茶花是中國(guó)特有的觀賞品種,但易得枯

41、萎病?？茖W(xué)家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因,通過下圖所示的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品種。相關(guān)敘述正確的是()A.圖中在基因工程中依次叫做基因表達(dá)載體、目的基因B.形成的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA連接酶C.由培育至過程中,依次經(jīng)歷了脫分化、再分化過程D.在幼苗中檢測(cè)到抗枯萎病基因標(biāo)志著成功培育新品種解析:圖中是載體,才是基因表達(dá)載體,A錯(cuò)誤。基因工程中只是用限制酶和DNA連接酶,DNA聚合酶在DNA復(fù)制過程中起作用,B錯(cuò)誤。將植物細(xì)胞培育為幼苗的過程中依次經(jīng)歷了脫分化、再分化過程,C正確。檢測(cè)到抗枯萎病基因并不意味著該基因一定能表達(dá),在幼苗中表現(xiàn)出抗枯萎病性狀才標(biāo)志著成

42、功培育新品種,D錯(cuò)誤。答案:C2.(2013河南周口模擬)降鈣素是一種多肽類激素,臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低,半衰期較短。某科研機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長(zhǎng)的新型降鈣素,從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā),推測(cè)相應(yīng)的脫氧核苷酸序列,并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈,兩條鏈通過18個(gè)堿基對(duì)形成部分雙鏈DNA片段,再利用Klenow酶補(bǔ)平,獲得雙鏈DNA,過程如下圖:獲得(hud)的雙鏈DNA經(jīng)EcoR(識(shí)別(shbi)序列和切割位點(diǎn)GAATTC)和BamH(識(shí)別序列(xli)和切割位點(diǎn)GGATCC)雙酶切后插入到大腸桿菌質(zhì)粒中。下列有關(guān)分析不正確的是()A.Klenow酶是

43、一種DNA聚合酶B.合成的雙鏈DNA有72個(gè)堿基對(duì)C.EcoR和BamH雙酶切的目的是保證目的基因和運(yùn)載體的定向連接D.篩選重組質(zhì)粒需要大腸桿菌質(zhì)粒中含有標(biāo)記基因解析:據(jù)圖可知,Klenow酶能以DNA單鏈為模板,合成出其互補(bǔ)鏈,因此Klenow酶是一種DNA聚合酶,A正確。人工合成兩條DNA單鏈各有72個(gè)堿基,且兩條鏈通過18個(gè)堿基對(duì)形成部分雙鏈DNA片段,因此最終合成的雙鏈DNA有(72-18)2=108個(gè)堿基對(duì),B錯(cuò)誤。EcoR和BamH雙酶切可防止DNA片段的任意連接,保證目的基因和運(yùn)載體的定向連接,C正確。篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌需要根據(jù)標(biāo)記基因的表達(dá)與否,D正確。答案:B3.(20

44、12安徽江南十校聯(lián)考)如圖表示利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得某種轉(zhuǎn)基因植物的部分操作步驟。以下說法錯(cuò)誤的是()A.利用含有四環(huán)素的培養(yǎng)基可將含分子的細(xì)菌篩選出來B.是農(nóng)桿菌,通過步驟將目的基因?qū)胫仓闏.可與多個(gè)核糖體結(jié)合,并可以同時(shí)翻譯出多種蛋白質(zhì)D.過程的完成需要限制酶和DNA連接酶的參與解析:圖示基因工程操作中以四環(huán)素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因,因此利用含有四環(huán)素的培養(yǎng)基可將含分子(重組質(zhì)粒)的細(xì)菌篩選出來,A正確。是農(nóng)桿菌,步驟表示農(nóng)桿菌侵染植株,將目的基因?qū)胫仓?B正確。是一條mRNA分子,可與多個(gè)核糖體結(jié)合,但由于翻譯的模板是同一條mRNA分子,遺傳信息相同,故多個(gè)核糖體翻譯出的是同種蛋白質(zhì),C錯(cuò)

45、誤。圖中過程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建,需要限制酶和DNA連接酶的參與,D正確。答案:C4.(2013河南洛陽(yáng)二摸)下列甲、乙兩圖為獲得生物新品種的過程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答。(1)檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的具體方法是使用與提取出的做分子雜交。(2)在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作為標(biāo)記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。乙圖為獲得抗蟲棉技術(shù)的流程。A過程需要的酶有。圖中將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞采用的方法是。C過程的培養(yǎng)基除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外,還必須加入。(3)隨著科技發(fā)展(fzhn),獲取目的基因的方法也越來越多,若乙圖中的“抗蟲基因(jyn)”是利用甲圖中的方法(fngf)獲取的,該方法稱為。圖中過程與細(xì)胞中DNA復(fù)制過程相比,該過程不需要酶。