植物組織中超氧物歧化酶活性_第1頁(yè)
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植物組織中超氧物歧化酶活性的測(cè)定 1一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握SOD酶活性測(cè)定方法。掌握分光光度計(jì)、光照培養(yǎng)箱、冷凍離心機(jī)使用方法。2二、實(shí)驗(yàn)原理 因此光還原反應(yīng)后,反應(yīng)液藍(lán)色愈深說(shuō)明酶活性愈低,反之酶活性愈高。本實(shí)驗(yàn)依據(jù)超氧物歧化酶抑制氮藍(lán)四唑(NBT)在光下的還原作用來(lái)確定酶活性大小。核黃素被氧化物質(zhì)還原的核黃素氧氮藍(lán)四唑藍(lán)色的化合物(560nm) 2 + 2H+ H2O2 + O2SOD3三、實(shí)驗(yàn)材料綠豆芽下胚軸 4四、 實(shí)驗(yàn)步驟1、酶液提取 2、顯色反應(yīng) 表1 各溶液加入量3、SOD活性測(cè)定 5五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算 SOD總活性 = 單位:酶單位/g鮮重表示; Ack照光對(duì)照管的光密度值;AE樣品管的光密度值;V樣液總體積(ml);a測(cè)定時(shí)樣品用量(ml);W樣重(g);6六、思考題 1、在SOD測(cè)定中為什么設(shè)暗中和照光兩個(gè)對(duì)照管?2、影響本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性的主要因素是什么?應(yīng)如何克服?7

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