唾液作為寄生蟲(chóng)病診斷標(biāo)本的研究

1、唾液作為寄生蟲(chóng)病診斷標(biāo)本的研究唾液作為標(biāo)本診斷某些疾病已受到很多學(xué)者的器重，在病毒如HIV、HBV、麻疹、風(fēng)疹病毒1,2,3和細(xì)菌如百日咳桿菌等病原體引起的熏染性疾病中已見(jiàn)現(xiàn)實(shí)應(yīng)用。在寄生蟲(chóng)熏染的診斷中固然如今的研究尚不多見(jiàn)，但因唾液具標(biāo)本網(wǎng)絡(luò)較為便利、非損傷性、易為病人擔(dān)當(dāng)?shù)乳L(zhǎng)處，也引起了寄生蟲(chóng)學(xué)界的器重。本文旨在快要年來(lái)外洋有關(guān)唾液標(biāo)本用于寄生蟲(chóng)病診斷的研究希望作一扼要綜述。1唾液標(biāo)本的構(gòu)成及網(wǎng)絡(luò)處置懲罰唾液為口腔中的三對(duì)大唾液腺(腮腺、頜下腺、舌下腺)及漫衍于上下唇、頰部等處的小唾液腺所排泄的液體，包羅有水、糖卵白、溶菌酶、過(guò)氧化物酶、乳鐵卵白、碳酸氫鹽和磷酸鹽構(gòu)成的緩沖體系及免疫球等卵

2、白多種身分。寄生蟲(chóng)病檢測(cè)全部標(biāo)本多為取自口腔的全唾液，此中不但包羅來(lái)自種種誕腺的混淆的排泄物，亦包羅脫落的上皮細(xì)胞、軟構(gòu)造的微生物及來(lái)自齦裂內(nèi)的液體等17。正凡人逐日全唾液的排泄量約為11.5升，其pH值在5.07.0之間，唾液中的卵白質(zhì)濃度為0.0251g/100l，較血漿中低100倍擺布。唾液中含有多種免疫球卵白，重要為由唾液腺局部的漿細(xì)胞產(chǎn)生的排泄型IgA(SIgA)，由血清經(jīng)齦溝滲入口腔的IgG、IgA和少量Ig與IgE4,5。每100l唾液中IgA、IgG與Ig的含量別離為19.4g、1.4g、0.2g，約莫為血清濃度的1/10，1/800與1/4001。唾液中的免疫球卵白的含量雖遠(yuǎn)

3、低于血清，但Parry1用放射免疫闡發(fā)(RIA)與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)等要領(lǐng)檢測(cè)免疫缺陷病毒、甲型肝炎與風(fēng)疹病毒熏染者唾液中的特異性抗體后以為，唾液中的抗體的程度已充足用于一些免疫學(xué)診斷，唾液中的IgG一樣平常多用來(lái)診斷構(gòu)造及血液內(nèi)的寄生蟲(chóng)。hallabe6將放射性125I標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟IgG注入恒河猴體內(nèi)，30分鐘后標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟物便可出現(xiàn)于口腔唾液中，從而證明唾液中IgG可實(shí)時(shí)反響體內(nèi)IgG的存在。別的，Asta7創(chuàng)造無(wú)牙或牙齒較少者唾液中IgG含量落落而牙周病患者中唾液IgG程度上升。對(duì)腸道寄生蟲(chóng)病的診斷多接納檢測(cè)唾液中的SIgA。有研究者創(chuàng)造腸道粘膜相干淋巴構(gòu)造抗原刺激后產(chǎn)生的免

4、疫反響，可表示在滿(mǎn)身各粘膜部位，在唾液等處可檢測(cè)的排泄性免疫反響物質(zhì)在血液大概缺如。非刺激性的全唾液的網(wǎng)絡(luò)可以通過(guò)使唾液從下唇滴入漏斗，然后放進(jìn)刻度管內(nèi)。刺激后唾液的網(wǎng)絡(luò)，可使受試者品味一些對(duì)實(shí)行效果無(wú)影響的物質(zhì)如橡皮圈等，以刺激唾液的排泄。如今普及利用的要領(lǐng)是讓病人將棉花球放入口中，用舌翻動(dòng)，特殊是使之打仗齒齦的部位，待浸濕后取出抗出唾液。在動(dòng)物實(shí)行中，可用電流刺激排泄神經(jīng)或利用藥物加強(qiáng)唾液排泄，以助網(wǎng)羅4。由于有細(xì)胞碎屑及沉淀的粘液素，全唾液每每很濃重且為非均質(zhì)，用于免疫診斷時(shí)需于低溫下經(jīng)14000g以上的高速離心以去除雜質(zhì)。需恒久促存時(shí)可利用硫柳汞防腐，但不宜利用疊氮納以免滋擾實(shí)行效果。

5、唾液中的很多有機(jī)身分會(huì)因細(xì)菌酶和低滲唾液中白細(xì)胞剖析后放出的酶作用而很快剖析，故唾液在網(wǎng)絡(luò)后應(yīng)立即舉行闡發(fā)或冰凍保存。亦有研究者將網(wǎng)絡(luò)后的唾液于56溫育45分鐘，以淘汰唾液中的酶類(lèi)對(duì)有機(jī)身分的剖析作用8。2檢測(cè)要領(lǐng)由于唾液中免疫球卵白的含量較低，故宜接納較敏感的要領(lǐng)。在免疫診斷要領(lǐng)中，ELISA因其操縱輕便、用度較低而應(yīng)用較多，特殊是間接ELISA已在豬囊尾蚴、阿米巴原蟲(chóng)、剛地弓形蟲(chóng)等寄生蟲(chóng)引起的疾病中普及應(yīng)用。比年來(lái)，研究者對(duì)抗原舉行了革新，如在腦囊尾蚴病診斷中，Planlarte9通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS)分散豬囊尾蚴的卵白質(zhì)抗原，以免疫印跡試驗(yàn)(esternbltting)

6、挑選出組分抗原GP24，用于檢測(cè)豬囊蟲(chóng)病，特異性精良。藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)膜卵白經(jīng)SDS分散出的24個(gè)抗原片斷，經(jīng)唾液標(biāo)本的挑選，分子量為120，105，92，66，32，29，14kDa的片斷被以為有特異性，具診斷潛力。由于新型診斷抗原的利用，間接ELISA的特異性與敏感性都有所進(jìn)步。酶聯(lián)免疫轉(zhuǎn)移印跡試驗(yàn)(EiTB)在唾液樣本的檢測(cè)中亦被利用，此種要領(lǐng)敏感性與特異性均較高，但操縱龐大，用度較高，需必然的裝備，多用于研究事情。Felden10和Flisser11曾用EITB技能檢測(cè)患者唾液中的特異性IgG抗體以診斷腦囊蟲(chóng)玻Felden創(chuàng)造此中抗原片斷GP24最易被唾液中的IgG所識(shí)別。直接凝集試驗(yàn)(

7、DAT)檢測(cè)唾液特異性IgG抗體曾usuA12用來(lái)診斷黑熱病，因其操縱簡(jiǎn)樸、唾液標(biāo)本用量較少，而實(shí)用于內(nèi)臟利什曼病的盛行病學(xué)的觀察12。別的，亦將有染料試驗(yàn)(DT)用于診斷唾液中抗剛地弓形蟲(chóng)抗體的報(bào)道13。3在寄生蟲(chóng)病診斷中的應(yīng)用3.1阿米巴病阿米巴病的診斷多依賴(lài)在糞便中查尋病原體。但糞便查抄費(fèi)時(shí)、費(fèi)力，需有履歷的事情職員，且不適于大范圍的普查。ur14在墨西哥阿米巴病盛行區(qū)，以糞檢病原體、ELISA要領(lǐng)檢測(cè)糞便中溶構(gòu)造內(nèi)阿米巴物異性膜抗原與唾液中檢測(cè)特異性抗體三種要領(lǐng)，對(duì)223名514歲門(mén)生舉行普查后創(chuàng)造，唾液中特異性IgA檢測(cè)的敏感性為85，特異性達(dá)98。此效果與糞中抗原檢測(cè)的效果無(wú)差異(

8、r0.753，P0.001)，也與糞便中病原體查抄的效果同等。由于唾液檢測(cè)較為便利，且比血清與糞便查抄自制，以為可實(shí)用于盛行病學(xué)觀察。ur同時(shí)創(chuàng)造人群中阿米巴原蟲(chóng)的熏染率與唾液中IgA檢測(cè)的敏感性呈正相干，與特異性負(fù)相干。當(dāng)人群熏染率5時(shí)，其特異性99，敏感性60，熏染率70時(shí)的特異性為70，敏感性達(dá)99。Aeti15檢測(cè)了阿米巴病患者、阿米巴帶蟲(chóng)者和康健人唾液中的特異性抗體后創(chuàng)造，IgA在侵襲性阿米巴病患者唾液中明顯升高，而無(wú)病癥帶蟲(chóng)唾液中的IgA程度與康健人無(wú)差異。故以為唾液中IgA抗體僅得當(dāng)于診斷侵襲性阿米巴病，對(duì)阿米巴帶蟲(chóng)者無(wú)代價(jià)。別的，研究者亦有報(bào)道唾液中抗溶構(gòu)造內(nèi)阿米巴IgA抗體在

9、治療后45天可消散，成人與兒童熏染阿米巴后排泄性免疫應(yīng)答相似。Brian16以260kDa半乳糖按捺性粘附卵白(GIAP)為診斷抗原，用ELISA要領(lǐng)檢測(cè)了13名阿米巴肝膿腫患者(此中4名為經(jīng)甲硝唑治療病人)唾液中抗GIAP抗體IgA與血清中的IgG。創(chuàng)造兩者均顯著升高，但兩者之間不相干，而治療與未治療病人唾液中的IgA程度無(wú)差異。3.2弓形蟲(chóng)病Hajeer12經(jīng)人體實(shí)行后創(chuàng)造人們熏染弓形蟲(chóng)后，唾液中11天即可查見(jiàn)Ig抗體，27天后查見(jiàn)IgG抗體，兩者在81天后轉(zhuǎn)陰。而IgA可在急性、慢性熏染，及血清檢測(cè)陰性熏染有唾液中均可查見(jiàn)，從而以為唾液中IgG、Ig對(duì)急性弓形蟲(chóng)病具有診斷潛力，而唾液中I

10、gA的程度對(duì)急、慢性弓形蟲(chóng)病無(wú)區(qū)分意義。Lyela8對(duì)60人舉行盛行病學(xué)觀察后證明唾液中抗弓形蟲(chóng)IgA程度可反響血清IgG程度。唾液中的IgA檢測(cè)可用于弓形蟲(chóng)病的檢測(cè)，而唾液中的IgG不適于慢性弓形蟲(chóng)熏染的盛行病學(xué)觀察。唾液標(biāo)本除用于免疫學(xué)診斷外，還可用于病原學(xué)查抄。AendEira17曾在一名3歲幼童唾液及扁桃體中查尋到剛地弓形蟲(chóng)的滋養(yǎng)體。而Terragna18將弓形蟲(chóng)熏染兔的唾液接種小鼠后創(chuàng)造，在33熏染兔的唾液中有病原體存在，從面證明唾液在弓形蟲(chóng)流傳中的前言作用。但Aest19在檢測(cè)了26位艾滋病人(此中6例明白診斷并發(fā)弓形蟲(chóng)病)的唾液，效果均未創(chuàng)造弓形蟲(chóng)，故以為在艾滋病人唾液中探求弓形

11、蟲(chóng)病原體以診斷弓形蟲(chóng)病的意義不大。3.3杜氏利什曼原蟲(chóng)病杜氏利什曼原蟲(chóng)熏染引起的內(nèi)臟利肝什曼病的免疫診斷多依賴(lài)血清學(xué)查抄。asu12以DAT檢測(cè)了19例黑熱病人唾液中的特異性抗體，18例唾液檢測(cè)呈陽(yáng)性效果，且特異性為100。由于唾液標(biāo)本檢測(cè)較為便利及寧?kù)o，作者以為可取代血清舉行免疫診斷。3.4藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)病Disney20用ELISA法檢測(cè)24名藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)患者唾液中SIgA后創(chuàng)造，其SIgA程度與康健人有明顯性差異(P0.001)。3.5豬囊尾蚴病本病的臨床表示多樣而無(wú)特異病癥，臨床診斷較為困難。如今較為有用的診斷要領(lǐng)包羅盤(pán)算機(jī)斷層掃描、核磁共振(RI)、檢測(cè)腦積液與血清標(biāo)本中抗囊尾蚴抗

12、體。但T及RI用度較高，腦積液與血清檢測(cè)具有損傷性。有鑒于此，唾液中特異性抗體的檢測(cè)有望為本病提供較為抱負(fù)的診斷要領(lǐng)。Aasta7用豬帶絳蟲(chóng)囊尾蚴的粗提物作為診斷抗原，用ELISA要領(lǐng)檢測(cè)了43例腦囊病患者、34例非熏染性腦部疾病患者及39名正凡人唾液及血清中的特異性抗體后創(chuàng)造，唾液中特異性IgG的檢測(cè)對(duì)腦囊蟲(chóng)具有較高的診斷代價(jià)，但I(xiàn)gA的檢測(cè)無(wú)診斷意義。由于囊尾坳粗提物與扁蟲(chóng)有交織抗原，故此要領(lǐng)僅實(shí)用于非血吸蟲(chóng)病及包蟲(chóng)病盛行區(qū)。Feldan10用兩種要領(lǐng)(ELISA、EITB)檢測(cè)了28例腦囊蟲(chóng)并29例非熏染性腦部疾病及26名康健人唾液與血清中的特異性抗體后創(chuàng)造，ELISA檢測(cè)唾液中IgG的

13、敏感性為82.1，高于血清標(biāo)本檢測(cè)效果(70.4)。Feldan以為EITB可作為血清診斷囊蟲(chóng)病較好的要領(lǐng)，而ELISA檢測(cè)唾液中的IgG抗體，因其無(wú)痛、無(wú)損傷性可應(yīng)用于臨床及盛行病學(xué)觀察。3.6絳蟲(chóng)病Kinder21闡發(fā)了豆?fàn)罱{蟲(chóng)(Taniapisifris)熏染犬唾液與血清中免疫球卵白后以為，唾液中特異性IgA與血清中IgG抗體可反響帶絳蟲(chóng)熏染，這兩種抗體在熏染后兩周上升，治療4周即明顯落落。由于唾液中IgA在絳蟲(chóng)產(chǎn)卵前已出現(xiàn)，治療后可消散。故可用于區(qū)分新舊熏染。kinder以為檢測(cè)唾液中的IgA對(duì)腸道絳蟲(chóng)病具診斷潛力。參考文獻(xiàn)1ParryJVetal.Lanet,1987;2(8550)

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