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1、【實(shí) 驗(yàn)】葉綠體中色素的提取和分離 大通七中 楊吉祥2019年4月28日色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行綠葉中色素的提取和分離探究綠葉中含有色素種類數(shù)目和顏色探究不同綠葉中色素含量培養(yǎng)合作和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)精神色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)原理提取:葉綠體色素易溶于無水乙醇(酒精、汽油、苯、石油醚等)等有機(jī)溶劑中,可以用無水乙醇提取綠葉中的葉綠體色素。分離:紙層析法 不同的葉綠體色素隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同。不同的色素會(huì)在擴(kuò)散過程中分離開來,形成條帶。 (色素在層析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散速度快,溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散速度慢,因而可用層析液
2、將不同的色素分離。) 色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)三、實(shí)驗(yàn)材料【實(shí)驗(yàn)材料】:新鮮菠菜綠葉,韭菜葉,小油菜葉,蔥葉【實(shí)驗(yàn)藥品】:層析液(95號(hào)汽油),無水乙 醇,石英砂,碳酸鈣【實(shí)驗(yàn)用具】:研缽,藥匙,紗布,小燒杯,干燥濾紙, 剪刀,試管,毛細(xì)吸管,棉塞色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)提取葉綠體色素取材:取新鮮菠菜葉(韭菜葉,小油菜葉,蔥葉)5g,撕去葉脈,盡量剪碎,放入研缽。研磨:向研缽中放入少量石英砂和碳酸鈣(量約為藥匙的1/3),加入6ml無水乙醇,充分、迅速地研磨至勻漿狀態(tài)。過濾:在漏斗上放上1層濾紙,將研磨液倒入漏斗,過濾制備得到濾液。【注】加石英砂是為了使研磨充分加碳酸鈣是為了防止葉綠體色素被破壞加入C
3、aCO3和石英砂的量均很少,無水乙醇的量不應(yīng)太少四、實(shí)驗(yàn)步驟色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)在濾紙片上點(diǎn)樣:在干燥的定性濾紙片圓心處點(diǎn)樣 待濾液干后,重復(fù)點(diǎn)樣3-4次。 待濾液干后,在圓心處輕輕挖一個(gè)小洞,將棉線繩輕輕穿過小洞(上面剛穿過濾紙即可)分離葉綠體色素四、實(shí)驗(yàn)步驟色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)固定裝置:將3mL層析液倒入培養(yǎng)皿中,將做好的濾紙片下面的棉線繩放入層析液中,將濾紙片放在培養(yǎng)皿上。觀察現(xiàn)象:10min后,將濾紙片上的棉線繩取出,風(fēng)干。觀察色素圈及其顏色,作好記錄。【注】這種方法可以避免點(diǎn)樣濾液浸沒到層析液。層析液中一些成分易揮發(fā),濾紙片可以充當(dāng)皿蓋,避免層析液揮發(fā)。分離葉綠體色素四、實(shí)驗(yàn)步驟1、選材時(shí)應(yīng)注意選擇鮮嫩、色濃綠、無漿汁的菠菜葉片。2、研磨要快,收集的濾液要用棉塞塞住,層析時(shí)要加蓋,盡量減少有機(jī)溶劑的揮發(fā)。(無水乙醇和層析液都易揮發(fā)、易燃且有一定毒性)3、每次點(diǎn)樣前要把燒杯中的濾液搖勻。4、盡量避免手上的雜質(zhì)沾到濾紙條上。5、實(shí)驗(yàn)時(shí)保持通風(fēng),安全操作6、實(shí)驗(yàn)注重團(tuán)隊(duì)合作,組員們共同完成實(shí)驗(yàn)。五、注意事項(xiàng)色素的提取和分
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