實驗動物眼底照相及熒光素眼底血管造影

1、實驗(shyn)動物眼底照相及熒光素眼底血管造影昭衍（蘇州）新藥研究(ynji)中心眼科實驗室-眼科基礎(chǔ)知識共三十四頁可獲取(huq)眼底彩照及FFA的儀器臺式裂隙(li x)燈+前置鏡臺式眼底照相機(jī)手持式眼底照相機(jī)共三十四頁動物(dngw)眼底結(jié)構(gòu)-猴視網(wǎng)膜顳上動脈(dngmi)視網(wǎng)膜顳上靜脈視網(wǎng)膜鼻上動脈視網(wǎng)膜鼻上靜脈視網(wǎng)膜鼻下動脈視網(wǎng)膜顳下動脈視網(wǎng)膜顳下靜脈黃斑中心凹黃斑反光暈輪視盤食蟹猴眼底圖譜手持式眼底照相共三十四頁數(shù)據(jù)(shj)來源：昭衍（蘇州）新藥研究中心數(shù)據(jù)(shj)來源：昭衍（蘇州）新藥研究中心動物眼底結(jié)構(gòu)-猴正常眼底圖A：神經(jīng)纖維反光B：豹紋狀眼底C：豹紋狀眼底ACB共三十

2、四頁視盤視網(wǎng)膜靜脈(jngmi)視網(wǎng)膜動脈(dngmi)動物眼底結(jié)構(gòu)-兔新西蘭兔眼底圖譜兔：視盤位于上方，主要動靜脈從視盤中央進(jìn)入眼內(nèi)分為內(nèi)側(cè)支和鼻側(cè)支，動脈位于表層，靜脈位于深層，動靜脈平行或彼此交叉。脈絡(luò)膜血管手持式眼底照相加+60D前置鏡手持式眼底照相共三十四頁動物眼底(ynd)結(jié)構(gòu)-狗黃綠色透明(tumng)毯層深色素層鼻下支動脈鼻下支靜脈脈上支靜脈上支動脈顳下支動靜脈Beagle犬眼底圖譜共三十四頁視盤視網(wǎng)膜靜脈(jngmi)視網(wǎng)膜動脈(dngmi)鼠：視盤位于視網(wǎng)膜中央，色淡紅，無明顯黃斑結(jié)構(gòu)，視網(wǎng)膜血管為全血管型，中央動脈與中央靜脈相間排列。動物眼底結(jié)構(gòu)-鼠SD大鼠眼底圖譜BN大

3、鼠眼底圖譜視盤視網(wǎng)膜靜脈視網(wǎng)膜動脈脈絡(luò)膜血管共三十四頁數(shù)據(jù)來源：昭衍（蘇州）新藥(xn yo)研究中心AA：視網(wǎng)膜色素紊亂(wnlun)、色素上皮萎縮紊亂(wnlun)B：視網(wǎng)膜色素紊亂C:黃斑中心凹顳側(cè)見2個黃白色病灶，未見明顯出血。BC眼底異常圖片共三十四頁熒光(ynggung)素眼底血管造影共三十四頁一、原理：熒光素眼底血管造影（fundus fluorescenin angiography, FFA）最基本的原理是利用能發(fā)熒光的物質(zhì)，用特定波長的光線激發(fā)，產(chǎn)生可以觀察到得圖像，激發(fā)停止，熒光就消失。 FFA采用的熒光染料是熒光素鈉，造影時將其快速注入靜脈內(nèi)， 用藍(lán)色光照射，使眼底血管內(nèi)

4、的熒光素鈉被激發(fā)出熒光，用高速照相及或攝像機(jī)進(jìn)行拍攝或錄像，了解(lioji)實時的眼底情況。 熒光素眼底血管(xugun)造影共三十四頁柵濾光片激發(fā)(jf)濾光片眼光源(gungyun)照相機(jī)閃光燈465490nm500530nm熒光素眼底血管造影共三十四頁熒光素眼底(ynd)血管造影關(guān)于熒光素鈉1.熒光素鈉藥理熒光素鈉（sodium fluorescein）：分子量為376.27，pH=8時熒光最強(qiáng)。激發(fā)光波長在紫藍(lán)色波段（465490nm），激發(fā)發(fā)出的熒光波長在黃綠色波段（500530nm）分布：60%-80%的熒光素鈉在血液中與白蛋白結(jié)合不能發(fā)出熒光，大約20%游離在血液中可被藍(lán)光激發(fā)

5、出熒光。靜脈注射后1min，熒光素鈉即散布全身組織。排泄：24h內(nèi)經(jīng)肝、腎排出。注射后24h皮膚顯黃色，2天內(nèi)尿液呈黃色。多飲水可加速熒光素鈉排出。2.熒光素鈉的應(yīng)用熒光素鈉一般經(jīng)靜脈注射，少數(shù)情況(qngkung)可口服給藥。(目前我們使用的是10%熒光素鈉，0.08ml/kg）3.熒光素鈉的副作用共三十四頁二、熒光造影眼底血管造影技術(shù)操作1.造影前準(zhǔn)備確認(rèn)儀器能正常使用動物的精神狀態(tài)（特別是進(jìn)行過）醫(yī)療垃圾袋、生理鹽水，開瞼器2.造影過程過敏試驗：目前(mqin)試驗中動物未進(jìn)行過敏試驗。造影：先拍攝彩色眼底像，應(yīng)盡量包括全部眼底，突出病變部位。注射熒光素鈉，食蟹猴一般使用10%熒光素鈉，

6、0.08ml/kg。注射完畢開始計時并開始拍片，前30s連續(xù)拍片，每秒1-2張，30s后可每5秒一張。如果雙眼病變需要雙眼同時造影。造影早期盡量多照一些圖像，中晚期一邊觀察一邊拍攝，注意細(xì)節(jié)。熒光(ynggung)素眼底血管造影共三十四頁三、眼底(ynd)熒光造影所見的正常熒光形態(tài)內(nèi)界膜 ILM神經(jīng)纖維層 NFL神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層 GCL內(nèi)叢狀層 IPL內(nèi)顆粒層 INL外叢狀層 OPL外顆粒層 ONL外界膜 OLM感光(gn gung)細(xì)胞層 IS/OS色素上皮層 RPE視網(wǎng)膜分層熒光素眼底血管造影共三十四頁眼底組織的屏障(pngzhng)功能 血-視網(wǎng)膜屏障：血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接+壁內(nèi)周細(xì)胞(xb

7、o)組成屏障，其他血管沒有此屏蔽功能。脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜屏障：RPE間閉鎖小帶色素上皮細(xì)胞玻璃膜脈絡(luò)膜毛細(xì)血管閉鎖小帶熒光素眼底血管造影共三十四頁臂-視網(wǎng)膜循環(huán)(xnhun)時間（arm-retina circulation time，A-RCT）熒光素： 肘中靜脈右心肺循環(huán)主動脈(dngmi)頸總動脈(dngmi)頸內(nèi)動脈(dngmi)眼動脈(dngmi)眼底A-RCT大體在1015s影響A-RCT的各種因素 注射部位、速度、注射處的血管粗細(xì)、血液粘度與速度、心臟的排血功能，血管管徑和阻力，燃料濃度與劑量。 甲亢和貧血可使染料加速到眼底而紅細(xì)胞增多癥和心排量減低等反之。 頸動脈狹窄等熒光素眼底血管

8、造影共三十四頁視網(wǎng)膜循環(huán)(xnhun)的熒光形態(tài)及分期層流與軸流現(xiàn)象熒光素的血液前鋒呈分層流動(lidng)，稱為層流。遇到分支后，熒光素沿一側(cè)前進(jìn)，稱為層流。動脈層流熒光素眼底血管造影共三十四頁靜脈(jngmi)層流染料排空(pi kn)靜脈：周邊充盈全部充盈周邊排空全部排空動脈：中央充盈全部充盈中央排空全部排空染料可以再循環(huán)2-3次。五六分鐘后熒光素均勻分布于周身所有血液內(nèi)，此時就見不到再循環(huán)了。熒光素眼底血管造影共三十四頁背景熒光與殘余熒光背景熒光：在動脈前期脈絡(luò)膜毛細(xì)血管很快充盈并融合形成的彌漫性熒光，是透過RPE層透見的脈絡(luò)膜熒光。殘余熒光：熒光素可以彌散(msn)至鞏膜組織，造影晚

9、期視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜熒光消退，仍可看到視盤緣和顳側(cè)弧形斑等處的熒光，稱為殘余熒光。視網(wǎng)膜循環(huán)時間（retinal circulation time，RCT）指從視網(wǎng)膜中央動脈開始出現(xiàn)熒光到視網(wǎng)膜中央靜脈任何一支開始出現(xiàn)熒光的時間。24秒，視網(wǎng)膜不同區(qū)域，RCT不同；黃斑區(qū)最快熒光素眼底血管(xugun)造影背景熒光共三十四頁動脈前期：視網(wǎng)膜動脈出現(xiàn)熒光(ynggung)前。睫狀后短動脈早0.51.5秒動脈期：從動脈開始充盈到靜脈開始充盈之前。12秒靜脈期：靜脈開始充盈到全部充盈或開始衰減。再循環(huán)期：首次視網(wǎng)膜循環(huán)后的再次循環(huán)。后期：視網(wǎng)膜熒光完全消退，約在注射造影劑1015分鐘后視網(wǎng)膜循環(huán)(xnh

10、un)分期熒光素眼底血管造影共三十四頁共三十四頁視網(wǎng)膜毛細(xì)血管染料通過動脈后開始充盈，此時眼底的背景(bijng)熒光逐漸增亮。黃斑部的毛細(xì)血管最清晰，黃斑區(qū)中央為暗區(qū)。熒光(ynggung)素眼底血管造影共三十四頁與脈絡(luò)膜血管同時(tngsh)充盈，比視網(wǎng)膜中央動脈早12秒睫狀視網(wǎng)膜動脈(dngmi)熒光素眼底血管造影共三十四頁視盤熒光(ynggung)1、深層朦朧熒光(ynggung)2、淺層葡萄串熒光3、視乳頭表層輻射狀毛細(xì)血管4、晚期視盤暈輪鞏膜熒光熒光染料經(jīng)靜脈注射后2分鐘到幾小時，脈絡(luò)膜毛細(xì)血管滲漏熒光素，使周圍組織著色，同時使鞏膜著色，從視盤近視弧中見熒光素眼底血管造影共三十四頁

11、強(qiáng)熒光透見熒光血管滲漏異常血管假性熒光組織著染染料積存視網(wǎng)膜下：視網(wǎng)膜脫離、色素上皮脫離視網(wǎng)膜內(nèi)：囊樣水腫視網(wǎng)膜內(nèi)：非囊樣水腫、血管周著染視網(wǎng)膜下：玻璃膜疣、瘢痕、鞏膜、篩板玻璃膜疣色素上皮萎縮自發(fā)熒光：脂褐素、玻璃疣窗樣缺損四、眼底(ynd)的異常熒光形態(tài)熒光(ynggung)素眼底血管造影共三十四頁視網(wǎng)膜色素(s s)上皮滲漏是造成強(qiáng)熒光的一個常見原因。透視熒光也是造成強(qiáng)熒光的一個原因。若色素上皮的色素脫失，脈絡(luò)膜的熒光在脫失處透出。透視熒光特點：早期可見；形態(tài)無變化；隨脈絡(luò)膜熒光消失而消失。染料積存也稱池樣充盈，指血-視網(wǎng)膜屏障破壞(phui)，熒光素經(jīng)滲漏點聚集在一定空間內(nèi)，不在早期出

12、現(xiàn)，邊界清楚，逐漸增強(qiáng)。組織著染也稱組織染色，是指血-視網(wǎng)膜屏障破壞，熒光素經(jīng)血管壁彌散于周圍組織，缺乏一定的空間形狀。神經(jīng)上皮層染料積存熒光素眼底血管造影 血管壁著染 染料積存共三十四頁弱熒光熒光遮蔽充 盈 缺 損（延遲、阻塞）視網(wǎng)膜血管 脈絡(luò)膜血管色素水腫其他滲出出血熒光素眼底血管(xugun)造影共三十四頁五、FFA適應(yīng)癥：視網(wǎng)膜血管疾?。ㄒ暰W(wǎng)膜動、靜脈阻塞；高網(wǎng)、糖網(wǎng)；COATS病、EALES?。灰暰W(wǎng)膜毛細(xì)血管瘤；視網(wǎng)膜動脈瘤；黃斑中心凹旁毛細(xì)血管擴(kuò)張(kuzhng)）黃斑部疾?。ㄖ袧{病、中滲??；玻璃疣、AMD、黃斑囊樣水腫；黃斑裂孔、黃斑缺損、黃斑前膜；Stargardt病、眼底黃色

13、斑點癥；病理性近視；先天性視乳頭小凹；視錐細(xì)胞營養(yǎng)不良；卵黃狀黃斑營養(yǎng)不良）視神經(jīng)乳頭疾病（視盤玻璃膜疣；視盤炎；視盤血管炎；視乳頭水腫；前部缺血性視神經(jīng)病變）眼底腫瘤（脈絡(luò)膜痣、脈絡(luò)膜黑色素瘤、脈絡(luò)膜轉(zhuǎn)移癌、脈絡(luò)膜血管瘤、脈絡(luò)膜骨瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜色素上皮錯構(gòu)瘤）其他疾病（脈絡(luò)膜破裂、血管樣條紋、光凝斑、視網(wǎng)膜色素變性、急性后極部多灶性鱗狀色素上皮病變、匍行性脈絡(luò)膜病變、外傷性血管性視網(wǎng)膜病變）共三十四頁ABC臺式眼底(ynd)照相機(jī)手持式眼底(ynd)照相機(jī)豹紋狀眼底（手持式眼底照相機(jī)）食蟹猴正常FFA眼底圖共三十四頁黃斑中心(zhngxn)凹可見約0.5PD高熒光，晚期滲漏。顳側(cè)大面積透見高熒光(ynggung)共三十四頁新西蘭兔FFA眼底(ynd)圖新西蘭兔正常(zhngchng)FFA眼底圖共三十四頁RCS大鼠FFA眼底(ynd)圖共三十四頁謝謝(xi xie)！共三十四頁內(nèi)容摘要實驗動物眼底照相及熒光素眼底血管造影。實驗動物眼底照相及熒光素眼底血管造影。A：視網(wǎng)膜色素紊亂、色素上皮萎縮(wi su)紊亂。熒光素鈉（sodium fluorescein）：分子量為376.27，pH=8時