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文檔簡介
1、廣義的植物組織培養(yǎng)(plant tissue culture ):是指在無菌和人工預(yù)知 的控制條件下,利用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,對離體的植物器官、組織或細(xì)胞進(jìn)行離體 培養(yǎng),使其再生細(xì)胞或生長、分化成完整植株的技術(shù)。狹義的植物組織培養(yǎng)指對植物的組織(如分生組織、表皮組織、薄壁組織 等)及培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織(callus)進(jìn)行離體培養(yǎng)的技術(shù)。外植體:植物組織培養(yǎng)中,使用的各種器官、組織和細(xì)胞統(tǒng)稱為外植體 (explant)。愈傷組織:是指外植體因受傷或在離體培養(yǎng)時,其未分化的細(xì)胞和已分化的 細(xì)胞進(jìn)行活躍的分裂增殖而形成的一種無特定結(jié)構(gòu)和功能的組織。植物細(xì)胞的培養(yǎng):是指將植物材料從母體植株上切取后,分離成細(xì)
2、胞或小細(xì) 胞團(tuán),放在無菌的人工環(huán)境條件下使其生長發(fā)育的方法。初代培養(yǎng):根據(jù)培養(yǎng)過程,將從植物體上分離下來的部分進(jìn)行第一次培養(yǎng), 稱為初代培養(yǎng)(primary culture),以后將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上繼續(xù)培 養(yǎng),則統(tǒng)稱為繼代培養(yǎng)(subculture)。植物細(xì)胞全能性是指一個生活的植物細(xì)胞,只要有完整的膜系統(tǒng)和細(xì)胞核, 它就會有一整套發(fā)育成一個完整植株的全部遺傳信息,在適當(dāng)?shù)臈l件下,這些 信息可以表達(dá),再生成一個完整植株。細(xì)胞分化(differentiation):是指生物在個體發(fā)育過程中細(xì)胞由一般變 為特殊的現(xiàn)象,即普通形態(tài)結(jié)構(gòu)的細(xì)胞,向著不同形態(tài)結(jié)構(gòu)的方向發(fā)展, 從而在機(jī)能上也各不相
3、同。脫分化:由失去分裂能力的細(xì)胞回復(fù)到分生性狀態(tài)并進(jìn)行分裂,形成形成一 種高度液泡化的呈無定形態(tài)的薄壁細(xì)胞即愈傷組織的現(xiàn)象(或過程)稱為“脫 分化”(dedifferentiation)。由無分化的愈傷組織的細(xì)胞再轉(zhuǎn)變成為具有一定結(jié)構(gòu),執(zhí)行一定生理功能 的細(xì)胞團(tuán)和組織,進(jìn)而構(gòu)成一個完整的植物體或植物器官的現(xiàn)象(或過程),叫 做再分化(redifferentiation)。細(xì)胞學(xué)說(cell theory):一切生物都是由細(xì)胞構(gòu)成的,細(xì)胞是生物體的基 本功能單位,細(xì)胞只能由細(xì)胞分裂而來。胚狀體:在離體培養(yǎng)條件下,植物離體培養(yǎng)的細(xì)胞、組織、器官也可以產(chǎn)生 類似胚的結(jié)構(gòu),其形成也經(jīng)歷一個類似胚胎的發(fā)
4、生和發(fā)育過程,這種類似胚的 結(jié)構(gòu)稱為胚狀體。體細(xì)胞胚胎發(fā)生:由單細(xì)胞或一群細(xì)胞被誘導(dǎo)不斷再生非合子胚,并萌發(fā)形 成完整植株的發(fā)育過程稱為體細(xì)胞胚胎發(fā)生.遺傳假說:培養(yǎng)細(xì)胞中細(xì)胞核物質(zhì)變化,如多倍性、非整倍性和染色體結(jié)構(gòu)突變, 可能與長期培養(yǎng)物器官發(fā)生或胚胎發(fā)生潛能喪失有關(guān)。這種由遺傳原因造成的 形態(tài)發(fā)生潛力的喪失是不可逆的。酶解法:利用果膠酶(pectase)處理植物葉片,使細(xì)胞間的中膠層發(fā)生降解, 分離出具有代謝活性的細(xì)胞。懸浮培養(yǎng)(suspension culture):是指將游離的植物細(xì)胞按一定的細(xì)胞密度,懸 浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的方法。分批培養(yǎng)(batch culture):是指把
5、細(xì)胞分散在一定容積的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng), 當(dāng)培養(yǎng)物增殖到一定量時,轉(zhuǎn)接繼代,建立起單細(xì)胞培養(yǎng)物。連續(xù)培養(yǎng)(continuous culture):是利用特制的培養(yǎng)容器進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng) 的一種方式。在連續(xù)培養(yǎng)中由于不斷注入新鮮培養(yǎng)基,排掉舊的培養(yǎng)基,保證 養(yǎng)分的充足供應(yīng),不會出現(xiàn)懸浮培養(yǎng)物發(fā)生營養(yǎng)虧缺的現(xiàn)象.有絲分裂指數(shù):是指在一個細(xì)胞群體中,處于有絲分裂的細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的 百分?jǐn)?shù)。單細(xì)胞培養(yǎng):就是對分離得到的單個細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),誘導(dǎo)其分裂增殖,形成 細(xì)胞團(tuán),再通過細(xì)胞分化形成芽、根等器官或胚狀體,直至長成完整植株的技 術(shù)。生物轉(zhuǎn)化:就是利用生物系統(tǒng)通過水解、加氫、羥基化作用、氧化還原及酯 化反應(yīng)
6、等生理生化反應(yīng),將有機(jī)分子轉(zhuǎn)化為新的化合物的過程。單倍體:所謂單倍體,指的是具有配子染色體數(shù)的個體或細(xì)胞。一倍體:只含有一個染色體組的個體或細(xì)胞(n=x),一倍體不能進(jìn)行減數(shù) 分裂,所以是不育的。二倍體:含有二個染色體組的個體或細(xì)胞(2n=2x,n代表配子染色體數(shù), 2n代表合子染色體數(shù),x代表染色體組)。三倍體:具有三個染色體組的細(xì)胞或個體。四倍體:具有四個染色體組的細(xì)胞或個體。多倍體:細(xì)胞或個體中的染色體組數(shù)多于二個。整倍體:體細(xì)胞內(nèi)含有完整的染色體組的類型稱為整倍體。非整倍體:如果在二倍體的基礎(chǔ)上,增加或減少個別染色體,這種變異的 細(xì)胞或個體叫非整倍體。在正常情況下,單核經(jīng)第一次有絲分裂
7、,產(chǎn)生一個大而疏松的營養(yǎng)核和一 個小而致密的生殖核,稱二核花粉粒。第二次有絲分裂僅限于生殖核,形成兩 個精子,它們處在花粉或花粉管中(圖6-1D),稱為三核花粉粒。平板培養(yǎng)(plate cultivation method):花粉置瓊脂固化培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng), 誘導(dǎo)產(chǎn)生胚狀體,進(jìn)而分化成植株。液體培養(yǎng):花粉懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。由于液體培養(yǎng)容易造成培 養(yǎng)物的通氣不良,影響細(xì)胞分裂和分化,可將培養(yǎng)物置于搖床上震蕩,使其處 于良好的通氣狀態(tài)。雙層培養(yǎng):花粉置固體一液體雙層培養(yǎng)基上培養(yǎng)。雙層培養(yǎng)基的制作方法 為:在培養(yǎng)皿中鋪加一層瓊脂培養(yǎng)基,待其冷卻并保持表面平整,然后在其表 面加入少量液體培養(yǎng)
8、基??醋o(hù)培養(yǎng)(nurse cultivation method):配制好花粉粒懸浮液和瓊脂固體 培養(yǎng)基后,將完整的花藥或花藥的愈傷組織放在瓊脂培養(yǎng)基上,將圓片濾紙放 在花藥或愈傷組織上,然后將花粉置于濾紙的上方。應(yīng)用此法培養(yǎng)番茄花粉形 成了細(xì)胞無性繁殖系。離體授粉(pollination in vitro ):是指將未授粉的胚珠或子房從母體 上分離下來,進(jìn)行無菌培養(yǎng),并以一定的方法授以無菌花粉,使之在試管內(nèi)實 現(xiàn)受精的技術(shù),又稱為離體受精(fertilization in vitro) 或M管受精(test tube fertilization)。胚珠培養(yǎng):是將胚珠從母株上分離出來,在人工控制
9、的條件下,進(jìn)行離體 培養(yǎng),使其生長發(fā)育形成幼苗的技術(shù)。根據(jù)培養(yǎng)目的的不同,可將胚珠培養(yǎng)分 為受精胚珠培養(yǎng)和未受精胚珠培養(yǎng)。植物胚胎培養(yǎng):是指對植物的胚、子房、胚珠和胚乳進(jìn)行離體培養(yǎng),使其發(fā) 育成完整植株的技術(shù)。合子胚培養(yǎng):是指在無菌條件下分離和培養(yǎng)有性胚,以期獲得可育植株的一 種技術(shù)。植物細(xì)胞膜:是一個由脂類和蛋白質(zhì)等構(gòu)成的雙層分子層膜,其物理性質(zhì)類 似于一個雙電層,細(xì)胞的內(nèi)外層帶的是同種電荷。有性生殖:是經(jīng)過雌、雄性細(xì)胞融合而發(fā)育成合子胚或種子,并用種子繁殖 后代的,如小麥、水稻、玉米等的繁殖。無性生殖:利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),在無菌條件下對外植體進(jìn)行離體培養(yǎng), 使其短期內(nèi)獲得遺傳性一致的大量
10、再生植株的方法稱為植物離體無性繁殖(propagation in vitro)。無融合生殖:是指被子植物未經(jīng)受精的卵或胚珠內(nèi)某些細(xì)胞直接發(fā)育成胚 的現(xiàn)象。玻璃化現(xiàn)象(Vitrification):是植物組織培養(yǎng)過程中試管苗特有的一種 生理失調(diào)或生理病變,多數(shù)發(fā)生在植物莖尖培養(yǎng)和離體快繁中。玻璃苗生長繁 殖速度下降,最后甚至死亡。褐化:是指培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì),致使培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料逐漸 變褐而死亡的現(xiàn)象。褐化的發(fā)生是由于組織中多酚氧化酶被激活,酚類化合物 被氧化形成褐色的醌類物質(zhì)。醌類化合物在酪氨酸酶的作用下,與培養(yǎng)材料組 織中的蛋白質(zhì)發(fā)生聚合,引起其他酶系統(tǒng)失活,導(dǎo)致代謝紊亂,生長受阻。黃化:是指試管苗幼苗整株失綠,全部或部分葉片黃化、斑駁的現(xiàn)象。這種 現(xiàn)象在組織培養(yǎng)中常見。種質(zhì)資源的離體保存(germplasm conservation in vitro):是指對
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