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文檔簡介

1、第五組 組長: 組員:指導(dǎo)教師:生化分離工程三級項目蛋黃中卵磷脂的分離純化01實驗原理02實驗材料及主要儀器01什么是卵磷脂?02卵磷脂有哪些功效?第一部分 背景卵磷脂03卵磷脂的分布及蛋黃中的卵磷脂?第二部分 實驗部分04提取卵磷脂的方法有哪些?03原始數(shù)據(jù)及數(shù)據(jù)處理04結(jié)果分析與討論05改進與優(yōu)化01 PART ONE卵磷脂 卵磷脂卵磷脂被英美科學(xué)家喻之為“健腦的黃金,養(yǎng)心的極品”,被日本營養(yǎng)學(xué)家稱為“本世紀最偉大的保健品”。確切的卵磷脂是磷脂酰膽堿Pc,但商業(yè)“卵磷脂”是一類含磷酸根脂質(zhì)的總和,包括磷脂酸PA、磷脂酰膽胺(腦磷脂)PE、磷脂酰膽堿(卵磷脂)PC、磷脂酰絲胺酸PS 、磷脂酰

2、甘油PG和磷脂酰肌醇PI 6種。1844年法國人Gohley從蛋黃中發(fā)現(xiàn)卵磷脂,并以希臘文命名為Lecithos(卵磷脂),通用藥品名稱為Lecithin,也自此揭開了其神秘的面紗。卵磷脂是磷脂的一種,又名磷脂酰膽堿,簡稱PC。磷脂酰膽堿由甘油基,脂肪酸基和膽堿構(gòu)成。卵磷脂的功效對人體有什么好處呢?肝臟的保護神卵磷脂不但可預(yù)防脂肪肝,還能促進肝細胞再生,防止肝硬化并有助于肝功能的恢復(fù)。糖尿病患者的營養(yǎng)品不足會使胰臟機能下降,無法分泌充分的胰島素,不能有效地將血液中的葡萄糖運送到細胞中。血管的“清道夫”卵磷脂具有乳化分解油脂的作用,對高血脂和高膽固醇有顯著的功效,可預(yù)防和治療動脈硬化。胎、嬰兒神

3、經(jīng)發(fā)育的必需品 嬰幼兒時期是大腦形成發(fā)育最關(guān)鍵時期,卵磷脂可以促進大腦神經(jīng)系統(tǒng)與腦容積的增長、發(fā)育。柔潤皮膚能分解體內(nèi)過多的毒素,并經(jīng)肝臟和腎臟的處理排出體外,可消除青春痘、雀斑??深A(yù)防老年癡呆的發(fā)生人記憶力減退,其原因與乙酰膽堿含量不足有一定關(guān)系。人腦能直接從血液中攝取磷脂,并很快轉(zhuǎn)化為乙酰膽堿。能有效地化解膽結(jié)石膽結(jié)石90是由膽固醇組成,卵磷脂可以將多余的膽固醇分解、消化及吸收。良好的心理調(diào)和劑補充卵磷脂,可使大腦神經(jīng)及時得到營養(yǎng),改善因神經(jīng)緊張而引起的急躁、易怒、失眠等癥。卵磷脂的分布卵磷脂存在于每個細胞之中,更多的是集中在腦及神經(jīng)系統(tǒng)、血液循環(huán)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)以及肝、心、腎等重要器官。存

4、在于油料作物種子和蛋黃中,尤其在蛋黃中含量最高。牛奶、動物的腦、骨髓、心臟、肺臟、肝臟、腎臟以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。卵磷脂在體內(nèi)多與蛋白質(zhì)結(jié)合,以脂肪蛋白質(zhì)(脂蛋白)的形態(tài)存在著,所以卵磷脂是以豐富的姿態(tài)存在于自然界當中,所以建議人們盡量攝取足夠多種類的食物。提取卵磷脂的方法超臨界CO2-乙醇夾帶劑萃取法優(yōu)點萃取物無溶劑殘留,雜質(zhì)含量較低,卵磷脂含量高缺點對儀器及反應(yīng)條件要求較嚴格微波輔助萃取法優(yōu)點提取用時短,溶劑用量少,提取率高,節(jié)能缺點 對儀器要求高,操作較復(fù)雜丙酮提取法優(yōu)點提取效率較高,工藝成熟,成本較低缺點產(chǎn)品中容易有化學(xué)溶劑丙酮的殘留低溫超濾法優(yōu)點 無化學(xué)溶劑殘留缺點工藝要求高

5、、產(chǎn)量較低,因此成本較高配位吸附柱層析法優(yōu)點分離系統(tǒng)可循環(huán)使用,成本低廉。較為環(huán)保,分離周期短,毒性小缺點 對所用儀器要求高02 PART TWO實驗部分 實驗原理卵黃中的甘油三酸酯占全部脂類的60%,磷脂約占28%,甾醇脂及其他約占6%。磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿,部分溶于乙醇,極難溶于丙酮;卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有機溶劑,但不溶于丙酮;丙酮能夠溶解油脂和游離脂肪酸、甘油三酯等。因此本實驗采用化學(xué)試劑從蛋黃中提取卵磷脂時,先采用丙酮脫水去其他脂類,再用乙醇對丙酮粉進行溶解,抽濾濃縮干燥最終獲得卵磷脂。實驗材料和儀器實驗材料:雞蛋、無水乙醇、丙酮儀器:電子天平、真空抽氣機、干燥箱、恒溫水浴

6、鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、抽濾漏斗、厚壁燒瓶、磨口瓶實驗步驟0504030201蛋黃的分離:將雞蛋打人培養(yǎng)皿中用小燒杯分離成蛋白和蛋黃 。稱量蛋黃重量(G)及小燒杯重量(G0)丙酮脫水去油:選用分析純的丙酮, 丙酮的體積與蛋黃的克數(shù)(mLg) 比例為 3:1靜置15min后真空抽濾,水分和溶于丙酮的其它脂質(zhì)在濾液中, 而蛋黃卵磷脂則留于濾渣即蛋黃粉中。稱量濾渣重量(G1)。乙醇溶解丙酮粉提取卵磷脂:用分析純的無水乙醇配制出99.7%的乙醇溶夜,將丙酮粉溶于其中(每克丙酮粉加9.5ml乙醇),在40下靜置(水浴鍋),再用真空抽濾裝置過濾至殘渣較干不粘手。濃縮:水浴的溫度控制在80-85為宜 。濃縮至冷凝管

7、口不再滴 出乙醇,圓底燒瓶中的物液泛起細小較密的泡沫時去除熱源,繼續(xù)在水浴中存放半小時后即可。干燥:濃縮后所得的物液流動性很強,含有較多水分??紤]其抗熱性較差,故放在不高60 的烘箱中,至其不再呈流動性,具有粘稠感時取出。稱量干燥后質(zhì)量(G2)并計算得率。數(shù)據(jù)原始數(shù)據(jù)記錄蛋黃重量G(g)小燒杯重量G0(g)干燥后燒杯重量G2(g)35.402111.077127.965得率計算卵磷脂得率=(127.965-111.077)/35.402*100%=47.703511%結(jié)果分析與討論卵磷脂得率高于一般水平11%左右,可能原因如下: 1.在最初蛋黃與蛋白的分離過程中,蛋白去除不徹底。 2.丙酮脫脂

8、時間不足 導(dǎo)致提取物中含有大量雜質(zhì)。其他產(chǎn)生誤差原因: 1.丙酮去油抽濾后在棄去殘夜液的過程中存在樣品損失。 2.乙醇溶液配制濃度存在誤差改進與優(yōu)化一、蛋黃粉丙酮脫脂效果優(yōu)化方案 丙酮與卵磷脂料液比優(yōu)化 1、 嘗試各種不同料液比情況下的脫脂效果,分為1:3、1:6、1:9、1:12、1:15 2、 嘗試脫脂時間下的脫脂效果:0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h(考察指標:丙酮不溶物質(zhì)量,越小表示除雜越多,效果越好)二、 丙酮不溶物乙醇萃取效果優(yōu)化方案 1、試驗不同乙醇濃度下的萃取效果 分成四組進行單因素試驗來進行驗證 乙醇濃度分別為50%、60%、70%、80%、90%、

9、100% (料液比1:7,水浴時間1.5h,水浴溫度35%)2、試驗不同萃取時間下的萃取效果 分成八組進行單因素試驗來進行驗證 萃取時間分別為0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h (料液比1:7,乙醇濃度選取已優(yōu)化參數(shù),水浴溫度35)3、試驗不同萃取溫度下的萃取效果 分成八組進行單因素試驗來進行驗證 萃取溫度分別為15、20、25、30、35、40、45、50(前兩個因素選用已優(yōu)化參數(shù),;料液比1:7)參考文獻1張珍. 雞蛋黃中提取卵磷脂的最佳操作工藝J. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.2郁軍, 裘愛泳, 劉元法. 磷脂的研究進展J.西部糧油科技, 2002

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