飼料中添加益生菌對凡納濱對蝦的生長和免疫力的影響

1、-. z本 科 畢 業(yè) 設(shè) 計 (論 文)飼料中添加益生菌對南美白對蝦生長和免疫力的影響Effects of Probiotic Bacterium on the Growth Performance and Immunity of Litopenaeus vannamei學(xué) 院： 海洋生命與水產(chǎn)學(xué)院 專業(yè)班級： 水產(chǎn)養(yǎng)殖131 學(xué)生： 鵬 學(xué) 號： 2013121279 指導(dǎo)教師： 畢可然副教授博士 你們教師是教授/副教授 2017 年 5月 畢業(yè)設(shè)計論文中文摘要飼料中添加益生菌對南美白對蝦生長和免疫力的影響摘 要：為研究飼料中添加益生菌對南美白對蝦生長和免疫力的影響，以初體質(zhì)量為( 6.9

2、5 1.20從摘要開場全文的文字和字母是新羅馬字體的) g 的南美白對蝦為實驗材料，在室養(yǎng)殖箱進(jìn)展3周的養(yǎng)殖實驗和2 周的副溶血弧菌人工感染實驗; 其中，對照組每天投喂根底飼料，實驗組每日投喂在根底飼料中添加地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌/枯草芽孢桿菌( 1：1) 配制成的3 組實驗飼料，實驗飼料中益生菌的終濃度為1010cfu /g。實驗結(jié)果說明，添加芽孢桿菌飼料喂養(yǎng)的南美白對蝦的生長速度明顯比對照組生長速度快(P0.05)，其中添加復(fù)合芽孢桿菌的實驗組生長速度最為明顯。在飼料中添加單一芽孢桿菌或復(fù)合芽孢桿菌都可以明顯加強(qiáng)南美白對蝦對副溶血弧菌的抵抗能力(P0.05)，且復(fù)合芽孢桿

3、菌的保護(hù)能力更強(qiáng)。飼料中添加芽孢桿菌可以提高南美白對蝦腸道蛋白酶和淀粉酶活力，且飼料中添加復(fù)合芽孢桿菌的實驗組的淀粉酶活力相比于對照組顯著提高(P0.05)。飼料中添加芽孢桿菌可以有效的降低腸道中的弧菌數(shù)(P0.05)，南美白對酚氧化酶活力、超歧化氧化酶活力和總抗氧化能力有了明顯的提升。綜上所述，飼料中添加益生菌可以促進(jìn)南美白對蝦的生長，加強(qiáng)其免疫力，添加復(fù)合益生菌則有更好的效果。關(guān)鍵詞: 南美白對蝦; 益生菌; 生長; 免疫力; 副溶血弧菌畢業(yè)設(shè)計論文外文摘要Effects of Probiotic Bacterium on the Growth Performanceand Immunit

4、y of Litopenaeus vannameiAbstract:In order to study the effects of probiotics on the growth and immunity of Penaeus vannamei, the larvae of P. vannamei (6.95 1.20) g were used as e*perimental materials and cultured in the indoor culture bo* for 3 weeks The e*perimental group was fed with Bacillus li

5、cheniformis, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis / Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) in the control group, and the control group was fed with basal diet daily. 1: 1). The final concentration of probiotics in e*perimental feed was 1010 cfu / g. The results showed that the growth rate of Pen

6、aeus vannamei fed with Bacillus sp. Was faster than that of the control group (P 0.05). The growth rate of the e*perimental group was the most obvious. The addition of single Bacillus or Bacillus subtilis to the feed could significantly enhance the resistance of P. viride to Vibrio parahaemolyticus

7、(P 0.05), and the protective ability of Bacillus subtilis was stronger. The activity of amylase and the activity of amylase in the control group were significantly higher than those in the control group (P 0.05). The addition of Bacillus in feed could effectively reduce the number of Vibrio in the i

8、ntestine (P 0.05). The activity of Phenolo*idase, the activity of hyperbranched o*idase and the total antio*idant capacity were improved obviously. In summary, the feed added probiotics can promote the growth of Penaeus vannamei, strengthen its immunity, add pound probiotics have a better effect.Key

9、words:Penaeusvannamei; Probiotics; Growth; Immunity; Vibrio parahaemolyticus目 錄 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc4841729801.1目前國外對蝦養(yǎng)殖簡況 PAGEREF _Toc484172980 h 5HYPERLINK l _Toc4841729811.2 現(xiàn)階段我國對蝦養(yǎng)殖存在的主要問題 PAGEREF _Toc484172981 h 5HYPERLINK l _Toc4841729821.3 益生菌 PAGEREF _Toc484172982 h 6HYPERLINK l

10、 _Toc4841729832.材料與方法 PAGEREF _Toc484172983 h 7HYPERLINK l _Toc4841729842.1實驗材料 PAGEREF _Toc484172984 h 7HYPERLINK l _Toc4841729852.2實驗分組 PAGEREF _Toc484172985 h 8HYPERLINK l _Toc4841729862.3副溶血弧菌感染實驗 PAGEREF _Toc484172986 h 8HYPERLINK l _Toc4841729873.實驗指標(biāo)與計算 PAGEREF _Toc484172987 h 9HYPERLINK l _T

11、oc4841729883.1 生長指標(biāo) PAGEREF _Toc484172988 h 9HYPERLINK l _Toc4841729893.2 腸道消化酶活力 PAGEREF _Toc484172989 h 9HYPERLINK l _Toc4841729903.3蝦腸道菌群總數(shù)和弧菌總數(shù) PAGEREF _Toc484172990 h 10HYPERLINK l _Toc4841729913.4免疫指標(biāo)的測定 PAGEREF _Toc484172991 h 10HYPERLINK l _Toc484172992血細(xì)胞計數(shù) PAGEREF _Toc484172992 h 10HYPERLI

12、NK l _Toc484172993酚氧化酶PO活性的測定 PAGEREF _Toc484172993 h 10HYPERLINK l _Toc4841729944.結(jié)果與分析 PAGEREF _Toc484172994 h 12HYPERLINK l _Toc4841729954.1不同益生菌對南美白對蝦生長指標(biāo)的影響 PAGEREF _Toc484172995 h 12HYPERLINK l _Toc4841729964.2不同益生菌對腸道消化酶活力的影響 PAGEREF _Toc484172996 h 13HYPERLINK l _Toc4841729974.3不同益生菌對腸道菌群總數(shù)和

13、弧菌總數(shù)的影響 PAGEREF _Toc484172997 h 14HYPERLINK l _Toc4841729984.4不同益生菌對南美白對蝦免疫指標(biāo)的影響 PAGEREF _Toc484172998 h 15HYPERLINK l _Toc484172999不同益生菌對南美白對蝦血細(xì)胞數(shù)量的影響 PAGEREF _Toc484172999 h 15HYPERLINK l _Toc484173000不同益生菌對南美白對蝦的血清中酚氧化酶PO活力的影響 PAGEREF _Toc484173000 h 15HYPERLINK l _Toc484173001不同益生菌對南美白對蝦血清中的溶菌酶活

14、力的影響 PAGEREF _Toc484173001 h 15HYPERLINK l _Toc484173002不同益生菌對南美白對蝦血清中的超氧化歧化酶SOD的影響 PAGEREF _Toc484173002 h 16HYPERLINK l _Toc484173003不同益生菌對南美白對蝦血清的總抗氧化能力的影響 PAGEREF _Toc484173003 h 16HYPERLINK l _Toc4841730045.討論 PAGEREF _Toc484173004 h 16HYPERLINK l _Toc4841730055.1營養(yǎng)及益生菌添加劑途徑的對蝦免疫調(diào)控 PAGEREF _Toc

15、484173005 h 17HYPERLINK l _Toc4841730065.2飼料中添加益生菌改善養(yǎng)殖環(huán)境 PAGEREF _Toc484173006 h 17HYPERLINK l _Toc4841730075.3無抗時代的抑菌方案 PAGEREF _Toc484173007 h 18HYPERLINK l _Toc484173008結(jié)論 PAGEREF _Toc484173008 h 19HYPERLINK l _Toc484173009致 PAGEREF _Toc484173009 h 20HYPERLINK l _Toc484173010參考文獻(xiàn) PAGEREF _Toc4841

16、73010 h 211.緒論51.1目前國外對蝦養(yǎng)殖簡況51.2現(xiàn)階段我國對蝦養(yǎng)殖存在的主要問題51.3 益生菌62.材料與方法72.1實驗材料72.2實驗分組82.3副溶血弧菌感染實驗83.實驗指標(biāo)與計算83.1 生長指標(biāo)93.2 腸道消化酶活力93.3蝦腸道菌群總數(shù)和弧菌總數(shù)93.4免疫指標(biāo)的測定104.結(jié)果與分析134.1不同益生菌對南美白對蝦生長指標(biāo)的影響134.2不同益生菌對腸道消化酶活力的影響134.3不同益生菌對腸道菌群總數(shù)和弧菌總數(shù)的影響144.4不同益生菌對南美白對蝦免疫指標(biāo)的影響155.討論165.1營養(yǎng)及益生菌添加劑途徑的對蝦免疫調(diào)控175.2飼料中添加益生菌改善養(yǎng)殖環(huán)境

17、175.3無抗時代的抑菌方案18結(jié)論18致19參考文獻(xiàn)201.緒論1.1目前國外對蝦養(yǎng)殖簡況日前，由于蝦類養(yǎng)殖業(yè)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)總值中占很大一局部，對蝦類也是人類攝取蛋白的重要來源，所以很多沿海國家的對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)正處于快速開展時期，全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)進(jìn)入迅速開展是從1980年到1990年。1993年，由于全球爆發(fā)對蝦病毒，給對蝦養(yǎng)殖業(yè)造成了很大的損失，之后對蝦的養(yǎng)殖開展進(jìn)入了沒落期1。此后，因為養(yǎng)殖品種的研究，出現(xiàn)了南美白對蝦養(yǎng)殖品種，再加上養(yǎng)殖技術(shù)的不斷先進(jìn)如微生物制劑的廣泛使用，促進(jìn)全球?qū)ξr養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)逐漸的穩(wěn)步的前進(jìn)，對對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量的提升有著不可無視的存在2。通過相關(guān)研究可了解，中國大局部地區(qū)對蝦養(yǎng)殖

18、產(chǎn)業(yè)重點養(yǎng)殖的品種為南美白對蝦，并且南美白對蝦產(chǎn)量占所有蝦類產(chǎn)量百分比每年都在逐步提升，2003年我國養(yǎng)殖對蝦總產(chǎn)量到達(dá)79萬噸，其中南美白對蝦產(chǎn)量到達(dá)61萬噸，占蝦類養(yǎng)殖總量的76.7%3。2010 年全球?qū)ξr的總產(chǎn)量350 萬噸，而我國對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量到達(dá)134.8萬噸，其中海水對蝦占到73.3 萬噸，淡水蝦的產(chǎn)量占到61.5萬噸，我國南美白對蝦的產(chǎn)量約占我國南美白對蝦容量的80%，我國南美白對蝦主要養(yǎng)殖產(chǎn)地為、和*等地。目前我國對蝦養(yǎng)殖主要養(yǎng)殖品種除了南美白對蝦Litopenaeus vannamei外，還有斑節(jié)對蝦Penaeus monodon，中國對蝦Fenneropenaeus chi

19、nensis，日本對蝦Marsupenaeus japonicus等。在我國沿海地區(qū)也有少量養(yǎng)殖長毛對蝦Fenneropenaeus penicillatus，墨吉對蝦Fenneropenaeus merguiensis，細(xì)角對蝦Litopenaeus stylirostris，新對蝦Matapenaeus sp等在我國沿海地區(qū)也有少量養(yǎng)殖。1.2現(xiàn)階段我國對蝦養(yǎng)殖存在的主要問題雖然我國對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)再不停的前進(jìn)與進(jìn)步，但現(xiàn)在當(dāng)下依然有不少問題等待解決。目前國在對蝦養(yǎng)殖中生產(chǎn)中缺乏一個明確的管理標(biāo)準(zhǔn)，這就造成對蝦養(yǎng)殖戶對利潤的一味追求，而造成對養(yǎng)殖環(huán)境的嚴(yán)重破壞，過多的重視對蝦這一養(yǎng)殖對象，而無

20、視了養(yǎng)殖環(huán)境，飼料投喂過剩或養(yǎng)殖過程中操作不當(dāng)導(dǎo)致養(yǎng)殖排水中營養(yǎng)成分的極大超標(biāo)，這些養(yǎng)殖廢水在沒有經(jīng)過處理的情況下被排放到養(yǎng)殖環(huán)境周圍的自然水域中，引起該水域氮磷含量非正常上升，這就大大增加了該水域水體富營養(yǎng)化的可能。除了養(yǎng)殖生產(chǎn)過程的養(yǎng)殖廢水的肆意排放，還有很多問題需要去解決：首先是蝦苗的安康活力問題，安康的蝦苗關(guān)系到養(yǎng)殖是否能夠成功，民間有一句話：好的蝦苗養(yǎng)殖已經(jīng)成功了一半，所以安康的蝦苗很重要，蝦苗的成活率、抗病力和生長速度與蝦苗的品質(zhì)有很大的關(guān)系，餌料系數(shù)的上下與蝦苗的品質(zhì)也有很大程度上的聯(lián)系。正因為這樣，好多育苗場一味地提高出苗的成活率而很大程度上使用大量的違禁藥品，從而導(dǎo)致蝦類的免

21、疫體質(zhì)受到不同程度的損傷，在育苗過程不重視幼蝦生長過程所需的營養(yǎng)成分，因為活餌料本錢比擬高，所以好多育苗場為了節(jié)約本錢獲得更高的利潤選擇不投喂活餌料，這樣導(dǎo)致在養(yǎng)殖后期對蝦蝦體容易感染病毒性疾病白斑綜合癥病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)和傳染性皮下及造血組織壞死病毒(IHHNV)4 。白斑綜合癥病毒(WSSV)現(xiàn)在已經(jīng)是制約我國南美白對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)迅速開展的關(guān)鍵性影響之一。自1993年發(fā)現(xiàn)該病毒開場至今，全球水產(chǎn)研究者對它開展了大量的調(diào)查實驗，但至今依然沒有取得有任何突破性的進(jìn)步，到現(xiàn)在也沒有研發(fā)出任何有效可行的方案來預(yù)防白斑綜合癥病毒的爆發(fā)和控制該病毒的發(fā)散。第二因為養(yǎng)殖水質(zhì)問題，工業(yè)廢水

22、、農(nóng)業(yè)廢水以及生活廢水造成我國很多自然水體污染嚴(yán)重，僅僅就2010年中國就有760多億m3的各種污水排流到自然水體中。被污水污染的水體通過屢次的穿插污染，最后致使蝦類疾病穿插互相傳播，導(dǎo)致蝦病大面積的爆發(fā)。其次，我國的飼料生產(chǎn)水平不及國外飼料生產(chǎn)水平，而且我國的飼料產(chǎn)品平安沒有一個系統(tǒng)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，營養(yǎng)組成不科學(xué)，從而致使蝦類的營養(yǎng)跟不上、生長速率過慢，因此很多開口餌料都是從國外進(jìn)口的。1.3 益生菌益生菌的概念益生菌又名微生物制劑、活性微生物等，主要產(chǎn)品有光和細(xì)菌、乳酸桿菌、枯草桿菌、雙歧桿菌、假單胞菌、酵母菌、糞球菌等。其中光和細(xì)菌是我國養(yǎng)殖早期最常用的益生菌，在這么多年的實踐與探索中，益生

23、菌的使用已經(jīng)被普遍承受，并且成為一種普遍的養(yǎng)殖方式存在5。這幾年來，在養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)上出現(xiàn)品種繁雜、功能多樣的微生物制劑，有一些是國外引進(jìn)的，還有一局部是我國自主研制的，使用效果也所異，在對蝦養(yǎng)殖中使用Epicin來改善養(yǎng)殖水體環(huán)境27，很多益生菌在凈化池底有機(jī)物上也都取得了明顯的效果6，比方有機(jī)污染降解菌等等。益生菌作為外源細(xì)菌進(jìn)入生物體，作用機(jī)理就好似直接吃進(jìn)活的細(xì)菌，就好似投喂一些好細(xì)菌來遏制壞細(xì)菌；將水體中的氨氮等有機(jī)物質(zhì)來作為益生菌的營養(yǎng)元，從而降低水中的氨氮濃度；養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中一些有機(jī)污染物通過生物降解的方法來轉(zhuǎn)變?yōu)槎趸?、無機(jī)鹽等無機(jī)物質(zhì)；改善機(jī)體的新代，增強(qiáng)機(jī)體的對外界的刺激能力7

24、；益生菌可以抑制有害菌在腸道的繁殖，減少毒素的產(chǎn)生，從而促進(jìn)腸道蠕動，提高腸道機(jī)能，增強(qiáng)腸道對營養(yǎng)的吸收，可以使養(yǎng)殖動物快速的生長8。水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中，餌料的殘留和動物的糞便在時間的催化下產(chǎn)生大量的有機(jī)污染物，使養(yǎng)殖水體的污染越來越嚴(yán)重，導(dǎo)致生態(tài)環(huán)境嚴(yán)重失衡9。益生菌具有繁衍能力強(qiáng)、可以快速的適應(yīng)生存環(huán)境、而且作用效果顯著，與物理處理、化學(xué)處理等方法相比擬，益生菌無需復(fù)雜的處理過程、這樣可以節(jié)約大量的勞動力和經(jīng)濟(jì)投入、而且沒有毒性殘留，所以可以在養(yǎng)殖水環(huán)境調(diào)控過程中廣泛推廣。我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖面積和產(chǎn)量均位列在世界的前沿，所以應(yīng)該保持安康的養(yǎng)殖方式，益生菌應(yīng)該廣泛推廣使用10。 益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖

25、中的調(diào)水作用水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)?；难杆匍_展可以帶來巨大的利潤和效益，但也引起了一系列的問題。在規(guī)模化的養(yǎng)殖環(huán)境里造成了嚴(yán)重的水體污染。有關(guān)研究顯示，在養(yǎng)殖過程中對餌料的不完全利用，造成大量的殘餌、糞便等碳?xì)浠衔镌陴B(yǎng)殖水體中的長時間累積，在厭氧細(xì)菌的催化下產(chǎn)生大量的毒性物質(zhì)，對養(yǎng)殖動物造成不可挽救的傷害11，造成養(yǎng)殖水體的環(huán)境消滅性破壞。另一方面，養(yǎng)殖水質(zhì)問題，工業(yè)廢水、農(nóng)業(yè)廢水以及生活廢水造成我國很多自然水體污染嚴(yán)重?，F(xiàn)在養(yǎng)殖環(huán)境的規(guī)?；?，造成病毒種類的繁多復(fù)雜且傳播迅速，造成養(yǎng)殖動物發(fā)病數(shù)增多，給養(yǎng)殖戶帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)相關(guān)資料顯示，我國這幾年養(yǎng)殖發(fā)生嚴(yán)重病害且發(fā)生病害的面積很大，占到總體

26、養(yǎng)殖面積的五分之一，每年損失的產(chǎn)量多于146萬噸12。近年來全國的養(yǎng)殖面積不斷擴(kuò)大，規(guī)?；酿B(yǎng)殖方式的大面積使用，造成水體嚴(yán)重的富營養(yǎng)化。養(yǎng)殖過程中對餌料的用量沒有準(zhǔn)確的用量，造成餌料的剩余，再加上養(yǎng)殖動物的糞便、尸體的有機(jī)物共存在一個養(yǎng)殖環(huán)境中，因為這幾天養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大和養(yǎng)殖年限的增加，造成水體的自我恢復(fù)能力不斷下降，使得養(yǎng)殖水體中的一些有毒物質(zhì)的含量嚴(yán)重超標(biāo)13，造成養(yǎng)殖水體的質(zhì)量下降，水產(chǎn)病害發(fā)病頻率升高，而造成這一系列問題發(fā)生的主要根源就是有機(jī)物污染、氨氮、亞硝態(tài)氮等在養(yǎng)殖水體中的長時間沉積。目前，國嘗試用益生菌對養(yǎng)殖污染的水體進(jìn)展生態(tài)修復(fù)掀起了養(yǎng)殖領(lǐng)域?qū)λ幚淼囊黄瑹岢?，挑選培養(yǎng)

27、針對凈水作用和制劑生產(chǎn)性能優(yōu)良的優(yōu)勢的芽孢桿菌或其他的組合是制作有效微生態(tài)凈水產(chǎn)品的成敗11。2.材料與方法2.1實驗材料實驗對蝦：2017年4月3日在市贛榆區(qū)青口鎮(zhèn)對蝦養(yǎng)殖場購置的南美白對蝦用于此次試驗用的蝦，大小為300頭，體質(zhì)量(1.65 005) g。將買的蝦暫養(yǎng)在有效體積大約為25升的3升的玻璃缸中。養(yǎng)殖期間每天換水1次，換水量為1/4-1/3，逐日投喂飼料3 次，水的溫溫度保持在( 23 2) ，持續(xù)充氣。益生菌：地衣芽孢桿菌 (Bacilluslicheniformis)( 菌含量不小于1010 CFU/g，綠百多生物生產(chǎn))、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)( 菌

28、含量不小于1010 CFU/g，綠百多生物生產(chǎn))，常溫保藏，用于拌料。副溶血弧菌：攻毒用副溶血弧菌，直接從實驗室獲得?；罨N后使用2216E 1000mlNSS溶液中參加酵母膏1g，蛋白胨5g，磷酸鐵0.1g，瓊脂20g，PH7.6-7.8液體培養(yǎng)基來激活培養(yǎng)，用離心法收集培養(yǎng)菌體，再用PBS 緩沖液稀釋備用，用于人工感染實驗。實驗根底飼料：由巴大飼料生產(chǎn)的寶鼎牌南美白對蝦配合飼料作為本次實驗的根底飼料，飼料各指標(biāo)見表1表1:根底飼料各項指標(biāo)Tab.1: position of the base diet in g/100g dry diet原料Ingredients配比Quota原料Ing

29、redients配比Quota魚粉Fish meal34豆粕Soybean meal13花生粕Peanut meal9魷魚膏Squid cream4低筋面粉Low-gluten flour24次粉Times the powder4磷脂油Phospholipid oil1海魚油Sea fish oil1.5蝦殼蛻殼素Shrimp shells0.1對蝦多礦Shrimp mine0.5對蝦多維Shrimp multidimensional0.2膽堿Choline0.3誘食劑Attractant0.1抗氧化劑Antio*idants0.05磷酸酯Phosphate0.05磷酸二氫鈣Calcium d

30、ihydrogen phosphate0.5實驗飼料：以根底飼料為對照組。在根底飼料中分別添加地衣芽孢桿菌 (Bacilluslicheniformis)( 菌含量不小于1010 CFU/g，綠百多生物生產(chǎn))、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)( 菌含量不小于1010 CFU/g，綠百多生物生產(chǎn))、地衣芽孢桿菌+ 枯草芽孢桿菌( 質(zhì)量比為11)，在1kg飼料中添加1g益生菌，配制菌含量不得低于107 CFU/g 的3 種實驗飼料。2.2實驗分組將南美白對蝦分為3組實驗組和一組對照組，每組投放100 尾蝦，實驗組投喂三個不同益生菌的試驗飼料，對照組投喂不添加任何益生菌的根本飼料。在

31、實驗養(yǎng)殖期間，各組南美白對蝦每天投喂3 -4次，每日投喂飼料的質(zhì)量約為對蝦體質(zhì)量的10% 左右( 具體根據(jù)池底餌料剩余情況調(diào)節(jié)每次的投喂量) ，所有的組別按照一開場實驗暫時養(yǎng)的條件進(jìn)展參考。2.3副溶血弧菌感染實驗 在養(yǎng)殖生長的第四周開場，從各實驗組中挑選出安康，活力強(qiáng)，沒有任何病癥，個體大小相近的的50尾對蝦分別重新放到一樣的養(yǎng)殖環(huán)境的四個玻璃缸中進(jìn)展副溶血弧菌人工感染實驗，將副溶血弧菌溶液20ml分別放到四個池中并攪拌均勻，感染實驗開場后，不再換水，封閉水循環(huán)系統(tǒng)。各組依舊分別繼續(xù)投喂對應(yīng)的實驗飼料或根底飼料，感染實驗期間需要及時撈出每個池的死亡的對蝦，并及時記錄每個池死亡的數(shù)量和感染后死

32、亡的時間，2周后完畢感染實驗。3.實驗指標(biāo)與計算3.1 生長指標(biāo)實驗起始和實驗完畢時分別對各玻璃缸蝦進(jìn)展記數(shù)、稱質(zhì)量。飼料常規(guī)成分分析參照 AOAC 的方法14。 相對增重率率：指增重和初體重的比值，是衡量生長狀況的一個常用指標(biāo)，特定增重率越大表示每天的體重增長越快，常用于實驗中衡量生長指標(biāo)。 相對增重率的計算公式如下： RW=Wb-Wa)/Wa100% 餌料系數(shù)：餌料用量和養(yǎng)殖品種的增重量的比值，表示餌料的營養(yǎng)效果。 餌料效率的計算公式如下： FER=(Wb-Wa)/Wc100%Wb、Wa 分別表示平均終體質(zhì)量(g)、平均初體質(zhì)量(g)；T 表示飼養(yǎng)時間(d)；Wc 表示實驗期間投入飼料量(

33、g)3.2 腸道消化酶活力 養(yǎng)殖實驗完畢后，在每個玻璃池中隨機(jī)取出10只南美白對蝦，用牙簽在蝦頭和蝦身的連接處向下數(shù)第三個關(guān)節(jié)處穿過蝦身蝦頭和蝦身的連接算第一個關(guān)節(jié)輕輕向外挑出蝦腸道，去除腸道里的糞便，用蒸餾水沖洗后放在干凈的培養(yǎng)皿中用濾紙吸干，稱出每組的質(zhì)量，搗碎后分別移入電動勻漿器勻漿冰水混合，在4 下離心30 min(10000 r/min)，移取上清液備用需要一天分析完畢。 蛋白酶活性測定采用福林- 酚試劑，堿性條件下極不穩(wěn)定，易被酚類化合物復(fù)原而呈現(xiàn)藍(lán)色反響，利用蛋白酶分解酪素底物生成含酚基氨基酸的呈色反響，來間接測定蛋白酶的活性15，在測酶活力前；先用福林-酚與的不同濃度的酪氨酸作

34、用，作出藍(lán)色深淺程度用光密度表示與酪氨酸濃度關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線16，然后將蛋白酶與底物反響的產(chǎn)物與福林-酚試劑作用后測光密度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相當(dāng)于多少微克的酪氨酸，以每mg酶蛋白在40的條件下，1min水解酪素產(chǎn)生1g酪氨酸為一個酶活力單位。 淀粉酶活性測定采用碘- 淀粉比色法，淀粉酶能催化淀粉水解為麥芽糖，以單位時間淀粉酶分解生成麥芽糖的量來表示淀粉酶活性的大小17，就提就是以每mg酶蛋白在37 與淀粉反響30 min，以水解10 mg 淀粉定為1 個酶活性單位。3.3蝦腸道菌群總數(shù)和弧菌總數(shù)感染后的第14天測定蝦腸道和糞便的弧菌及細(xì)菌總數(shù)。從每個池中隨機(jī)取10 尾蝦，在無菌的環(huán)境下將10尾南

35、美白對蝦解剖，取出腸道，別離腸道和糞便，分別置于無菌玻璃勻漿器，分別參加5ml無菌的生理鹽水后勻漿，然后取出勻漿液再進(jìn)展20倍稀釋，然后分別取0.1ml的稀釋液均勻的涂抹在2216E和TCBS培養(yǎng)基，然后將培養(yǎng)皿放到28的恒溫箱恒溫培養(yǎng)2天，兩天后統(tǒng)計菌落數(shù)，分別記錄蝦腸道的菌總數(shù)和弧菌的數(shù)量。2216E培養(yǎng)基的制作取蛋白胨5g，酵母膏1g，磷酸高鐵0.01g，瓊脂20g，加熱溶解于1000ml的蒸餾水中，參加5%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH7.6-7.8，121高壓滅菌15分鐘，待冷卻至50傾倒到無菌的培養(yǎng)皿中，冷卻凝固后放入到恒溫箱備用。TCBS培養(yǎng)基的制作取酵母粉5g，蛋白胨10g，硫代硫酸鈉

36、10g，枸緣酸鈉10g，牛膽粉5g，牛膽酸鈉3g，蔗糖20g，氯化鈉10g，檸檬酸鐵1g，麝香草芬蘭0.04g，瓊脂15g煮沸溶解于1000ml的蒸餾水中，冷卻至60時，傾倒于無菌培養(yǎng)皿，冷卻凝固后放入恒溫箱36攝氏度左右備用。3.4免疫指標(biāo)的測定實驗完畢后，24 h每組都不投喂任何食物，饑餓處理后，從每個玻璃池中隨機(jī)取出5尾南美白對蝦，用1 mL 無菌注射器，在南美白對蝦頭部的心臟部抽血，將每組抽的血分別放到無菌量筒中，測出每組的血淋巴容積，然后按照血液與抗凝劑按照1：2的比例混合，混合后靜置12小時，然后在4下3 000 r/min進(jìn)展10分鐘的離心，然后別離上層血清，封閉置于-80 超低

37、溫冰箱儲藏待用。血細(xì)胞計數(shù)利用血球計數(shù)板在光學(xué)顯微鏡400倍下直接計數(shù),計算出每毫升血淋的血細(xì)胞數(shù)目。酚氧化酶PO活性的測定酚氧化酶(PO)活力的測定是用L-dopa作為底物,參照改進(jìn)的Ashida7方法進(jìn)展試驗,具體步驟如下：取濃度為0.1mol/L的磷酸鉀鹽緩沖液PH6.0300微升于96孔的酶標(biāo)板中，再取出濃度為0.01mol/L的L-dopa10微升于酶標(biāo)板中，最后取出10微升的血清于此前加的緩沖液混合L-dopa的酶標(biāo)板中25下混合均勻，然后將酶標(biāo)板放到多通道分光-熒光光度計中，將溫度設(shè)定為28，其吸收波長設(shè)置為490nm，測定血清酶動力的光密度值，測量期間2分鐘測一次，測定10次。

38、以490nm波長的光下測得的吸光度為縱坐標(biāo)，反響時間為橫坐標(biāo)作實驗結(jié)果圖，1個酶的活力單位以本次實驗條件下光密度值每分鐘增加0.001作為標(biāo)準(zhǔn)。為方便實驗測得結(jié)果，本次實驗在一樣測定條件下可以直接采用酶活力單位來表示酶的活性。血清溶菌酶活性的測定.1：實驗原理：溶菌酶的測定原理是利用溶菌酶對細(xì)菌的溶菌作用，用對溶菌酶比擬敏感的菌株懸液作為底物，酶的活性測定依靠酶作用菌液光密度減少值來確定18 。.2：標(biāo)準(zhǔn)曲線用0.1ml不同濃度的酶標(biāo)準(zhǔn)溶液于4支小試管中，在37水浴中加熱5分鐘，然后再向每支試管中參加2ml同樣37預(yù)熱的菌液，然后搖晃使其混合均勻，此時立刻記錄實驗起始的時間，2min后滴加一滴

39、體積約為0.05ml濃度為5mol/L的KOH用來停頓此次反響。立刻將反響溶液倒入比色皿中，用波長為640nm來測定其光密度值結(jié)果記作D0。其余3支試管重復(fù)以上操作，分別記為D1，D2，D3，然后以光密度值作為縱坐標(biāo)，溶菌酶濃度作為橫坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。.3：血清溶菌酶活性測定 血清溶菌酶第一步測定方法與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定方法一樣，取0.1ml的血清溶液于小試管中，在37水浴中加熱5分鐘，然后再向試管中參加2ml同樣37預(yù)熱的菌液，然后搖晃使其混合均勻，此時立刻記錄實驗起始的時間，2min后滴加一滴體積約為0.05ml濃度為5mol/L的KOH用來停頓此次反響。立刻將反響溶液倒入比色皿中，用波

40、長為640nm來測定其光密度值結(jié)果記作D4.血清溶菌酶第二步測定方法是另取0.1ml的血清溶液，然后滴入一滴體積約為0.05ml濃度為5mol/L的KOH搖晃使其混合均勻，在37水浴中加熱5分鐘，再同樣參加2ml、37預(yù)熱的菌液，在同樣的實驗條件下2分鐘后記錄其光密度值D5，所以光密度減少值為D4-D5。血清中超氧化物歧化酶SOD活性和總抗氧化力的測定血清中超氧化歧化酶SOD活性和總抗氧化力的測定可以直接用試劑盒建成生物工程研究所生產(chǎn)測得。.1超氧化物歧化酶SOD活性測定羥胺法操作方法： 試劑 對照管 測定管試劑一ml 1.0 1.0 樣品ml 0.0 1.0蒸餾水ml 1.0 0.0試劑二m

41、l 0.1 0.1試劑三ml 0.1 0.1試劑四ml 0.1 0.1 用旋渦混勻器充分混勻，置37恒溫水浴40分鐘顯色劑ml 2.0 2.0混合均勻，室溫放置10分鐘，于波長550nm處，1cm光徑比色杯，蒸餾水調(diào)零，比色。計算公式：血清中超氧化物歧化酶SOD活力計算：U/ml SOD=.2總抗氧化能力的測定：操作方法：試劑 對照管 測定管試劑一ml 1.0 1.0 樣品ml 0.0 1.0試劑二ml 2.0 2.0 試劑三應(yīng)用液ml 0.5 0.5 旋渦混勻器充分混勻，37水浴30分鐘試劑四ml 0.1 0.1樣品ml 1.0 0.0旋渦混勻器充分混勻，放置10min，蒸餾水調(diào)零，1cm光

42、徑，520nm處測各管吸光度。計算公式：血清中總抗氧化能力T-AOC的計算：3.5數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析實驗結(jié)果用平均數(shù) 標(biāo)準(zhǔn)差( mean SD)表示，使用SPSS 19 0 分析軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)單因素方差( One-Way ANOVE) 分析，Duncan 氏法進(jìn)展多重比擬，處理間( P 0 05 ) 則認(rèn)為差異顯著。4.結(jié)果與分析4.1不同益生菌對南美白對蝦生長指標(biāo)的影響根底飼料，根底飼料中飼料中添加地衣芽孢桿菌 (Bacilluslicheniformis)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、地衣芽孢桿菌+ 枯草芽孢桿菌( 質(zhì)量比為11)對南美白對蝦的生長指標(biāo)參見表2表2南美白

43、對蝦增重、增重率、餌料系數(shù)和成活率Tab 2: Weight gain, bait coefficient and survival rate of Penaeus vannamei實驗組Test group初體gEarlyweight末體重gBodyweight增重gWeight gain增重率Weight gain rate餌料效率Bait efficiency成活率Survivalrate對照組1.650.052.880.021.230.02a74.55%a0.73a85%地衣芽孢桿菌1.650.053.030.081.380.08ab83.64%ab0.68a80%枯草芽孢桿菌1.65

44、0.053.050.051.400.05ab84.85%ab0.70a78%地+枯1:11.650.053.170.071.520.07abc92.12%abc0.83ab87%注：一樣列數(shù)據(jù)的右上角不同的上標(biāo)字母代表有顯著差異 (P0.05)Note：Values in the same column without a mon superscript are significantly different( P0.05)由上表可以明顯的看出：飼料中添加益生菌均可以提高南美白對蝦的生長速度P0.05，其中飼料中單一添加地衣芽孢桿菌的南美白對蝦生長速度與飼料中單一添加枯草芽孢桿菌的生長速度差異

45、不明顯P0.05，但與添加復(fù)合芽孢桿菌的生長速度有顯著的差異P0.05。飼料中單一地添加枯草芽孢桿菌或者地衣芽孢桿菌對餌料效率的影響與對照組的餌料效率差異并不顯著，但是添加復(fù)合芽孢桿菌的實驗組的餌料效率與對照組有顯著的提高P0.05。實驗的成活率在78%-87%之前，由于實驗的南美白對蝦的數(shù)量有限，并不能得出有效的結(jié)論。4.2不同益生菌對腸道消化酶活力的影響根底飼料，根底飼料中飼料中添加地衣芽孢桿菌 (Bacilluslicheniformis)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、地衣芽孢桿菌+ 枯草芽孢桿菌( 質(zhì)量比為11)對南美白對蝦的腸道消化酶活力參見表3表3：不同益生菌

46、對南美白對蝦腸道蛋白酶和淀粉酶活力的影響Tab 3: Effects of different probiotics on intestinal protease and amylase activity in Penaeus vannamei實驗組Test group蛋白酶Protease淀粉酶Amylase對照組18.80.58a4.341.13a地衣芽孢桿菌23.611.08ab8.280.89ab枯草芽孢桿菌23.350.99ab7.891.34ab地衣枯草1:123.930.76ab8.730.64b注：一樣列數(shù)據(jù)的右上角不同的上標(biāo)字母代表有顯著差異 (P0.05)Note：Valu

47、es in the same column without a mon superscript are significantly different( P0.05) 由上表可以明顯的看出，飼料中添加益生菌均可以提高南美白對蝦腸道中的蛋白酶和淀粉酶的活性P0.05，但是飼料中添加地衣芽孢桿菌的實驗組、添加枯草芽孢桿菌的實驗組和添加復(fù)合芽孢桿菌的實驗組之間對南美白對蝦腸道蛋白酶的活力差異并不明顯P0.05。單一的添加枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌之間對南美白對蝦腸道淀粉酶活力沒有明顯差異的影響P0.05，但是添加復(fù)合芽孢桿菌相比于添加單一的芽孢桿菌可以更好的提高南美白對蝦腸道淀粉酶的活性P0.05。

48、4.3不同益生菌對腸道菌群總數(shù)和弧菌總數(shù)的影響根底飼料，根底飼料中飼料中添加地衣芽孢桿菌 (Bacilluslicheniformis)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、地衣芽孢桿菌+ 枯草芽孢桿菌( 質(zhì)量比為11)對南美白對蝦的腸道菌群總數(shù)和弧菌總數(shù)的影響參見表4表4：不同益生菌對南美白對蝦腸道菌群總數(shù)和弧菌總數(shù)的影響Tab 4: Effects of different probiotics on the total number of intestinal microflora and the total number of Vibrio in Penaeus vann

49、amei實驗組Test group菌群總數(shù)Total number of flora弧菌總數(shù)Total number of Vibrio對照組4.0107a1.29107a地衣芽孢桿菌1.17107b7.08105b枯草芽孢桿菌2.95107ab4.68106地衣枯草1:15.89106bc6.69105b注：一樣列數(shù)據(jù)的右上角不同的上標(biāo)字母代表有顯著差異 (P0.05)Note：Values in the same column without a mon superscript are significantly different( P0.05) 由上表可以明顯的看出，飼料中添加益生菌均

50、可以降低南美白對蝦腸道中的細(xì)菌總數(shù)P0.05，但是添加復(fù)合芽孢桿菌比單一添加地衣芽孢桿菌或者枯草芽孢桿菌可以更有效的降低南美白對蝦腸道中的細(xì)菌總數(shù)P0.05。飼料中添加益生菌也均可以降低南美白對蝦腸道中的弧菌數(shù)量P0.05，其中添加枯草芽孢桿菌最為明顯P0.05，但是添加地衣芽孢桿菌和復(fù)合芽孢桿菌相比，兩者沒有顯著的區(qū)別P0.05。4.4不同益生菌對南美白對蝦免疫指標(biāo)的影響根底飼料，根底飼料中飼料中添加地衣芽孢桿菌 (Bacilluslicheniformis)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、地衣芽孢桿菌+ 枯草芽孢桿菌( 質(zhì)量比為11)對南美白對蝦的血細(xì)胞數(shù)、溶菌酶和酚氧

51、化酶的影響參見表5，對南美白對蝦的超氧化歧化酶和總抗氧化能力的影響參見表6表5：不同益生菌對南美白對蝦血細(xì)胞數(shù)、酚氧化酶和溶菌酶的影響Tab 5: Effects of Different Probiotics on Blood Cell Count, Phenolo*idase and Lysozyme in Penaeus vannamei實驗組Test group血細(xì)胞數(shù)107cell/mlNumber of blood cells酚氧化酶 (U/ml)Phenol o*idase溶菌酶(U/ml)Lysozyme對照組1.570.12a6.30.5a16.750.71a地衣芽孢桿菌1.

52、760.11a13.31.5b20.001.73b枯草芽孢桿菌1.680.15a13.91.7b21.753.47b地衣+枯草1:12.180.12b17.40.8bc28.452.37bc注：一樣列數(shù)據(jù)的右上角不同的上標(biāo)字母代表有顯著差異 (P0.05)Note：Values in the same column without a mon superscript are significantly different( P0.05)不同益生菌對南美白對蝦血細(xì)胞數(shù)量的影響 由表5可以明顯的看出，飼料中添加單一的枯草芽孢桿菌的實驗組或者單一的地衣芽孢桿菌實驗組相比于根底飼料的對照組，南美白對蝦

53、的血細(xì)胞數(shù)量沒有明顯的提高P0.05，但是添加復(fù)合芽孢桿菌的實驗組的南美白對蝦的血細(xì)胞數(shù)量相比于其他三組有明顯的提高P0.05。不同益生菌對南美白對蝦的血清中酚氧化酶PO活力的影響由表5中可以看出，飼料中添加益生菌均可以提高南美白對蝦的血清中酚氧化酶的活性P0.05，其中單一的添加枯草芽孢桿菌和單一的添加枯草芽孢桿菌相比，兩者對南美白對蝦血清中的酚氧化酶活性的沒有顯著的差異P0.05，但是添加復(fù)合芽孢桿菌的實驗組中南美白對蝦血清中的酚氧化酶活性明顯大于其他幾組P0.05。不同益生菌對南美白對蝦血清中的溶菌酶活力的影響由表5中可以明顯的看出，飼料中不管添加何種益生菌均可以提高南美白對蝦血清中的溶

54、菌酶的活性P0.05，其中單一的添加枯草芽孢桿菌和單一的添加枯草芽孢桿菌相比，兩者對南美白對蝦血清中的溶菌酶活性的沒有顯著的差異P0.05，但是添加復(fù)合芽孢桿菌的實驗組中南美白對蝦血清中的溶菌酶的活性相比于單一的添加枯草芽孢桿菌或地衣芽孢桿菌的實驗有明顯的提高P0.05。表6：不同益生菌對南美白對蝦超氧化歧化酶和總抗氧化能力的的影響Tab 6: Effects of different probiotics on supero*ide dismutase and total antio*idant capacity of Penaeus vannamei實驗組Test group超氧化歧化酶

55、(U/ml)Supero*ide dismutase總抗氧化能力(U/ml)Total antio*idant capacity對照組271.451.33a5.660.32a地衣芽孢桿菌294.653.45b7.870.07b枯草芽孢桿菌287.267.45b12.570.48bc地衣+枯草1:1288.347.05b11.361.88bc注：一樣列數(shù)據(jù)的右上角不同的上標(biāo)字母代表有顯著差異 (P0.05)Note：Values in the same column without a mon superscript are significantly different( P0.05)不同益生

56、菌對南美白對蝦血清中的超氧化歧化酶SOD的影響由表6中可以明顯的看出，飼料中添加益生菌均可以提高南美白對蝦血清中的超氧化歧化酶SOD活性，但是單一的添加枯草芽孢桿菌或地衣芽孢桿菌的實驗組與添加復(fù)合芽孢桿菌的實驗組相比，三者對南美白對蝦血清中的超氧化歧化酶SOD沒有明顯的區(qū)分P0.05。不同益生菌對南美白對蝦血清的總抗氧化能力的影響由表6中可以看出，飼料中添加益生菌均可以提高南美白對蝦血清中的總抗氧化能力P0.05。其中添加枯草芽孢桿菌和添加復(fù)合芽孢桿菌的兩組實驗組之間差異不顯著P0.05，但是相比于單一的添加地衣芽孢桿菌的實驗組有明顯的提高(P0.05。5.討論在全球的對蝦養(yǎng)殖領(lǐng)域中對由于病毒

57、性疾病以及早期死亡綜合癥對對蝦養(yǎng)殖造成嚴(yán)重的損失的研究都是水產(chǎn)研究界的一個困擾。這些年以來，相關(guān)研究學(xué)者在對蝦的致病源以及提高對蝦免疫力等方面取得突破性進(jìn)展19。在此，一些研究學(xué)者根據(jù)以往這些的研究成果開發(fā)出了有效阻止對蝦病害的發(fā)生的方法以及提高對蝦對外源刺激物的應(yīng)激能力的技術(shù)措施。從養(yǎng)殖動物的元素需求和抗病力方面來說，在養(yǎng)殖動物的飼料中添加微生物制劑的措施，可以增強(qiáng)對蝦對各種理化刺激因素的應(yīng)激能力，提高南美白對蝦生長速度，增加經(jīng)濟(jì)收益。因為有了這些研究成果，才能保證對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)的平安以及對蝦養(yǎng)殖行業(yè)的可持續(xù)的開展。從實際應(yīng)用的角度出發(fā)，飼料中添加益生菌可以從以下三個方面來提高對蝦對各種刺激因

58、素的應(yīng)激能力：首先是通過對蝦對各元素需求的平衡或外源刺激提高對蝦對各種理化刺激因素的應(yīng)激能力，其次是減少水中刺激性物質(zhì)對對蝦免疫的刺激，最后是利用對水體外的環(huán)境調(diào)節(jié)抑制病原生物的產(chǎn)生和減少對對蝦感染的可能。5.1營養(yǎng)及益生菌添加劑途徑的對蝦免疫調(diào)控除了營養(yǎng)元素的準(zhǔn)確均衡配置之外，更多的研究焦點聚集在對蝦的應(yīng)激調(diào)節(jié)上益生菌所起的作用。益生菌是一類能刺激白細(xì)胞活性從而提高動物抗病毒、細(xì)菌或其他病原能力的微生態(tài)制劑。對于節(jié)肢動物門，起作用的主要方面是提高酚氧化酶和與其相關(guān)的元素的生命力20。特別要強(qiáng)調(diào)的是，益生菌不是添加的越多效果會越好，相關(guān)研究均說明，益生菌的使用效果與其添加的用量并名優(yōu)很準(zhǔn)確的線

59、性關(guān)系。在益生菌制劑的使用方面，首先益生菌準(zhǔn)確的搭配使用相當(dāng)關(guān)鍵，其次，準(zhǔn)確的添加量也很關(guān)鍵。所有的搭配方法以及使用劑量都要在養(yǎng)殖動物上經(jīng)過大量的實驗數(shù)據(jù)分析才能過證明它對養(yǎng)殖動物的效果。但在劑量稍微超出平安劑量時則會產(chǎn)生*些信號分子降低動物食欲甚至抑制動物生長的現(xiàn)象26。其次，在飼料中直接添加益生菌，養(yǎng)殖動物廣泛存在著應(yīng)激疲倦，就是在一直投喂添加益生菌的飼料的實驗組，對蝦的應(yīng)激反響提升后會緩慢的降到其之前狀態(tài)28。所以，在養(yǎng)殖動物有了應(yīng)激疲倦之后，通過何種方法對養(yǎng)殖動物的免疫系統(tǒng)的再次恢復(fù)是每一個研究學(xué)者不可無視的存在。5.2飼料中添加益生菌改善養(yǎng)殖環(huán)境相比于陸地上動物的生活環(huán)境而言，對蝦生

60、活在水中，因為水的流動性，使得水中的有機(jī)物質(zhì)被去除干凈存在一定的難度。尤其是在當(dāng)今養(yǎng)殖水環(huán)境嚴(yán)重超負(fù)荷運載下，對蝦池的水進(jìn)展大量進(jìn)排放的情況下，對蝦對新的水環(huán)境的應(yīng)激容易造成對蝦蝦病的發(fā)生。所以，在飼料中添加益生菌來提高對蝦的攝食率，從而降低水中的殘餌和糞便，減少了對養(yǎng)殖水體的污染的威脅，從而保證對蝦安康快速的生長，帶來更高的經(jīng)濟(jì)效益。相比擬魚類的吞食的攝食方法，對蝦等甲殼動物的攝食方法是抱食，攝食速度相比很慢，所以造成飼料在水中溶解嚴(yán)重，想要解決這一問題，無非就是要縮短對蝦的攝食過程，只有在消化得快吃的快的情況下才能解決這個問題，所以提高對蝦對飼料的消化速度是解決這一問題的最根本手段。 除此