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1、血涂片制備染色及白細(xì)胞形態(tài)觀察根據(jù)不同的細(xì)胞種類及細(xì)胞的不同成分,對(duì)酸性及堿性染料的結(jié)合能力不同,而使各種細(xì)胞呈現(xiàn)出各自的特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)使用吉姆薩染料:由天青(藍(lán))2號(hào)和酸性染料伊紅混合配制而成。掌握血涂片的制備和染色方法及白細(xì)胞的正常形態(tài)原理 目的器材 載玻片、推片、顯微鏡、微量吸管、移液槍試劑 姬姆薩染色液、磷酸緩沖液、甲醇標(biāo)本 抗凝血注意:操作中請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并帶一次性手套操作。血 涂 片制 備推片(夾角保持30 -45)載玻片血液(10微升)將推片勻速向前,勿停頓。涂片的厚薄取決于速度和角度:快、大(厚)。慢、小(?。┮粡垵M意的血涂片應(yīng)厚薄均勻 頭 體 尾鮮明涂片干燥后用鉛筆在血涂片的頭部寫
2、上姓名和編號(hào)李四B 1 2 3血 涂 片 染色稀釋后的姬姆薩染色液覆蓋整個(gè)血膜染色15minPBS磷酸緩沖液漂洗(切勿先倒掉染液)涂片經(jīng)水洗干燥后即可鏡檢李四123涂片快速干燥后加甲醇固定2-3min血涂片的觀察1.染色情況(滿意、偏酸、偏堿)2. 細(xì)胞分布情況紅細(xì)胞:淡紅色,無(wú)核的圓形細(xì)胞,因紅細(xì)胞為雙凹形,故邊緣部分染色較深,中心較淺,直徑7-8微米嗜中性:體積略大于紅細(xì)胞,細(xì)胞核被染成紫色分葉狀,可分1-5葉。直徑10-12微米嗜酸性:略大于嗜中性白細(xì)胞,細(xì)胞核染成紫色,通常為2葉,胞質(zhì)充滿嗜酸性大圓顆粒,被染成鮮紅色。直徑10-15微米。嗜堿性:體積略小于嗜酸性白細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)中有大小不等被染成紫色的顆粒,顆粒數(shù)目較嗜酸性白細(xì)胞的顆粒少,核1-2葉,染成淡藍(lán)色。淋巴細(xì)胞:可觀察到中、小型兩種。小淋巴細(xì)胞與紅細(xì)胞大小相似,圓形,核致密,染成深紫色。周圍僅一薄層嗜堿性染成淡藍(lán)的細(xì)胞質(zhì)。單核細(xì)胞:體積最大,細(xì)胞圓形。胞質(zhì)染成灰藍(lán)色。核呈腎形或馬蹄形,染色略淺于淋巴細(xì)胞的核。直徑14-20微米1.你認(rèn)為本次實(shí)驗(yàn)操作中需要注意的問(wèn)題是什么? 2.試描述一下你所看到的白細(xì)胞,包括細(xì)胞的形態(tài)/大小及染色情況。其中,
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