大孔吸附樹脂在新藥研究開發(fā)和生產(chǎn)中的應(yīng)用及存在的問題課件

1、第1頁，共40頁。大孔吸附樹脂在新藥研究開發(fā)和生產(chǎn)中的應(yīng)用及存在的問題屠鵬飛北京大學(xué)中醫(yī)藥現(xiàn)代研究中心第2頁，共40頁。概 述中藥有效成分的不斷闡明中藥現(xiàn)代化的要求當(dāng)前用于中藥純化的主要技術(shù)： 溶劑法： 沉淀法： 色譜法：大孔吸附樹脂、離子交換樹脂、 聚酰胺、葡聚糖凝膠等 超臨界流體萃取法： 超濾法： 結(jié)晶法：第3頁，共40頁。一、樹脂簡介1、常用樹脂的類型凝膠樹脂大孔樹脂離子交換樹脂第4頁，共40頁。2、離子交換樹脂第5頁，共40頁。離子交換樹脂的種類 種 類 活 性 基 團(tuán)1 強(qiáng)酸性 磺酸基(SO3H)2 弱酸性 磷酸基(PO3H2)、羧酸基(COOH)3 強(qiáng)堿性 型：三甲基胺(-N+(C

2、H3)3) 型：二甲基乙醇胺(N+(CH3)2C2H4OH4 弱堿性 伯氨基(-NH2)、仲氨基(-NHR)、叔氨基(-NR2)5 兩性 強(qiáng)堿弱酸 弱堿弱酸第6頁，共40頁。3、大孔吸附樹脂第7頁，共40頁。目前國產(chǎn)樹脂的主要類型致孔劑：甲苯、石蠟、溶劑汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等第8頁，共40頁。國產(chǎn)大孔吸附樹脂的主要型號、性能、生產(chǎn)企業(yè) 型號 性能 生產(chǎn)企業(yè)D-101 非極性 天津晶瑩提取樹脂有限責(zé)任公司D-201 弱極性 天津晶瑩提取樹脂有限責(zé)任公司D-301 極性 天津晶瑩提取樹脂有限責(zé)任公司HPD-100 非極性 河北滄州寶恩化工有限公司HPD-300 弱極性 河北滄州寶恩化工有限公

3、司HPD-600 極性 河北滄州寶恩化工有限公司X-5 非極性 南開大學(xué)化工廠AB-8 弱極性 南開大學(xué)化工廠NKA-9 極性 南開大學(xué)化工廠 第9頁，共40頁。三菱化學(xué)的大孔吸附樹脂聚苯乙烯系列合成樹脂： Diaion: HP20, HP21 Sepabeads: SP825, SP850 Sepabeads: SP70, SP700修飾的聚苯乙烯系列合成樹脂: Sepabeads: SP207異丁烯系列合成樹脂: Diaion: HP2MG第10頁，共40頁。大孔吸附樹脂的主要理化性質(zhì)顏色：白色、乳白色至微黃物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于任何酸、堿及有機(jī)溶劑，加熱不溶，可在150以下使用含水量：

4、6080堆積密度：0.60.9第11頁，共40頁。影響樹脂性能的主要因素及國產(chǎn)樹脂存在的主要問題交聯(lián)度比表面積吸附容量粒度分布強(qiáng)度第12頁，共40頁。二、大孔吸附樹脂的預(yù)處理 第13頁，共40頁。1、樹脂預(yù)處理的方法回流提取法滲漉法水蒸氣蒸餾法2、樹脂預(yù)處理的溶劑乙醇丙酮異丙醇25鹽酸25氫氧化鈉第14頁，共40頁。3、滲漉法純化樹脂色譜柱：不銹鋼柱；徑高比為1:31:7裝柱：濕法裝柱洗脫溶劑：乙醇25鹽酸25NaOH 水甲醇25鹽酸25NaOH 水混合溶劑25鹽酸25NaOH 水洗脫方法：乙醇法：乙醇浸泡12h 2BV洗脫浸泡35h 2BV洗脫浸泡35h 35BV洗脫浸泡35h 35BV洗脫

5、23BV鹽酸浸泡24h 洗脫水洗脫23BV NaOH浸泡24h 洗脫水洗脫第15頁，共40頁。混合溶劑法：混合溶劑浸泡12h 2BV洗脫浸泡35h 2BV洗脫浸泡35h 35BV洗脫23BV鹽酸浸泡24h 洗脫水洗脫23BV NaOH浸泡24h 洗脫水洗脫新方法：乙醇浸泡35h 35BV乙醇洗脫 23BV鹽酸浸泡24h 洗脫水洗脫23BV NaOH浸泡24h 洗脫水洗脫第16頁，共40頁。4、乙醇法純化樹脂有機(jī)殘留物檢測第17頁，共40頁。第18頁，共40頁。三、大孔吸附樹脂的再生再生溶劑的選擇乙醇：5095甲醇：50100異丙醇：丙酮：50100堿性乙醇溶液：25鹽酸：25NaOH：洗脫方法

6、正洗脫：逆流洗脫：第19頁，共40頁。四、大孔吸附樹脂在新藥研究中的應(yīng)用 第20頁，共40頁。1、適用的新藥類型中藥有效成分的粗分和精制單味中藥有效部位的制備中藥復(fù)方有效部位的制備注意：性質(zhì)相似成分可混煎后一起制備各味藥所含成分性質(zhì)差別較大的復(fù)方應(yīng)單獨(dú)提取后，再制備單味藥有效成分性質(zhì)差別較大的應(yīng)分別制備第21頁，共40頁。2、成分的類型與樹脂的選擇脂溶性成分包括甾體類、二萜、三萜、黃酮、木脂素、香豆素、生物堿等：應(yīng)選擇非極性或弱極性的樹脂，如D101、AB-8、HPD100等皂苷和生物堿苷類成分：應(yīng)選擇弱極性或極性樹脂，如D201、D301、HPD300、HPD600、AB-8、NKA-9等黃

7、酮苷、蒽醌苷、木脂素苷、香豆素苷等：應(yīng)選擇合成原料中加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯氰的樹脂，如D201、D301、HPD600、NKA-9等環(huán)烯醚萜苷類成分：應(yīng)選擇極性樹脂，如D301、HPD600、NKA-9等第22頁，共40頁。3、樹脂用于新藥研究應(yīng)考察的內(nèi)容(1)樹脂型號的選擇 比吸附值考察 分離性能考察(2)藥材樹脂比例的考察(3)色譜柱的徑高比考察(4)洗脫溶劑的考察(5)吸附流速和洗脫流速考察(6)收集洗脫液量考察(7)樹脂的使用壽命考察(8)工藝放大試驗第23頁，共40頁。4、樹脂分離條件的正交試驗表頭的設(shè)計 因素 藥材樹脂 色譜柱 洗脫流速 收集洗脫水平 比例 徑高比 BV/h 液量

8、 1 1:1 1:3 1 3 2 1:2 1:5 2 5 3 1:3 1:7 3 7第24頁，共40頁。實例一：某中藥中苯乙醇苷類成分的分離、精制該中藥所含的成分：苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜及其苷類、木脂素及其苷類、多元醇、水溶性生物堿、單糖、雙糖、氨基酸等第25頁，共40頁。1、樹脂型號的考察第26頁，共40頁。2、樹脂用量和吸附次數(shù)的考察第27頁，共40頁。3、洗脫液乙醇濃度的考察 乙醇濃度 20 40 60 80洗脫量 9倍 5倍 4倍 3倍 檢出雜質(zhì) 脂溶性 脂溶性 成分 成分第28頁，共40頁。4、收集洗脫液量的考察第一次洗脫第二次洗脫洗脫溶劑 水洗脫 40乙醇洗脫收集量 4 5TLC檢測

9、 未檢出糖 難檢出苯乙醇苷洗脫溶劑 水洗脫 40乙醇洗脫收集量 3 4TLC檢測 未檢出糖 難檢出苯乙醇苷第29頁，共40頁。實例二、某中藥中黃酮苷類成分的分離、精制1、樹脂型號的考察第30頁，共40頁。3、洗脫條件的正交試驗第31頁，共40頁。第32頁，共40頁。5、成品中有機(jī)殘留物的限量檢查檢查方法：氣相色譜法檢查成分：應(yīng)根據(jù)樹脂合成中所接觸的有機(jī)成分確定檢查成分測定方法：頂空進(jìn)樣或溶劑法含量限度：苯：2ppm；其它：20ppm方法學(xué)考察：溶劑的氣相色譜檢測基線噪音和最低檢測限的測定對照品的測定供試品的測定第33頁，共40頁。標(biāo)準(zhǔn)的書寫格式色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗對照品溶液的制備供試品溶液

10、的制備測定法起草說明第34頁，共40頁。五、大孔吸附樹脂在中藥及植物提取物生產(chǎn)中的應(yīng)用第35頁，共40頁。1、槐花米中黃酮苷類成分的分離、純化槐花花穗9.9kgMeOH提取36LHP20吸附MeOH溶解50-10L+100%-10LLH-20吸附MeOH溶解CHP20P吸附50%EtOH流份ODS層析分離45%MeOH洗脫3,4,5,7-四羥基黃酮-3-葡萄糖酸苷第36頁，共40頁。2、大孔樹脂在絞股藍(lán)總皂苷精制中的應(yīng)用絞股藍(lán)水煎液D101樹脂水洗脫棄去95乙醇洗脫收集洗脫液濃縮得總皂苷第37頁，共40頁。3、大孔樹脂在貫葉金絲桃提取物制備中的應(yīng)用貫葉金絲桃80乙醇提取物正己烷脫脂乙酸乙酯提取黃酮和雙萘醌殘渣溶于水D101樹脂水洗脫除去雜質(zhì)95乙醇