保健食品安全性評價課件

1、保健食品毒理學(xué)安全性評價北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部 毒理學(xué)系 周宗燦電話：（010）8280 15311頁，共82頁。反應(yīng)停thalidomide第2頁，共82頁。保健食品毒理學(xué)安全性評價一。毒理學(xué)基礎(chǔ)二。保健食品安全性毒理學(xué)評價規(guī)范 （2003）三。毒理學(xué)試驗(yàn)及結(jié)果判定四。安全評價工作中的有關(guān)問題五。注意點(diǎn)和進(jìn)展第3頁，共82頁。一。毒理學(xué)基礎(chǔ)安全性 安全性是首先關(guān)注的問題 （審批制和備案制） 保健食品（審批制）：非自愿風(fēng)險 藥品：自愿風(fēng)險有效性 第4頁，共82頁。毒理學(xué)（toxicology）從生物醫(yī)學(xué)角度研究化學(xué)物質(zhì)對生物機(jī)體的損害作用及其機(jī)制的科學(xué)。任何一種化學(xué)物在一定條

2、件下都可能是對機(jī)體產(chǎn)生任有害作用。第5頁，共82頁。毒理學(xué)描述毒理學(xué)、機(jī)制毒理學(xué)、管理毒理學(xué) （法規(guī)毒理學(xué)）毒作用譜： 系統(tǒng)毒性；致突變；致畸；致癌第6頁，共82頁。劑量軸低 30 100 高 人 NOEL 閾 LOEL NOAEL 閾 LOAEL MTD LD50 功能 長期毒性 急期毒性 第7頁，共82頁。 100% * 50 * 15 30 60 NOAEL LOAEL mg/kg 閾毒作用劑量反應(yīng)關(guān)系第8頁，共82頁。描述毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則化學(xué)物在實(shí)驗(yàn)動物產(chǎn)生的作用，可以外推于人。實(shí)驗(yàn)動物必須暴露于高劑量，這是發(fā)現(xiàn)對人潛在危害的必需的和可靠的方法。成年的健康（雄性和雌性未孕）實(shí)驗(yàn)動物

3、和人可能的暴露途徑是基本的選擇。第9頁，共82頁。檢測和評價 人擬用劑量 100倍 藥物A 30倍 毒性作用 藥物B 毒性B A 無毒性 毒性作用 安全性 A B 作用第10頁，共82頁。毒性評價試驗(yàn)的基本目的 受試物毒作用的表現(xiàn)和性質(zhì) 劑量-反應(yīng)(效應(yīng))研究 確定毒作用的靶器官 確定損害的可逆性第11頁，共82頁。 實(shí)驗(yàn)動物物種選擇對受試物在代謝、生化和毒理學(xué)特征與人最接近的物種；選擇自然壽命不太長的物種；易于飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)操作的物種；經(jīng)濟(jì)并易于獲得的物種。常規(guī)選擇物種的方式是利用兩個物種，一種是嚙齒類，另一種是非嚙齒類。系統(tǒng)毒性研究最常用的嚙齒類是大鼠和小鼠，非嚙齒類是狗。第12頁，共82頁。

4、物種選擇急性毒性試驗(yàn)常用 大鼠、小鼠、狗亞慢性、慢性毒性試驗(yàn)常用 大鼠、狗皮膚刺激試驗(yàn)和致敏試驗(yàn)常用 豚鼠皮膚刺激試驗(yàn)和眼刺激試驗(yàn)常用 兔遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)多用 小鼠致畸試驗(yàn)常用 大鼠、小鼠和兔致癌試驗(yàn)常用 大鼠和小鼠遲發(fā)性神經(jīng)毒性試驗(yàn)常用 母雞第13頁，共82頁。染毒途徑 毒理學(xué)試驗(yàn)中染毒途徑的選擇，應(yīng)盡可能模擬人在接觸該受試物的方式。最常用的染毒途徑為經(jīng)口、經(jīng)呼吸道、經(jīng)皮途徑。第14頁，共82頁。溶劑和賦型劑染毒前根據(jù)染毒途徑的不同，應(yīng)將受試物制備成一定的劑型。常用的是制備成水溶液、油溶液或混懸液。對溶劑和助溶劑的要求是：所用的溶劑或助溶劑應(yīng)該是無毒或?qū)嶋H無毒與受試物不起反應(yīng)，受試物在溶液中應(yīng)

5、穩(wěn)定；與受試物的毒動學(xué)和毒效學(xué)無顯著影響；無特殊刺激性或氣味。第15頁，共82頁。溶劑和賦型劑對水溶性受試物，體內(nèi)試驗(yàn)首選的溶劑為水（經(jīng)口染毒）和等滲鹽水（胃腸道外染毒）。水不溶性受試物應(yīng)溶于或懸浮于適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑中。混懸液最常用的賦形劑為0.5%羧甲基纖維素鈉或10%阿拉伯樹膠。受試物溶液應(yīng)新鮮配制，除非已證明貯存穩(wěn)定。 第16頁，共82頁。美國藥劑協(xié)會（1986）推薦的常用溶劑和賦型劑1。丙酮（Acetone）；2羧甲基纖維素（Carboxyl methyl cellulose，CMC）；3玉米油（Corn oil）；4二甲基甲酰胺（N,N-dimethylformamide, DMFO）

6、；5二甲基亞砜（Dimethyl sulfoxide, DMSO）；6乙醇（Ethanol）7（Glycerol） 甘油；8阿拉伯膠（Gum Arabic）；9乳糖（Lactose）；10甲基纖維素（Methyl cellulose）11甲基乙基酮，丁酮（Methyl ethyl ketone，MEK）；12凡士林油（Mineral oil；liquid petrolatum）；13 橄欖油（Olive oil）；14 花生油（peanut oil/Arachis oil）15 凡士林（Petrolatum/Vaseline /petroleum Jelly）；16聚乙二醇-400（Polye

7、thylene Glycol-400，PEG400）；17生理鹽水（Saline）；18吐溫80（Tween 80）；19水（Water） （黃色示可用于經(jīng)口）第17頁，共82頁。一般推薦的染毒最大容積（1）經(jīng)口20ml/kg（對空腹動物）；（2）經(jīng)皮2ml/kg（根據(jù)體表面積計算，限于染毒的準(zhǔn)確性）；（3）靜脈1ml/kg（5分鐘以上）；（4）肌肉注射0.5ml/kg（一個部位）；（5）每眼0.01ml；（6）直腸0.5ml/kg；（7）陰道：大鼠0.2ml, 兔1ml；（8）吸入2mg/L；（9）鼻：猴或犬每鼻孔0.1ml。第18頁，共82頁。安全系數(shù)不確定系數(shù) 不確定系數(shù)100倍 物種間

8、差異10倍 個體間差異10倍 毒效學(xué) 毒動學(xué) 毒效學(xué) 毒動學(xué) 100.4 100.6 100.5 100.5 (2.5) (4.0) (3.2) (3.2)第19頁，共82頁。二。保健食品安全性毒理學(xué)評價規(guī)范（2003） 食品衛(wèi)生法、保健食品管理辦法的要求保健食品必須符合食品衛(wèi)生要求，對人體不產(chǎn)生任何急性、亞急性或慢性危害。第一部分：毒理學(xué)評價程序第二部分：毒理學(xué)檢驗(yàn)方法 第20頁，共82頁。第一部分：毒理學(xué)評價程序主題內(nèi)容與適用范圍對受試物的要求 對受試物處理的要求保健食品安全性毒理學(xué)評價試驗(yàn)的四個階段和內(nèi)容不同保健食品選擇毒性試驗(yàn)的原則要求 保健食品安全性毒理學(xué)評價試驗(yàn)的目的和結(jié)果判定保健

9、食品毒理學(xué)安全性評價時應(yīng)考慮的問題第21頁，共82頁。 （一）主題內(nèi)容與適用范圍本程序規(guī)定了保健食品安全性毒理學(xué)評價的統(tǒng)一規(guī)程。本程序適用于保健食品的安全性評價。第22頁，共82頁。（二）對受試物的要求以單一已知化學(xué)成分為原料的受試物；含有多種原料的配方產(chǎn)品。提供原料來源、生產(chǎn)工藝、推薦人體攝入量、使用說明書等有關(guān)資料。受試物應(yīng)是符合既定配方和生產(chǎn)工藝的規(guī)格化產(chǎn)品，其組成成分、比例及純度應(yīng)與實(shí)際產(chǎn)品相同。第23頁，共82頁。（三）對受試物處理的要求介質(zhì)的選擇人的可能攝入量較大的受試物處理袋泡茶類受試物的處理膨脹系數(shù)較高的受試物處理液體保健食品濃縮含乙醇的保健食品含有人體必需營養(yǎng)素等物質(zhì)的保健食

10、品益生菌等微生物類保健食品以雞蛋等食品為載體的特殊保健食品第24頁，共82頁。衛(wèi)法監(jiān)發(fā)200251號文件1.關(guān)于進(jìn)一步規(guī)范保健食品原料管理的通知（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)200251號）對保健食品涉及的各種原料物質(zhì)的管理與安全性評價作了詳細(xì)規(guī)定，將原料分為三類：藥食同源（附件1）；可用于保健食品（附件2）；禁用于保健食品（附件3）。 第25頁，共82頁。通知的主要內(nèi)容申報保健食品中涉及的物品（或原料）是我國新研制、新發(fā)現(xiàn)、新引進(jìn)的無食用習(xí)慣或僅在個別地區(qū)有食用習(xí)慣的，按照新資源食品衛(wèi)生管理辦法的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。申報保健食品中涉及食品添加劑的，按照食品添加劑衛(wèi)生管理辦法的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。申報保健食品中涉及真菌、益生

11、菌等物品（或原料）的，按照我部印發(fā)的衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)真菌類和益生菌類保健食品評審規(guī)定的通知（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)200184號）執(zhí)行。第26頁，共82頁。丁香、八角茴香、刀豆、小茴香、小薊、山藥、山楂、馬齒莧、烏梢蛇、烏梅、木瓜、火麻仁、代代花、玉竹、甘草、白芷、白果、白扁豆、白扁豆花、龍眼肉（桂圓）、決明子、百合、肉豆蔻、肉桂、余甘子、佛手、杏仁（甜、苦）、沙棘、牡蠣、芡實(shí)、花椒、赤小豆、阿膠、雞內(nèi)金、麥芽、昆布、棗（大棗、酸棗、黑棗）、羅漢果、郁李仁、金銀花、青果、魚腥草、姜（生姜、干姜）、枳子、枸杞子、梔子、砂仁、胖大海、茯苓、香櫞、香薷、桃仁、桑葉、桑椹、桔紅、桔梗、益智仁、荷葉、萊菔子、蓮子、高良

12、姜、淡竹葉、淡豆豉、菊花、菊苣、黃芥子、黃精、紫蘇、紫蘇籽、葛根、黑芝麻、黑胡椒、槐米、槐花、蒲公英、蜂蜜、榧子、酸棗仁、鮮白茅根、鮮蘆根、蝮蛇、橘皮、薄荷、薏苡仁、薤白、覆盆子、藿香。 87附件1 既是食品又是藥品的物品名單第27頁，共82頁。人參、人參葉、人參果、三七、土茯苓、大薊、女貞子、山茱萸、川牛膝、川貝母、川芎、馬鹿胎、馬鹿茸、馬鹿骨、丹參、五加皮、五味子、升麻、天門冬、天麻、太子參、巴戟天、木香、木賊、牛蒡子、牛蒡根、車前子、車前草、北沙參、平貝母、玄參、生地黃、生何首烏、白及、白術(shù)、白芍、白豆蔻、石決明、石斛（需提供可使用證明）、地骨皮、當(dāng)歸、竹茹、紅花、紅景天、西洋參、吳茱萸

13、、懷牛膝、杜仲、杜仲葉、沙苑子、牡丹皮、蘆薈、蒼術(shù)、補(bǔ)骨脂、訶子、赤芍、遠(yuǎn)志、麥門冬、龜甲、佩蘭、側(cè)柏葉、制大黃、制何首烏、刺五加、刺玫果、澤蘭、澤瀉、玫瑰花、玫瑰茄、知母、羅布麻、苦丁茶、金蕎麥、金櫻子、青皮、厚樸、厚樸花、姜黃、枳殼、枳實(shí)、柏子仁、珍珠、絞股藍(lán)、胡蘆巴、茜草、蓽茇、韭菜子、首烏藤、香附、骨碎補(bǔ)、黨參、桑白皮、桑枝、浙貝母、益母草、積雪草、淫羊藿、菟絲子、野菊花、銀杏葉、黃芪、湖北貝母、番瀉葉、蛤蚧、越橘、槐實(shí)、蒲黃、蒺藜、蜂膠、酸角、墨旱蓮、熟大黃、熟地黃、鱉甲。 114 附件2 可用于保健食品的物品名單第28頁，共82頁。 八角蓮、八里麻、千金子、土青木香、山莨菪、川烏、

14、廣防己、馬桑葉、馬錢子、六角蓮、天仙子、巴豆、水銀、長春花、甘遂、生天南星、生半夏、生白附子、生狼毒、白降丹、石蒜、關(guān)木通、農(nóng)吉痢、夾竹桃、朱砂、米殼（罌粟殼）、紅升丹、紅豆杉、紅茴香、紅粉、羊角拗、羊躑躅、麗江山慈姑、京大戟、昆明山海棠、河豚、鬧羊花、青娘蟲、魚藤、洋地黃、洋金花、牽牛子、砒石（白砒、紅砒、砒霜）、草烏、香加皮（杠柳皮）、駱駝蓬、鬼臼、莽草、鐵棒槌、鈴蘭、雪上一枝蒿、黃花夾竹桃、斑蝥、硫磺、雄黃、雷公藤、顛茄、藜蘆、蟾酥。 59附件3 保健食品禁用物品名單第29頁，共82頁。保健食品原料安全性評價要求藥食同源（附件1）87種: 可免可用于保健食品（附件2）114種: 二階段？

15、: 見下禁用于保健食品（附件3）59種。第30頁，共82頁。以普通食品、衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)和允許用作保健食品的物質(zhì)以外的動植物或動植物提取物、微生物、化學(xué)合成物為原料生產(chǎn)的保健食品，應(yīng)對該原料和用該原料生產(chǎn)的保健食品分別進(jìn)行安全性評價。 該原料原則上按以下四種情況確定試驗(yàn)內(nèi)容。用該原料生產(chǎn)的保健食品原則上須進(jìn)行第一、二階段的毒性試驗(yàn)，必要時進(jìn)行下一階段的毒性試驗(yàn)。安全性評價要求第31頁，共82頁。國內(nèi)外均無食用歷史的原料或成分: 四個階段的毒性試驗(yàn)。僅在國外少數(shù)國家或國內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分，第一、二、三階段的毒性試驗(yàn)，必要時進(jìn)行第四階段毒性試驗(yàn)。未發(fā)現(xiàn)有毒或毒性甚微以及較大數(shù)

16、量人群有長期食用歷史，第一、二階段的毒性試驗(yàn)，必要時第三階段毒性試驗(yàn)。國際組織已對其進(jìn)行過系統(tǒng)的毒理學(xué)安全性評價，先進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)。必要時第三階段毒性試驗(yàn)。在國外多個國家廣泛食用的原料，進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行下一階段毒性試驗(yàn)。不同保健食品選擇毒性試驗(yàn)原則第32頁，共82頁。2 . 益生菌類及真菌類保健食品評審規(guī)定 益生菌類及真菌類保健食品必須安全可靠，即食用安全，無不良反應(yīng)；生產(chǎn)用菌種的生物學(xué)、遺傳學(xué)、功效學(xué)特性明確和穩(wěn)定；可用于保健食品的益生菌及真菌類菌種名單由衛(wèi)生部公布。第33頁，共82頁。菌種來源及國內(nèi)外安全食用資料，菌種的安全性評價資料(包括毒力試

17、驗(yàn))，對經(jīng)過馴化、誘變的菌種，應(yīng)提供馴化、誘變的方法及馴化劑、誘變劑等資料。菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害，不得在生產(chǎn)用培養(yǎng)基內(nèi)加入有毒有害物質(zhì)和致敏性物質(zhì)?？股睾驼婢臋z測。在發(fā)酵過程中不得加入具有功效成分的動植物及其它物質(zhì)。益生菌的主種子傳代不超過10代，工作種子傳代不得超過5代。經(jīng)過基因修飾的菌種不得用于保健食品。益生菌類及真菌類第34頁，共82頁?？捎糜诒＝∈称返恼婢N名單可用于保健食品的益生菌菌種名單釀酒酵母兩岐雙岐桿菌 產(chǎn)朊假絲酵母嬰兒雙岐桿菌乳酸克魯維酵母長雙岐桿菌 卡氏酵母 短雙岐桿菌 蝙蝠蛾擬青霉青春雙岐桿菌 蝙蝠蛾被毛孢保加利亞乳桿菌 靈芝嗜酸乳桿菌紫芝 干酪乳桿菌干酪亞

18、種松杉靈芝嗜熱鏈球菌 紅曲霉 紫紅曲霉 益生菌、真菌菌種名單第35頁，共82頁。以酶制劑等為原料的保健食品評審規(guī)定衛(wèi)法監(jiān)發(fā)2002100號可用于保健食品的真菌菌種名單可用于保健食品的益生菌菌種名單釀酒酵母兩岐雙岐桿菌 產(chǎn)朊假絲酵母嬰兒雙岐桿菌乳酸克魯維酵母長雙岐桿菌 卡氏酵母 短雙岐桿菌 蝙蝠蛾擬青霉青春雙岐桿菌 蝙蝠蛾被毛孢保加利亞乳桿菌 靈芝嗜酸乳桿菌紫芝 干酪乳桿菌干酪亞種松杉靈芝嗜熱鏈球菌 紅曲霉 紫紅曲霉 第36頁，共82頁。酶制劑. 菌種來源及衛(wèi)生部認(rèn)定的檢定單位出具的菌種檢定報告；. 菌種的毒力試驗(yàn)報告；. 菌種的安全性評價報告；. 國內(nèi)外該菌種使用于食品生產(chǎn)的文獻(xiàn)資料；. 發(fā)酵

19、終產(chǎn)物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（包括純度、雜質(zhì)成分及含量）。 以酶制劑等為原料的保健食品評審規(guī)定衛(wèi)法監(jiān)發(fā)2002100號第37頁，共82頁。 . 提供明確的產(chǎn)品化學(xué)結(jié)構(gòu)式、物理化學(xué)性質(zhì)，配體與金屬離子之比、游離元素和總元素之比；. 提供氨基酸螯合物定性、定量的檢測方法（包括原料和產(chǎn)品）以及衛(wèi)生部認(rèn)定的檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的驗(yàn)證報告；. 毒理學(xué)安全評價資料. 國內(nèi)外該氨基酸螯合物用于食品生產(chǎn)的文獻(xiàn)資料。 氨基酸螯合物第38頁，共82頁。對申報某些保健功能的食品進(jìn)行檢測的興奮劑主要有七大類：雄性激素(類固醇)、麻醉劑(可待因、杜冷丁等)、-2受體阻斷劑(心得安、心得舒等)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮劑(士的寧、芬氟拉明、麻黃素、

20、咖啡因等)、利尿劑(速尿、利尿酸、安體舒通等)、-激動劑(瘦肉精等)、肽類激素(生長激素、紅細(xì)胞生成素等)。興奮劑檢測第39頁，共82頁。第二部分：毒理學(xué)評價方法試驗(yàn)的四個階段和內(nèi)容第一階段：急性毒性試驗(yàn)第二階段：遺傳毒性試驗(yàn)，30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，傳統(tǒng)致畸試驗(yàn) 第三階段：亞慢性毒性試驗(yàn)：90天喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、代謝試驗(yàn)第四階段：慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)） 第40頁，共82頁。選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則要求以衛(wèi)生部規(guī)定允許用于保健食品的動植物或動植物提取物（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)200251號附件2）或微生物（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)200184號附件2和5）為原料生產(chǎn)的保健食品 ，應(yīng)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變試驗(yàn)和30天喂養(yǎng)試

21、驗(yàn)，必要時進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和第三階段毒性試驗(yàn)。第41頁，共82頁。選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則要求普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)200251號附件1）以傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)且食用方式與傳統(tǒng)食用方式相同的保健食品，一般不要求進(jìn)行毒性實(shí)驗(yàn)。用水提物配制生產(chǎn)的保健食品，如服用量為常規(guī)用量，一般不要求進(jìn)行毒性試驗(yàn)。如服用量大于常規(guī)用量時，需進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變試驗(yàn)和30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，必要時進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)。用水提以外的工藝生產(chǎn)的保健食品，服用量為常規(guī)用量時，應(yīng)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變試驗(yàn)。如服用量大于常規(guī)用量時，需增加30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，必要時進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和第三階段毒性試驗(yàn)。第42頁，共82頁

22、。選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則要求營養(yǎng)補(bǔ)充劑用已列入營養(yǎng)強(qiáng)化劑名單的營養(yǎng)素的化合物為原料生產(chǎn)的保健食品，如其原料來源、生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量均符合國家有關(guān)要求，一般不要求進(jìn)行毒性試驗(yàn)。第43頁，共82頁。三。毒理學(xué)試驗(yàn)及結(jié)果判定急性毒性試驗(yàn)：如LD50小于人的可能攝入量的100倍，則放棄該受試物用于保健食品。如LD50大于或等于100倍者，則可考慮進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。如動物未出現(xiàn)死亡的劑量大于或等于10g/kgBW（涵蓋人體推薦量的100倍），則可進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。對人的可能攝入量較大和其它一些特殊原料的保健食品，按最大耐受量法給予最大劑量動物未出現(xiàn)死亡，也可進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。第44頁，共

23、82頁。遺傳毒性試驗(yàn)： Ames試驗(yàn)或V79/HGPRT、 TK基因突變試驗(yàn)骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)或哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)小鼠精子畸形分析或睪丸染色體畸變分析其它備選遺傳毒性試驗(yàn)：顯性致死試驗(yàn)、果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)、非程序性DNA合成實(shí)驗(yàn)第45頁，共82頁。遺傳毒性試驗(yàn)結(jié)果的判定三項(xiàng)試驗(yàn),體外或體內(nèi)有一項(xiàng)或以上試驗(yàn)陽性，放棄該受試物用于保健食品。如三項(xiàng)試驗(yàn)均為陰性，則進(jìn)入下一步的毒性試驗(yàn)。第46頁，共82頁。 3. 30天喂養(yǎng)試驗(yàn)最大未觀察到有害作用劑量大于或等于人的可能攝入量的100倍，可進(jìn)行安全性評價。特殊原料：在最大灌胃劑量組或在飼料中的最大摻入量劑量組未發(fā)現(xiàn)有毒性作用，可進(jìn)行安全性評

24、價至少大于或等于人的可能攝入量的70倍。特殊功能的保健食品應(yīng)進(jìn)行具體分析。第47頁，共82頁。長期毒性試驗(yàn)外觀 亞慢性、慢性生長發(fā)育(體重) 毒性試驗(yàn) 體液行為 過程中 血液學(xué)毒性體征 血清生化學(xué) 活殺解剖 尿分析最終體重 臟器濕重 器官/組織 生物學(xué)標(biāo)志臟/體比 酶 固定/染色 內(nèi)源性成分 組織病理學(xué) 膽汁、尿 第48頁，共82頁。4.大鼠 致畸試驗(yàn) 雄鼠雌鼠 陰栓 （天）孕0 7 染毒 16 20 處死檢查 活胎、吸收胎、早死胎、晚死胎 大鼠 外觀畸形 骨骼畸形 內(nèi)臟畸形第49頁，共82頁。致畸試驗(yàn)結(jié)果的判定 以LD50或30天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的最大未觀察到有害作用劑量設(shè)計的受試物各劑量組，如果在

25、任何一個劑量組觀察到受試物的致畸作用，則應(yīng)放棄該受試物用于保健食品，如果觀察到有胚胎毒性作用，則應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的繁殖試驗(yàn)。第50頁，共82頁。 其它毒理學(xué)試驗(yàn) 5.90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 最大未觀察到有害作用劑量大于人的可能攝入量的100倍進(jìn)行安全性評價。國內(nèi)外均無食用歷史的原料或成分：最大未觀察到有害作用劑量小于或等于人的可能攝入量的100倍者表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。國外少數(shù)國家或國內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分：最大未觀察到有害作用劑量大于100倍而小于300倍者，應(yīng)進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)。大于或等于300倍者則不必進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)，可進(jìn)行安全性評價。第51頁，共82頁。其它毒理學(xué)試驗(yàn)

26、 6.慢性毒性：最大未觀察到有害作用劑量小于或等于人的可能攝入量的50倍者，表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。未觀察到有害作用劑量大于50倍而小于100倍者，經(jīng)安全性評價后，決定該受試物是否可用于保健食品。最大未觀察到有害作用劑量大于或等于100倍者，則可考慮允許用于保健食品。第52頁，共82頁。其它毒理學(xué)試驗(yàn) 7.致癌試驗(yàn)根據(jù)致癌試驗(yàn)所得的腫瘤發(fā)生率、潛伏期和多發(fā)性等進(jìn)行致癌試驗(yàn)判定的原則是：腫瘤只發(fā)生在試驗(yàn)組動物，對照組中無腫瘤發(fā)生。試驗(yàn)組與對照組動物均發(fā)生腫瘤，但試驗(yàn)組發(fā)生率高。試驗(yàn)組動物中多發(fā)性腫瘤明顯，對照組中無多發(fā)性腫瘤，或只是少數(shù)動物有多發(fā)性腫瘤。試驗(yàn)組與對照組動物腫瘤發(fā)

27、生率雖無明顯差異，但試驗(yàn)組中發(fā)生時間較早。第53頁，共82頁。安全性評價考慮的因素試驗(yàn)指標(biāo)的統(tǒng)計學(xué)意義和生物學(xué)意義：生理作用與毒性作用：時間-毒性效應(yīng)關(guān)系：特殊人群和敏感人群： 人的可能攝入量較大的保健食品： 含乙醇的保健食品：動物年齡對試驗(yàn)結(jié)果的影響安全系數(shù) 人體資料 綜合評價 保健食品安全性的重新評價（必要時）第54頁，共82頁。四、安全評價工作中的有關(guān)問題原料的安全性是建立在長期食用、藥用的經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，系統(tǒng)的全面的毒理學(xué)研究資料尚不完整，尤其是改變了傳統(tǒng)的食用方式時。其安全性應(yīng)高度關(guān)注。應(yīng)注重原料的安全評估，特別是三致和慢性毒性。加強(qiáng)原料中有害成分的鑒定與毒性研究。對配伍模式進(jìn)行毒性研

28、究。有益作用與有害作用的權(quán)衡與判定。方法學(xué)問題第55頁，共82頁。保健食品含有功效成分，采用一套方法難以評價結(jié)構(gòu)和功能不同的物質(zhì)，傳統(tǒng)的毒理學(xué)安全評價指標(biāo)有一定局限性，保健食品的安全評價應(yīng)引入個案評估的原則，了解其作用機(jī)制將有助于安全評價。第56頁，共82頁。作用機(jī)制研究將有助于安全評價保健食品含有功效成分，采用一套方法難以評價結(jié)構(gòu)和功能不同的物質(zhì)，傳統(tǒng)的毒理學(xué)安全評價指標(biāo)有一定局限性，保健食品的安全評價應(yīng)引入個案評估的原則，了解其作用機(jī)制將有助于安全評價。第57頁，共82頁。安全系數(shù) 通常為100化學(xué)物：純度清楚，沒有特別的營養(yǎng)價值，人群暴露量較低，確定對健康不良影響采用給予動物不同劑量水平

29、來估計最大未觀察有害作用劑量，從而應(yīng)用適當(dāng)?shù)陌踩禂?shù)確定安全攝入量。方法學(xué)問題第58頁，共82頁。整體食物：各種化合物的復(fù)雜的混合體，成份和營養(yǎng)價值變化大，體積大易產(chǎn)生飽腹，給與動物的量通常只是人體膳食含量的幾倍，采用的膳食模式是否營養(yǎng)均衡，是否引起營養(yǎng)問題。因?yàn)榉鞘茉囄锉旧碇苯右鸬牟涣挤磻?yīng)需要避免，因此，采用動物實(shí)驗(yàn)來測試整體食物的潛在不良作用是很困難的。實(shí)質(zhì)等同原則可用于對其進(jìn)行安全評價。方法學(xué)問題第59頁，共82頁。統(tǒng)計學(xué)意義生物學(xué)意義無有無有毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計學(xué)意義和生物學(xué)意義 第和第種情況最為常見。 統(tǒng)計學(xué)意義生物學(xué)意義損害效應(yīng)/非損害效應(yīng)第60頁，共82頁。統(tǒng)計學(xué)意義和生物學(xué)意

30、義 第種情況是有統(tǒng)計學(xué)意義但無生物學(xué)意義，此種情況相當(dāng)見。 在判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)意義時，有無劑量-反應(yīng)關(guān)系是關(guān)鍵。 有統(tǒng)計學(xué)意義但無生物學(xué)意義的情況，更常見的原因是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)設(shè)計不良所致。 第種情況是具有生物學(xué)意義但無統(tǒng)計學(xué)意義，這可能是因?yàn)樵撌录陌l(fā)生是極端罕見的。 第61頁，共82頁。統(tǒng)計學(xué)意義和生物學(xué)意義在評價毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果時，要綜合評價實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計學(xué)意義和生物學(xué)意義一般來說，具有統(tǒng)計學(xué)意義是具有生物學(xué)意義的必要條件之一。正確地利用統(tǒng)計學(xué)假設(shè)檢驗(yàn)的結(jié)果有助于確定實(shí)驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)關(guān)聯(lián)。第62頁，共82頁。判斷生物學(xué)意義的步驟（1）縱向比較，此參數(shù)的改變有無劑量-反應(yīng)關(guān)系。 （2）橫向比較

31、，此參數(shù)的改變是否伴有其它相關(guān)參數(shù)的改變。 （3）與歷史性對照比較，同時進(jìn)行的陰性對照應(yīng)在歷史性對照的均數(shù)3SD 范圍之內(nèi)，否則應(yīng)重新試驗(yàn)。觀察值與對照組比較，差別具有統(tǒng)計學(xué)顯著性（P 0.05；+，P0.05；+，P0.01 劑量組實(shí)驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)2實(shí)驗(yàn)3高劑量+LOAEL ？中劑量+LOAEL+NOAEL？低劑量 NOAEL第66頁，共82頁。五。注意點(diǎn)立題（市場調(diào)研和專家咨詢）主管單位和檢驗(yàn)單位咨詢 原料配方，受試樣品（質(zhì)量、溶解性、樣品前處理）， 申報功能，人擬用量。申報前專家咨詢第67頁，共82頁。對中藥安全性的關(guān)注點(diǎn)中藥大多為植物，毒性一般低于化學(xué)藥品。有長期傳統(tǒng)藥用的經(jīng)驗(yàn)。人體（人群）

32、使用的經(jīng)驗(yàn)與動物毒理學(xué)安全性評價是互為補(bǔ)充，不能替代。個人經(jīng)驗(yàn)和個案報告作為因果關(guān)系的證據(jù)不充分，應(yīng)發(fā)展循證醫(yī)學(xué)。應(yīng)發(fā)展中藥藥材復(fù)方的毒理學(xué)研究及安全性數(shù)據(jù)庫。特別是體外毒性篩選和靶器官預(yù)測，ADMETox。第68頁，共82頁。美國NTP（2000）美國國家毒理學(xué)計劃（NTP）1500多種在美國上市的草本植物中，其有益作用或有害作用大部分沒有經(jīng)過科學(xué)證實(shí)。膳食補(bǔ)充劑健康教育法未要求對1994年前上市的草本植物進(jìn)行安全性評價。FDA負(fù)責(zé)舉證，安全性評價的責(zé)任在政府。第69頁，共82頁。美國NTP（2000）10種白毛茛：進(jìn)行生殖毒性發(fā)育毒性慢性毒性致癌性研究紫草：具有肝毒性并可致大鼠肝癌和肺癌，

33、進(jìn)行生殖毒性研究 蒲勒酮/胡薄荷酮（歐亞薄荷紫穗薄荷等）：可能具有胚胎毒性，進(jìn)行生殖毒性慢性毒性致癌性研究銀杏：進(jìn)行神經(jīng)毒性慢性毒性致癌性研究松果菊：進(jìn)行免疫毒性亞慢性毒性慢性毒性致癌性研究第70頁，共82頁。KAVA卡瓦Dallas L. ClouatreToxicology Letters 150 (2004) 8596Kava kava: examining new reports of toxicity第71頁，共82頁。KAVA在1998年以前，卡瓦（Piper methysticum）提取物被認(rèn)為是抗焦慮藥很安全的替代物，并且可能具有大量另外的效益。至2002年底出版的綜述繼續(xù)了證

34、實(shí)卡瓦的安全和效益。不過，自2003年1月卡瓦提取物在歐共體和加拿大已經(jīng)被禁止， 并US FDA警告由于肝功能衰竭的11例導(dǎo)致移植， 包括4例死亡。從各種各樣的數(shù)據(jù)庫全部為的評論的78例肝毒性被認(rèn)為與到卡瓦攝入有關(guān)聯(lián)。 這些不良事件中， 4例可能與單獨(dú)攝入有關(guān)聯(lián)，另外的23例可能與攝入卡瓦有關(guān)聯(lián)，但也涉及 攝入其它化合物。 第72頁，共82頁?？ㄍ邇?nèi)酯第73頁，共82頁。KAVA已知卡瓦內(nèi)酯肝毒性3種可能的機(jī)制為抑制細(xì)胞色素P450， 在肝臟谷胱甘肽水平的，降低環(huán)氧合酶活性。在任何分析中，卡瓦提取物的直接毒性相當(dāng)小，然而藥物相互作用和/或與其它化合物的毒性增強(qiáng)的可能性很大。 目前， 卡瓦毒性看

35、來是“特異質(zhì)” 。然而，與其它抗焦急藥比較,卡瓦提取物的危險-效益比仍然保持良好。 第74頁，共82頁。ILSI在食物和膳食補(bǔ)充劑中使用植物和植物制制安全性評價指南 2003 第75頁，共82頁。為危害鑒定和表征進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動物研究的基本原則和需要的7點(diǎn)推薦實(shí)驗(yàn)研究的范圍取決于使用歷史是否足夠和產(chǎn)品與傳統(tǒng)的食物或食物成分的可比較性為鑒別可能的安全問題應(yīng)該評定有益效應(yīng)和有害效應(yīng)的作用模式，包括在植物產(chǎn)品和攝入的其他生物學(xué)活性化合物之間相互作用的可能性。取決于使用的歷史和作用模式，可能必需進(jìn)行特殊研究。通常應(yīng)該對商業(yè)定型產(chǎn)品進(jìn)行安全性研究，劑量范圍包括有害效應(yīng)第76頁，共82頁。推薦（7點(diǎn)）為特定生物活性組