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1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的概念及種類(lèi): 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(laboratory animal):經(jīng)人工培育,對(duì)其攜帶的微生物和寄生蟲(chóng)實(shí)行控制,遺傳背景明確或者來(lái)源清楚,用于生命科學(xué)研究、藥品與生物制品生產(chǎn)和檢定以及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。特點(diǎn):遺傳限定動(dòng)物遺傳背景明確,來(lái)源清楚的動(dòng)物;微生物、寄生蟲(chóng)限定動(dòng)物;主要用于科學(xué)實(shí)驗(yàn);具備的要求:對(duì)實(shí)驗(yàn)處理表現(xiàn)出極高的敏感性;個(gè)體反應(yīng)表現(xiàn)出極強(qiáng)的均一性;模型性狀具有遺傳上的穩(wěn)定性;動(dòng)物來(lái)源具有易獲得性 實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物(animals for research):實(shí)際上指一切可以用于實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物,包括野生動(dòng)物、經(jīng)濟(jì)動(dòng)物、警衛(wèi)動(dòng)物、觀賞動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。分類(lèi):實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要為哺乳類(lèi)
2、動(dòng)物 野生動(dòng)物在自然環(huán)境中生長(zhǎng)、繁育并延續(xù)其種族的物種 無(wú)脊椎動(dòng)物(海膽、蟑螂、蠅、蚊)、魚(yú)類(lèi)(鯽魚(yú)、泥鰍)、兩棲類(lèi)(蛙、蟾蜍)、嚙齒目(黑線姬鼠)、靈長(zhǎng)目(猿猴) 經(jīng)濟(jì)動(dòng)物 為人類(lèi)社會(huì)生活需要而馴養(yǎng)、培育和繁殖生產(chǎn)的動(dòng)物產(chǎn)業(yè)家畜(豬,馬、牛、羊、雞、兔、魚(yú))及社會(huì)家畜(犬、貓、金魚(yú)) 觀賞動(dòng)物供人類(lèi)玩耍和公園里供游人觀賞而飼養(yǎng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的分支學(xué)科 動(dòng)物實(shí)驗(yàn):以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為實(shí)驗(yàn)對(duì)象的科學(xué)實(shí)驗(yàn)在生命科學(xué)領(lǐng)域可用于:研究生命過(guò)程的組織形態(tài)、機(jī)能反應(yīng)的變化;在動(dòng)物自然發(fā)生的疾病及人為制作的病理模型觀察疾病發(fā)生、發(fā)展的規(guī)律;藥物等因素對(duì)動(dòng)物的作用。(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳育種學(xué):利用遺傳調(diào)控原理,控制動(dòng)
3、物的遺傳特性,培育出新的動(dòng)物品種、品系和各種動(dòng)物模型,以及使野生動(dòng)物和家畜、家禽實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化的科學(xué)(2)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)與寄生蟲(chóng)學(xué):研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物和寄生蟲(chóng)分類(lèi)學(xué),實(shí)行對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攜帶的微生物與寄生蟲(chóng)進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控,探討與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物疾病作斗爭(zhēng)的措施,以達(dá)到控制和消滅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物疾病的目的。(3)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境生態(tài)學(xué):研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存環(huán)境與條件的科學(xué),研究環(huán)境中的物理因素、化學(xué)因素、棲居環(huán)境、生物因素等對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響作用(4)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué):研究飼料中的營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖、抗病力以及對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果所產(chǎn)生的影響作用的科學(xué),最終實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)化。(5)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼育管理:對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本身
4、進(jìn)行繁育和生產(chǎn)管理的科學(xué),從宏觀上對(duì)各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化和法規(guī)化管理(6)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物醫(yī)學(xué):研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物疾病的診斷、預(yù)防、治療以及在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中應(yīng)用的科學(xué)。(7)比較醫(yī)學(xué):研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人類(lèi)的基本生命現(xiàn)象,開(kāi)發(fā)并建立各種人類(lèi)疾病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作為人類(lèi)的替身,通過(guò)比較、識(shí)別,以了解人類(lèi)疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程,從而進(jìn)行病理、生理、藥理和毒理等方面的實(shí)驗(yàn)研究,為增進(jìn)人類(lèi)的健康服務(wù)。(8)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù):進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)的各種操作技術(shù)、實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),以及飼養(yǎng)管理技術(shù)和各種質(zhì)量監(jiān)測(cè)技術(shù)等的研究。(9)中醫(yī)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué):以中醫(yī)藥理論為基礎(chǔ),運(yùn)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的理論和方法,進(jìn)行中醫(yī)藥研究的學(xué)科。3、3
5、R原則 1959年提出,目前被普遍接受,并正努力付諸實(shí)施其含義是替代、減少和優(yōu)化替代:用低等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或非實(shí)驗(yàn)動(dòng)物替代高等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 體外培養(yǎng)器官、組織、細(xì)胞等替代實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 物理或化學(xué)方法替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)減少:盡可能減少使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的數(shù)量 合用動(dòng)物;改進(jìn)統(tǒng)計(jì)學(xué)設(shè)計(jì);用低等動(dòng)物替代高等動(dòng)物,減少高等動(dòng)物特別是非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的用量;使用高質(zhì)量動(dòng)物優(yōu)化:優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作,以減輕動(dòng)物的痛苦 改進(jìn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù);減少社會(huì)和環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響;改良儀器設(shè)備近交系動(dòng)物、封閉群動(dòng)物和雜交群動(dòng)物的概念和遺傳學(xué)特征 近交系:在一個(gè)動(dòng)物群體中,任何個(gè)體基因組中99%以上的等位位點(diǎn)為純合時(shí)定義為近交系。近交
6、系經(jīng)至少20代的同胞兄妹交配或親子交配培育而成。品系內(nèi)所有個(gè)體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對(duì)共同祖先。近交系動(dòng)物的特點(diǎn): (1)基因純合性:純合子的純合度在理論上達(dá)最高點(diǎn)98.6%。所有基因位點(diǎn)都是純合子,無(wú)暗藏隱性基因。(2)遺傳組成的同源性:可追溯到其原始的一對(duì)共同祖先,基因型完全一致。也稱(chēng)同基因性。(3)表型的一致性:相同基因型動(dòng)物,在相同環(huán)境因素下,其表現(xiàn)型是均一的,反應(yīng)性是一致的。類(lèi)似精密天枰,任何可遺傳的體征都一致如形態(tài)(毛色、體重)、行為類(lèi)型、血型、組織型等。 (4)對(duì)外界因素的敏感性:由于高度近交,近交系動(dòng)物某些生理功能穩(wěn)定性降低,因而對(duì)外界因素反應(yīng)更為敏感。 (5)
7、遺傳特征的可辨別性:每一種近交系都有自己獨(dú)特的遺傳概貌,可建立遺傳概貌圖,可根據(jù)遺傳監(jiān)測(cè)方法將兩個(gè)外貌相同的近交系分開(kāi)。 (6)遺傳組成獨(dú)特性:每個(gè)近交系在遺傳組成上都是獨(dú)一無(wú)二的,因而具有獨(dú)特的表現(xiàn)型。 (7)背景資料可查性:背景資料和數(shù)據(jù)較為完整,培育和保種過(guò)程中都有詳細(xì)記錄,分布廣泛,生物學(xué)特性和應(yīng)用的范圍廣,積累大量資料文獻(xiàn),方便應(yīng)用。(8)國(guó)際分布廣泛性:任何個(gè)體都攜帶該品系的全部基因庫(kù),引種只要12對(duì)就可將該品系傳下去,容易廣泛分布,世界各地可重復(fù)、驗(yàn)證。 (9)長(zhǎng)期的遺傳穩(wěn)定性:人為選擇不會(huì)改變基因型,可世代相傳。 封閉群動(dòng)物:封閉群又稱(chēng)遠(yuǎn)交群動(dòng)物,以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的
8、一個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群,在不從外部引入新的血緣條件下,至少連續(xù)繁殖四代以上稱(chēng)封閉群。 遺傳學(xué)特征:基因庫(kù)大,雜合率高,群體基因頻率基本保持穩(wěn)定,在封閉群內(nèi)個(gè)體差異程度主要取決于其祖代起源,具有較強(qiáng)的繁殖力和生產(chǎn)力,對(duì)有害的基因突變具有較強(qiáng)的承載力。1、繁殖率高2、重復(fù)性差。廣泛應(yīng)用于教學(xué)、預(yù)實(shí)驗(yàn)、一般實(shí)驗(yàn)及藥物篩選和獨(dú)立安全實(shí)驗(yàn)、生物制品、化學(xué)制品的鑒定等。此外,封閉群動(dòng)物可能攜帶大量隱性有害突變基因,因此可用于遺傳病研究。雜交群動(dòng)物概念:由兩個(gè)不同近交系雜交產(chǎn)生的后代群體稱(chēng)為雜交群動(dòng)物。子一代簡(jiǎn)稱(chēng)F1。雜交群動(dòng)物一般是在兩個(gè)近交系動(dòng)物之間矜持那個(gè)交配說(shuō)繁殖的第一代動(dòng)物。在雜交群動(dòng)物,其個(gè)體的雜合性
9、一致,及其遺傳型和表現(xiàn)型都一致,但其后代一般不宜繼續(xù)繁殖和培養(yǎng)近交系,因?yàn)樽佣鷷?huì)發(fā)生遺傳上的性狀分離。特點(diǎn):(1)具有雜交優(yōu)勢(shì),因而生命力強(qiáng),適應(yīng)性和抗病力強(qiáng),繁殖旺盛。在很大程度上可克服近交系繁殖引起的各種近交衰退現(xiàn)象。(2)具有與近交系動(dòng)物基本相似的遺傳和表現(xiàn)型均質(zhì)性。(3)采用雜交群動(dòng)物所作的各種實(shí)驗(yàn),其結(jié)果重復(fù)性好。(4)具有親代雙親的特點(diǎn)。(5)國(guó)際分布廣,廣泛應(yīng)用于各類(lèi)實(shí)驗(yàn)研究,其研究結(jié)果易于重復(fù),便于國(guó)際交流。 近交系動(dòng)物的命名 近交系的命名規(guī)則:一般用1至4個(gè)大寫(xiě)英文字母表示:如A、AE、BA、AKR、DBA、NZB、STAR 有些品系在大寫(xiě)字母間可加寫(xiě)12個(gè)阿拉伯?dāng)?shù)字來(lái)表示
10、: 如C3H、C57BL、C57BR、C57L等; 非正規(guī)命名,如已被國(guó)際廣泛承認(rèn)則可保留沿用:如129、101、615等 關(guān)系相近,同來(lái)源的不同品系,其名稱(chēng)基本相似,差異部分用一個(gè)不同大寫(xiě)英文字母表示。如NZB、NZO、NZW、NZX、NZY等 近交代數(shù)表示:一般是在品系符號(hào)后面括號(hào)里寫(xiě)上代數(shù),并在代數(shù)前加上F(Filial的縮寫(xiě)), 如A(F78),如資料不全可寫(xiě)上已知代數(shù),其前面加?如AKR(F?+10)常用的小鼠、大鼠近交系、封閉群小鼠:近交系:BALB/c,C57BL,C3H,BDA,A系,AKR,CBA,TA1,TA2,和615封閉群:昆明小鼠(KM),NIH,ICR和LACA大鼠
11、:近交系:F344/N,Lou/CN等 封閉群:Wister大鼠,SD,Long-Evans等7、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)分類(lèi)(國(guó)際分級(jí)法)等級(jí)種類(lèi)飼養(yǎng)條件控制程度備注三級(jí)無(wú)菌動(dòng)物Germfree animal隔離系統(tǒng)Isolation system以封閉的無(wú)菌技術(shù)獲得,用現(xiàn)有方法不能檢出任何微生物和寄生蟲(chóng)的動(dòng)物。三級(jí)悉生動(dòng)物Gnotobiotics animal隔離系統(tǒng)Isolation system確知已帶的微生物,經(jīng)無(wú)菌條件飼養(yǎng)的動(dòng)物。明確所帶的微生物。二級(jí)無(wú)特定病原體動(dòng)物Specific pathogen free animal屏障系統(tǒng)Barrier system不帶有指定的致病性微
12、生物和寄生蟲(chóng)的動(dòng)物。帶有非特定的微生物和寄生蟲(chóng)一級(jí)普通動(dòng)物Conventional animal開(kāi)放系統(tǒng)Open system不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動(dòng)物烈性傳染病的病原。對(duì)微生物攜帶狀況不明確實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)分類(lèi)(國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn))等級(jí)種類(lèi)飼養(yǎng)條件四級(jí)無(wú)菌動(dòng)物Germfree animal GF隔離系統(tǒng)Isolation system四級(jí)悉生動(dòng)物Gnotobiotics animal GN隔離系統(tǒng)Isolation system三級(jí)無(wú)特定病原體動(dòng)物Specific pathogen free animal SPF屏障系統(tǒng)Barrier system二級(jí)清潔動(dòng)物Clean animal
13、 CL屏障系統(tǒng)Barrier system一級(jí)普通動(dòng)物Conventional animal CV開(kāi)放系統(tǒng)Open system(1)普通動(dòng)物(CV):不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動(dòng)物烈性傳染病病原的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠、大鼠不設(shè)普通級(jí)(GB149222011)在普通環(huán)境里飼養(yǎng),房舍要有防野鼠、防昆蟲(chóng)設(shè)施,飼料和墊料只消毒不滅菌,飲水須符合城市飲用水標(biāo)準(zhǔn)微生物控制要求最低外貌健康、正常的飲食,眼角、鼻腔無(wú)分泌物附著,尸檢無(wú)眼觀病灶主要用于教學(xué)示教;科學(xué)研究的預(yù)試驗(yàn);沒(méi)有培育出高等級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(2)清潔動(dòng)物(最少疾病動(dòng)物):除普通動(dòng)物應(yīng)排除的病原外,不攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾大的病原的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
14、.小鼠排除病原10種(必檢項(xiàng)目4種),病毒5種(必檢3種),寄生蟲(chóng)5種(類(lèi))(必檢3種);大鼠排除病原菌10種(必檢5種),病毒2種(必檢2種);寄生蟲(chóng)5種(類(lèi))(必檢3種)來(lái)源于SPF動(dòng)物或剖腹產(chǎn)動(dòng)物在屏障環(huán)境里飼育,所用墊料、用具應(yīng)經(jīng)高壓蒸汽滅菌,飲水進(jìn)行酸化、飼料通過(guò)放射線照射滅菌,工作人員需著無(wú)菌工作服、靴、帽、口罩進(jìn)入屏障環(huán)境,進(jìn)行飼育或?qū)嶒?yàn)可應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域(3)無(wú)特定病原體動(dòng)物(SPF動(dòng)物):除清潔動(dòng)物應(yīng)排除的病原外,不攜帶主要潛在感染或條件致病菌和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。小鼠排除病原菌16種(必檢8種),病毒11種(必檢6種),寄生蟲(chóng)7種(類(lèi))(必檢5種)
15、;大鼠排除病原菌15種(必檢9種),病毒7種(必檢7種);寄生蟲(chóng)7種(類(lèi))(必檢5種)來(lái)源于無(wú)菌動(dòng)物或悉生動(dòng)物在屏障環(huán)境里飼育適用于所有的科研實(shí)驗(yàn)(國(guó)際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物)(4)無(wú)菌動(dòng)物現(xiàn)有的檢測(cè)技術(shù),在動(dòng)物體內(nèi)外的任何部位均檢不出任何活的微生物和寄生蟲(chóng)的動(dòng)物必須用人為的方法培育出來(lái),在隔離環(huán)境里飼育特點(diǎn):形態(tài)學(xué)、生理學(xué)無(wú)菌動(dòng)物的特點(diǎn)形態(tài)學(xué)上消化系統(tǒng): 盲腸膨大,腸壁菲薄,易發(fā)生盲腸扭轉(zhuǎn),導(dǎo)致破裂循環(huán)系統(tǒng):心臟變小免疫系統(tǒng):胸腺上皮細(xì)胞變大,胞漿泡狀結(jié)構(gòu)和溶酶體變小生理學(xué)上免疫功能:免疫應(yīng)答慢,過(guò)敏反應(yīng)、對(duì)異體移植物的排斥反應(yīng)以及自身免疫現(xiàn)象消失或減弱。對(duì)微生物感染非常敏感生長(zhǎng)率:豚鼠、兔生長(zhǎng)
16、率降低,大、小鼠改變不大代謝:水分代謝周期延長(zhǎng),腸管對(duì)水的吸收率低營(yíng)養(yǎng):體內(nèi)不能合成VitB、VitK抗輻射能力:增強(qiáng)壽命:長(zhǎng)于普通動(dòng)物悉生動(dòng)物:人為地將指定微生物叢定居在無(wú)菌動(dòng)物體內(nèi)外所形成的動(dòng)物與無(wú)菌級(jí)別相同可分為單菌、雙菌和多菌GB14922清潔級(jí)小鼠大鼠應(yīng)排除的細(xì)菌和病毒(必檢)(p30) 小鼠:病毒:鼠痘病毒、小鼠肝炎病毒、仙臺(tái)病毒 病原菌:沙門(mén)菌、支原體、鼠棒狀桿菌、泰澤病原體大鼠: 病毒:漢坦病毒、仙臺(tái)病毒 病原菌:沙門(mén)菌、支氣管鮑特桿菌、支原體、鼠棒狀桿菌、泰澤病原體9、無(wú)菌動(dòng)物的應(yīng)用動(dòng)物模型研究:GF可用于建立具有正常菌叢或致病菌叢的動(dòng)物模型老年病研究:研究微生物在機(jī)體衰老過(guò)
17、程中的作用心血管疾病研究:許多心血管疾病與機(jī)體膽固醇代謝相關(guān),而微生物直接影響膽固醇代謝,利用無(wú)菌動(dòng)物研究腸道菌群的變化與膽固醇代謝的關(guān)系免疫學(xué)研究:抗體產(chǎn)生的機(jī)制;免疫抑制劑的研究;微生物維持機(jī)體非特異性和特異性免疫力的作用腫瘤研究:研究特殊微生物與腫瘤發(fā)生的關(guān)系以及闡述致癌物質(zhì)的作用機(jī)制藥理與毒理研究:研究某些物質(zhì)、藥物的藥理和毒理與體內(nèi)微生物的關(guān)系10、無(wú)菌動(dòng)物、無(wú)特定病原體動(dòng)物和普通動(dòng)物的比較項(xiàng)目無(wú)菌動(dòng)物SPF動(dòng)物普通動(dòng)物傳染病無(wú)無(wú)有或可能無(wú)寄生蟲(chóng)無(wú)無(wú)有或可能無(wú)試驗(yàn)結(jié)果明確明確有疑問(wèn)應(yīng)用動(dòng)物數(shù)少量少量多或大量統(tǒng)計(jì)價(jià)值很好可能好不準(zhǔn)確長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)可能好可能好困難自然病死率很少少高長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)存活
18、率約100%約90%約40%實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確設(shè)計(jì)可能可能不可能實(shí)驗(yàn)結(jié)果的討論價(jià)值很高高低11、必檢應(yīng)排除的細(xì)菌小鼠:沙門(mén)菌、支原體、鼠棒狀桿菌、泰澤病原體大鼠:沙門(mén)菌、支氣管鮑特桿菌、支原體、鼠棒狀桿菌、泰澤病原體必檢應(yīng)排除的病毒小鼠:鼠痘病毒、小鼠肝炎病毒、仙臺(tái)病毒大鼠:漢坦病毒、仙臺(tái)病毒必檢應(yīng)排除的寄生蟲(chóng)體外寄生蟲(chóng)(節(jié)肢動(dòng)物)、弓形蟲(chóng)、全部蠕蟲(chóng)應(yīng)排除的細(xì)菌除清潔動(dòng)物應(yīng)排除的外還包括:小鼠、大鼠:嗜肺巴斯德桿菌、肺炎克雷伯桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌應(yīng)排除的病毒除清潔動(dòng)物應(yīng)排除的外還包括:小鼠:小鼠肺炎病毒、呼腸孤病毒型、小鼠細(xì)小病毒大鼠:小鼠肺炎病毒、呼腸孤病毒型、大鼠細(xì)小病毒RV株、大鼠
19、細(xì)小病毒H-1株、大鼠冠狀病毒/大鼠涎淚腺炎病毒除清潔動(dòng)物應(yīng)排除的寄生蟲(chóng)外不應(yīng)檢出的寄生蟲(chóng)纖毛蟲(chóng)、鞭毛蟲(chóng)12、GB14925影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的因素氣候因素:溫度、濕度、氣流與風(fēng)速、通風(fēng)與換氣理化因素:光照、噪聲、空氣的潔凈度、梯度壓差、有害氣體、信息素生物因素:同種生物、異種生物氣候因素溫度:大多數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屬于恒溫動(dòng)物環(huán)境溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響:影響生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖;影響代謝;影響健康和抗感染能力;激發(fā)應(yīng)激反應(yīng);影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果GB14925-2010規(guī)定大小鼠合適的溫度為2026,日溫差不超過(guò)4濕度:濕度過(guò)高,微生物易于繁殖和傳播,墊料、飼料也易發(fā)生霉變高溫高濕導(dǎo)致機(jī)體蒸發(fā)散熱受阻,易引起代謝紊亂和
20、抵抗力下降 濕度過(guò)低,易致粉塵飛揚(yáng),空氣中變態(tài)反應(yīng)原的含量隨濕度的下降而上升引起動(dòng)物和人的呼吸道疾?。淮笫笠装l(fā)生環(huán)尾病我國(guó)規(guī)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室空氣相對(duì)濕度基準(zhǔn)值為40%70%氣流與風(fēng)速:主要影響動(dòng)物皮膚的體表蒸發(fā)、對(duì)流散熱及環(huán)境的空氣質(zhì)量合理的氣流和風(fēng)速能調(diào)節(jié)溫度和濕度,使動(dòng)物感覺(jué)舒適,有效降低室內(nèi)粉塵和有害氣體,控制傳染病的流行,有利于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和工作人員的健康。氣流速度過(guò)小,空氣流通不良,有害氣體濃度升高,散熱困難,易造成呼吸道疾病的傳播;氣流速度過(guò)大,動(dòng)物體表散熱量增加,同樣危及動(dòng)物的健康,影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果。動(dòng)物飼育間的氣流值一般為0.10.2m/s(籠具處不超過(guò)0.2m/s)通風(fēng)與換氣:目的是
21、供給動(dòng)物新鮮合乎要求的空氣,除去室內(nèi)惡臭物質(zhì)過(guò)于頻繁,動(dòng)物將消耗過(guò)多的能量用于維持體溫,導(dǎo)致生育率下降在封閉的空間一旦人為的通風(fēng)停止,室內(nèi)空氣質(zhì)量下降,甚至可能造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的窒息死亡屏障環(huán)境換氣次數(shù)不低于15次/h、隔離環(huán)境換氣次數(shù)不低于20次/h2)理化因素光照動(dòng)物房應(yīng)有合適的人工光源合適的光周期模擬自然界的晝夜更替(光周期可影響動(dòng)物生殖腺的成熟和性周期的活動(dòng))持續(xù)黑暗可使卵巢和子宮的重量下降,持續(xù)光照動(dòng)物持續(xù)發(fā)情,大鼠和小鼠可出現(xiàn)永久性陰道角化合適的光強(qiáng)不致?lián)p傷動(dòng)物的視網(wǎng)膜和方便工作人員的觀察和操作。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求實(shí)驗(yàn)動(dòng)物照明度為1020lx,工作照明度為不低于200lx,照明時(shí)間為12/1
22、2或10/14(1lx指一支蠟燭從1米外投射在1m2的表面上的光的數(shù)量)噪聲:動(dòng)物的聽(tīng)閾比人更寬噪聲產(chǎn)生于:外界傳入、室內(nèi)機(jī)器產(chǎn)生、動(dòng)物自身產(chǎn)生噪聲對(duì)動(dòng)物的影響包括神經(jīng)系統(tǒng)心血管系統(tǒng)聽(tīng)源性痙攣消化及內(nèi)分泌系統(tǒng)繁殖及幼小動(dòng)物的生存國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),飼育室噪聲應(yīng)控制在60dB以下空氣潔凈度:空氣凈化(過(guò)濾)的程度(5um以下的顆粒物可吸入支氣管或肺部,引起損害或成為微生物的載體)分為三級(jí)5級(jí)飼育無(wú)菌動(dòng)物、7級(jí)飼育SPF動(dòng)物、8級(jí)飼育清潔動(dòng)物 梯度壓差:動(dòng)物房?jī)?nèi)相通的區(qū)域之間存在著一定的壓力差避免室外或結(jié)凈度較低的空氣向潔凈度較高的環(huán)境內(nèi)滲透造成污染。壓差方向從高級(jí)別潔凈區(qū)向低級(jí)別潔凈區(qū)清潔走廊動(dòng)物室污染走
23、廊外界動(dòng)物室清潔走廊污染走廊外界梯度壓差屏障環(huán)境不低于10pa,隔離系統(tǒng)不低于50pa有害氣體:氨氣、甲基硫醇、硫化氫、硫化甲基、三甲胺、苯乙烯、乙醛和二硫化甲基等八種,以前三種為主 氨氣是由細(xì)菌分解尿素產(chǎn)生,氨含量增多刺激動(dòng)物粘膜引起流淚、咳嗽,嚴(yán)重者引起肺水腫和肺炎。長(zhǎng)期處于高濃度氨的環(huán)境中,實(shí)驗(yàn)動(dòng) 物上呼吸道出現(xiàn)慢性炎癥,失去使用價(jià)值。250ppm下,豚鼠49天內(nèi)死亡率達(dá)80% 家兔408ppm可刺激咽喉,500ppm可見(jiàn)氣管及支氣管出血,698ppm可刺激眼部,1720ppm出現(xiàn)咳嗽硫化氫產(chǎn)生于動(dòng)物的糞便和腸中,是有強(qiáng)烈臭雞蛋味的氣體,能刺激粘膜、神經(jīng),降低動(dòng)物的妊娠率標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定氨氣濃度
24、不高于14mg/m3(20ppm)信息素(引物信息素):由動(dòng)物釋放至體外的一類(lèi)物質(zhì),對(duì)其它動(dòng)物的繁殖等多種行為產(chǎn)生明顯的影響小鼠可產(chǎn)生:假性妊娠和發(fā)情周期混亂(Lee-Boot);懷孕初期的小鼠與交配對(duì)象以外的雄性動(dòng)物接近或同居時(shí)產(chǎn)生的中止妊娠的反應(yīng)(Bruce)3)生物因素 同種生物因素:社會(huì)因素: 直線型猴、兔、雞、狗、豬; 專(zhuān)制型小鼠、大鼠、貓 勢(shì)力范圍: 群養(yǎng)動(dòng)物時(shí),每個(gè)個(gè)體都有自己的勢(shì)力范圍,哪怕地位最低劣的動(dòng)物面對(duì)最強(qiáng)的個(gè)體,為了保衛(wèi)自己的勢(shì)力范圍也有防衛(wèi)的習(xí)性飼養(yǎng)密度:一定面積內(nèi)飼養(yǎng)動(dòng)物的數(shù)量飼養(yǎng)密度可影響:環(huán)境的空氣潔凈度、有害氣體的濃度、動(dòng)物體內(nèi)微生物的種類(lèi)及含量、甚至影響實(shí)
25、驗(yàn)動(dòng)物的內(nèi)分泌不同種類(lèi)動(dòng)物、同種動(dòng)物不同體重動(dòng)物每只所需的最小空間不同(書(shū)P53)動(dòng)物群養(yǎng)時(shí),籠具底板每平方米可收容成年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物最大密度大約是:小鼠100只、大鼠50只、豚鼠20只、兔4只、犬1只、猴1只175mm245mm125mm的空間最多可容納體重為20g的小鼠10只、30g的小鼠8只異種動(dòng)物因素:不同種的動(dòng)物應(yīng)分室飼育。影響動(dòng)物的習(xí)性;傳染疾?。簧畹倪m宜條件不同微生物因素:引起動(dòng)物的疾病或潛在感染。人為因素:反應(yīng)在對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理、試驗(yàn)處理或技術(shù)操作過(guò)程中。影響動(dòng)物的發(fā)育、實(shí)驗(yàn)結(jié)果13、小鼠、大鼠繁育生產(chǎn)設(shè)施及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施環(huán)境指標(biāo)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)間動(dòng)物實(shí)驗(yàn)間屏障環(huán)境隔離環(huán)境屏障環(huán)
26、境隔離環(huán)境溫度,20262026日溫差,44相對(duì)濕度,%4070最小換氣次數(shù),次/h15201520動(dòng)物籠具處氣流速度(m/s)0.2相通區(qū)域的最小靜壓差,Pa10501050空氣潔凈度,級(jí)75或775或7落下菌數(shù),個(gè)/皿3無(wú)檢出3無(wú)檢出氨濃度,mg/m314噪聲,dB60照度,lx最低工作照度200動(dòng)物照度1520晝夜明暗交替時(shí)間,h12/12或10/1414、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施及組成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施:界定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存空間、維持其需要的建筑物和設(shè)備根據(jù)功能不同可分為:(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)設(shè)施、(2)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施和(3)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物特殊實(shí)驗(yàn)設(shè)施(1)是指用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育、生產(chǎn)的建筑物和設(shè)備的總和(2)是指以研
27、究、試驗(yàn)、教學(xué)、生物制品和藥品及其相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn)、檢定為目的而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼育、試驗(yàn)的建筑物和設(shè)備的總和(3)包括感染動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施(動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室)和應(yīng)用放射性物質(zhì)或有害化學(xué)物質(zhì)等進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的設(shè)施三者在環(huán)境指標(biāo)控制上有相似之處實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的選址:大氣含塵濃度及化學(xué)污染程度較低,自然環(huán)境較好的區(qū)域;空氣含菌水平低,避開(kāi)自然疫源地;能保證水電供應(yīng),交通方便;遠(yuǎn)離有嚴(yán)重震動(dòng)和噪聲干擾的區(qū)域。組成:飼育室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室、檢疫室、洗刷消毒室、廢棄物處理設(shè)施、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)室、辦公室、資料室、庫(kù)房和機(jī)械設(shè)備室布局原則:有利于防止動(dòng)物疾病和人獸共患病的傳播,各級(jí)、各類(lèi)、各種動(dòng)物須保持各自的獨(dú)立性、相互隔離,
28、避免互相干擾、交叉感染;方便工作人員的飼育操作、實(shí)驗(yàn)操作及設(shè)施設(shè)備的維護(hù),并有足夠的儲(chǔ)物空間,易于保持相應(yīng)的凈化標(biāo)準(zhǔn)和各項(xiàng)環(huán)境指標(biāo)達(dá)標(biāo);人員、動(dòng)物、物品和凈化空氣按單向路線移動(dòng),以避免交叉污染和相互影響。根據(jù)用途分為:普通環(huán)境、屏障環(huán)境、隔離環(huán)境15、普通環(huán)境:符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物居住的基本要求,控制人員和物品、動(dòng)物出入,不能完全控制傳染因子。一定的環(huán)境控制:空調(diào)機(jī)、送風(fēng)、排風(fēng)裝置和初、中效過(guò)濾器一定的微生物控制:有防野鼠、防蟲(chóng)設(shè)施 飼料、飲水要符合衛(wèi)生要求,墊料要消毒分三個(gè)區(qū):前區(qū):檢疫室、庫(kù)房、辦公室、休息室等控制區(qū):飼育室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室、清潔走廊、清潔物品儲(chǔ)存室等后勤處理區(qū):污物走廊、洗刷消毒室、
29、污物處理設(shè)施等16、屏障環(huán)境:符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物居住的基本要求,嚴(yán)格控制人員和物品、動(dòng)物出入用于清潔級(jí)或SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)的場(chǎng)所分三區(qū)清潔區(qū):飼養(yǎng)室或?qū)嶒?yàn)室、清潔走廊、清潔準(zhǔn)備室、清潔物品貯存室、檢疫室等污染區(qū):污物走廊、洗刷消毒室等外部區(qū):接受動(dòng)物室、飼料加工室、庫(kù)房、焚燒爐、更衣淋浴間、值班室、辦公室、機(jī)械設(shè)備室等空氣經(jīng)過(guò)濾后(初、中、高效)進(jìn)入(空氣潔凈度為7級(jí));設(shè)施內(nèi)不同的區(qū)域之間存在著一定的空氣壓力差(不小于10Pa);物品經(jīng)高壓蒸汽滅菌等方法處理后進(jìn)入;人員需經(jīng)一定的消毒程序后方可進(jìn)入;運(yùn)送的動(dòng)物經(jīng)一定步驟的消毒后方能進(jìn)入人、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、物品和空氣的移動(dòng)路線人:更衣淋浴更衣清潔走
30、廊飼養(yǎng)室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室污染走廊洗刷消毒室更衣外部區(qū)域物品:消毒的物品傳遞窗或渡槽清潔準(zhǔn)備室儲(chǔ)存室飼養(yǎng)室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室包裝處理污物走廊外部區(qū)域?qū)嶒?yàn)動(dòng)物:外來(lái)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傳遞窗檢疫室清潔走廊飼養(yǎng)室實(shí)驗(yàn)動(dòng)物污物走廊外部區(qū)域空氣:潔凈空氣清潔走廊、清潔準(zhǔn)備室、清潔物品儲(chǔ)存室飼養(yǎng)室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室污物走廊外部區(qū)域人員入室前要求: 經(jīng)常保持手腳、衣服的清潔,保持口腔清潔衛(wèi)生;有病時(shí),嚴(yán)禁進(jìn)入;最好不去其他的動(dòng)物飼養(yǎng)室和實(shí)驗(yàn)室,去過(guò)的要有一周以上的隔離期方能進(jìn)入入室操作要求:在指定處換鞋開(kāi)關(guān)門(mén)迅速,每扇門(mén)關(guān)閉后才能開(kāi)下一扇門(mén)按規(guī)則換衣,不得將外用物品帶入手表飾物等不得帶入淋浴時(shí)間不得少于15分鐘淋浴順序:手頭(含頭發(fā))
31、臉口上身下身腳手用肥皂和洗發(fā)劑及熱水充分洗浴并漱口5次以上將腳踏入藥水槽(2%新潔爾滅)浸泡23分鐘跨入通道內(nèi)并用干浴巾擦抹身體進(jìn)入清潔區(qū)緩沖間,穿無(wú)菌衣,口罩帽子短褲腳套上衣塑膠手套打開(kāi)紫外燈,將手伸入藥水槽(2%新潔爾滅)浸泡3分鐘,再走入清潔走廊,進(jìn)入飼養(yǎng)觀察室17、獨(dú)立通氣籠盒(individually ventilated cages, IVC) 在密閉獨(dú)立單元(籠具或籠盒)內(nèi),潔凈氣流獨(dú)立通氣,廢氣集中外排,并可在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行操作和實(shí)驗(yàn)的微型SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼育和實(shí)驗(yàn)的設(shè)備。由主機(jī)、籠架、籠盒和送排風(fēng)系統(tǒng)等組成。在影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的因素中,由IVC控制的主要有換氣次數(shù)、氣流速度、籠
32、盒內(nèi)外的靜壓差、空氣的潔凈度、噪聲和落下菌數(shù)。18、隔離環(huán)境:隔離環(huán)境是以隔離器及其他附屬裝置所組成的飼養(yǎng)系統(tǒng),以保持無(wú)菌狀態(tài)或無(wú)外源性污染物。飼養(yǎng)SPF、無(wú)菌動(dòng)物、悉生動(dòng)物或進(jìn)行同級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的場(chǎng)所;要求人不能與動(dòng)物直接接觸;進(jìn)入的物品必須包裝消毒后經(jīng)滅菌渡艙或傳遞艙移入;隔離器的正壓要求達(dá)到不低于50Pa。19、GB14925空氣潔凈度潔凈度0.5um(pc/m3)1um(pc/m3)5um(pc/m3)5級(jí)(352,3520(83,832297級(jí)(35200,352000(8320,83200(293,29308級(jí)(352000,3520000(83200,832000(2930,2930
33、020、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)素能夠在動(dòng)物體內(nèi)被消化吸收,具有供能或構(gòu)成體組織或調(diào)節(jié)生理功能等作用的物質(zhì)。蛋白質(zhì):由氨基酸組成的大分子物質(zhì)(粗蛋白:飼料中含氮物質(zhì)的總稱(chēng))對(duì)動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)作用包括:蛋白質(zhì)是動(dòng)物維持生命、生長(zhǎng)和繁殖不可缺少的物質(zhì);蛋白質(zhì)是構(gòu)成體組織、體細(xì)胞的基本原料;蛋白質(zhì)是修補(bǔ)體組織的必需物質(zhì);蛋白質(zhì)組成酶和激素參與并調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)的代謝過(guò)程;蛋白質(zhì)還可代替碳水化合物及脂肪提供能量;是乳、肉、蛋、皮、毛等一切動(dòng)物產(chǎn)品的原料;幾個(gè)基本概念必需氨基酸:在動(dòng)物體內(nèi)不能合成或合成速度及數(shù)量不能滿足正常生長(zhǎng)的需要,必須由飼料來(lái)供給的氨基酸(K、W、T、V、H、R、L、I、M、F)。非必需氨基酸:在動(dòng)物體
34、內(nèi)合成較多或需要較少,不需要由飼料來(lái)供給,亦能滿足動(dòng)物的正常的需要。限制性氨基酸:食物中氨基酸的含量和比例相對(duì)機(jī)體的需要不足。氨基酸的互補(bǔ)作用 :由于動(dòng)物體內(nèi)的蛋白質(zhì)、氨基酸與飼料的組成不完全一致,單獨(dú)使用某一種飼料就不能滿足動(dòng)物合成蛋白質(zhì)的需要,通常使用兩種以上的飼料,其氨基酸可以得到相互補(bǔ)充,取長(zhǎng)補(bǔ)短,有效地利用氨基酸。飼料中蛋白質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響:含量不足或某些必需氨基酸缺乏或比例不當(dāng):動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育緩慢、抵抗力下降,體重減輕,并出現(xiàn)貧血、低蛋白血癥等,長(zhǎng)期缺乏可導(dǎo)致水腫,并影響生殖。 含量過(guò)高:引起代謝紊亂,甚至出現(xiàn)酸中毒脂類(lèi):脂肪、磷脂、膽固醇(粗脂肪:能溶解在有機(jī)溶劑中的物質(zhì),包括真
35、脂肪、有機(jī)酸、類(lèi)脂、葉綠素、胡蘿卜素等)對(duì)動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)作用包括:是動(dòng)物體組織的重要組成成分;是重要的能量來(lái)源;提供必需脂肪酸(植物油脂中所含的三種多不飽和脂肪酸:亞麻酸、亞油酸和花生四烯酸);是脂溶性維生素的溶劑;具有保溫和保護(hù)臟器的作用。飼料脂肪含量對(duì)動(dòng)物的影響:必需脂肪酸缺乏可引起嚴(yán)重的消化系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙;過(guò)多使動(dòng)物肥胖而影響健康,并且不利于實(shí)驗(yàn)研究。碳水化合物:可溶性:?jiǎn)翁?、雙糖、多糖(淀粉)粗纖維(膳食纖維):指植物性飼料中那些對(duì)水、稀酸、稀堿難溶解的物質(zhì),如纖維素、半纖維素等,是植物細(xì)胞壁的主要成分營(yíng)養(yǎng)作用包括:動(dòng)物能量的主要來(lái)源;合成脂肪和非必需氨基酸;為泌乳動(dòng)物合成乳糖
36、及乳脂提供原料;構(gòu)成細(xì)胞的基本成分;促進(jìn)腸道蠕動(dòng)礦物質(zhì)(粗灰分):飼料燃燒后的剩余成分,主要是一些無(wú)機(jī)化合物 常量元素鈣、磷、鉀、鈉、氯、鎂、硫; 微量元素鐵、鋅、銅、錳、碘、鈷、鉬、硒對(duì)動(dòng)物的作用:機(jī)體重要的結(jié)構(gòu)物質(zhì);維持機(jī)體滲透壓平衡;調(diào)節(jié)酸堿平衡;保持神經(jīng)、肌肉的興奮性。礦物質(zhì)不足的影響:機(jī)體自身不能合成,必須由飼料提供,若不足將會(huì)影響動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育,甚至導(dǎo)致動(dòng)物的死亡。維生素:機(jī)體維持正常功能所必需的,但在體內(nèi)不能合成或合成量少,必須由食物供給的一組低分子有機(jī)物質(zhì)。脂溶性維生素:A、D、E、K; 水溶性維生素:B1、B2、B6、B12、C、PP、泛酸、生物素、葉酸、硫辛酸作用:參與骨骼
37、的形成(A、B1、D);防止出血(K);防止貧血(A、B12、D);刺激正常的繁殖(E、A、C);維持神經(jīng)系統(tǒng)的機(jī)能(A、B族維生素);提高預(yù)防疾病的能力(A、B1)。水:水是動(dòng)物必需的營(yíng)養(yǎng)成分,動(dòng)物機(jī)體內(nèi)水分含量可達(dá)45-80%。 動(dòng)物體所需要的水分主要來(lái)源于飲水、飼料水和動(dòng)物自身的代謝水作用:重要的溶劑;調(diào)節(jié)體溫;潤(rùn)滑劑;調(diào)節(jié)滲透壓水分缺乏對(duì)動(dòng)物的影響:生長(zhǎng)發(fā)育:幼齡動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育減慢,哺乳動(dòng)物泌乳減少;食欲下降,導(dǎo)致食欲廢絕,消化機(jī)能下降;免疫力和抗病力顯著減弱。21、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)需要:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂類(lèi)、礦物質(zhì)、維生素、水等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的日平均需要量。不同動(dòng)物的解剖生理特性
38、不同,攝食習(xí)性也有所差異,可分為草食性、肉食性和雜食性三類(lèi)維持需要:是指健康動(dòng)物體重不增不減,不進(jìn)行生產(chǎn),體內(nèi)各種營(yíng)養(yǎng)處于平衡狀態(tài)時(shí)對(duì)營(yíng)養(yǎng)素的需要量。即維持動(dòng)物正常體溫、呼吸、 心跳等基本生命活動(dòng)的營(yíng)養(yǎng)需要。生長(zhǎng)需要:動(dòng)物進(jìn)行物質(zhì)積累,細(xì)胞數(shù)量增多和組織器官體積增大,從而使動(dòng)物的體積和重量增加過(guò)程中對(duì)于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要量。繁殖需要:能夠滿足動(dòng)物母體自身的營(yíng)養(yǎng)需要和為胎兒生長(zhǎng)發(fā)育與哺乳提供各種優(yōu)質(zhì)、充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。飼料中必需氨基酸的種類(lèi): 纈氨酸、賴(lài)氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、色氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、胱氨酸、精氨酸、組氨酸23、大鼠、小鼠、豚鼠、家兔生物學(xué)特性和應(yīng)用家兔的主要生物學(xué)特
39、性及其選擇應(yīng)用主要生物學(xué)特性應(yīng)用繁殖力高、抗病力強(qiáng)、較溫馴、易飼養(yǎng)耳靜脈便于注射給藥及采血應(yīng)用廣泛:急性實(shí)驗(yàn)、內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)、物質(zhì)代謝研究、遺傳學(xué)研究、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)等體溫調(diào)節(jié)穩(wěn)定、反應(yīng)靈敏解熱藥的研究、注射液的熱原檢查、研究環(huán)境因素引起體溫過(guò)高或過(guò)低的反應(yīng)典型的刺激性排卵動(dòng)物避孕藥研究中觀察藥物對(duì)排卵的影響胸腔解剖特殊,開(kāi)胸和打開(kāi)心包胸膜暴露心臟時(shí),只要不弄破縱膈膜,動(dòng)物不需做人工呼吸開(kāi)胸及心臟實(shí)驗(yàn)心臟在離體條件下仍可搏動(dòng)很久觀察藥物對(duì)心臟的直接作用頸部的交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)和主動(dòng)脈減壓神經(jīng)獨(dú)立行走觀察減壓神經(jīng)對(duì)心臟的影響注射四氧嘧啶可形成持續(xù)性高血糖復(fù)制糖尿病模型食用高膽固醇、高脂肪飼料后易形成動(dòng)脈
40、粥樣硬化病變復(fù)制動(dòng)脈粥樣硬化及高脂血癥模型對(duì)日本血吸蟲(chóng)易感復(fù)制日本血吸蟲(chóng)病模型皮膚對(duì)刺激物的反應(yīng)接近于人觀察毒物對(duì)皮膚的局部作用洋地黃、烏頭堿可誘發(fā)心律失常復(fù)制性心律失常眼球大,便于手術(shù)操作和觀察復(fù)制眼科動(dòng)物模型嘔吐反應(yīng)不敏感、缺乏咳嗽反射、對(duì)射線十分敏感,照射后常發(fā)生休克樣反應(yīng)不適于觀察致嘔吐、致咳嗽和放射病的實(shí)驗(yàn)研究小鼠解剖生理學(xué)特點(diǎn)和生物學(xué)特性小鼠外觀:嘴尖、頭呈錐體形,嘴臉前部?jī)蓚?cè)共有19根胡須。尾約與體長(zhǎng)相等(散熱、平衡、防御),尾部有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片(尾有4條血管)。下頜骨和牙齒:下頜骨喙?fàn)钔惠^小,髁狀突發(fā)達(dá),形態(tài)有品系特征,遺傳力較高(可判斷品系)。上下頜各有兩個(gè)門(mén)齒和六個(gè)臼齒
41、,齒式為:1003/1003=16。門(mén)齒終身不斷生長(zhǎng),需要不斷啃咬有一定硬度的食物,以磨損門(mén)齒維持適當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度。內(nèi)部臟器:食道細(xì)長(zhǎng),約為2cm;胃容量小(1.0-1.5ml),胃分為前胃和腺胃(不會(huì)嘔吐);腸道較短(不耐饑餓),盲腸不發(fā)達(dá)。 有膽囊;胰腺分散在十二指腸,胃底及脾門(mén)處,似脂肪組織。(脾臟,雄鼠大于雌鼠50%) 沒(méi)有腭或咽扁桃體。 心臟由左、右心房和左、右心室組成。心尖位于近胸骨端第4肋間,此處為小鼠心臟采血的進(jìn)針部位。 雌性子宮呈“Y”字型,卵巢有系膜包繞不與腹腔相通,故無(wú)宮外孕。 乳腺發(fā)達(dá),胸部3對(duì)、鼠鼷部2對(duì)乳頭。 雄性為雙睪丸,幼年時(shí)藏于腹腔內(nèi),性成熟后下降至陰囊。前列腺分背
42、、腹兩葉。生長(zhǎng)發(fā)育:成熟早,繁殖力強(qiáng),便于提供同胎和不同品系動(dòng)物。 小鼠多為發(fā)情動(dòng)物,6-7周性成熟(35-40日齡,45-60日齡),妊娠期19-21d,哺乳期20-22d。性周期4-5d。每胎產(chǎn)仔6-15只,年產(chǎn)仔胎數(shù)6-9胎;出生時(shí)僅1.5g左右,生后1-2h可吃奶,3d臍帶脫落,皮膚變?yōu)榘咨_(kāi)始長(zhǎng)毛,3周后可獨(dú)立生活斷奶。(新生小鼠無(wú)毛,全身通紅。夜間分娩,4分鐘1個(gè)) 雌鼠交配后2-4h在陰道口形成一個(gè)白色的陰道栓,防止精子倒流,可提高受孕率,陰道栓常作為受孕成功的標(biāo)志,依次計(jì)算交配日期。生活習(xí)性:體型小,易于飼養(yǎng)管理。飼料消耗量少,飼養(yǎng)條件簡(jiǎn)單,飼養(yǎng)占地小。成熟體重18-25g,
43、20-40g(哺乳一月后可達(dá)12-15g),哺乳飼養(yǎng)1.5-2月可達(dá)20g以上,體重增長(zhǎng)的快慢與品系、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)等有密切關(guān)系,一般以其體重判斷周齡。(表格見(jiàn)書(shū)P25作了解)性情溫順,易抓拿;對(duì)外來(lái)刺激及為敏感;喜居于較暗的安靜環(huán)境,晝伏夜動(dòng),喜歡啃咬,喜食香脆、有一定硬度的食物。 膽小怕驚。體小嬌嫩,不耐饑渴,不耐冷熱,對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性差。 對(duì)飲水量不足更為敏感,飲水量4-7ml/d,食量4-8g/d。氣管及支氣管腺不發(fā)達(dá),無(wú)咳嗽反射。 無(wú)嘔吐反應(yīng);缺乏汗腺,體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定。 不易形成動(dòng)脈粥樣硬化病變。營(yíng)養(yǎng)對(duì)蛋白質(zhì)的要求較其他動(dòng)物高,應(yīng)高于20%比例,對(duì)VE缺乏敏感,可影響受孕,可體內(nèi)自身合成VC
44、。(喜群居) 常用生理生化指標(biāo):詳見(jiàn)書(shū),不考這條。P26大鼠解剖生理學(xué)特點(diǎn)和生物學(xué)特性大鼠外觀:與小鼠相似,個(gè)體較大,成年體長(zhǎng)18-20cm,尾上有短毛和角質(zhì)鱗片,數(shù)量多于200片。下頜骨和牙齒:大鼠上下頜各有2個(gè)門(mén)齒和6個(gè)臼齒,門(mén)齒終生不斷生長(zhǎng),需不斷啃咬磨損維持恒定。齒式為1003/1003=16。內(nèi)部臟器:無(wú)扁桃體;味覺(jué)不發(fā)達(dá);無(wú)膽囊,來(lái)自各葉的膽管形成膽總管。食道長(zhǎng)約4-5cm;不會(huì)嘔吐,胃分為前胃(非腺胃)和胃體(腺胃),由界限嵴隔開(kāi),食管通過(guò)界限嵴的1個(gè)褶進(jìn)入胃小彎。胃容量約為4-7ml。 肝有六葉(中葉、右葉、左外葉、左中葉、尾狀葉和乳突葉),再生能力強(qiáng),切除60%-70%仍有再
45、生能力。 肺結(jié)構(gòu)特別,左肺為1個(gè)大葉,右肺分為4葉(前、中、副、后葉)。 長(zhǎng)骨長(zhǎng)期有骨骺線存在,不骨化。 腸道較短,盲腸較大,盲腸功能不發(fā)達(dá)。 垂體位于視交叉之后,較脆弱地附著在漏斗的下部,不需要很大吸力就可除去而不破壞鞍膈和腦膜,適于做去 垂體模型。 雙子宮,呈“Y”形。 胸部和鼠蹊部各有3對(duì)乳頭。 胰腺很分散,位于胃和十二指腸彎曲處。壽命2.5-3年。 生長(zhǎng)發(fā)育:生長(zhǎng)發(fā)育繁殖快,性成熟為6-8周齡;性周期4-5d;妊娠期19-23d;平均每窩產(chǎn)仔6-12只,為全年多發(fā)情動(dòng)物。一般新生體重5.5-10g,出生時(shí)無(wú)毛,兩耳關(guān)閉,12-16d睜眼,7-10d全身長(zhǎng)滿被毛,20-21d斷奶,大鼠的
46、生長(zhǎng)速度與品系、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)、環(huán)境有密切關(guān)系。成年鼠300-600g,雌性250-500g。大鼠在交配后2-4h,在雌鼠250-500g。大鼠在交配后2-4h,在雌鼠陰道內(nèi)形成陰道栓,可在陰道內(nèi)停留12-24h。生活習(xí)性:晝伏夜動(dòng),喜啃咬,對(duì)新環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng);性情溫順,易于捉拿,但較小鼠兇猛;體型比小鼠大,易飼養(yǎng)管理。 垂體腎上腺系統(tǒng)功能發(fā)達(dá),應(yīng)激反應(yīng)靈敏。視覺(jué)、嗅覺(jué)較靈敏,做條件反射等實(shí)驗(yàn)反應(yīng)良好。對(duì)營(yíng)養(yǎng)、維生素、氨基酸缺乏敏感。(雌鼠缺乏VE,生育能力下降)。血壓和血管阻力對(duì)藥物反應(yīng)敏感。對(duì)炎癥反應(yīng)靈敏,特別是踝關(guān)節(jié)。常用生理生化指標(biāo):詳見(jiàn)書(shū),不考這條。P30-31小鼠大鼠染色體染色體數(shù)2n =
47、 40染色體數(shù)2n=42習(xí)性和行為1膽小怕驚 2晝伏夜動(dòng) 3喜群居 4適應(yīng)性差 5喜啃咬1晝伏夜動(dòng) 2喜群居 3膽小怕驚 4喜啃咬 5抗病力強(qiáng) 6對(duì)環(huán)境噪聲敏感 7壽命2.5-3年 解剖學(xué)特點(diǎn)外觀和體型:體型最小,出生時(shí)體重僅1.5g,體長(zhǎng)2cm左右,6周齡達(dá)18-30g,成年小鼠最大時(shí)可達(dá)30-40g,體長(zhǎng)11cm左右。 尾長(zhǎng)約與體長(zhǎng)相等。 盲腸不發(fā)達(dá)。 骨髓為紅骨髓而無(wú)黃骨髓,終生造血。 雌性小鼠為雙子宮型,呈“Y”形;卵巢有系膜包繞,不與腹腔相通,故無(wú)宮外孕。 6.小鼠皮膚無(wú)汗腺,散熱靠尾巴。1.外觀與體型:體型較大,體重約是小鼠的10倍。新生仔鼠體重約5.5-10g, 1.5-2月齡達(dá)
48、到180-220g,其體長(zhǎng)不小于18-20cm。雄性大鼠最大體重達(dá)300-800g,雌性大鼠250-400g。 2.大鼠汗腺不發(fā)達(dá),僅在爪墊上有汗腺。尾巴是散熱器官。在高溫下靠流出大量唾液調(diào)節(jié)體溫。 3.大鼠無(wú)膽囊,膽管直接與十二指腸相連。 4.大鼠食管與胃交界處有皺褶,能阻止胃內(nèi)容物反流到食管,因此大鼠不會(huì)嘔吐。生理學(xué)特性生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo) 生長(zhǎng)期短、成熟早、繁殖力強(qiáng) 0日齡:出生時(shí)1.5g,體長(zhǎng)20mm,赤裸無(wú)毛,身體成半透明,眼緊閉,兩耳貼皮膚,嗅覺(jué)、味覺(jué)敏感。 3日齡:皮膚出現(xiàn)毛色 4-6日齡:雙耳張開(kāi)聳立 7-8日齡:開(kāi)始爬動(dòng) 9-11日齡:聽(tīng)覺(jué)發(fā)育,被毛長(zhǎng)齊 12-14日齡:睜眼,開(kāi)始采
49、食飲水,四處活動(dòng) 21日齡:離乳 性成熟:45-60日齡,35-45日齡 體成熟:70-80日齡,65-75日齡 發(fā)情周期:4-5天 妊娠期:19-21天 哺乳期:20-22天 生育期:1年 壽命:2-3年 生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo) 生長(zhǎng)期短、成熟早、繁殖力強(qiáng) 0日齡:出生時(shí)5-7g,赤裸無(wú)毛,眼緊閉,兩耳貼皮膚,嗅覺(jué)、味覺(jué)敏感。3日齡:皮膚出現(xiàn)毛色 4-6日齡:雙耳張開(kāi)聳立, 7-8日齡:開(kāi)始爬動(dòng) 9-11日齡:聽(tīng)覺(jué)發(fā)育,被毛長(zhǎng)齊 12-14:睜眼,開(kāi)始采食飲水,四處活動(dòng)21日齡:離乳 性成熟:45-60日齡,35-45日齡 體成熟:80-90日齡,75-85日齡 發(fā)情周期:4-5天 妊娠期:19-21
50、天 哺乳期:20-22天 生育期:1年 壽命:2.5-3年 應(yīng)用 (一)藥物研究 (二)腫瘤學(xué)研究(三)遺傳學(xué)研究(四)感染性疾病的研究(五)免疫學(xué)研究(六)老年病研究(七)其他疾病研究1.神經(jīng)系統(tǒng)疾病 如亞急性壞死性腦脊髓病、癲癇2.呼吸系統(tǒng)疾病 小鼠是研究鎮(zhèn)咳藥的首選動(dòng)物3.消化系統(tǒng)疾病4.計(jì)劃生育(一)內(nèi)分泌研究(二)營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病研究(三)藥物研究藥物安全性評(píng)價(jià):長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)、生殖毒性試驗(yàn)藥效學(xué)研究(四)行為學(xué)研究(五)老年病學(xué)研究(六)腫瘤研究(七)感染性疾病研究(八)心血管疾病研究(九)中醫(yī)藥研究豚鼠解剖生理學(xué)特點(diǎn)和生物學(xué)特性豚鼠外觀:體形粗短,頭大,頸粗,耳朵和四肢短小,無(wú)尾;全
51、身被毛,緊貼體表,前肢有四趾,后肢有三趾,趾端有尖銳短爪,眼睛明亮,耳殼薄而血管明顯;上唇分裂,皮厚二不易注射,血管神經(jīng)不易分離。內(nèi)部臟器:門(mén)齒銳利呈弓形深入頜部,終生生長(zhǎng),臼齒發(fā)達(dá)。齒式為1013/1013=20。胃壁薄,容量約為20-30ml。腸管長(zhǎng),為體長(zhǎng)的10倍,盲腸發(fā)達(dá)。肝臟分5葉:外側(cè)左葉、外側(cè)右葉、內(nèi)側(cè)左葉、內(nèi)側(cè)右葉和尾狀葉(尾狀突起和乳狀突起),膽囊位于乳頭尖突起的下方。 胰腺位于十二指腸彎曲部得腸系膜上,乳白色片狀物。 肺分為7葉:右肺分為上、中、下葉及從中葉分出的側(cè)葉共4葉;左肺分上、中、下3葉。氣管及支氣管不發(fā)達(dá),只有喉部有氣管腺,支氣管以下即無(wú)氣管腺,全部在頸部,位于下
52、頜骨角到胸腔入口中間,為兩個(gè)光亮、淡黃色、細(xì)長(zhǎng)成橢圓形、充分分葉的腺體。 淋巴系統(tǒng)發(fā)達(dá),對(duì)浸入的病原維生素敏感。雌性卵巢呈卵圓形,位于腎后端。 子宮有兩個(gè)完全分開(kāi)的子宮角,連接輸卵管末端,兩個(gè)子宮角會(huì)合后形成子宮頸,開(kāi)口于陰道,陰道具有無(wú)孔的陰道閉合膜,發(fā)情時(shí)張開(kāi),非發(fā)情時(shí)閉合。雌性只有一對(duì)乳頭,位于鼠蹊部,左右各一。雄性有位于兩側(cè)突起的陰囊,內(nèi)含睪丸,另有附睪、精囊、輸精管、副性腺和陰莖,陰莖端有兩個(gè)特殊的角狀物,呈圓錐形。生長(zhǎng)發(fā)育:豚鼠性成熟早,雌性一般60日齡左右開(kāi)始排卵,雄鼠30d左右有性活動(dòng),5月齡時(shí)性成熟。雌性發(fā)情周期為13-20d(平均16d),發(fā)情時(shí)間可持續(xù)1-18h,躲在下午
53、5點(diǎn)到第二天早晨,排卵是在發(fā)情結(jié)束后。孕期長(zhǎng),為65-70d,哺乳期15-21d,每胎產(chǎn)仔1-7只,多數(shù)為3-4只。為長(zhǎng)年多發(fā)情,并有產(chǎn)后性周期。 豚鼠屬晚成熟動(dòng)物,胚胎在母體內(nèi)發(fā)育完全,初生豚鼠全身即覆有被毛,眼耳張開(kāi),初生1h后就可行走,有牙,數(shù)小時(shí)就能進(jìn)食,出生時(shí)50-115g,生后2-3d后可邊食乳邊吃飼料,母鼠泌乳能力強(qiáng),母鼠間有互相哺乳的習(xí)慣。 生長(zhǎng)發(fā)育很快,出生后2個(gè)月內(nèi)平均每天增重2.5-3.5g。成年豚鼠體重為350-600g;壽命一般為4-5年。生理特點(diǎn)及生活習(xí)性:習(xí)性溫順,不抓人,不會(huì)攀登和跳躍,膽小易驚,受驚時(shí)發(fā)出吱吱叫聲;喜歡干燥清潔安靜的生活環(huán)境;喜群居,成群活動(dòng)、
54、休息或集體采食、緊挨躺臥。嚴(yán)格的草食性動(dòng)物,喜食纖維素較多的禾本科嫩草,日夜采食。一般拒絕苦、咸和過(guò)甜的飼料,對(duì)限量飼喂飼料和飲水不適當(dāng),易于將食物扒散或?qū)嬎疄R出,且經(jīng)常噴射含有唾液和食入物的水,弄臟吸管和飲水。也喜歡蹲在食盆中休息,拍糞排尿。體內(nèi)不能合成維生素C,要注意補(bǔ)充。維生素C缺乏時(shí)出現(xiàn)壞血癥,后肢癱瘓。嗅覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)發(fā)達(dá),耳蝸管敏感,對(duì)700-2000周/s純音最敏感,易做聽(tīng)力實(shí)驗(yàn);對(duì)聲音、震動(dòng)和環(huán)境變化極敏感,易受驚,甚至流產(chǎn)。耐低氧,抗缺氧,抗缺氧能力比小鼠強(qiáng)四倍,比大鼠強(qiáng)二倍。易引起變態(tài)反應(yīng),易被抗原性物質(zhì)所致敏,引起過(guò)敏變態(tài)反應(yīng),如給豚鼠注射馬血清很易復(fù)制成過(guò)敏性休克動(dòng)物模型。
55、對(duì)抗菌素特別敏感,對(duì)青霉素敏感性比小鼠高1000倍。可引起小腸炎和結(jié)腸炎,發(fā)生死亡。豚鼠皮膚對(duì)毒物刺激反應(yīng)靈敏,其反應(yīng)接近人類(lèi),常用于局部皮膚毒物作用的實(shí)驗(yàn)。24、人類(lèi)疾病動(dòng)物學(xué)模型的概念為闡明人類(lèi)疾病的發(fā)生機(jī)制或建立治療方法而制作的具有人類(lèi)疾病模擬表現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。意義:人類(lèi)的替難者;可按需取得實(shí)驗(yàn)樣品;縮短研究周期;可比性強(qiáng);有助于認(rèn)識(shí)疾病本質(zhì);藥效臨床前研究;為教學(xué)服務(wù)。人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的分類(lèi)根據(jù)產(chǎn)生的機(jī)制:誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型、自發(fā)性疾病動(dòng)物模型根據(jù)產(chǎn)生疾病的系統(tǒng):運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型通過(guò)人為方式使實(shí)驗(yàn)
56、動(dòng)物受到物理、化學(xué)、生物等致病因素的作用,而發(fā)生類(lèi)似某種人類(lèi)疾病的動(dòng)物模型 物理因素機(jī)械損傷、氣壓、溫濕度變化、噪聲等可引起疾病的發(fā)生,如:手術(shù)切斷大鼠兩側(cè)迷走神經(jīng)可導(dǎo)致大鼠的肺水腫。 化學(xué)因素:某些化學(xué)物質(zhì)或藥物可引起疾病的發(fā)生,如:給大鼠注射四氧嘧啶后可導(dǎo)致糖尿病。 生物因素:某些細(xì)菌或病毒的感染可引起疾病的發(fā)生,如:志賀菌感染猴可導(dǎo)致細(xì)菌性痢疾。自發(fā)性疾病動(dòng)物模型:未經(jīng)人工處置動(dòng)物自發(fā)地出現(xiàn)人類(lèi)的疾病狀態(tài)特殊的育種方式:某些近交系動(dòng)物呈現(xiàn)出某種組織型腫瘤的高發(fā)動(dòng)物的基因突變:由于基因的突變,導(dǎo)致動(dòng)物個(gè)體某種功能的缺失動(dòng)物特殊的生物性狀:東方田鼠對(duì)血吸蟲(chóng)病的天然抵抗、鹿的紅細(xì)胞呈鐮形人類(lèi)疾病動(dòng)物模型形成的方法26、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的原則:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則相似性原則;差異性原則;易化原則;相容或相匹配原則;可獲得性原則;重現(xiàn)性、均一性原則相似性原則結(jié)構(gòu)、功能與代謝一般而言,動(dòng)物的進(jìn)化層次愈高,其結(jié)構(gòu)、功能和代謝愈接近人類(lèi)非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物并非動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在唯一選擇,某些動(dòng)物的結(jié)構(gòu)、功能和代謝也與人具有一定的相似性:豬的皮
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