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1、Word - 5 -鄂西山區(qū)豬圓環(huán)病毒2型感染的血清學(xué)調(diào)查 公司產(chǎn)品,購于北京愛德士元亨生物科技有限公司。 1.2 檢測方法 PCV2抗體檢測按如下步驟進行: (1)樣品處理:將全血樣品4 000 rpm離心 10 min,取上清備用; (2)樣品稀釋:在血清稀釋板中按12的體積稀釋待檢血清樣品(100 L樣品稀釋液中加 50 L待檢血清樣品); (3)對比稀釋:在血清稀釋板中按12分別稀釋陽性對比和陰性對比(100 L樣品稀釋液中加50 L對比血清); (4)取抗原包被板(依據(jù)樣品多少,可拆開分多次使用),分別將稀釋好的待檢血清樣品和對比血清各取100 L加入到抗原包被板孔中。同時設(shè)2孔陰性
2、對比、2孔陽性對比,輕輕混勻孔中樣品(勿溢出),置37 下孵育90 min; (5)棄去孔中的液體,每孔加入200 L洗滌液,每次靜置3 min,棄去洗滌液,并在吸水紙上拍干,共計洗板5次; (6)每孔加酶標記物100 L,置37 下孵育20 min,洗滌5次; (7)每孔加底物液A和底物液B各1滴(約 50 L),混勻,室溫(20 25 )避光顯色 15 min; (8)每孔加終止液1滴(約50 L),混勻后10 min內(nèi)測定結(jié)果。 結(jié)果判定:在酶標儀上測各孔OD630值。試驗成立的條件是陰性對比孔平均OD630值與陽性對比平均OD630值之差0.3;確定樣品OD6300.45時,判定為陽性
3、,OD6300.45時,判定為陰性。 豬偽狂犬病gE抗體、豬瘟病毒抗體和豬繁殖與呼吸綜合征抗體的檢測均按試劑盒說明書進行。 2 結(jié)果 2.1 不同豬場的PCV2抗體檢測結(jié)果 對2022年2022年采自鄂西山區(qū)20個豬場的1 260份血清樣品進行PCV2抗體檢測,結(jié)果發(fā)覺全部被檢豬場均存在PCV2感染,豬場的抗體陽性率為100 %(20/20),全部豬的PCV2抗體平均陽性率為56.75 %(715/1 260),其中PCV2抗體陽性率最高的達77.97 %(46/59),最低的為35 %(21/60),見表1。 2.2 不同豬群的PCV2抗體檢測結(jié)果 不同豬群的PCV2抗體陽性率檢測結(jié)果表明,
4、公豬的陽性率為20 %(4/20),母豬為21.67 %(26/120),育肥豬為53.46 %(139/260),保育豬為66.67 %(204/306),哺乳仔豬為61.73 %(342/554)(表2)。由此可知,鄂西山區(qū)保育豬和哺乳仔豬PCV2感染率較高,分別達66.67 %和61.73 %。 2.3 不同豬場的PRRSV抗體檢測結(jié)果 對2022年2022年采自鄂西山區(qū)20個豬場中未免疫PRRSV疫苗的11個豬場的710份血清進行了PRRSV抗體檢測,結(jié)果發(fā)覺全部被檢豬場均存在PRRSV感染,豬場的抗體陽性率為 100 %(11/11),全部豬的PRRSV抗體平均陽性率為48.45 %
5、(344/710),其中PRRSV抗體陽性率最高的達71.67 %(43/60),最低的為32.31 %(21/65),見表3。 2.4 不同豬場的PRV gE抗體檢測結(jié)果 對2022年2022年采自鄂西山區(qū)20個豬場的1 260份血清樣品進行PRV gE抗體檢測,結(jié)果發(fā)覺20個被檢豬場有13個豬場存在PRV野毒感染,豬場PRV野毒感染率達65 %(13/20);全部豬的PRV gE抗體平均陽性率為23.73 %(299/1 260),其中PRV gE抗體陽性率最高的達48.28 %(28/58),見表4。 2.5 不同豬場的CSFV抗體檢測結(jié)果 對2022年2022年采自鄂西山區(qū)20個豬場的
6、1 260份血清樣品進行CSFV抗體檢測,所檢20個豬場均進行了CSFV疫苗的免疫,結(jié)果發(fā)覺20個被檢豬場CSFV抗體平均陽性率為71.35 %,其中CSFV抗體陽性率最高的達93.33 %(56/60),最低的僅有50 %(28/56),見表5。 3 爭論 近年來,我國部分地區(qū)動物流行病學(xué)監(jiān)測結(jié)果顯示,豬圓環(huán)病毒2型的感染率及其引起的豬圓環(huán)病毒病的暴發(fā)次數(shù)都有上升的趨勢,且常與豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬偽狂犬病病毒(PRV)、豬瘟病毒(CSFV)等混合感染,表現(xiàn)出較高的病死率,給養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴峻的經(jīng)濟損失8,9。本討論中被檢測豬場均存在PCV2感染,其抗體平均陽性率為56.75
7、 %(715/1 260),比郎洪武等10報道的全國7個養(yǎng)豬大省42.9 %的陽性率高出近14個百分點,比趙東升11等報道的全國2022年2022年P(guān)CV2血清抗體平均陽性率38.47 %高18.28個百分點,而比徐廷川6等報道的廣東省2022年2022年P(guān)CV2血清抗體平均陽性率61.91 %要低5.16個百分點,說明鄂西山區(qū)的PCV2感染已經(jīng)特別普遍,這可能與近幾年頻繁到外地引種且引種時沒有嚴格檢測相關(guān)疫病,飼養(yǎng)管理水平低下等緣由有關(guān)。 對于不同豬群PCV2的血清抗體檢測結(jié)果表明,受檢豬群哺乳仔豬、保育豬及育肥豬的PCV2感染陽性率較高,這與郎洪武等10、吳瑗等12報道的后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬
8、和種公豬的PCV2感染陽性率較高有所不同。 近年來,隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷壯大,在豬群中普遍存在PCV2、PRRSV及其他病原的感染的現(xiàn)象,對養(yǎng)豬業(yè)造成的危害也日益加劇13。本討論對全部20個豬場均進行了PRV gE抗體、CSFV抗體的檢測,對其中未免疫PRRSV疫苗的11個豬場進行了PRRSV抗體檢測,結(jié)果發(fā)覺PCV2抗體感染率高的豬場PRRSV、PRV的感染率也相對較高,而CSFV的免疫抗體陽性率則相對較低,具有肯定的相關(guān)性,這可能與PCV2感染后導(dǎo)致的免疫抑制有關(guān)。 PCV2能夠破壞豬的免疫系統(tǒng),造成免疫抑制,從而引起多種疾病混合感染的發(fā)生,另外還造成對疫苗的免疫失敗或?qū)χ委煙o應(yīng)答的現(xiàn)象。因此,該病對豬的健康和養(yǎng)豬業(yè)健康可持續(xù)進展的威逼日益增大。本次檢測的20個養(yǎng)殖場均
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