GB∕T 34265-2017 Sanger法測(cè)序技術(shù)指南

ICS07080

A40.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T34265—2017

Sanger法測(cè)序技術(shù)指南

GuideforthemethodofSangersequencing

2017-09-07發(fā)布2018-04-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T34265—2017

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語和定義

3………………1

縮略語

4……………………2

原理

5………………………2

主要儀器設(shè)備

6、……………2

法基因測(cè)序指標(biāo)

7Sanger…………………3

法基因測(cè)序方法

8Sanger…………………4

法基因測(cè)序的應(yīng)用

9Sanger………………5

附錄資料性附錄法測(cè)序原理示意圖

A()Sanger………6

附錄資料性附錄試劑及溶液配制

B()…………………7

附錄資料性附錄測(cè)序反應(yīng)體系的配制

C()……………8

附錄資料性附錄擴(kuò)增程序

D()…………9

附錄資料性附錄待測(cè)序產(chǎn)物純化

E()…………………10

參考文獻(xiàn)

……………………11

GB/T34265—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)生化檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位深圳華因康基因科技有限公司深圳市華因康高通量生物技術(shù)研究院廣州康昕

:、、

瑞基因健康科技有限公司武漢康昕瑞基因健康科技有限公司中國(guó)測(cè)試技術(shù)研究院上海交通大學(xué)醫(yī)

、、、

學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院國(guó)家人類基因組南方研究中心中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院中山大學(xué)腫瘤防治中心

、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人盛司潼譚輝彪李花曾濤楊杰斌周李華張俊王升躍全燦陳功

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34265—2017

引言

基因測(cè)序方法是基因科技產(chǎn)業(yè)鏈的核心技術(shù)其發(fā)展?fàn)顩r直接關(guān)系到生物產(chǎn)業(yè)的發(fā)展?fàn)顩r對(duì)生物

,,

學(xué)癌癥攻克遺傳學(xué)醫(yī)藥研制藥效分析農(nóng)業(yè)新能源國(guó)家民族戰(zhàn)略安全和人類生命健康安全具有

、、、、、、、

至關(guān)重要的支撐作用

。

基因測(cè)序技術(shù)在全球的發(fā)展非常迅速目前實(shí)際應(yīng)用最廣泛的是測(cè)序方法它是超高精度

,Sanger,

測(cè)序的黃金標(biāo)準(zhǔn)是迄今為止唯一既能用于人類基因組提供從頭測(cè)序又能用于從頭組裝的技術(shù)將

,,。

測(cè)序方法標(biāo)準(zhǔn)化并加以推廣應(yīng)用生物企業(yè)乃至整個(gè)國(guó)內(nèi)行業(yè)就會(huì)獲得一個(gè)絕好的技術(shù)規(guī)范和

Sanger,

保護(hù)自我發(fā)展的壁壘推動(dòng)整個(gè)行業(yè)產(chǎn)業(yè)鏈的發(fā)展提升整個(gè)行業(yè)的技術(shù)實(shí)力早日實(shí)現(xiàn)測(cè)序

,,。Sanger

方法的標(biāo)準(zhǔn)化將對(duì)我國(guó)基因生物檢測(cè)產(chǎn)業(yè)這一戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)的發(fā)展起到至關(guān)重要的促進(jìn)作用為

,。

了使測(cè)序方法更加規(guī)范有效發(fā)揮其重要的科技支撐作用有必要對(duì)其制定標(biāo)準(zhǔn)

Sanger,,。

由于測(cè)序方法并非單一技術(shù)涉及到不同技術(shù)領(lǐng)域的結(jié)合包括生物化學(xué)機(jī)械數(shù)據(jù)處理

Sanger,,、、、

等因此本標(biāo)準(zhǔn)僅對(duì)法基因測(cè)序的術(shù)語技術(shù)指標(biāo)以及所涉及的儀器設(shè)備試劑方法進(jìn)行說明

,Sanger、,、、

和規(guī)定

。

Ⅱ

GB/T34265—2017

Sanger法測(cè)序技術(shù)指南

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)序方法的術(shù)語和定義縮略語原理主要儀器設(shè)備法基因測(cè)序

Sanger、、、、、Sanger

指標(biāo)法基因測(cè)序方法法基因測(cè)序的應(yīng)用

、Sanger、Sanger。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于對(duì)動(dòng)物組織植物組織血液口腔黏膜毛發(fā)糞便土壤微生物等生物樣品中的

、、、、、、、

通過測(cè)序方法進(jìn)行測(cè)序

DNASanger。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

基因測(cè)序genesequencing

對(duì)核酸分子的核苷酸排列順序的測(cè)定即測(cè)定組成核酸分子的腺嘌呤鳥嘌呤胞嘧啶

,(A)、(G)、(C)

和胸腺嘧啶或者是尿嘧啶的排列順序

(T)(U)。

定義

[GB/T30989—2014,3.18]

32

.

Sanger測(cè)序方法methodofSangersequencing

用于基因測(cè)序的雙脫氧鏈末端終止法在鏈延伸過程中利用熒光標(biāo)記雙脫氧堿基隨機(jī)阻斷產(chǎn)生以

,,

結(jié)束的四組不同長(zhǎng)度的核苷酸鏈