分光光度法測定毛老虎莖中三萜酸的總含量

1、分光光度法測定毛老虎莖中三萜酸的總含量【關(guān)鍵詞】毛老虎；,分光光度法；,香草醛摘要：目的建立香草醛-冰醋酸體系分光光度法測定毛老虎中總?cè)扑岬姆椒?。方法利用在高氯酸的條件下香草醛-冰醋酸與三萜酸的反響測定總?cè)扑?。結(jié)果總?cè)扑嵩?.5313.14g/l呈良好的線性關(guān)系，測定樣品回收率為99.07%。結(jié)論該法簡便、快速、靈敏。關(guān)鍵詞：毛老虎；分光光度法；香草醛DeterinatinfTtalntentfTriterpenidsinStesfHyptissuavelens(L.)PitbySpetrphtetryAbstrat：bjetiveTdevelpthedeterinatinethdftt

2、altriterpenidsinvanillinglaialaetiaidsystebyspetrphtetry.ethdsVanillinasusedaslurdevelpingreagentinthepresenefperhlriaid.ResultsThealibratinurvefttaltriterpenidshadgdlinearrelatinshipintherangef2.5313.14g/l.Theaveragereveryas99.07%.nlusinTheethdissiple,easyandreprduible.Keyrds：Hyptissuavelens(L.)Pit

3、;Spetrphtetry;Vanillin毛老虎Hyptissuavelens(L.)Pit為唇形科山香屬植物，別名山薄荷、假藿香，本屬植物共約400種，絕大多數(shù)均有藥用價(jià)值。?全國中草藥匯編?載：“辛、苦、平。疏風(fēng)利濕，行氣散淤。主治感冒頭痛，胃腸炎，痢疾，腹脹；外用治跌打腫痛，創(chuàng)傷出血，蟲蛇咬傷，濕疹，皮炎1。從毛老虎中提取三萜酸國內(nèi)還未見報(bào)道，印度的istra,TrunaN等2曾報(bào)道從毛老虎中提獲得到三萜酸，我們做預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，用熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品作TL對照實(shí)驗(yàn)，以1%香草醛濃硫酸溶液顯色，兩者顯示出Rf值一樣的櫻紅色斑點(diǎn)。為了進(jìn)一步研究三萜酸，本實(shí)驗(yàn)以熊果酸為對照品采用香草醛-冰醋酸比色，在高

4、氯酸條件下對毛老虎莖中總?cè)扑徇M(jìn)展測定，從而有效優(yōu)化總?cè)扑岬奶崛」に嚒?器材UV2501紫外分光光度計(jì)日本島津：KSB1200型數(shù)控超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)昆山市超聲儀器；試劑：高氯酸、冰醋酸、香草醛、無水乙醇均為分析純，熊果酸購于中國藥品生物制品鑒定所；毛老虎采集于廣西南寧市效區(qū)。2方法2.1對照品溶液的配制精細(xì)稱取熊果酸對照品8.1g，置100l容量瓶中，用無水乙醇超聲溶解，并定容至100l，即得。2.2測定方法取適量標(biāo)準(zhǔn)或樣品溶液，水浴揮干，加5%香草醛-冰醋酸液0.4l，加高氯酸0.8l,置60水浴加熱15in，冰浴冷卻后，加冰醋酸5.0l，搖勻，待測。2.3影響本法的各種因素選擇5%香草醛

5、-冰醋酸溶液用量、高氯酸用量、水浴加熱溫度、水浴加熱時(shí)間等4個(gè)因素，每個(gè)因素選擇3個(gè)程度，編制因素程度表，見表13。表1實(shí)驗(yàn)因素程度略3結(jié)果3.1測定波長選擇分別取樣品及標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，按“測定方法項(xiàng)下處理后，在400650n范圍內(nèi)掃描，對照品溶液和樣品溶液均在550n處有最大吸收，確定550n為測定波長。表2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果略由表2中極差R值大小顯示，各因素作用主次為ADB，因此以A2B23D2為佳，即最正確反響條件為：5%香草醛-冰醋酸液參加量為了0.4l，高氯酸參加量為0.8l，水浴加熱溫度為60，水浴加熱時(shí)間為10in。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.3.2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果取熊果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5l，分別按

6、正交實(shí)驗(yàn)因素程度表中各個(gè)因素進(jìn)展實(shí)驗(yàn)，然后測定吸收度，結(jié)果見表2。3.3方差分析將正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)展方差分析，結(jié)果見表3。表3中方差分析結(jié)果說明，相對于B因素，A因素有顯著性意義。3.4反響穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取適量熊果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“測定方法項(xiàng)下處理，對生成的紫紅色產(chǎn)物的穩(wěn)定性進(jìn)展考察，結(jié)果說明反響產(chǎn)物在1060in內(nèi)進(jìn)展測定較為穩(wěn)定，60in之后吸收度明顯下降。3.5工作曲線精細(xì)汲取熊果酸對照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2l，按“測定方法項(xiàng)下處理，在550n處測定吸收度，以熊果酸濃度為橫坐標(biāo)，吸收值為縱坐標(biāo)，作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為：Y=0.0358X+0.0033,r=0.

7、9997，說明熊果酸在此2.5313.14g/l范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。3.6樣品含量測定取從毛老虎莖中提的3批粉末，在缽體中研勻，60枯燥至恒重。精細(xì)稱取適量于25l容量瓶中，用無水乙醇超聲溶解，并定容至25l，即得。按“測定方法項(xiàng)下，對樣品中總?cè)扑崽崛∥镞M(jìn)展測定，其結(jié)果總?cè)坪繛?.96%，見表4。表3方差分析略表4毛老虎提取物總?cè)扑岷繙y定結(jié)果略3.7回收率實(shí)驗(yàn)精細(xì)稱取含量的樣品，準(zhǔn)確參加熊果酸對照品進(jìn)展測定分析，回收率為99.07%，RSD=1.78%，結(jié)果見表5。表5加樣回收率實(shí)驗(yàn)相當(dāng)于熊果酸量略4討論冰醋酸-香草醛、高氯酸比色法是測定三萜類化合物常用方法，本法測定的可能機(jī)制是三

8、萜酸本身在可見光區(qū)無吸收，經(jīng)過三萜酸中羥基與香草醛構(gòu)造中的醛基進(jìn)展縮合反響，生成紅色的縮合物，通過測定縮合物的量，從而計(jì)算出總?cè)扑岬牧?。?jīng)實(shí)驗(yàn)考證，5%香草醛-冰醋酸0.4l，高氯酸0.6l，水浴溫度60，水浴加熱時(shí)間為10in是熊果酸測定的最正確條件，在550n下，有一個(gè)較好的吸收值。從實(shí)驗(yàn)中知在顯色后1060in內(nèi)較穩(wěn)定，有一個(gè)較準(zhǔn)確的測定值。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，假設(shè)在實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格控制反響條件，其結(jié)果仍較穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，可用于質(zhì)量控制4。參考文獻(xiàn)：1全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編，下冊，第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1978：65.2istraTN,SinghRS,jhaTN,heistrynstituentsfHyptissuavelens.PartI.SpetriesandbilgialstudiesnatriterpeneaidJ.Jur