《體內(nèi)藥物分析實驗》課程教學(xué)大綱（本科）

1、體內(nèi)藥物分析實驗（Bio-pharmaceutical Analysis Experiments）課程代碼：16410047學(xué)分：1.0學(xué)分學(xué)時：32先修課程：分析化學(xué)實驗B、藥物分析實驗A適用專業(yè)：藥學(xué)專業(yè)、藥物制劑專業(yè)教材或?qū)嶒炛笇?dǎo)書：藥物分析實驗自編講義一課程性質(zhì)與課程目標(biāo)（-）課程性質(zhì)體內(nèi)藥物分析是藥學(xué)各相關(guān)專業(yè)教學(xué)計劃中設(shè)置的專業(yè)課程，是實踐性、技術(shù)性、應(yīng)用性很強 的方法學(xué)科，其實驗課程是教學(xué)中不可缺少的重要組成部分，是培養(yǎng)學(xué)生掌握基本操作技能和創(chuàng)新 能力的重要教學(xué)環(huán)節(jié)。通過實驗鞏固和加深學(xué)生對體內(nèi)藥物分析理論知識的理解，掌握生物樣品（血 樣、尿樣）的預(yù)處理方法，掌握體內(nèi)藥物分析的常

2、規(guī)分析方法（紫外分光光度法和高效液相色譜法） 的基本原理及操作，熟悉實驗裝置的結(jié)構(gòu)、性能和操作步驟，培養(yǎng)學(xué)生獨立思考的能力，發(fā)現(xiàn)并解 決問題的能力及實事求是的科學(xué)態(tài)度。（二）課程目標(biāo)1.知識方面：課程目標(biāo)1.1生物樣品（血樣、尿樣）的預(yù)處理方法；課程目標(biāo)1. 2紫外分光光度法的基本原理及使用；課程目標(biāo)1. 3高效液相色譜法的基本原理及使用；課程目標(biāo)1.4熒光分光光度法的基本原理及使用；2.能力與素質(zhì)方面：課程目標(biāo)2.1具備采集各類生物樣品并合理進行預(yù)處理的能力；課程目標(biāo)2. 2掌握常規(guī)分析儀器的工作原理及操作能力；課程目標(biāo)2. 3具備獨立完成實驗數(shù)據(jù)的測定、分析和整理的能力；課程目標(biāo)2. 4對

3、實際工作中出現(xiàn)的問題能獨立思考并解決問題的能力；二、本課程開設(shè)的實驗項目注：1.類型：指驗證性、綜合性、設(shè)計性等;編號實驗項目名稱學(xué)時類型要求支撐的課程目標(biāo)1紫外法測定撲熱息通尿藥濃度8綜合性必做1. 1, 1. 2, 2. 1, 2. 2,2.3, 2.42雙波長法測定氨茶堿的血藥濃度8綜合性必做1, 1.2, 1.4, 2. 1,2, 2. 3, 2.43HPLC法測定藥物在小鼠體內(nèi)的血藥濃度8綜合性必做1. 1, 1.3, 2. 1, 2.2,2.3, 2.44HPLC法測定藥物在小鼠體內(nèi)的組織分布8綜合性選做L 1. 3, 2. 1, 2.2,3, 2.45鍬離子熒光增敏法檢測恩諾沙星

4、及其代謝物環(huán)內(nèi)沙星8綜合性選做1. 1, 1.4, 2.1, 2.2,2.3, 2.42.要求：指必做、選做。實驗1.紫外法測定撲熱息通尿藥濃度(1)目的要求掌握撲熱息痛尿藥濃度的測定原理及方法；掌握撲熱息痛尿藥濃度的測定；(2)方法原理撲熱息痛水解生成對氨基酚，對氨基酚在次漠酸鈉的存在下，能與苯酚產(chǎn)生反應(yīng)，生成靛蘭染 料。(3)主要實驗儀器及原料(略)(4)掌握要點尿樣的預(yù)處理方法及注意事項；紫外分光光度法的使用及注意事項(5)實驗內(nèi)容尿藥標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；尿藥濃度的測定；藥時曲線的制備實驗2.雙波長法測定氨茶堿的血藥濃度(1)目的要求了解氨茶堿學(xué)藥濃度測定的意義；掌握血清樣品的一般預(yù)處理方法

5、；掌握氨茶堿血藥濃度的測 定原理及方法。(2)方法原理茶堿偏酸性，因此在酸性條件下，血清中的茶堿可用有機溶媒提出，并同時沉淀血清蛋白，再 用堿液把茶堿自有機溶媒中提出，然后進行紫外測定，采用雙波長法，即測定波長在274nm和波長298nm處的吸收度差值來定量。(3)主要實驗儀器及原料(略)(4)掌握要點家兔血樣的采集及注意事項；血清樣品的制備及注意事項；雙波長分光光度法的原理及應(yīng)用。(5)實驗內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；血樣的采集；血藥濃度的測定。實驗3. HPLC法測定藥物在小鼠體內(nèi)的血藥濃度(1)目的要求掌握小鼠血漿樣品的預(yù)處理方法；掌握HPLC法的基本原理及使用方法(2)方法原理高效液相色譜法的

6、基本原理；內(nèi)標(biāo)法定量的原理(3)主要實驗儀器及原料(略)(4)掌握要點小鼠血樣的采集及血漿的制備，防止溶血的方法；內(nèi)標(biāo)法定量的原理和注意事項；HPLC使用注 意事項。(5)實驗內(nèi)容血樣采集及血漿樣品的制備；血藥濃度的測定；數(shù)據(jù)處理及血藥濃度經(jīng)時曲線的繪制。實驗4. HPLC法測定藥物在小鼠體內(nèi)的組織分布(1)目的要求掌握小鼠肝臟等組織臟器的預(yù)處理方法；掌握HPLC法的基本原理及使用方法(2)方法原理高效液相色譜法的基本原理；內(nèi)標(biāo)法定量的原理(3)主要實驗儀器及原料(略)(4)掌握要點小鼠肝臟等組織臟器的采集及勻漿液的制備；樣品與處理的方法及注意事項；HPLC使用注意事 項。(5)實驗內(nèi)容各組織

7、臟器的采集及樣品的預(yù)處理；組織中藥物濃度的測定；數(shù)據(jù)處理及藥物在組織中的分布。 實驗5.鉞離子熒光增敏法檢測恩諾沙星及其代謝物環(huán)丙沙星(1)目的要求掌握血樣和尿樣的采集及預(yù)處理方法；掌握鍬離子熒光增敏法檢測的基本原理及實驗注意事項。（2）方法原理恩諾沙星（或環(huán)丙沙星）有Q-酮酸結(jié)構(gòu)，可與錮系離子中的鉞（Tb3+）結(jié)合。恩諾沙星（或環(huán) 丙沙星）吸收外界給予的能量，再以能量轉(zhuǎn)移的形式傳給TV，,使之發(fā)出1V+特征熒光，在545nm處 的熒光強度最強。由于斯托克位移大，可有效排除制劑中的輔料、尿樣和血樣中內(nèi)源性物質(zhì)的干擾。（3）主要實驗儀器及原料恩諾沙星原料藥、恩諾沙星粉，氧化鍬（Tb407）、鹽酸

8、、醋酸、醋酸鈉（4）掌握要點血樣（尿樣）的采集及預(yù)處理；熒光分光光度計的使用。（5）實驗內(nèi)容激發(fā)光譜和發(fā)射光譜的測定；標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；恩諾沙星粉含量測定；血藥濃度或尿藥濃度的 測定及數(shù)據(jù)處理。三 考核與評定（-）實驗項目考核要求.實驗平時表現(xiàn)的要求（1）課前應(yīng)做好預(yù)習(xí)，明確實驗?zāi)康囊?，弄懂實驗原理及操作要點，每次實驗課應(yīng)有準(zhǔn)備 地接受指導(dǎo)教師的提問。（2）在實驗過程中嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，規(guī)范實驗操作，注意基本操作與實驗現(xiàn)象的觀察分析。（3）實驗完畢做好各自實驗臺的清潔工作，公用試劑和儀器用后及時歸位，玻璃器皿用后洗 凈。.實驗報告的要求按規(guī)定的格式獨立完成實驗報告，對實驗現(xiàn)象和實驗數(shù)據(jù)進行整理、分析，并根據(jù)實驗結(jié)果 做出明確的結(jié)論。實驗報告中要體現(xiàn)原始記錄的書寫。（二）實驗課程成績評定實驗課程成績的評定由兩部分組成，其中平時表現(xiàn)占總成績的50%,實驗報告成績占總成績的50%,取所有實驗成績平均值作為最終成績。考核形式考核要求考核權(quán)重備注實驗報告報告書寫規(guī)范、認(rèn)真，數(shù)據(jù)處理結(jié)果準(zhǔn)確50%平時表現(xiàn)預(yù)習(xí)認(rèn)真，操作規(guī)范，結(jié)果正確50%注：1.考核形式包括實驗報告、平時表現(xiàn)（預(yù)習(xí)、操作）、實驗課程考試、答辯等;2.可根據(jù)專業(yè)課程實際情況進行適當(dāng)安排或補充。四、大綱說明本實驗課