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1、實(shí)驗(yàn)二 葉綠體色素提取、分離及理化性質(zhì)鑒定 1高等植物葉綠體色素的種類葉綠素(chlorophyll)類胡蘿卜素(carotenoid)234一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私獠⒄莆杖~綠體色素的提取、分離的原理和方法;了解葉綠體色素的理化性質(zhì);了解葉綠體色素的光學(xué)特性在光合作用中的意義二、原理三、器材與試劑1、儀器:漏斗、大試管、缽體、燒杯、濾紙、蓋玻片、酒精燈2、試劑:乙醇、CaCO3、石英砂、CCl4、鹽酸、醋酸銅、KOH、苯3、材料:菠菜葉片5四、方法葉綠體色素的提取取菠菜葉子10g,剪碎,加石英砂和碳酸鈣少許,乙醇約5ml,研磨成勻漿,再加乙醇15ml,用漏斗過(guò)濾,即為色素提取液。(1)紙層析法分離葉
2、綠體色素 取準(zhǔn)備好的濾紙條(215cm),將其一端剪去兩側(cè)。用蓋玻片蘸取葉綠體色素提取液, 于濾紙的下端窄條的上方中央。然后將濾紙條放入盛有CCl4的燒杯中。(注意:色素線不要浸到液面以下!實(shí)驗(yàn)完畢回收CCl4 )6胡蘿卜素葉黃素葉綠素a葉綠素b7 熒光現(xiàn)象 葉綠素溶液在透射光下呈綠色,在反射光下呈紅色,稱為熒光現(xiàn)象 。(2)葉綠素的熒光現(xiàn)象取上述色素乙醇提取液少許于試管中,在反射光和透射光下觀察色素提取液的顏色有什么不同。反射光下觀察到的溶液顏色 ,即為葉綠素產(chǎn)生的熒光現(xiàn)象。8光e第一單線態(tài)第一三線態(tài)體系間跨越基態(tài)熒光磷光9(3)銅在葉綠素分子中的替代作用取上述色素乙醇提取液少許于試管中,1滴1滴地加入鹽酸,直至溶液出現(xiàn)褐綠色。然后加醋酸銅晶體2-3小粒,慢慢地在酒精燈上加熱溶液,使溶液又產(chǎn)生亮綠色。10去鎂葉綠素銅代葉綠素11(4)黃色素和綠色素的分離將葉綠體色素的提取液4毫升于大試管中,加入1毫升KOH-甲醇溶液,充分搖勻,然后加5毫升苯,搖勻,再沿試管壁慢慢加入11.5ml蒸餾水,輕輕混勻(勿激烈搖蕩),觀察分層現(xiàn)
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