植物化學(xué)成分分離法

1、關(guān)于植物化學(xué)成分分離法第一張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月對溶劑的要求： a. 對所需成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度小，或 反之； b. 不與所需成分起化學(xué)反應(yīng)，即使反應(yīng)也是可 逆的； c. 經(jīng)濟(jì)易得，并具有一定安全性； d. 沸點適中，便于回收反復(fù)使用。第二張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月常用提取溶劑分二大類： 惰性溶劑水、乙醇、甲醇、苯、氯仿、 乙酸乙酯、丙酮等 反應(yīng)溶劑稀酸、稀堿的水溶液或醇溶液第三張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 二、提取方法 a.浸漬法 b.滲漉法 c.煎煮法 d.回流提取法 e.連續(xù)回流提取法第四張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月采

2、用幾種不同極性的溶劑分步提取 常用系統(tǒng)： 己烷乙醚甲醇水 己烷二氯甲烷甲醇水 提供生物試驗樣品第五張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月單一溶劑提取 水： a.胺型生物堿、甙類、有機(jī)酸可直接用水提??； b.雜質(zhì)較多，分離困難加戊醇、辛醇;薄膜濃縮； c.易發(fā)霉發(fā)酵加甲苯、甲醛、氯仿等防腐劑。 有機(jī)溶劑（最常用乙醇）： a.冷提雜質(zhì)較少； b.熱提效率高，但雜質(zhì)亦較多。第六張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月多種溶劑處理 利用所含成分在某種溶劑中溶解度的差異而達(dá)到分離的目的。 例：苦楝皮磨粉苯液醇液油脂類川楝素 苯濃縮 石油醚溶解結(jié)晶60%乙醇減壓濃縮 氯仿提取第七張，PPT共四十三頁

3、，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 兩相溶劑萃取法混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中，由于分配系數(shù)不同而達(dá)到分離的目的。用于脂溶性成分和水溶性成分的分離。分離生物堿時常用 pH 梯度萃取。第八張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 例：從蛔蒿中提取驅(qū)蛔有效成分山道年第九張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 吸附法吸附法的目的：吸附除去雜質(zhì)（鞣質(zhì)色素） 吸附所需物質(zhì)常用吸附劑：氧化鋁、氧化鎂、酸性白土、 活性炭第十張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月例：羊角拗甙的提取羊角拗種子石油醚脫脂95%乙醇醇提液蒸餾至干水溶液熱水溶解濾液粗強(qiáng)心甙粗甙乙酸鉛除雜質(zhì)脫鉛硫酸銨濾液乙醚氧化鎂拌

4、勻乙醇丙酮回流總甙第十一張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 沉淀法利用某些成分與某些試劑產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)而得到分離或除去雜質(zhì)的方法。對所需成分來說，沉淀反應(yīng)是可逆的。最常用的是鉛鹽法。脫鉛方法可通硫化氫氣體，也可用硫酸、磷酸、硫酸鈉、磷酸鈉等。第十二張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月幾種實驗室常用的沉淀劑 常用的沉淀劑 化 合 物 中性乙酸鉛 酸性，鄰位酚羥基化合物，有機(jī)酸，蛋白質(zhì)， 黏液質(zhì)，鞣質(zhì)，樹脂，酸性皂甙，部分黃酮甙 堿式乙酸鉛 上述物質(zhì)，某些甙類，生物堿等堿性物質(zhì) 明礬 黃芩甙 雷氏銨鹽 生物堿 碘化鉀 季胺生物堿咖啡堿、明膠、蛋白 鞣質(zhì) 膽固醇 皂甙 苦味酸、苦

5、酮酸 生物堿 氯化鈣、石灰 有機(jī)酸第十三張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第五節(jié) 透析法利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜，而大分子物質(zhì)不能通過半透膜的性質(zhì)達(dá)到分離的方法。 電透析示意圖第十四張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第六節(jié) 升華法凡具有升華性質(zhì)的化合物，均可用此法進(jìn)行純化。此法簡單易行，但往往不完全，常伴有分解現(xiàn)象，產(chǎn)率低。 例：樟木中的樟腦、茶葉中的咖啡堿、 植物中的苯甲酸等成分的純化。第十五張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 第七節(jié) 結(jié)晶和重結(jié)晶 結(jié)晶的目的在于進(jìn)一步分離純化，便于進(jìn)行化學(xué)鑒定及結(jié)構(gòu)測定工作。純化合物的結(jié)晶有一定的熔點和結(jié)晶學(xué)特征，有利于化

6、合物性質(zhì)的判斷。初析出的結(jié)晶總帶有一些雜質(zhì)，需反復(fù)結(jié)晶，才能得到純粹的單一晶體。第十六張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月一、結(jié)晶的條件需要結(jié)晶的溶液往往呈過飽和狀態(tài)。通常是在加熱的情況下，使化合物溶解過濾除去不溶性雜質(zhì)，濃縮，放冷，析出。一般放置對形成結(jié)晶來說是一個重要條件。濃度適中，逐漸降溫，有可能析出純度較高的結(jié)晶。第十七張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二、結(jié)晶溶劑的選擇對所需成分的溶解度隨溫度的不同而有顯著的差別；不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；其沸點低于化合物的熔點。第十八張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三、制備結(jié)晶的方法 結(jié)晶形成的二個步驟：晶核的形成 結(jié)晶的增長化合物

7、結(jié)晶溶解濃縮過濾靜置第十九張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月如無結(jié)晶析出，可采?。?a. 松動瓶塞； b. 加入少量晶種； c. 用玻璃棒摩擦玻璃容器內(nèi)壁； d. 用干冰降溫； e. 加有機(jī)可溶性鹽類鹽析。第二十張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月四、不易結(jié)晶或非結(jié)晶體的處理若是由于純度不夠，夾雜不純物引起的，需要進(jìn)一步分離純化。若是本身的性質(zhì)，往往需要制備結(jié)晶性的衍生物或鹽，然后用化學(xué)方法處理回復(fù)到原來的化合物。第二十一張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月五、結(jié)晶純度的判斷結(jié)晶形狀：針狀、柱狀、棱柱狀、板狀、 片狀、方晶、粒狀、簇狀、多邊形棱柱狀初步鑒定的依據(jù)：形狀、色澤

8、、熔點薄層層析氣相層析高效液相層析波譜技術(shù)第二十二張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第八節(jié) 層析分離方法一、基本原理 利用不同的物質(zhì)在兩相（固定相和移動相）中不同的平衡分配系數(shù)來進(jìn)行分離。 k = CsCm固定相中的濃度移動相中的濃度第二十三張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二、層析法的分類根據(jù)兩相所處的狀態(tài)來劃分： 液相層析 液-固層析、液-液層析 氣相層析 氣-固層析、氣-液層析 根據(jù)層析過程的機(jī)理來劃分： 吸附層析 液固吸附層析、氣固吸附層析 分配層析 液液分配層析、氣液分配層析 排阻層析 液固排阻層析、氣固排阻層析 離子交換層析 有機(jī)離子交換樹脂 、 纖維素及無機(jī)高分子

9、交換劑第二十四張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三、常用的層析方法 層析填料是決定柱效的主要因素。填料應(yīng)具有的性能是不溶于所使用的流動相中，不使欲分離的物質(zhì)破壞或分解，惰性大，可逆性強(qiáng)，吸附容量大，同時顆粒直徑范圍要窄。1.硅膠層析 層析硅膠為多孔性物質(zhì)，可用通式 SiO2.xH2O表示。其表面有很多游離( )、鍵合( )和鍵合活性( )狀態(tài)的硅醇基，通過氫鍵與極性或不飽和分子相互作用，同時能吸附多量的水分。第二十五張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月硅膠含水量與活性的比較 活性 加入水量（%） 0 5 15 25 38 硅膠的吸附性能取決于硅膠中硅醇基的數(shù)目，其次是含水量，它隨

10、著水分的增加而降低。第二十六張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月層析柱的制備與加樣 濕法裝柱；干法裝柱。 樣品溶于移動相，柱頂加入；樣品溶于適當(dāng)溶劑，拌硅 膠，待溶劑揮發(fā)，加移動相上柱。 應(yīng)用范圍廣，適用于非極性和極性化合物。層析溶劑的選擇 根據(jù)物質(zhì)的極性采用相應(yīng)的極性溶劑來洗脫。硅膠的再生 乙醇或甲醇洗滌，除去溶劑，烘干活化處理。第二十七張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2、氧化鋁層析最常用吸附劑之一，微堿性。 氧化鋁含水量與活性的關(guān)系 活性 加入水量（%） 0 3 6 10 15第二十八張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月洗脫用溶劑 極性溶劑洗脫能力大。氧化鋁再生 甲醇

11、、稀乙酸、稀氫氧化鈉、水依次洗滌，200活化。第二十九張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3、活性炭層析分離水溶性物質(zhì)的主要方法之一。吸附作用在水溶液中最強(qiáng)，在有機(jī)溶劑中較弱。對物質(zhì)的吸附力： 芳香族化合物脂肪族化合物 大分子化合物小分子化合物 極性基團(tuán)多的化合物極性基團(tuán)少的化合物第三十張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月4、離子交換層析影響離子交換的有關(guān)因素 a. 溶液的酸堿度 b.對交換離子的選擇性 c.被交換物質(zhì)在溶液中的濃度 d.溫度的影響 e.溶劑的影響 第三十一張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十二張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月5、大孔吸附樹脂層

12、析不含交換基團(tuán)的具有大孔結(jié)構(gòu)的高分子吸附劑，也是一種親脂性物質(zhì)。吸附力主要依靠分子中的親脂鍵、偶極離子及氫鍵作用。解吸容易，吸附容量大。第三十三張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月6、凝膠層析 固定相凝膠，具有許多孔隙的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的固體，有 分子篩的作用。 親水性凝膠葡聚糖凝膠。 疏水性凝膠在交聯(lián)葡聚糖分子上引如一個基團(tuán)增大其 親脂性 第三十四張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月7、聚酰胺層析分子中含豐富的酰胺基，可與酚、酸、醌、硝基化合物等形成氫鍵結(jié)合而被吸附，與不能形成氫鍵的化合物分離?；衔锓肿又蟹恿u基數(shù)目越多，吸附力越強(qiáng)；芳香核、共軛雙鍵多的吸附力也大。易形成分子內(nèi)氫鍵的化合

13、物，會使化合物的吸附力減弱。第三十五張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月8、快速層析(加壓柱層析)硅膠顆粒400230篩目干法裝柱第三十六張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月9、離心液相層析 優(yōu)點: a.分離周期短 b.操作簡便 離心液相層析分離程序第三十七張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月10、逆流分溶層析按照液液分配原理設(shè)計液滴逆流層析旋轉(zhuǎn)多段式逆流 層析 液滴逆流層析法第三十八張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月11、真空液相層析（減壓柱層析）漏斗內(nèi)裝薄層層析用擔(dān)體;樣品加至柱頂或拌樣加入;每次收集流分都將柱抽干;通常分離30mg25g樣品。第三十九張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月12、 干柱層析用填充劑干裝成的柱進(jìn)行層析分離;是制備性薄層層析的一種改進(jìn);一般柱高不宜超過50cm，直徑在13cm之間;樣品容量與吸附劑量的比例在1：100以上。第四十張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于202