同濟醫(yī)院檢驗科ISO15189體系文件29.氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-DCE）染色

1、同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科血液組項目操作指導書TJYYJYKMY/XMZ129第2版標題氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-DCE）染色第1章 第29節(jié)第 PAGE 4 頁 共 NUMPAGES 4 頁 目的：保證氯化醋酸AS-D萘酚酯酶 適用范圍：氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色 項目名稱：氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色 檢測方法：化學染色 原理：血細胞內的氯化醋酸AS-D萘酚酯酶將基質液中的氯化醋酸AS-D萘酚水解，產(chǎn) 生AS-D萘酚，后者與堅牢紫醬偶聯(lián)形成不溶性紅色沉淀，定位與胞漿內。 試劑；6.1 品牌； 丙酮 上海試劑三廠 37%甲醛 上海試劑三廠磷酸氫二鈉 上海新華化工廠 磷酸二氫鉀 上海試

2、劑二廠氯化醋酸AS-D萘酚 SIGMANN-二甲基甲酰胺溶液 上海華工試劑廠鹽酸 上海試劑三廠付品紅 上海試劑二廠亞硝酸鈉 上海振興試劑廠6.2 貨號： 丙酮 13-20102365II 37%甲醛 13-20102569II磷酸氫二鈉 磷酸二氫鉀 13-001-0802-113II氯化醋酸AS-D萘酚 208-439NN-二甲基甲酰胺溶液 鹽酸 13-001-0806-003II付品紅 亞硝酸鈉 13-0010801220II6.3 包裝規(guī)格： 丙酮 500ml 37%甲醛 500ml磷酸氫二鈉 500g 磷酸二氫鉀 500g氯化醋酸AS-D萘酚 1gNN-二甲基甲酰胺溶液 500ml 鹽酸

3、 500ml付品紅 25g亞硝酸鈉 25g6.4 內含物：6.4.1 固定液：甲醛-丙酮溶液6.4.2 六偶氮付品紅溶液 甲液：40g/L鹽酸付品紅溶液 付品紅 4g 2N鹽酸 100ml 乙液：40g/L亞硝酸鈉溶液 亞硝酸鈉 4g 蒸餾水 100ml應用液： 甲液1份、乙液1份混合，褪至無色即可使用6.4.3 0.067mol/L磷酸鹽緩沖液PH7.66.4.4 基質液：6.4.4.1稱取4mg氯化醋酸AS-D萘酚，加入0.3mlNN-二甲基甲酰胺溶解6.4.4.2加入9.6ml緩沖液（PH7.4）混勻，再加入六偶氮付品紅應用液 儀器：顯微鏡 操作步驟：8.1 新鮮涂片冷固定液固定30秒8

4、.2 水洗待干8.3 浸入基質液，在37水溫箱內孵育1小時8.4 流水沖洗干凈8.5 用蘇木素復染1-2分鐘 線性范圍：無10 參考范圍：油鏡觀察，細胞漿內橘紅色顆粒為陽性11 臨床意義：正常血細胞染色反應11.1 粒細胞系統(tǒng)：原粒細胞為陰性反應或陽性反應，自早幼粒細胞至中性分葉核粒細胞均為陽性反應，酶活性并不隨細胞的成熟而增強。嗜酸性粒細胞為陰性反應或弱陽性反應。嗜堿性粒細胞為陽性反應。11.2 單核細胞系統(tǒng)：為陰性反應，個別單核細胞可呈弱陽性反應。11.3 其他細胞：幼紅細胞，淋巴細胞，漿細胞均呈陰性反應。12 病人準備標本要求：采取病人骨髓液涂片13 注意事項：13.1 標本新鮮13.2 染色時間要充分。13.3 沖洗