甘草活性成分抗呼吸道合胞病毒作用

1、甘草活性身分抗呼吸道合胞病毒作用甘草活性身分抗呼吸道合胞病毒作用【關(guān)鍵詞】甘草；呼吸道合胞病毒；抗病毒作用【摘要】目的研究甘草抗病毒活性身分(gx)體外抗呼吸道合胞病毒(rsv)的作用。要領(lǐng)接納中性紅實行和不雅察細(xì)胞病變(pe)法，以利巴韋林為陽性藥,測定gx對rsv的按捺作用。效果gx的半數(shù)中毒濃度t50為460.00?g/l，半數(shù)有用按捺濃度(e50)為23.53?g/l，治療指數(shù)(ti)為19.55;gx在rsv熏染hela細(xì)胞2，4，6，8，10?h后給藥,對rsv復(fù)制均有顯著的按捺作用(p0.01)；且gx對rsv有中和作用。結(jié)論gx在體外對rsv復(fù)制有顯著的按捺作用?！娟P(guān)鍵詞】甘草

2、；呼吸道合胞病毒；抗病毒作用1工具與要領(lǐng)甘草(產(chǎn)地內(nèi)蒙古，經(jīng)黑龍江省藥品查驗中藥研究所斷定)。利巴韋林注射液(天津藥業(yè)團(tuán)體新鄭股份,批號：0610152)。人宮頸癌傳代細(xì)胞(hela),(中國疾病防范操縱中央病毒研究所)。呼吸道合胞病毒(rsv-lng株)(中國疾病防范操縱中央病毒研究所)。rsv在hela細(xì)胞中的構(gòu)造半數(shù)熏染量(tid50)為110-6.6/0.2?l。本次實行接納100tid50/0.2?l的熏染量。硅膠制備板(安徽良臣硅源質(zhì)料廠)。甲醇、三氯甲烷、無水乙醇等，均為闡發(fā)純(天津市博迪化工)。中性紅(上海華舜生物工程)，用磷酸鹽緩沖液稀釋。脫色液：由無水乙醇、枸櫞酸鈉和鹽酸構(gòu)

3、成。用細(xì)胞維持液將gx和利巴韋林釋為7個濃度組，別離參加到hela細(xì)胞已長成單層的96孔造就板上。同時設(shè)正常細(xì)胞比較組。置35、5%2造就箱造就3?d后，棄去維持液,每孔添加0.2?l中性紅染液,放回造就箱造就2?h。取出后用磷酸鹽緩沖液(pbs)洗2次,添加0.2?l脫色液。室溫暗處安排30?in后,酶標(biāo)儀450?n波長下測吸光度(a)值4，測定細(xì)胞存活率，求藥物半數(shù)中毒濃度(t50)。細(xì)胞存活率=藥物組均勻a值/細(xì)胞比較組均勻a值100%。參照文獻(xiàn)5。實行分3組舉行。(1)藥物的按捺作用：在96孔板上，接種100tid50/0.2?lrsv液，0.2?l/孔。吸附2?h后，別離參加差異濃度

4、的gx和利巴韋林。置造就箱中造就。同時設(shè)正常細(xì)胞比較組和病毒比較組，待病毒比較組細(xì)胞病變(pe)為4時，中性紅實行同上,測定病毒按捺率，求藥物的半數(shù)有用濃度(e50)和治療指數(shù)(ti)。病毒按捺率=實行組(藥物+病毒)均勻a值-病毒比較組均勻a值/正常細(xì)胞比較組均勻a值-病毒比較組均勻a值100%。pe記載規(guī)矩：0為細(xì)胞無pe；1為025%pe；2為25%50%pe；3為50%75%pe；4為75%100%pe。ti=t50/e50。(2)差異時間給藥對rsv按捺作用：向96孔板中，參加100tid50/0.2?lrsv液，0.2?l/孔，別離作用2，4，6，8，10，12?h后吸棄病毒液，再

5、別離參加gx濃度為120.00?g/l和利巴韋林濃度為80.00?g/l，造就要領(lǐng)同上。待病毒比較組pe為4時，記載pe效果。(3)藥物的中和作用：200tid50/0.2?lrsv液與含差異濃度藥物的維持液等體積混淆，35作用2?h后,加到96孔板中，0.2?l/孔。吸附2?h，棄上清，加細(xì)胞維持液，置造就箱中造就。待病毒比較組pe為4時，記載pe效果。2效果按照中性紅實行測定細(xì)胞存活率，lgit回歸盤算得gx的t50為460.00?g/l，利巴韋林的t50為1.01?g/l。經(jīng)lgit回歸要領(lǐng)盤算得gx的e50為23.53?g/l，利巴韋林的e50為12.90?g/l。以是gx的ti為19

6、.55，利巴韋林的ti為78.29；gx在必然濃度時對rsv在hela細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制有顯著的按捺作用。3討論如今，大多數(shù)研究以為甘草中有抗病毒作用的重要身分是甘草酸7和甘草多糖8。實行中，開端驗證gx不是甘草酸和甘草多糖，大概是一種新的抗病毒物質(zhì)，因此，應(yīng)對gx化學(xué)布局舉行深化研究。體外研究不克不及充實表現(xiàn)藥物在體內(nèi)的生化轉(zhuǎn)化效應(yīng),本實行有待于在動物體內(nèi)查驗其抗rsv的作用；gx是通過按捺病毒核酸復(fù)制,照舊通過制止病毒卵白合成，而實現(xiàn)對rsv復(fù)制的按捺，其詳細(xì)作用機(jī)制尚需研究。【參考文獻(xiàn)】1luiafb.preventinfrespiratrysynytialvirusinfetinj.revh

7、splinfaedsapaul,2001,56(3):79-90.2朱丹,劉華剛.抗病毒中藥的最新研究希望j.中國醫(yī)學(xué)文摘：內(nèi)科學(xué)，2022，26(6)：747-748.3劉鑫妍，李洪源，王秀琴，等.甘草抗病毒有用部位(g3-1-4)體外按捺呼吸道合胞病毒的研究j.中醫(yī)藥信息，2022，234：65-67.4arkrp,dalelb,paulft.ptentinhibitinfrespiratrysynytialvirusrepliatinusinga2-5a-antisensehieratargetedtsignalsithinthevirusgenirnaj.prnatlaadsiusa，1998,95(15):8874-8879.5何靜，楊占秋，石麗橋，等.鹽酸阿比朵爾抗呼吸道合胞病毒機(jī)制初探j(luò).武漢大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版,2022,27(1)：69-71.6劉昌孝，孫瑞元.藥物評價實行方案與統(tǒng)計學(xué)底子.北京:軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出書社，1999：31-32.7jeffre