2022醫(yī)學(xué)課件卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)

1、3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)一、教學(xué)目標(biāo)：1.簡(jiǎn)述哺乳動(dòng)物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。2.簡(jiǎn)述哺乳動(dòng)物胚胎的早期培養(yǎng)方法。3.認(rèn)同體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。二、教學(xué)重點(diǎn)：1.體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。2.哺乳動(dòng)物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。三、教學(xué)難點(diǎn)：1. 卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)。2. 精子的采集和獲能。第一頁(yè)，共三十二頁(yè)。1978年7月25日世界首例試管嬰兒第二頁(yè)，共三十二頁(yè)。1988年3月10日我國(guó)首例試管嬰兒第三頁(yè)，共三十二頁(yè)。1992年我國(guó)首例三胞胎試管嬰兒第四頁(yè)，共三十二頁(yè)。根據(jù)資料答復(fù)以下問題：1.資料上用到了什么生物技術(shù)？ 試管嬰兒技術(shù)包括體外受精、胚胎體外培

2、養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)。2.試管嬰兒和母親正常懷孕，生產(chǎn)的過程有何異同？相同之處：都通過有性生殖產(chǎn)生，在母體子宮內(nèi)發(fā)育形成胎兒。不同之處：受精作用在體外，并在體外發(fā)育成早期胚胎進(jìn)行胚胎移植。第五頁(yè)，共三十二頁(yè)。試管動(dòng)物技術(shù)： 通過 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育成 后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。體外條件人工操作早期胚胎第六頁(yè)，共三十二頁(yè)。國(guó)產(chǎn)奶牛：年均產(chǎn)奶量3000公斤左右國(guó)際良種奶牛：年均產(chǎn)奶量10000公斤左右引進(jìn)一頭良種成年奶牛需要3萬5萬元；牛的生育率低，一頭牛一胎只生一只，一生只能生育四五次。牛的生育率雖然很低，但是牛的卵母細(xì)胞卻相當(dāng)?shù)亩?，其卵巢中卵母?xì)胞數(shù)目要比一生中排卵數(shù)多

3、1000倍左右；公牛產(chǎn)生的精子數(shù)目就更多了。一、從試管牛說起第七頁(yè)，共三十二頁(yè)。試管動(dòng)物技術(shù)過程：第一步：體外受精 第二步：胚胎的早期培養(yǎng)第三步：胚胎移植第八頁(yè)，共三十二頁(yè)。胚胎移植采集良種母牛的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場(chǎng)采集卵巢中的卵母細(xì)胞“試管牛工廠化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖第九頁(yè)，共三十二頁(yè)。1982年世界首例試管牛犢問世 實(shí)現(xiàn)良種?？焖俅罅糠敝呈紫纫龅氖?和 的培養(yǎng)。體外受精早期胚胎第十頁(yè)，共三十二頁(yè)。 主要包括 、 和 等幾個(gè)主要步驟 。概念：采取雌性動(dòng)物的 和雄性動(dòng)物的 ，使其在 中受精。二、體外受

4、精卵母細(xì)胞精子試管卵母細(xì)胞的采集精子的獲取受精第十一頁(yè)，共三十二頁(yè)。1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng) 對(duì)不同動(dòng)物,采集卵母細(xì)胞的方法不同。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如小鼠、兔，以及家畜豬、羊等卵細(xì)胞的采集： 最常用的方法是卵巢經(jīng)過 處理，具體做法是給供體注射 ，使一頭母畜一次排出比自然情況下多幾倍到十幾倍的卵子，之后從 中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。超數(shù)排卵促性腺激素輸卵管第十二頁(yè)，共三十二頁(yè)。 大家畜或大型動(dòng)物，如牛，卵細(xì)胞的采集： 從屠宰場(chǎng)已屠宰母畜的 中采集卵母細(xì)胞，也可以借助 、 或 等工具確定卵泡位置，直接從活體動(dòng)物中吸取泡卵液連同卵母細(xì)胞取出，在體外進(jìn)行人工培養(yǎng)，使其成熟。卵巢超聲波(B超)探測(cè)

5、儀內(nèi)窺鏡腹腔鏡第十三頁(yè)，共三十二頁(yè)。牛卵巢第十四頁(yè)，共三十二頁(yè)。B超活采儀第十五頁(yè)，共三十二頁(yè)。第十六頁(yè)，共三十二頁(yè)。B超引導(dǎo)法： 借助超聲波探頭和屏幕的引導(dǎo)，從活母畜卵巢采集卵母細(xì)胞。操作員先將帶有超聲波探頭和采卵針的采卵器通過陰道插入子宮，同時(shí)通過將卵巢貼在探頭上。根據(jù)B超屏幕所顯示的卵泡位置，利用采卵針穿刺卵泡并同時(shí)抽吸卵母細(xì)胞。第十七頁(yè)，共三十二頁(yè)。第十八頁(yè)，共三十二頁(yè)。第十九頁(yè)，共三十二頁(yè)?；铙w采集的牛卵母細(xì)胞第二十頁(yè)，共三十二頁(yè)。第二十一頁(yè)，共三十二頁(yè)。卵母細(xì)胞的成熟培養(yǎng)：CO2培養(yǎng)箱第二十二頁(yè)，共三十二頁(yè)。培養(yǎng)箱第二十三頁(yè)，共三十二頁(yè)。培養(yǎng)箱第二十四頁(yè)，共三十二頁(yè)。2.精子的收集

6、和獲能 收集精子的方法有：假陰道法手握法電刺激法第二十五頁(yè)，共三十二頁(yè)。 在體外受精前，要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理。通常采用的體外獲能方法有 和 兩種。 對(duì)于 、 和 的精子，一般采用培養(yǎng)法；對(duì)于 、 等家畜的精子常用化學(xué)法。培養(yǎng)法：精子在獲能液中獲能?；瘜W(xué)誘導(dǎo)法：精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中，用化學(xué)藥物誘導(dǎo)獲能。培養(yǎng)法化學(xué)誘導(dǎo)法嚙齒動(dòng)物家兔豬牛羊第二十六頁(yè)，共三十二頁(yè)。3.受精 獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子，一般情況下在 或中完成受精過程。獲能溶液專用受精溶液第二十七頁(yè)，共三十二頁(yè)。三、胚胎的早期培養(yǎng)概念：是應(yīng)用人工創(chuàng)造條件，對(duì)獲取的 進(jìn)行體外培養(yǎng)。培養(yǎng)液成分：水、無機(jī)鹽、糖

7、類、維生素、氨基酸、激素、核苷酸、血清等早期胚胎第二十八頁(yè)，共三十二頁(yè)。 不同動(dòng)物胚胎移植時(shí)間不同牛、羊：桑椹胚或囊胚階段小鼠、家兔：卵裂期或囊胚階段試管嬰兒：8個(gè)或16個(gè)細(xì)胞階段 胚胎培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時(shí)，可將其取出向受體移植或冷凍保存。第二十九頁(yè)，共三十二頁(yè)。第三十頁(yè)，共三十二頁(yè)。 試管動(dòng)物 與 克隆動(dòng)物相比生殖方式：技術(shù)手段：遺傳規(guī)律：有性生殖 無性生殖核移植技術(shù)、胚胎移植遵循 無體外受精胚胎移植第三十一頁(yè)，共三十二頁(yè)。內(nèi)容總結(jié)3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)。1. 卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)。2. 精子的采集和獲能。試管嬰兒技術(shù)包括體外受精、胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)。胚胎移植。對(duì)不同動(dòng)物,采集卵母細(xì)胞的方法不同。等工具