“三黃補血湯”對失血小鼠的補血作用評價

1、“三黃補血湯對失血小鼠的補血作用評價【摘要】目的研究三黃補血湯對失血小鼠的補血作用。方法以剪尾法造失血模型，以紅細胞RB、白細胞B、血紅蛋白Hgb、促紅細胞生成素EP為研究指標，評價三黃補血湯的補血效果。結(jié)果造?？墒辜t細胞數(shù)和白細胞數(shù)減少、血紅蛋白含量降低,三黃補血湯有明顯的增加紅細胞和白細胞數(shù)量、血紅蛋白含量及EP程度。結(jié)論三黃補血湯顯著的補血效果，有進一步研究的意義?！娟P(guān)鍵詞】三黃補血湯紅細胞細胞血紅蛋白促紅細胞生成素“三黃補血湯是中藥成方中補血作用較強的一個復(fù)方，見于明代張潔所著?仁術(shù)便覽?1，其屬于中藥四物湯的類方，由熟地、生地、牡丹皮、黃芪、柴胡、歸身、川芎、升麻、白芍等多味藥物組成

2、，有補血益氣及升陽之功，用以治療亡血血虛，六脈俱大，按之空虛者。本實驗以紅細胞RB、白細胞B、血紅蛋白Hgb、促紅細胞生成素EP為研究指標，研究三黃補血湯對失血性貧血小鼠的補血效果。1儀器、藥品與試劑LYPUSBX51顯微鏡，LYPUSDP70顯微攝像頭，SysexF-820半自動血球計數(shù)儀。中藥熟地、生地、牡丹皮、黃芪、柴胡、歸身、川芎、升麻、白芍均購自武漢市國藥集團。EP試劑盒(H-162)s-7956Lt.#A2505，SantaruzBitehnlgyin,USA；FIT標記羊抗兔IgG(ZF-0311)Lt.G942496，產(chǎn)地美國Piere。實驗用小鼠由華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院實驗動

3、物房提供。2方法2.1中藥的分組及提取中藥根據(jù)文獻1的相關(guān)記載，確定方劑組成及藥物劑量，將藥物提齲提取方法：藥材粉碎至一定細度，加8倍量水，浸泡30in，煎煮30in，傾出藥液，壓濾，藥渣參加4倍量水，煎煮25in，壓濾。2次煎煮均回收餾出液。合并液體，減壓濃縮至一定濃度，參加乙醇至終濃度達60%，低溫存放48h，過濾沉淀，回收乙醇，調(diào)整至藥材與溶液量比gl為12。2.2給藥量確實定根據(jù)文獻2中動物與人體表比換算法,由成人劑量換算成小鼠用藥量。2.3血虛動物模型的制備根據(jù)文獻3取小鼠，以75%酒精擦拭尾部使血管擴張，充血后剪去尾端0.250.3，然后將尾端傷口浸入37溫水中,直至小鼠失血0.5

4、l。2.4給藥及取血方法將實驗小鼠分為正常組、手術(shù)組不給藥、手術(shù)后給藥組。各組動物為10只，其中手術(shù)組與給藥組共3組均需按血虛動物模型制備方式處理，而給藥組共3組在失血后1h給予藥物，按照人與鼠的體外表積折算給藥量，灌胃2次/d。共飼養(yǎng)3d，第4天早晨斷頭取血，搜集血液。2.5RB、B、Hgb、EP測試進展RB、B及Hgb測試,用SysexF-820半自動血球計數(shù)儀進展測定；運用免疫熒光法對EP含量進展測定，老鼠血液離心1500r/in,10in取上清液，涂片，加EP試劑1200孵育12h，再加FIT標記羊抗兔IgG反響30in，在熒光顯微鏡觀察。3結(jié)果動物實驗后表現(xiàn):手術(shù)組小鼠手術(shù)后出現(xiàn)緊張

5、、煩躁。第2天觀察，逐漸出現(xiàn)精神活動欠佳,毛欠光澤,少飲少食的現(xiàn)象。給藥組手術(shù)后也出現(xiàn)緊張，但第2，3天食量及活動量均未與正常組相比有明顯變化；隨著實驗天數(shù)的增加，正常組小鼠體重呈穩(wěn)步增長趨勢,手術(shù)組及各給藥組小鼠,其體重與正常組比擬無顯著性差異。給藥4d后,模型組小鼠出現(xiàn)精神萎靡,活動緩慢,聚堆,蜷臥,嗜睡,尾色蒼白,給藥組小鼠行為活動趨于正常。RB、B、Hgb測試結(jié)果見表1。EP測試結(jié)果見圖13。表1RB，B及Hgb測試結(jié)果略轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.4討論貧血通常是指外周血中血紅蛋白濃度、紅細胞計數(shù)和或紅細胞壓積低于同年齡和同性別正常人的最低值，其中以血紅蛋白濃度低于正常值最為重要。按中醫(yī)理

6、論解釋，血虛當以補血為治療手段，但血虛易產(chǎn)生血行凝滯現(xiàn)象，所以加活血行氣藥；血虛還應(yīng)滋陰，通過配伍到達補血效果。現(xiàn)代研究說明，處方中熟地3、當歸4單用均有補血作用，而升麻、白芍、生地、黃芪、柴胡、牡丹皮、川芎均是按中醫(yī)理論參加的藥物：升麻、川芎入氣分，柴胡溝通表里，黃芪補氣，生地、白芍、牡丹皮滋陰?，F(xiàn)有資料顯示，黃芪甲苷等成分有補血功能5；升麻有降血壓及擴張外周血管功能6；白芍有抑制血小板聚集和鎮(zhèn)痛的作用7；柴胡有降低血壓及鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜作用8；牡丹皮有保護心肌,防止血小板聚集等作用9,均對失血后引起的某些病癥有改善。從實驗結(jié)果來看,三黃補血湯全方有明顯的增加紅細胞和白細胞數(shù)量及血紅蛋白含量的效果

7、，使血清EP程度增高。結(jié)果顯示三黃補血湯有明顯的療效?！緟⒖嘉墨I】1明張潔.仁術(shù)便覽.北京：人民衛(wèi)生出版社，1985：173.2陳奇.中藥藥理實驗方法.北京：人民衛(wèi)生出版社，1994：206.3馮雪梅，呂艷，祝彼得，等.熟地和制首烏多糖對貧血小鼠骨髓有核細胞數(shù)和細胞周期的影響J.四川中醫(yī)，2022，24(6):71.4陳慧珍.當歸的研究進展J.海峽藥學(xué)，2022，208：38.5古今.當歸補血湯中黃芪對小鼠造血功能的影響J.中國中醫(yī)根底醫(yī)學(xué)雜志，2022，15(3)：215.6林玉萍，邱明華，李忠榮.升麻屬植物的化學(xué)成分與生物活性研究J.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2002，14(6):58.7陳四平，張浩，李相沖，等.中藥白芍的研究進展J.承德醫(yī)學(xué)院