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文檔簡介
雙向免疫擴散試驗 臨床免疫學檢驗教研室實驗目的1. 掌握雙向免疫擴散實驗的原理，操作方 法；2. 正確理解抗體效價的含義；（1:2/1:4）實驗原理本質上屬于固相免疫沉淀反應；抗原和抗體分別在含有電解質的固相介質孔中, 各自向四周擴散, 若抗體抗原相對應, 則在比例適宜處形成沉淀線；若將待檢抗體做系列倍比稀釋，可以根據白色沉淀線逐漸消失的情況確定抗體的效價。試劑與材料1. 已知濃度的抗原： 人IgG2. 1.5%瓊脂糖: 生理鹽水配制3. 生理鹽水4. 載玻片, 移液管,打孔器, 針頭，移液器, 濕盒，5. 待測抗血清實驗步驟1. 標記 2. 制板（45ml瓊脂糖溶液/玻璃板; 靜置待凝） 3. 打孔（梅花形，間距保持45mm） 4. 固定（過火56次） 5. 準備抗血清（1/2；1/4；1/8；1/16） 6. 加樣（10l/孔）7.溫育結果判斷：出現(xiàn)沉淀線的最高抗體稀釋度即為該抗體在對應抗原濃度下的效價。注意事項:自己總結思考題:1. 如何根據雙擴實驗中沉淀線的狀態(tài)對抗原和抗體的性質進行分析？梅花形加樣
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