糖化血紅蛋白

1、糖化血紅蛋白測定臨床意義主講人：王秀第1頁糖尿?。―M）糖尿病是由遺傳原因、免疫功效紊亂、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神原因等各種致病因子作用于機體造成胰島素功效減退、胰島素抵抗等而引發(fā)糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水和電解質(zhì)等一系列代謝紊亂綜合癥。第2頁我國糖尿病現(xiàn)實狀況伴隨國內(nèi)人民生活水平提升，膳食結(jié)構(gòu)和生活方式改變造成了與糖脂代謝紊亂相關(guān)疾病迅猛增加。其中，糖尿病人群已靠近1億，糖尿病前期人群大約2億但我國患者知曉率、治療率和達(dá)標(biāo)率卻很低！知曉率（36.1%）治療率（33.4%）糖尿病患者血糖控制率（13.5%） 現(xiàn)在，我國已成為世界上糖尿病人口最多國家。第3頁糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白為血紅蛋

2、白兩條鏈N端頡氨酸與葡萄糖化合而成。是不可逆反應(yīng)，其量與血糖濃度成正相關(guān)，其中以HBA1C為主。紅細(xì)胞在血循環(huán)中壽命為120天，所以能夠觀察到之前120天平均血糖水平。第4頁HBA1C與血糖區(qū)分空腹血糖和餐后血糖反應(yīng)某一詳細(xì)時間血糖水平，輕易受到進食和糖代謝等相關(guān)原因影響。糖化血紅蛋白不受抽血時間、是否空腹、是否使用胰島素等原因干擾，能夠穩(wěn)定可靠反應(yīng)出檢測前120天內(nèi)平均血糖水平。第5頁國內(nèi)當(dāng)前糖尿病診療標(biāo)準(zhǔn)確診為糖尿病1.含有經(jīng)典癥狀，空腹血糖7.0mmol/l或餐后血糖11.1mmol/l2.沒有經(jīng)典癥狀，僅空腹血糖7.0mmol/l或餐后血糖11.1mmol/l者應(yīng)再重復(fù)一次3.沒有經(jīng)典

3、癥狀，僅空腹血糖7.0mmol/l或餐后血糖11.1mmol/l者OGTT2h血糖11.1mmol/l者能夠確診為糖尿病可排除糖尿病OGTT 2h血糖7.8-11.1mmol/l為糖耐量減低；如空腹血糖6.1-7.0mmol/l為空腹血糖受損，均不診療為糖尿病。若餐后血糖7.8MMOL/L及空腹血糖5.6mmol/l能夠排出糖尿病。第6頁HBA1C特點與血糖值相平行血糖越高，糖化血紅蛋白就越高，所以能反應(yīng)血糖控制水平。生成遲緩因為血糖是不停波動，每次抽血只能反應(yīng)當(dāng)初血糖水平，而糖化血紅蛋白則是逐步生成，短暫血糖升高不會引發(fā)糖化血紅蛋白升高；反過來，短暫血糖降低也不會造成糖化血紅蛋白下降。因為吃

4、飯不影響其測定，故能夠在餐后進行測定。第7頁HBA1C特點一旦生成就不易分解糖化血紅蛋白相當(dāng)穩(wěn)定，不易分解，所以它即使不能反應(yīng)短時間內(nèi)血糖波動，卻能很好反應(yīng)較長時間血糖控制效果，能反應(yīng)采血前2-3個月內(nèi)平均血糖水平。較少受血紅蛋白水平影響糖化血紅蛋白是指其在總血紅蛋白中百分比，所以不受血紅蛋白水平影響。第8頁HBA1C臨床意義評價糖尿病長久控制水平，反應(yīng)出病人在抽血前2-3個月內(nèi)平均水平可作為糖尿病病情監(jiān)測指標(biāo)，亦可作為輕癥、型、“隱性”糖尿病早期診療指標(biāo)作為監(jiān)測指標(biāo)來了解患者近階段血糖控制情況，以及估價糖尿病慢性并發(fā)癥發(fā)生與發(fā)展情況第9頁HBA1C臨床意義對預(yù)防糖尿病孕婦巨大胎兒，畸形胎，死

5、胎，以及急慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展監(jiān)督含有主要意義對于病因還未明確昏迷或正在輸注葡萄糖（測血糖當(dāng)然增高）搶救者，糖化血紅蛋白含有判別診療價值對于糖化尤其增高糖尿病患者，應(yīng)警覺如酮癥酸中毒等急性并發(fā)癥發(fā)生第10頁HBA1C控制標(biāo)準(zhǔn)中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會推薦普通HBA1C目標(biāo)值為9%:血糖控制很差，是慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展危險原因，可能引發(fā)糖尿病性腎病、動脈硬化、白內(nèi)障等并發(fā)癥，并有可能出現(xiàn)酮癥酸中毒急性合并癥第11頁血糖達(dá)標(biāo)三個標(biāo)準(zhǔn)空腹血糖控制在4.4-6.1mmol/l之間餐后兩小時血糖控制在4.4-8.0mmol/l之間糖化血紅蛋白控制在6.5%以下到達(dá)理想控制目標(biāo)，即不但要控制基礎(chǔ)狀態(tài)下空腹高血糖，還

6、要控制負(fù)荷狀態(tài)餐后高血糖，者兩個血糖都控制好了，糖化血紅蛋白才能到達(dá)理想水平，進而延緩解預(yù)防各種并發(fā)癥發(fā)生。第12頁HBA1C臨床使用周期美國糖尿病協(xié)會提議：1.血糖控制滿意且穩(wěn)定糖尿病患者，最少一年測兩次2.若血糖控制不滿意且需調(diào)整方案，應(yīng)一年測四次3.計劃懷孕糖尿病婦女早期每個月測一次；血糖控制滿意后，應(yīng)每6-8周測一次,直到受孕第13頁HBA1C監(jiān)測注意事項糖化血紅蛋白可作為糖尿病普查和健康檢驗項目，但不能取代糖耐量試驗作為糖尿病診療依據(jù)對昏迷病人判別：在腦血管急癥時，因為應(yīng)急反應(yīng)可使血糖增高，但糖化血紅蛋白監(jiān)測正常。若糖化血紅蛋白增高則預(yù)示患者處于高血糖狀態(tài)糖化血紅蛋白很高患者要警覺酮

7、癥酸中毒發(fā)生對于妊娠糖尿病僅測定血糖是不夠，一定要監(jiān)測糖化血紅蛋白，并使其保持在8%以下。如此可防止巨大胎兒、死胎和畸形胎發(fā)生指導(dǎo)治療第14頁HBA1C檢測方法糖化血紅蛋白檢測方法很多，慣用有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫熒光、離子捕捉、電泳法等。金標(biāo)準(zhǔn)：高壓液相法（HPLC）第15頁HBA1C檢測試劑盒（HPLC法）包裝規(guī)格400人份預(yù)期用途用于體外定量檢測人全血中糖化血紅蛋白A1C。該試劑盒與Bio-Rad血紅蛋白測試系統(tǒng)（D-10 Hemoglobin Testing System）配合使用，采取離子交換高壓液相法測定人全血中糖化血紅蛋白。第16頁檢測原理Bio-Rad血紅

8、蛋白測試系統(tǒng)（D-10 Hemoglobin Testing System）應(yīng)用離子交換高壓液相法（HPLC）對人全血中糖化血紅蛋白A1c自動化和準(zhǔn)確測定。標(biāo)本可被自稀釋，之后注入分析柱。血紅蛋白測試系統(tǒng)（D-10 Hemoglobin Testing System）將預(yù)先編程設(shè)置由低到高離子濃度緩沖液注入系統(tǒng)，在這一過程中，血紅蛋白經(jīng)和柱中物質(zhì)離子反應(yīng)后到達(dá)分離。處理好樣本自動被注入分析通路，分離血紅蛋白隨即在流經(jīng)光感測量計時，測量其在415nm光波吸收情況。血紅蛋白測試系統(tǒng)（D-10 Hemoglobin Testing System）臨床數(shù)據(jù)處理軟件（CDM）將每次分析過程中搜集到數(shù)據(jù)還

9、原。此間要經(jīng)過兩個水平計算。然后得出分析結(jié)果和分析圖譜，A1c峰被截斷，該面積計算使用了指數(shù)模式高斯對數(shù)（EMG），這么計算已經(jīng)排除了可變部分A1c和氨基甲酰血紅蛋白等干擾成份。第17頁試劑盒主要組成成份產(chǎn)品目錄號名稱描述數(shù)量220-0110清洗緩沖液1Bis-Tris磷酸鹽緩沖液，PH值6.02瓶*ml220-0111清洗緩沖液2Bis-Tris磷酸鹽緩沖液，PH值6.71瓶*1000ml220-0112洗液/稀釋液去離子水。1瓶*1600ml220-0113分析柱陽離子交換柱1個220-0115軟盤含糖化血紅蛋白A1c檢測試劑盒（HPLC法）參數(shù)1個220-0118校準(zhǔn)品/校準(zhǔn)品稀釋液校準(zhǔn)

10、品：凍干人紅細(xì)胞裂解劑。校準(zhǔn)品稀釋液：去離子水校準(zhǔn)品1：3瓶*7ml校準(zhǔn)品2：3瓶*7ml校準(zhǔn)品稀釋液1瓶*100ml220-0148全血灌注液凍干人紅細(xì)胞裂解劑4瓶*1.0ml220-0149樣本管聚丙烯小管，蓋子可穿透100個*1.5ml第18頁試劑盒組成成份注意事項：血紅蛋白測定系統(tǒng)是按照每個月200個或200個以上測試以及每次運行4個或4個以上樣原來計算緩沖液水平和廢液水平。低測試量用戶可能在警告信息顯示前就用完緩沖液并充滿外部廢液桶。每次運行前要目測檢測緩沖液水平和廢液水平。第19頁試劑儲存條件及使用期清洗緩沖液1，清洗緩沖液2，洗液/稀釋液和分析柱在15-30保留，使用期為2年。校

11、準(zhǔn)品/校準(zhǔn)品稀釋液和全血灌注液在2-8保留，使用期為2年。第20頁樣本要求樣本搜集 全血樣本應(yīng)搜集在含EDTA真空采血管中。全血樣本在2-8可保留7天，或在室溫（15-30）保留3天。樣本準(zhǔn)備 1樣本管在使用前應(yīng)到達(dá)室溫（15-30），在室溫下樣本可保留3天。將樣本管放在D-10標(biāo)本架上，隨即放入機器。確保標(biāo)本條形碼朝向儀器后方。對特殊12，13和14mm直徑管子可參見內(nèi)附說明。對16mm管子去除其內(nèi)插部分。高度為75mm到100mm管子能夠使用。 2若樣本管形狀或型號不規(guī)則，或樣本管中樣本小于2.0ml,則需先稀釋樣本，吸收1.5ml稀釋洗液/稀釋液加入1.5ml安瓶中，接著加入5l全血，蓋

12、好蓋，徹底震蕩。然后用1.5ml載管裝好。 第21頁試劑準(zhǔn)備和保留參考當(dāng)前批號校準(zhǔn)液和質(zhì)控液中說明書來獲取參考值及其范圍。當(dāng)更換不一樣批號試劑和分析柱時，一定要從對應(yīng)軟盤上安裝對應(yīng)參數(shù)。清洗緩沖液和洗液/稀釋液1.在使用前清洗緩沖液和洗液/稀釋液應(yīng)將其平衡至室溫（15-30）2.未開封前清洗緩沖液和洗液/稀釋液在室溫可保留至使用期，開封后在室溫可保留8周。3.在完成200個測試后，應(yīng)安裝一瓶新清洗緩沖液1.安裝完試劑后在窗口上重新設(shè)置液量。4.不一樣批號洗液/稀釋液能夠交換。第22頁全血灌注液安裝新分析柱時應(yīng)使用新復(fù)溶全血灌注液。1.全血灌注液在2-8可穩(wěn)定保留至使用期。2.將1ml去離子水加

13、入瓶內(nèi)復(fù)溶全血灌注液。3.輕搖瓶體使之溶解和充分混合。4.在室溫下靜置10-15分鐘。5.在標(biāo)簽上注明復(fù)溶日期，復(fù)溶全血灌注液在2-8可穩(wěn)定保留一天。第23頁質(zhì)控Bio-rad lyphochek 糖尿病質(zhì)控在使用前以1：300百分比稀釋。吸收1.5ml洗液/稀釋液加入一個貼好標(biāo)簽1.5ml樣品管中，隨即加入5微升復(fù)溶質(zhì)控。試劑失效或變質(zhì)說明假如試劑在運輸過程中冷凍了，在安裝前要輕輕顛倒混勻。不要使用變色，渾濁或有沉淀試劑。不要使用有遺漏試劑。不要使用凍干品是棕色或瓶子損壞校準(zhǔn)品或全血灌注液。如凍干品中有不溶解物質(zhì)，則應(yīng)丟棄，不能使用。第24頁參考范圍下述范圍可作為結(jié)果并加以解釋。然而糖尿病病程、治療好壞、發(fā)病年紀(jì)等原因在評定血糖控制程度上加以考慮。這些結(jié)果均為非孕婦者數(shù)值?！皯?yīng)采取辦法”應(yīng)視個人詳細(xì)情況而定。這些辦法包含糖尿病病人加強教育，與醫(yī)療小組協(xié)作，參考內(nèi)分泌醫(yī)師意見，改變治療方式，加強自我血糖監(jiān)測，更多接觸病人等。HbAIc(%) 血糖控制程度 8 提議增加辦法（仍含有心、腦、腎等并發(fā)癥高風(fēng)險度） 7 控制達(dá)標(biāo)（I型糖尿病人可能有低血糖，一些糖耐量不良或亞臨床型可有血紅蛋白增高） 6 非糖尿病水平第25頁檢驗結(jié)果解釋為了取得可接收準(zhǔn)確結(jié)果，應(yīng)遵從以下標(biāo)準(zhǔn)：D-10已經(jīng)經(jīng)過了測定測試。校準(zhǔn)/稀釋液內(nèi)附材料中相關(guān)于斜率和截距參