臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)2018講義

1、第十一章 生物素-親和素放大技第一節(jié) 生物素第十一章 生物素-親和素放大技第一節(jié) 生物素的理化性質(zhì)與標(biāo)（biotinB一、活化生物（一）（二）標(biāo)記蛋白質(zhì)醛基的活化生物素有兩種：生物素酰肼（BHZ）和肼化生物胞素（BGHZ）DNA二、生物素標(biāo)記蛋（一）（二）（三）第二節(jié) 親和素、鏈霉親和素的理化性質(zhì)與標(biāo)一、親和素及其活能結(jié)合 4 個(gè)分子的生物素，二者之間的親和力極強(qiáng)二、鏈霉親和素及其活能結(jié)合 4 個(gè)分子的生物素，二者之間的親和力極強(qiáng)二、鏈霉親和素及其活65kD三、親和素（或鏈霉親和素）的標(biāo)抗原或抗體、鐵蛋白和熒光蛋白等，其中最常用的是酶、異硫 酸熒光素（FITC）和膠體金。親和素（或鏈霉親和素）

2、（一）（二）（SA）因表面所帶正電荷少，且不含糖基，在實(shí)驗(yàn)中的非特異性。第三節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)的特應(yīng)體系中反應(yīng)物的分離、純化。BAS一、靈敏度：每個(gè)親和素分子有四個(gè)生物素結(jié)合部位，因此，BAS 具有多級(jí)放大作用，使其在應(yīng)用時(shí)二、特異性：親和素與生物素間的結(jié)合具有極高的親和力，其反應(yīng)呈高度專一性。而且，BAS 結(jié)合三、穩(wěn)定性：親和素與生物素間的親和常數(shù)極高，結(jié)合形成的復(fù)合物的解離常數(shù)很小，呈不可逆反四、適用性：生物素和親和素可與酶、熒光素和放射性核素等各類標(biāo)記技術(shù)結(jié)合，用于檢測(cè)體液、BAS第四節(jié) BAS第四節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)的應(yīng)一、生物素-親和素系統(tǒng)基本類型及原（LAB）BAB 法 BA

3、B 法也稱為橋聯(lián)親和素-標(biāo)記生物素法（BRAB），是以游離的親和素（或鏈霉親和素）作為橋ABCABCBAB（或鏈霉親和素）與酶標(biāo) 生物素結(jié)合，形成可溶性的親和素（或鏈霉親和素）-生物素-過氧化物酶復(fù)合物（ABCSABC）。當(dāng)其與 檢測(cè)反應(yīng)體系中的生物素化抗體（直接法）或生物素化第二抗體（間接法）相遇時(shí)，ABC（SABC）中未飽BABA（LAB）法是以標(biāo)記親和素（或鏈霉親和素）二、生物素-親和素系統(tǒng)在酶免疫測(cè)定中的（一）將 BAS 與 ELISA 偶聯(lián)可提高 ELISA 的靈敏度：每個(gè)親和素可結(jié)合 4 個(gè)生物素，可使反應(yīng)明顯放三、生物素-親和素系統(tǒng)在熒光免疫技術(shù)中的應(yīng)A（BAB（或鏈霉親和素抗體的夾心法。酶放大時(shí)間分辨熒光免疫分析（EATRFIA）則是在抗原與固相 McAb 和生物素化 McAb 反應(yīng)形成夾心復(fù)合四、生物素-親和素系