個(gè)人試驗(yàn)進(jìn)度階段性報(bào)告

1、個(gè)人試驗(yàn)進(jìn)度階段性報(bào)告張明政福建省農(nóng)科院農(nóng)業(yè)生物資源研究所主要內(nèi)容發(fā)酵用Bt優(yōu)良菌株的篩選氣升-攪拌式發(fā)酵Bt伴胞晶體蛋白離心過濾發(fā)酵液工藝最正確條件研究微膠囊包裹率檢測方法影響因子探索發(fā)酵用Bt優(yōu)良菌株的篩選篩選原因：前次發(fā)酵所用不能產(chǎn)生伴胞晶體，認(rèn)為菌株退化并且發(fā)酵時(shí)間太長 達(dá)96小時(shí)篩選目的：通過對幾種Bt菌株的平板活化，搖瓶發(fā)酵來觀察其生長情況，產(chǎn)生晶體的速度，數(shù)量及形狀來確定最正確的攪拌-氣升式發(fā)酵菌株。 試驗(yàn)結(jié)果：菌落形態(tài) 試驗(yàn)結(jié)果：PH變化試驗(yàn)結(jié)果：芽孢數(shù)通過血球板計(jì)數(shù) ，14號菌株最高伴胞晶體形態(tài)14號菌株發(fā)酵的晶體呈棱形，數(shù)量多，視野清楚15號菌株發(fā)酵產(chǎn)物未觀察到晶體，形態(tài)為

2、橢圓形的菌體，且數(shù)量多，視野清楚，不是污染的跡象，可能此菌株不是Bt.試驗(yàn)結(jié)論：14號菌株最理想Bt-HD-0203-01 二:氣升-攪拌式發(fā)酵Bt伴胞晶體蛋白試驗(yàn)結(jié)論：1此次發(fā)酵相比前幾次的發(fā)酵是最成功的，發(fā)酵液顏色呈黃白狀態(tài)，而前幾次的那么比較暗，并且通過等電點(diǎn)法提取的蛋白質(zhì)為黑色。2此次發(fā)酵時(shí)間較短，在很大程度上防止污染。3該發(fā)酵罐溫度控制不好，不通過冷凝水的循環(huán)或者流出夾層的流動(dòng)，溫度降低，假設(shè)冷凝水保持不流出只是在夾層內(nèi)循環(huán)那么溫度升高。4通過底部氣升式鼓氣，而上面轉(zhuǎn)動(dòng)攪拌，使得溶氧充足，相比只是單純的氣升式發(fā)酵要好。 三、離心過濾發(fā)酵液工藝最正確條件研究 試驗(yàn)結(jié)果：處理量試驗(yàn)結(jié)果:

3、 (溫度)試驗(yàn)結(jié)果: PH試驗(yàn)結(jié)論： 處理量0.5L/次，溫度10、PH4.5時(shí)過濾效果最好。四、微膠囊包裹率檢測方法影響因子探索1.考馬斯G-250法繪制標(biāo)準(zhǔn)白蛋白曲線 2. PH對考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測定蛋白質(zhì)濃度的影響 3.壁材濃度對蛋白質(zhì)含量檢測的影響 4.親水性膠體濃度對蛋白質(zhì)含量檢測的影響 試驗(yàn)結(jié)果：1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 以蛋白質(zhì)含量x為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析，得到A=0.012000+0.006970X R=0.9983 FR=0.9965 2.PH對考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測定蛋白質(zhì)的影響 3.壁材濃度對蛋白質(zhì)含量檢測的影響 4.親水性膠體濃度對蛋白質(zhì)含量檢測的影響 試驗(yàn)結(jié)論：1在微膠囊包裹率檢測中PH是主要的影響因素，標(biāo)準(zhǔn)方法中PH很低，使得囊壁材料凝結(jié)在一起形成絮狀物而影響濃度的檢測。試驗(yàn)雖然證明在一定PH梯度范圍內(nèi)結(jié)果飄逸不大，但是能不能改變標(biāo)準(zhǔn)的考馬