透皮吸收促進(jìn)劑對(duì)大黃中蒽醌類(lèi)有效成分透皮吸收的影響

1、透皮吸收促進(jìn)劑對(duì)大黃中蒽醌類(lèi)有效成分透皮吸收的影響【摘要】目的討論不同濃度的氮酮、丙三醇、油酸對(duì)大黃中蒽醌類(lèi)有效成分透皮吸收的影響。方法以離體小鼠皮為透皮屏障，采用改進(jìn)Franz擴(kuò)散池裝置，采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定接收池中蒽醌類(lèi)物質(zhì)大黃素，大黃酚，大黃素甲醚，大黃酸的含量，計(jì)算累積透過(guò)量。結(jié)果氮酮、丙三醇和油酸對(duì)大黃中蒽醌類(lèi)物質(zhì)均有促透作用，其促透作用強(qiáng)弱順序?yàn)椋?%氮酮1%氮酮4%氮酮6%氮酮；6%丙三醇4%丙三醇2%丙三醇1%丙三醇；2%油酸4%油酸6%油酸1%油酸。結(jié)論氮酮、丙三醇和油酸對(duì)大黃中蒽醌類(lèi)物質(zhì)大黃素、大黃酚、大黃甲醚、大黃酸的促透作用具有一定的量效關(guān)系。【關(guān)鍵詞】透皮吸收；

2、促進(jìn)劑；大黃；蒽醌類(lèi)；有效成分Abstrat：bjetiveTevaluatetheeffetfAzne,prpanetrilandlEiaidunderdifferentnentratinsnTransderalabsrptinfeffetivepnentsinanthraquinnesfrRhubard.ethdsApieefexisedabdinalhairlessuseskinassetinaFranz-typediffusinell.Penetratinsfedin,rhEIn,physinandhrysphanleredetetedbyHPLanduulativepereatin(

3、Q)alulated.ResultsLaurapra,prpanetrilandleiaiderefundpereatinenhaningeffettanthraquinnes(edin,rhein,physinandhrysphanl)inRhubard.Thepereatinenhaningeffetas2%leiaid4%leiaid6%leiaid1%leiaid;2%laurapra1%laurapra4%laurapra6%laurapra;6%prpanetril4%prpanetril2%prpanetril1%prpanetril.nlusinLaurapra,prpanet

4、rilandleiaidhavepereatinenhaningeffettanthraquinnes(edin,rhein,physinandhrysphanl)inRhubardithdse-effetrelatinship.Keyrds：Transderalabsrptin;Ptentiatin;Rhubard;Anthraquinnes;Effetivepnents大黃具有較強(qiáng)的抗炎、收斂止血等成效，被廣泛用于治療皮膚并濕疹、丹毒等疾病以及化裝品中；臨床上多用大黃粉或與其它藥物配伍，以醋、植物油等調(diào)敷外用。透皮吸收制劑是一種新型藥物劑型，具有可維持穩(wěn)定的血藥濃度、防止胃腸道酶解作用和肝

5、臟的首過(guò)效應(yīng)、降低藥物的毒副作用、給藥方便等優(yōu)點(diǎn)，為目前最受青睞的四大類(lèi)新型制劑之一1。皮膚表皮的角質(zhì)層對(duì)大多數(shù)外用藥物形成一道難以浸透的生理屏障，許多藥物透過(guò)該屏障的速度都很慢2?？酥破つw的屏障作用，尋找促進(jìn)藥物透皮吸收的方法，使藥物在一定時(shí)間內(nèi)經(jīng)皮浸透并到達(dá)治療所需的血藥濃度，成為透皮給藥領(lǐng)域開(kāi)發(fā)和研究的熱點(diǎn)之一3，應(yīng)用透皮吸收促進(jìn)劑是增加藥物透皮吸收的首選方法4。我們對(duì)大黃提取物中蒽醌類(lèi)物質(zhì)大黃酚、大黃素、大黃酸、大黃甲醚等在常用的促透劑氮酮，丙三醇和油酸三種溶劑體系條件下的透皮吸收進(jìn)展了實(shí)驗(yàn)研究，旨為大黃的合理設(shè)計(jì)和開(kāi)發(fā)提供根據(jù)，并為大黃透皮制劑的合理設(shè)計(jì)和開(kāi)發(fā)提供參考。現(xiàn)報(bào)道如下。1

6、儀器與試劑高效液相色譜儀美國(guó)安捷倫1100，包括真空在線脫氣機(jī)，四元泵，自動(dòng)進(jìn)樣器，紫外檢測(cè)器等，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海亞榮生化儀器廠，分析天平上海恒平科學(xué)儀器，DF-101S恒溫水浴磁力攪拌器河南省予華儀器，F(xiàn)ranz擴(kuò)散池沈陽(yáng)玻璃儀器加工廠。西域大黃安國(guó)市京興藥業(yè)責(zé)任，大黃酚，大黃素，大黃素甲醚，大黃酸，蘆薈大黃對(duì)照品中國(guó)生物藥物制品研究所，丙三醇錦西化學(xué)試劑廠，油酸國(guó)安恒業(yè)精細(xì)化工，氮酮北京市德鴻盛生物化學(xué)科技，無(wú)水乙醇等均為分析純?cè)噭?方法與結(jié)果2.1大黃中蒽醌類(lèi)物質(zhì)的提取與制備大黃粉碎后，過(guò)篩，取50g大黃粉末，用300l95%乙醇，水浴恒溫回流4次，0.5h/次，回流時(shí)溫度控制在79左右

7、，合并回流液。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀對(duì)合并液進(jìn)展?jié)饪s至70l左右，回收乙醇，濃縮液再進(jìn)展乙醚100l萃取3次，合并，溫度控制在35左右，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸去乙醚回收。液體變粘稠后，繼續(xù)加熱至50蒸干，得黃棕色固體，即蒽醌粗品。對(duì)粗品用堿溶酸沉法進(jìn)展純化，再離心，得黃棕色沉淀，陰涼、枯燥處風(fēng)干，得黃棕色晶體粉末大黃總蒽醌，備用。2.2分析方法的建立與考察2.2.1色譜條件據(jù)參考文獻(xiàn)15設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定條件如下：色譜柱為18柱；流動(dòng)相為甲醇-0.1%磷酸-水=425175；檢測(cè)波長(zhǎng)438n；流速1.0l/in。大黃素、大黃酚、大黃酸、大黃素甲醚的別離情況見(jiàn)圖1。2.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線精細(xì)稱取大黃素、大黃酚、大黃酸

8、、大黃素甲醚對(duì)照品5.2，6.3，2.0，4.5g，分別置于10l量瓶中，加甲醇超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，制成每毫升分別含0.52，0.63，0.20，0.45g的對(duì)照液，再汲取各對(duì)照品液1l，用甲醇定容于10l量瓶中。0.45的濾膜過(guò)濾后，分別進(jìn)樣1，5，10，15，20，25l。以對(duì)照品進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)Y，峰面積分值為橫坐標(biāo)X繪制工作曲線，大黃酸：Y=0.0371X+0.0129r=0.9999；大黃素：Y=0.0091X-0.0133r=0.9999；大黃酚：Y=0.0081X+0.032r=0.9999；大黃素甲醚：Y=0.0132X+0.0245r=0.9999。2.2.3精細(xì)度實(shí)

9、驗(yàn)精細(xì)汲取大黃蒽醌混合液20l，在“2.2.1項(xiàng)的色譜條件下，連續(xù)進(jìn)樣5次。RSD%分別為大黃酸0.13，大黃素0.11，大黃酚0.11，大黃素甲醚0.08。2.2.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取大黃蒽醌對(duì)照混合液20l，分別在0，1，2，6，12h進(jìn)樣，按色譜條件測(cè)定，測(cè)定結(jié)果大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的RSD分別為0.50%，0.69%，0.60%，0.57%。說(shuō)明大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚非常穩(wěn)定。2.2.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取約12g大黃蒽醌5份，用甲醇適當(dāng)稀釋后，用0.45的濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣20l，測(cè)定大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的峰面積，結(jié)果RSD%分別為0.62，0.55，0.

10、64，0.45。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.2.6回收率實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取大黃蒽醌10l與對(duì)照品混合液4，6，8，10，12，16l混合，并用甲醇補(bǔ)充至20l后進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算得大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚平均回收率分別為100.6，100.7，100.2，100.0。2.3體外透皮吸收實(shí)驗(yàn)2.3.1離體鼠皮的制備取質(zhì)量為50100g的小鼠，斷頸處死，剃去腹部的毛，剪下皮膚，去除皮下組織，用生理鹽水反復(fù)屢次沖洗，置于-40的冰箱中保存。2.3.2大黃蒽醌的體外透皮吸收實(shí)驗(yàn)2.4促透劑的促透作用的研究2.4.1促透劑的制備丙三醇，氮酮，油酸分別用50%的乙醇配制成濃度為1%，2%，4%，6%的溶液1

11、0l作為促透劑。2.4.2促透劑作用下的體外透皮吸收在改進(jìn)Franz擴(kuò)散池恒溫槽中參加適量水370.1，在接收池中參加16.5l30%的乙醇pH=6.0，將鼠皮用鐵夾子固定在兩室之間，向供應(yīng)池內(nèi)參加已配好的不同濃度的促透劑2.0l和供試液8.0l。于0.5，1，2，4，6h分別取樣1l，同時(shí)向接收池中補(bǔ)充等量的接收液。用0.45微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣20l測(cè)定峰面積，并計(jì)算按照下式計(jì)算大黃素，大黃酚，大黃素甲醚的累積透過(guò)量Q，不同濃度的氮酮、丙三醇、油酸對(duì)大黃蒽醌增強(qiáng)作用的結(jié)果見(jiàn)圖35。結(jié)果顯示出促進(jìn)劑對(duì)它們的吸收均有一定的促透作用，總的趨勢(shì)為，氮酮：2%1%4%6%，丙三醇：6%4%2%1%，油

12、酸：2%4%6%1%。3討論多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道，HPL法測(cè)定蒽醌類(lèi)常選用的檢測(cè)波長(zhǎng)在254n，但我們根據(jù)大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃甲醚的紫外光譜實(shí)際掃描結(jié)果，確定為438n為測(cè)定波長(zhǎng)，在此波長(zhǎng)下它們均有較強(qiáng)的吸收，而且干擾小，靈敏度較高，可滿足透皮吸收對(duì)各組分的檢測(cè)。傳統(tǒng)外用法中中藥多以醋調(diào)外敷現(xiàn)代科學(xué)研究證實(shí)，醋中的醋酸、乳酸、氨基酸、甘油等化合物，對(duì)皮膚有柔和的刺激作用，使小血管擴(kuò)張，增加皮膚的血液循環(huán)。另外本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在pH=6.0的30%乙醇溶液中有利于蒽醌類(lèi)藥物成分的穿透性，這可能與皮膚的生理特性有關(guān)。關(guān)于大黃透皮吸收的研究中，現(xiàn)有的報(bào)道均對(duì)大黃中的大黃酚進(jìn)展檢測(cè)，而忽略了大黃中的其他有效成分。所以，本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)較多，同時(shí)對(duì)其大黃酸、大黃酚及大黃素甲醚等進(jìn)展了透皮吸收的考察，以求得全面科學(xué)地探究透皮吸收及其促透作用情況。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)大黃中大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的體外浸透實(shí)驗(yàn)和促透劑對(duì)藥物浸透的作用研究，得出以下結(jié)論：大黃中大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的透皮吸收均有一定的促透作用，其中以大黃酸的透皮速率最好。在考察濃度為1%，2%，4%，6%的氮酮、丙三醇、油酸3種促透劑的促滲性能中，以濃度為2%氮酮時(shí)具有最大的透皮速率；丙三醇的促滲性能是隨著濃度的增加一直呈現(xiàn)增強(qiáng)的趨