中藥藥理學培訓課件

1、一、實驗須知 二、炮制對延胡索鎮(zhèn)痛作用的影響（熱板法） 三、附子炮制前后對小鼠中毒情況的影響 四、天麻對小鼠睡眠的影響 五、天南星抗小鼠驚厥作用 六、茵陳蒿湯對家兔的利膽作用（插管法） 七、麻黃對正常大鼠足跖部汗液分泌的影響（著色法） 八、人參對小鼠抗疲勞作用的觀察 目錄一、實驗須知 目錄實驗前應掌握受試藥物的現(xiàn)代中藥藥理學研究內(nèi)容；結(jié)合中醫(yī)藥理論分析實驗結(jié)果，評價其對中醫(yī)藥理論的論證和闡明作用；思考中藥藥理實驗設(shè)計的一般思路。實驗須知 實驗前應掌握受試藥物的現(xiàn)代中藥藥理學研究內(nèi)容；實驗須知 一、炮制對延胡索鎮(zhèn)痛作用的影響（熱板法）實 驗 原 理 與 目 的可溶性生物堿一、炮制對延胡索鎮(zhèn)痛作用

2、的影響（熱板法）實 驗 原 理 與 水煎醇沉液(4g原藥材/ml)水煎醇沉液(4g原藥材/ml)醋制延胡索生延胡索ipip雌性藥品、動物與給藥方法水煎醇沉液水煎醇沉液醋制延胡索生延胡索ipip雌性藥品、動物550.5C15 20C5-30秒 給藥后15分鐘測定給藥后45分鐘測定給藥后60分鐘測定痛閾值操作流程小鼠的選擇及正常痛閾的測定 延胡索組醋制延胡索組 生理鹽水組550.5C15 20C5-30秒 給藥后15分鐘測痛閾提高百分率（）= 給藥后平均痛閾值 給藥前平均痛閾值 給藥前平均痛閾值 100 各時間點組間檢驗 生理鹽水組延胡索組醋制延胡索組藥物有無作用作用有無強弱差異觀察指標與統(tǒng)計方法

3、痛閾提高百分率（）= 給藥后平均痛閾值 給藥前平均痛閾給藥后若放入燒杯內(nèi)小鼠60秒仍無反應，應將小鼠取出，痛閾值以60秒計。 正常小鼠放入熱板后易出現(xiàn)不安、舉前肢、舔前足、踢后肢等現(xiàn)象，這些動作不能作為疼痛指標，只有舔后足才作為疼痛指標。 注意事項給藥后若放入燒杯內(nèi)小鼠60秒仍無反應，應將小鼠取出，痛閾值以思考題延胡索的鎮(zhèn)痛主要和嗎啡有哪些區(qū)別？炮制對藥物作用的影響 ？思考題延胡索的鎮(zhèn)痛主要和嗎啡有哪些區(qū)別？炮制對藥物作用的影響二、附子炮制前后致小鼠中毒表現(xiàn)的影響實 驗 原 理 與 目 的有毒生物堿炮制二、附子炮制前后致小鼠中毒表現(xiàn)的影響實 驗 原 理 與 目 水煎液(1g原藥材/ml)水煎液

4、(1g原藥材/ml)生附子 制附子 igig藥品、動物與給藥方法水煎液水煎液生附子 制附子 igig藥品、動物與給藥方法給藥后30分鐘內(nèi) 一般狀態(tài)活動能力死亡只數(shù)操作流程小鼠的稱重、標記、分組生附子組制附子組 給藥后30分鐘內(nèi) 一般狀態(tài)活動能力死亡只數(shù)操作流程小鼠的稱重死亡率（）= 本組死亡數(shù) 本組動物總數(shù) 100 組間檢驗 生附子組制附子組毒性表現(xiàn)是什么毒性大小有無差異直觀觀察 觀察指標與統(tǒng)計方法死亡率（）= 本組死亡數(shù) 本組動物總數(shù) 100 組間檢生附子和制附子水煎液制備時均應煎煮4小時以上。注意事項生附子和制附子水煎液制備時均應煎煮4小時以上。注意事項思考題中藥經(jīng)炮制后對臨床用藥有何意義

5、？ 為預防附子中毒，應如何降低其毒性？ ？思考題中藥經(jīng)炮制后對臨床用藥有何意義？ 為預防附子中毒，應如三、天麻對小鼠睡眠的影響 實 驗 原 理 與 目 的天麻素天麻苷元天麻多糖天麻水提液天麻水提醇沉液想睡了！戊巴比妥鈉閾下劑量ipip對側(cè)腹腔ip以翻正反射消失為指標記三、天麻對小鼠睡眠的影響 實 驗 原 理 與 目 的天麻素天水煎液(1g原藥材/ml)天麻 生理鹽水ipip藥品、動物與給藥方法水煎液天麻 生理鹽水ipip藥品、動物與給藥方法給藥后30分鐘ip 4mg/ml戊巴比妥鈉32mg/kg 一般狀態(tài)活動能力入睡只數(shù)Ip0.1ml/10g操作流程小鼠的稱重、標記、分組天麻組生理鹽水組 給藥

6、后30分鐘ip 4mg/ml戊巴比妥鈉32mg/kg 一入睡率（）= 本組入睡數(shù) 本組動物總數(shù) 100 組間檢驗 天麻組生理鹽水組活動能力有無差異有無鎮(zhèn)靜作用直觀觀察 觀察指標與統(tǒng)計方法入睡率（）= 本組入睡數(shù) 本組動物總數(shù) 100 組間檢戊巴比妥鈉溶液新鮮配制；戊巴比妥的閾下劑量每次實驗前需預試找出；天麻飲片要預先蒸軟或浸泡使成分煎出完全注意事項戊巴比妥鈉溶液新鮮配制；注意事項思考題結(jié)合本實驗分析天麻的藥理作用 ?為何不直接觀察天麻對小鼠的中樞抑制作用 ？ ？思考題結(jié)合本實驗分析天麻的藥理作用 ?為何不直接觀察天麻對小四、天南星抗小鼠驚厥作用 實 驗 原 理 與 目 的祛風止痙鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛抗驚厥

7、電痙攣閾值小鼠驚厥發(fā)生率四、天南星抗小鼠驚厥作用 實 驗 原 理 與 目 的祛風鎮(zhèn)靜水煎液(0.5g原藥材/ml)天南星 生理鹽水ipip藥品、動物與給藥方法水煎液天南星 生理鹽水ipip藥品、動物與給藥方法給藥后30分鐘sc0.06%硝酸士的寧0.2ml一般狀態(tài)驚厥潛伏期驚厥只數(shù)Ip0.1ml/10g操作流程小鼠的稱重、標記、分組天南星組生理鹽水組 給藥后30分鐘sc0.06%硝酸士的寧0.2ml一般狀態(tài)驚厥組間檢驗 天南星組生理鹽水組潛伏期有無差異發(fā)生只數(shù)的差異組間檢驗 天南星組生理鹽水組潛伏期有無差異發(fā)生只數(shù)的差異藥物作用？觀察指標與統(tǒng)計方法組間檢驗 天南星組生理鹽水組潛伏期有無差異發(fā)生

8、只數(shù)的差異組間士的寧的的驚厥劑量每次實驗前需預試找出注意事項士的寧的的驚厥劑量每次實驗前需預試找出注意事項思考題結(jié)合本實驗分析天南星的藥理作用 ?天南星抗士的寧小鼠驚厥在臨床上的意義 ?？思考題結(jié)合本實驗分析天南星的藥理作用 ?天南星抗士的寧小鼠驚五、茵陳蒿湯對家兔的利膽作用 實 驗 原 理 與 目 的茵陳蒿湯茵陳蒿梔子大黃解毒退黃保肝利膽膽汁分泌膽汁排泄膽汁固體物五、茵陳蒿湯對家兔的利膽作用 實 驗 原 理 與 目 的茵水煎醇沉液(g原藥材/ml)菌陳蒿湯十二指腸給藥藥品、動物與給藥方法水煎醇沉液菌陳蒿湯十二指腸給藥藥品、動物與給藥方法操作流程操作流程扎線牽引扎線導管膽管十二指腸端膽汁示意圖

9、扎線牽引扎線導管膽管十二指腸端膽汁示意圖前后對照總流量有無差異藥物作用？觀察指標與統(tǒng)計方法前后對照總流量有無差異藥物作用觀察指標與統(tǒng)計方法膽總管引流膽汁的塑料導管可用頭皮針上的半透明塑料管制成。管的尖端剪成斜口，離管口23mm處加熱拉成稍細的頸部，以便結(jié)扎膽總管而固定之。開腹手術(shù)中通有出血點，用絲線結(jié)扎止血。膽總管比較細，切勿用力拉牽引線而拉斷，故操作必須細心輕巧。膽總管切口應一次成功，正好剪斷膽總管的1/3-1/2。注意一定要剪斷內(nèi)膜，使膽汁引流導管插在內(nèi)膜下，見有膽汁流出便易插入導管。 注意事項膽總管引流膽汁的塑料導管可用頭皮針上的半透明塑料管制成。管的思考題茵陳蒿湯的利膽作甩的機制有哪些

10、？ 為什么不設(shè)空白對照組來進行實驗驗證？ ？思考題茵陳蒿湯的利膽作甩的機制有哪些？ 為什么不設(shè)空白對照組六、麻黃對正常大鼠足跖部汗液分泌的影響實 驗 原 理 與 目 的發(fā)汗解表麻黃發(fā)汗以麻黃湯作用最強麻黃湯麻黃桂枝杏仁、甘草六、麻黃對正常大鼠足跖部汗液分泌的影響實 驗 原 理 與 目水煎液(.5g原藥材/ml)麻黃湯 生理鹽水igig麻黃湯（去麻黃桂枝組） ig藥品、動物與給藥方法水煎液麻黃湯 生理鹽水igig麻黃湯（去麻黃桂枝組） ig藥和田-高垣氏試劑 A液：取碘2g溶于100ml無水乙醇即成； B液：取可溶性淀粉50g、蓖麻油100ml，兩者均勻混合即成 試劑和田-高垣氏試劑 A液：取碘

11、2g溶于100ml無水乙醇即成；給藥后30分鐘，固定，足跖部A液 液，h內(nèi)放大鏡觀察汗液出現(xiàn)時間汗滴數(shù)量汗液顏色 ig1ml/100g25-27C操作流程大鼠的稱重標記、分組麻黃湯組麻黃湯（去麻黃桂枝組）生理鹽水組給藥后30分鐘，固定，足跖部A液 液，h內(nèi)放大鏡觀察汗組間檢驗 麻黃湯（去麻黃桂枝組）生理鹽水組汗滴數(shù)量的差異藥物作用？組間檢驗 生理鹽水組汗液出現(xiàn)時間有無差異麻黃湯組觀察指標與統(tǒng)計方法組間檢驗 麻黃湯（去麻黃桂枝組）生理鹽水組汗滴數(shù)量的差異藥物本實驗宜在恒溫、恒濕條件下進行，室溫控制在26+1。實驗前最好將大鼠進行固定器訓練，固定大鼠時，操作應輕柔，盡量避免掙扎出汗。在一次實驗中，

12、觀察汗點出現(xiàn)時間應一致。大鼠足跖部汗腺主要分布在足跖肉墊上，足跖關(guān)節(jié)也有分布，足掌心則無。本實驗也可以用小鼠。 注意事項本實驗宜在恒溫、恒濕條件下進行，室溫控制在26+1。注意事思考題從實驗結(jié)果分析麻黃湯組方原理？ 如何準確記錄汗點出現(xiàn)數(shù)？ ？思考題從實驗結(jié)果分析麻黃湯組方原理？ 如何準確記錄汗點出現(xiàn)數(shù)七、人參對小鼠抗疲勞作用的觀察 實 驗 原 理 與 目 的扶正益氣增強造血提高免疫抗應激游泳時間耐缺氧耐高溫耐低溫七、人參對小鼠抗疲勞作用的觀察 實 驗 原 理 與 目 的扶水煎液(5g原藥材/ml)人參 生理鹽水igig雄性藥品、動物與給藥方法水煎液人參 生理鹽水igig雄性藥品、動物與給藥方

13、法給藥后45分鐘，5 %體重負荷，置水中活動能力溺斃時間 Ig0.2ml/10g200.5C20cm鼻孔浸入水面下15s以上操作流程I小鼠的稱重、標記、分組人參組生理鹽水組 給藥后45分鐘，5 %體重負荷，置水中活動能力溺斃時間 Ig組間檢驗 人參組生理鹽水組溺斃時間組間檢驗 生理鹽水組藥物作用？觀察指標與統(tǒng)計方法I組間檢驗 人參組生理鹽水組溺斃時間組間檢驗 生理鹽水組藥物作要嚴格控制水溫，水溫差異太大會影響實驗結(jié)果。動物單個游泳，集體游泳會影響實驗結(jié)果。 注意事項I要嚴格控制水溫，水溫差異太大會影響實驗結(jié)果。注意事項I給藥后45分鐘，置入含鈉石灰的密閉廣口瓶中死亡時間 Ig0.2ml/10g操作流程II小鼠的稱重、標記、分組人參組生理鹽水組 給藥后45分鐘，置入含鈉石灰的密閉廣口瓶中死亡時間 Ig0.組間檢驗 人參組生