蜚蠊藥材質(zhì)量控制方法研究

1、蜚蠊藥材質(zhì)量操縱要領(lǐng)研究楊永壽，肖培云，劉灼爍【摘要】目的創(chuàng)立蜚蠊藥材的質(zhì)量操縱要領(lǐng)。要領(lǐng)接納薄層色譜法定性區(qū)分，色譜條件為正丁醇-醋酸-水511，0.5%茚三酮顯色劑；接納索氏提取法測定脂肪含量；水分測定法查抄水分的最低操縱限；分光光度法測定總氨基酸的含量，茚三酮顯色后檢測波長為570n。結(jié)果蜚蠊藥材與比較品薄層色譜斑點清楚,易于識別，藥材中脂肪的含量不得凌駕7.0%，水分含量不得凌駕12.0%，分光光度法測定總氨基酸含量，回歸方程：A=0.067943+0.009143，r=0.9999,酪氨酸含量在1.010.0g范疇內(nèi)呈精良的線性干系。結(jié)論該要領(lǐng)輕便易行,重復(fù)性好,可用于蜚蠊藥材的質(zhì)量

2、操縱?！娟P(guān)鍵詞】蜚蠊藥材薄層色譜法索氏提取法水分測定法分光光度法Keyrds：Rah；TL；Sxhletsextratin；Aquaetry；Absrptinspetretry蜚蠊(Rah)為昆蟲綱蜚蠊目，蜚蠊科，俗稱蟑螂，全天下創(chuàng)造并紀(jì)錄的蟑螂種類約三千余種，普及漫衍于熱帶、亞熱帶地區(qū)，在我國也有普及漫衍。蜚蠊作為藥用最早載于?神農(nóng)本草經(jīng)?中1。比年來的研究創(chuàng)造，蜚蠊中含有對肝炎、心腦血管疾并肺癌及惡性纖維瘤有明顯療效的活性身分24，而且以蜚蠊藥材為質(zhì)料開拓出“病愈新滴劑“心脈龍注射液“肝龍膠囊等國度系列新藥。但蜚蠊藥材在恒久的利用歷程中不停沒有范例的國度尺度，致使藥材在豢養(yǎng)歷程中無相應(yīng)范例

3、要求，藥材質(zhì)量無法得到包管。研究表白，蜚蠊藥材中重要有用身分為氨基酸和卵白質(zhì)5，但藥材在豢養(yǎng)歷程中，養(yǎng)殖廠家為尋求其重量，在飼料中參加大量脂肪身分，致使藥材品格落落，而且給藥廠消費增長了處置懲罰本錢，加上蜚蠊藥材為富營養(yǎng)的動物藥，水分含量的凹凸將直接影響藥材的質(zhì)量及存放時間，因此必需加以操縱。蜚蠊藥材質(zhì)量尺度的創(chuàng)立，將為該藥材提供科學(xué)、可靠的質(zhì)量檢測要領(lǐng)，同時可對蜚蠊藥材的范例化養(yǎng)殖提供理論根據(jù)。1儀器與試劑島津UV2550紫外-可見分光光度計，梅特勒電子天平AE240瑞士，索氏提取器，DZK-4水浴鍋上?？莆鰧嵭袃x器廠，超聲波洗濯器上?？茖?dǎo)超聲儀器公司，ZY紫外闡發(fā)儀上海安亭，硅膠G254(

4、青島海洋化工場)。酪氨酸、亮氨酸、丙氨酸、a-氨基丙酸、甘氨酸比較品中國藥品生物成品檢定所消費，批號:0856-202207，0833-202234，0832-202211，0853-202208，0815-202223，別的試劑均為闡發(fā)純。2要領(lǐng)與結(jié)果2.1比較品溶液的制備細(xì)密稱取80減壓枯燥至恒重的酪氨酸比較品10.0g，置100l容量瓶中，加0.02l/L的NaH溶液10l，水浴加熱至完全溶解，加水至刻度，搖勻，即得濃度為100.0g/l的酪氨酸比較品溶液含量測定用。細(xì)密稱取80枯燥至恒重的亮氨酸、丙氨酸、氨基丙酸、甘氨酸各2.0g，用50%甲醇稀釋10l，得濃度為200.0g/l的比較

5、品溶液薄層區(qū)分用。2.2供試品溶液的制備取破壞后的供試品10g，細(xì)密稱定，置燒瓶中加95%的乙醇100l水浴回流提取3次，1h/次，過濾，歸并濾液，殘渣加約3040l水，水浴加熱，充實溶解，放冷后過濾，撤除脂肪，用少量水洗滌燒瓶及漏斗兩次，濾液于比色管中定容至50l，加活性炭0.5g，振搖，過濾，濾液即為供試品溶液。2.3藥材的薄層色譜區(qū)分勸2.2項制備的供試品溶液,另勸2.1項制備的亮氨酸、丙氨酸、氨基丙酸、甘氨酸比較品溶液，汲取上述溶液各5l,別離點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,以正丁醇醋酸水(511)的溶液為睜開劑,睜開約1015,取出,晾干,用0.5%的茚三酮溶液噴霧

6、顯色，檢視,供試品色譜中,在與比較品色譜相應(yīng)的位置上顯雷同顏色的斑點。樣品與比較品的薄層色譜圖見圖1。2.4藥材中脂肪含量的操縱測定蜚蠊藥材中脂肪的含量參考國度尺度標(biāo)GB9695.1-1988?肉與肉成品-游離脂肪含量的測定?，利用索氏抽提法，用石油醚抽提樣品中的脂肪。然后于水浴上接納溶劑，蒸干后95105枯燥2h稱量,盤算樣品中脂肪含量，結(jié)果見表1。表1蜚蠊藥材脂肪含量測定結(jié)果略從表1可得，人工豢養(yǎng)的蜚蠊藥材中脂肪的含量顯著高于天然生長的藥材，這給藥廠的消費增長了處置懲罰本錢，因此，有需要操縱藥材中脂肪的含量。按照大量的實行及藥廠消費的履歷，本文將蜚蠊藥材中脂肪的含量操縱在7.0%以內(nèi)。2.

7、5藥材中水分含量的操縱取人工豢養(yǎng)的蜚蠊藥材適量，60真空減壓枯燥至恒重，按表2取枯燥后的藥材，并按比例參加必然量的水，混淆勻稱后于250l廣口試劑瓶中密封保存，25恒溫安排，每隔15d取樣不雅測，以觀察水分含量與藥材不變性之間的干系，實行結(jié)果見表2。表2蜚蠊藥材中水分與存放時間的干系略從表2可知，蜚蠊藥材中水分的含量不得凌駕12.0%，不然藥材很輕易產(chǎn)生敗北變質(zhì)，故藥材中水分應(yīng)操縱在12%以內(nèi)。2.6藥材中總氨基酸的含量測定勸2.1項下配制的酪氨酸比較品溶液，參加1lpH=5.0的檸檬酸緩沖液和1l茚三酮顯色劑，搖勻，水浴加熱15in，取出，冷卻至室溫，參加60%乙醇3l，搖勻，在紫外-可見分

8、光光度計上于400700n范疇內(nèi)舉行全波長掃描，酪氨酸在570n處有最大汲取。應(yīng)選擇570n為蜚蠊藥材中總氨基酸含量測定波長。細(xì)密汲取供試品溶液1.0l于10l容量瓶中，照尺度曲線制備項下的要領(lǐng)自“別離參加1l檸檬酸緩沖液起，依法測定汲取度，用尺度曲線法盤算出供試品溶液中氨基酸的含量g，并照以下公式換算為蜚蠊中總氨基酸的含量：總氨基酸g/g=2.50.662-水分含量%細(xì)密汲取同一供試品溶液,重復(fù)測定5次,總氨基酸含量的RSD為2.36%。細(xì)密汲取同一供試品溶液,別離在安排0,1,2,3,4,5,6h后測定,總氨基酸含量的RSD為1.97%,表白供試品溶液在6h內(nèi)不變。取同一批樣品,按“2.2

9、項下的要領(lǐng)制備5份供試品溶液,依法測定，蜚蠊藥材中總氨基酸含量的RSD為1.64%,表白要領(lǐng)重復(fù)性較好。取含量的蜚蠊藥材樣品5份,1.0g/份，別離參加比較品酪氨酸8.0g,依法舉行樣品處置懲罰和測定,盤算加樣接納率,結(jié)果總氨基酸的加樣接納率為100.36%，RSD為1.85%,要領(lǐng)的接納率較好。結(jié)果見表3。表3接納率實行略按上述供試品溶液的制備要領(lǐng)和測定條件,測定了5批差異產(chǎn)地人工豢養(yǎng)的蜚蠊藥材中總氨基酸含量，結(jié)果見4。表4蜚蠊藥材中總氨基酸的含量測定略3討論從本研究創(chuàng)立的薄層色譜測定要領(lǐng)來看，薄層色譜睜開體系分散結(jié)果好，斑點清楚，不拖尾，藥材供試品與比較品色譜相應(yīng)位置上顯雷同顏色的斑點。由于蜚蠊藥材中重要有用身分為氨基酸、卵白質(zhì)和多肽等富營養(yǎng)物質(zhì)，水分含量過高易引起敗北變質(zhì)，故藥材中水分含量操縱在12%以下有利于藥材的保存。含量測定要領(lǐng)操縱簡樸,重復(fù)性好,可用于藥品消費企業(yè)及消費基地對蜚蠊藥材的質(zhì)量操縱。從對差異產(chǎn)地、差異網(wǎng)羅時間的藥材中總氨基酸含量的測定結(jié)果來看,藥材中有用身分總氨基酸的含量有必然的地區(qū)性差異,同一地區(qū)的藥材差異批次間也有差異,這大概與生長情況、喂養(yǎng)飼料及網(wǎng)羅時間差異有干系?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1孫星衍.神農(nóng)本草經(jīng).上海：商務(wù)印書館，1955：90.2蔣述均，陳利銘，安一明.順鉑肝動脈灌注團(tuán)結(jié)扶正抗癌治療中、晚期原發(fā)性肝癌的臨床治療J.福建醫(yī)藥雜志，199