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1、血培養(yǎng)標(biāo)本的采集與運(yùn)送(一)采集指征.寒戰(zhàn)、體溫超過(guò)38C或低體溫,懷疑血流感染時(shí)。.以下情況時(shí)應(yīng)抽血做細(xì)菌和真菌培養(yǎng):醫(yī)院內(nèi)肺炎;留置中心靜脈導(dǎo)管 超過(guò)48h;感染性內(nèi)膜炎;骨髓炎;有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病、免疫缺陷伴全身感染病癥; 臨床醫(yī)生懷疑有血流感染可能的其他情況。(二)采集方法.皮膚消毒程序:用消毒液從穿刺點(diǎn)向外畫(huà)圈消毒,至消毒區(qū)域直徑達(dá)5cm 以上,待消毒液揮發(fā)干燥后(常需30s以上)穿刺采血。.采血部位:通常為肘靜脈,疑為細(xì)菌心內(nèi)膜炎時(shí)以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血 為宜。.采血量:以培養(yǎng)基與血液之比為10:1為宜。成人每次每培養(yǎng)瓶采血8 10ml,嬰幼兒每次每培養(yǎng)瓶采血2nd。對(duì)于成人患者,應(yīng)該同

2、時(shí)分別在2個(gè)部位 各采集1套(每套含1個(gè)需氧瓶和1個(gè)厭氧瓶)血標(biāo)本,以幫助提高檢出率和排 出污染情況。.培養(yǎng)瓶接種:成人用注射器無(wú)菌穿刺取血后,排盡針頭內(nèi)空氣,直接注 入血培養(yǎng)瓶,勿換針頭(如果行第二次穿刺或用頭皮針取血時(shí),應(yīng)換針頭),先 注于厭氧培養(yǎng)瓶,然后注入需氧培養(yǎng)瓶,輕輕混勻以防血液凝固。推薦采用負(fù) 壓血培養(yǎng)瓶,減少污染環(huán)節(jié)。(三)標(biāo)本運(yùn)送所有標(biāo)本采集后都應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室,最好在2h內(nèi)。如果不能及時(shí)送檢,宜置于室溫環(huán)境。血培養(yǎng)瓶送到檢驗(yàn)科前,不應(yīng)暫存于冰箱內(nèi)。(四)考前須知:.采血時(shí)機(jī):盡可能在抗菌藥物使用前或在停用抗菌藥物24小時(shí)后采集; 最好在寒戰(zhàn)和發(fā)熱初期采血。.采血次數(shù)及間隔:

3、對(duì)需馬上做抗菌治療的急性發(fā)熱性疾?。ㄈ缒X膜炎、 細(xì)菌性肺炎)或需緊急手術(shù)的患者,應(yīng)立即從兩臂分別取2套標(biāo)本。對(duì)感染性 心內(nèi)膜炎患者,在24h內(nèi)取血3次,每次間隔不少于30min;必要時(shí)次日再做血 培養(yǎng)2次。對(duì)發(fā)熱原因不明者2次抽血間隔60min;必要時(shí)于2448小時(shí)后再 抽血2次。.不能在靜滴抗菌藥物的靜脈處采血;不應(yīng)從留置靜脈或動(dòng)脈導(dǎo)管取血。血管導(dǎo)管相關(guān)感染標(biāo)本采集二、血管導(dǎo)管相關(guān)性血流感染(CRBSI)定義帶有血管內(nèi)導(dǎo)管或拔除血管內(nèi)導(dǎo)管48小時(shí)內(nèi)的患者出現(xiàn)菌血癥或真菌血 癥,并伴有發(fā)熱(38)、寒顫或低血壓等感染表現(xiàn),除血管內(nèi)導(dǎo)管外,無(wú)其 它明確的感染源。CRBSI診斷成立至少還需具備以下

4、各項(xiàng)中的1項(xiàng):1)導(dǎo)管半定量細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性 O15CFU/導(dǎo)管尖段5cm)或者定量培養(yǎng)陽(yáng)性 O102CFU/導(dǎo)管段),同時(shí)從導(dǎo)管血培養(yǎng)的細(xì)菌與外周血培養(yǎng)結(jié)果一致(種屬 和藥敏結(jié)果);2)從血管導(dǎo)管、外周靜脈同時(shí)抽血做細(xì)菌定量培養(yǎng),二者細(xì)菌濃度比例超 過(guò) 3:1;3)同時(shí)從血管導(dǎo)管內(nèi)、外周靜脈抽血送細(xì)菌培養(yǎng),導(dǎo)管內(nèi)所取血樣培養(yǎng)出 現(xiàn)陽(yáng)性的時(shí)間比外周血早2個(gè)小時(shí)以上。對(duì)于常見(jiàn)皮膚污染菌,如類白喉?xiàng)U菌(棒狀桿菌屬)、芽抱桿菌屬(除炭疽桿 菌外)、丙酸桿菌屬、凝固酶陰性葡萄球菌(包括表葡菌)、草綠色鏈球菌、氣 球菌屬、微球菌屬,需要不同時(shí)間、采集兩次或兩次以上的血培養(yǎng)才能確診。如血液中一次或一次以上培養(yǎng)

5、到金黃色葡萄球菌、腸球菌屬、大腸埃希菌、假 單胞菌屬、克雷伯菌屬、假絲酵母菌屬等等,即可確診。2、標(biāo)本的采集方法臨床醫(yī)護(hù)人員應(yīng)高度重視臨床疑似病例標(biāo)本送檢率,提高送檢標(biāo)本的合格率,正確掌握標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)和方法以及送檢時(shí)限,及時(shí)發(fā)現(xiàn)疑似病例。臨床 醫(yī)師首先判斷導(dǎo)管是否仍有保存的必要性。按導(dǎo)管保存與否分別采用不同的方 法采集標(biāo)本。(1)適合于保存導(dǎo)管標(biāo)本采集要求:對(duì)可疑的CRBSI患者至少采取2套血培養(yǎng),其中至少一套來(lái)自外周靜脈,另一套來(lái)自導(dǎo)管,從導(dǎo)管采血時(shí),應(yīng)用皮膚消毒劑(如75%乙醇、 含碘消毒劑等)消毒導(dǎo)管接頭,待干,再采血,以免血標(biāo)本被污染。兩套血標(biāo) 本的采血時(shí)間必須W5分鐘,分別標(biāo)記采血

6、部位。(2)適合于導(dǎo)管拔除標(biāo)本采集要求:從獨(dú)立的外周靜脈無(wú)菌采集1-2套血培養(yǎng)。無(wú)菌狀態(tài)下取出 導(dǎo)管進(jìn)行定量培養(yǎng)或半定量(導(dǎo)管尖端5cm)平板滾動(dòng)培養(yǎng)。采血方法:采血者 用速干乙醇消毒液洗手;75%乙醇消毒培養(yǎng)瓶的橡膠塞,待干60秒;用0.5%含 有效碘消毒劑消毒皮膚,消毒范圍的直徑為5cm2,待干60秒鐘后進(jìn)行穿刺;穿 刺部位消毒后不得再觸摸。兩個(gè)部位采血時(shí)間必須05分鐘。(3)每瓶采血10mL,盡量保證兩套血培養(yǎng)采血達(dá)40mL,提高陽(yáng)性檢出率。(4)采血后,血培養(yǎng)瓶應(yīng)盡快送至微生物實(shí)驗(yàn)室。采血后的血培養(yǎng)瓶室溫 放置不能超過(guò)12小時(shí)。中心靜脈導(dǎo)管相關(guān)血流感染(CR-BSI)的判斷方法根據(jù)導(dǎo)管

7、是否仍有保存的必要性有兩種采取方法,保存導(dǎo)管:外周靜脈血1份,中心靜 脈血1份;拔除導(dǎo)管:2個(gè)不同部位的外周靜脈血、導(dǎo)管尖端5cm或整根。(1)保存導(dǎo)管者結(jié)果解釋:見(jiàn)下表中心靜脈導(dǎo)管血外周靜脈血條件結(jié)果判斷+細(xì)菌種屬相同CR-BSI+金黃色葡萄球菌或假絲酵母菌CR-BSI+導(dǎo)管靜脈血較外周靜脈血報(bào)陽(yáng) 快120分鐘提示為CR-BSI導(dǎo)管靜脈血細(xì)菌濃度較外周靜 脈血高5倍+不能確定不是CR-BSI如果兩套血培養(yǎng)陽(yáng)性且為同一種細(xì)菌:(1)如果缺乏其它感染證據(jù),提示可能為 CR-BSI; (2)來(lái)自導(dǎo)管的血培養(yǎng)報(bào)陽(yáng)時(shí)間比外周靜脈血培養(yǎng)早120分鐘,提示為CR-BSI(如 果報(bào)陽(yáng)差異時(shí)間小于120分鐘,

8、但耐藥譜一致,同時(shí)缺乏其它感染證據(jù),也可能提示為 CR-BSI); (3)來(lái)自導(dǎo)管血培養(yǎng)的細(xì)菌數(shù)量為至少5倍于外周靜脈血培養(yǎng),如果缺乏其它感 染證據(jù),提示可能為CR-BSI (此方法適用于手工定量血培養(yǎng)系統(tǒng))。如果僅是來(lái)自導(dǎo)管的血培養(yǎng)為陽(yáng)性:不能確定為CR-BSI,可能為定植菌或采集血標(biāo)本 時(shí)污染。如果僅是來(lái)自外周靜脈的血培養(yǎng)為陽(yáng)性:不能確定為CR-BSI;但如為金黃色葡萄球菌,或假絲酵母菌屬,在缺乏其它感染證據(jù)那么提示可能為CR-BSL如果兩套血培養(yǎng)為陰性:不是CR-BSI。(2)已拔除導(dǎo)管結(jié)果解釋:見(jiàn)下表導(dǎo)管尖端或整根外周靜脈血1外周靜脈血2結(jié)果判斷+CR-BSI+培養(yǎng)為金葡菌或假絲酵母 菌且缺乏其它感染的證據(jù) 那么提示可能為CR-BSI+導(dǎo)管定植菌不是CR-BSI如果一套或多套血培養(yǎng)陽(yáng)性,且導(dǎo)管尖端培養(yǎng)或?qū)Ч芏颗囵B(yǎng)為陽(yáng)性,根據(jù)鑒定結(jié)果 和藥敏譜兩種培養(yǎng)為同一種細(xì)菌,提示可能為CR-BSL如果一套或多套血培養(yǎng)陽(yáng)性,而導(dǎo)管尖端培養(yǎng)或?qū)Ч芏颗囵B(yǎng)為陰性:如培養(yǎng)結(jié)果為 金黃色葡萄

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