病原微生物腸桿菌科

1、復(fù) 習(xí) 題1在化膿性感染中，能促感染局限化的細(xì)菌產(chǎn)物是 A血漿凝固酶 B鏈道酶 C透明質(zhì)酸酶 D鏈激酶 E以上都不是A.金黃色葡萄球菌 B.甲型溶血型鏈球菌 C乙型溶血型鏈球菌 D M蛋白 1可引起風(fēng)濕熱的是2可引起食物中毒的是3.常引起感染性心內(nèi)膜炎的致病菌是4.與腎小球腎炎有關(guān)的抗原蛋白是攜帶NDM-1的大腸桿菌感染，會(huì)導(dǎo)致許多病人出現(xiàn)尿路感染和血液中毒。在已發(fā)現(xiàn)的NDM-1細(xì)菌感染病例中，至少有一例已經(jīng)對(duì)所有已知的抗生素具有抗藥性。 超 級(jí) 細(xì) 菌NDM-1的大腸埃希菌第十章 腸桿菌科知 識(shí) 要 點(diǎn)1.掌握：（1）大腸埃希菌的生物學(xué)性狀、致病性。（2）志賀菌的生物學(xué)性狀、致病性、微生物學(xué)

2、檢查法。（3）沙門(mén)菌的生物學(xué)性狀、致病性、微生物學(xué)檢查法；血清學(xué)診斷和肥達(dá)試驗(yàn)。2. 熟悉：（1）大腸埃希菌的微生物學(xué)檢查法及防治原則。（2）志賀菌和沙門(mén)菌感染的防治原則；3.了解：（1）大腸埃希菌在衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查中的意義。（2）志賀菌感染的免疫性；（3）沙門(mén)菌的分類(lèi)及其感染的免疫性；（4）其他菌屬的致病性。概 述大多數(shù)為正常菌群少數(shù)是致病菌，如：致病性大腸埃希菌、傷寒沙門(mén)菌、痢疾志賀菌、 腸桿菌科細(xì)菌是一大群寄居在人類(lèi)和動(dòng)物腸道中生物學(xué)性狀近似的革蘭陰性桿菌。形態(tài)結(jié)構(gòu) 形態(tài)相似。中等大小的革蘭陰性桿菌。多有鞭毛，少數(shù)有莢膜或包膜，致病菌多有菌毛。從形態(tài)上無(wú)法區(qū)別。共同特性生 化 反 應(yīng) 活

3、潑致病菌株多不能分解乳糖。乳糖發(fā)酵試驗(yàn)可初步鑒別腸道致病菌和非致菌能分解多種糖類(lèi)和蛋白質(zhì)，形成不同的代謝產(chǎn)物，常以此作為鑒別手段。共同特性大腸埃希菌和痢疾志賀菌，你能區(qū)分嗎？用鑒別培養(yǎng)基，不就行了？SSA指示劑為中性紅，分解乳糖產(chǎn)酸的細(xì)菌呈紅色菌落（大腸），不分解乳糖的細(xì)菌呈無(wú)色菌落?？乖Y(jié)構(gòu)：復(fù)雜（1）O抗原（菌體抗原）：LPS的最外層核心多糖（2）H抗原（鞭毛抗原）（3）莢膜抗原：如Vi抗原、K抗原共同特性 對(duì)一般消毒劑敏感。 膽鹽、煌綠等染料對(duì)大腸埃希菌等非致病菌有選擇性的抑制作用。借選擇培養(yǎng)基來(lái)分離致病性腸道菌。抵 抗 力 弱共同特性Escherichia Escherichia 的細(xì)

4、菌一般不致病，是人類(lèi)和動(dòng)物腸道中的正常菌群。其中以大腸埃希菌（E.coli）最為重要（代表菌）。埃希菌屬形態(tài)染色G-桿菌多有周鞭毛致病株有菌毛 兼性厭氧、營(yíng)養(yǎng)要求不高普通平板：灰白色、光滑、濕 潤(rùn)、中等大小的菌 落。選擇培養(yǎng)基中菌 落為紅色液體培養(yǎng)基：均勻混濁生長(zhǎng)培養(yǎng)特性： 生化反應(yīng)能發(fā)酵葡萄糖等多種糖類(lèi)，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。大部分菌株迅速發(fā)酵乳糖。在克氏雙糖管中，斜面和底層均產(chǎn)酸產(chǎn)氣同沙門(mén)菌、志賀菌區(qū)分 硫化氫陰性、動(dòng)力陽(yáng)性 IMViC 試驗(yàn)為+ + - -?？乖Y(jié)構(gòu)：復(fù)雜（1）O抗原（菌體抗原）：170種（2）H抗原（鞭毛抗原）：50種（3）K抗原：100種致病性致病物質(zhì)所致疾病致病物質(zhì)：黏 附 素

5、：黏附于泌尿道和腸道的細(xì)胞上。外 毒 素： 1、不耐熱腸毒素和 2、耐熱腸毒素a和b 3、志賀毒素和 4、溶血素AALT的結(jié)構(gòu)和作用部位BBBBBA亞單位：毒素的活性部位B亞單位：與腸黏膜上皮細(xì)胞表面的GM1神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合后,使A亞單位穿過(guò)細(xì)胞膜與腺苷環(huán)化酶作用腸粘膜細(xì)胞上的腺苷環(huán)化酶A亞單位ATPcAMP活化小腸分泌過(guò)度，腹瀉ST的作用：激活腸粘膜細(xì)胞上的鳥(niǎo)苷環(huán)化酶GTPcGMP液體平衡紊亂，腹瀉所致疾?。?、腸道外感染化膿性感染：腹膜炎、闌尾炎、手術(shù)創(chuàng)口感染，體弱者可引起敗血癥。新生兒引起新生兒腦膜炎。泌尿道感染：為上行感染，尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎。表現(xiàn)為尿頻、排尿困難、血尿和膿尿。腸出

6、血性大腸埃希菌 EHEC (enterohemorrhagic E.coli)腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌 ETEC (enterotoxigenic E.coli)腸侵襲性大腸埃希菌 EIEC (enteroinvasive E.coli)腸致病性大腸埃希菌 EPEC (enteropathogenic E.coli )腸集聚性大腸埃希菌EAEC (enteroaggregative E.coli)2、腸道感染：胃腸炎腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌(ETEC ) 疾?。?歲以下嬰幼兒腹瀉和旅行者腹瀉癥狀： 從輕微的腹瀉至水瀉，有惡心、低熱作用部位：小腸粘膜細(xì)胞致病物質(zhì)：定植因子、 不耐熱腸毒素(LT) 、耐熱

7、腸毒素(ST)腸侵襲性大腸埃希菌 （ EIEC）疾?。狠^大兒童和成人腹瀉。癥狀：發(fā)熱、腹痛、腹瀉、膿血便和有里急后重。 類(lèi)似細(xì)菌性痢疾。作用部位：大腸致病物質(zhì)：內(nèi)毒素致病機(jī)理：不產(chǎn)生腸毒素，侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞，造成炎癥和潰瘍，產(chǎn)生黏液膿血便。腸致病性大腸埃希菌（ EPEC）疾病：嬰幼兒腹瀉。癥狀：發(fā)熱、嘔吐、腹瀉、粘液便。作用部位：小腸致病物質(zhì)：不產(chǎn)生毒素，粘附素破壞微絨毛刷狀緣，絨毛萎縮、上皮細(xì)胞排列紊亂，功能受損。腸出血性大腸埃希菌(EHEC )疾?。撼鲅越Y(jié)腸炎，溶血性尿毒綜合征 多見(jiàn)于5歲以下兒童。癥狀：劇烈腹痛、水瀉、大量鮮血便。作用部位：小腸遠(yuǎn)端、結(jié)腸致病物質(zhì)：菌毛、志賀毒

8、素等。致病機(jī)理：志賀毒素滅活核糖體，終止蛋白質(zhì)合成。引起腸黏膜水腫、出血、液體蓄積、腸黏膜脫落、腸細(xì)胞水腫、壞死、引起血性便。細(xì)菌血清型：O157：H7視頻疾?。簨雰焊篂a。癥狀：持續(xù)性水瀉、嘔吐、脫水、低熱、偶有血便。致病物質(zhì)：毒素和黏附素致病機(jī)理：聚集性黏附腸道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致微絨毛變短，單核細(xì)胞浸潤(rùn)和出血。腸集聚性大腸埃希菌（EAEC）微生物學(xué)檢查病人標(biāo)本中細(xì)菌的分離與鑒定 1、標(biāo)本的采集：不同的病變采集不同的標(biāo)本 2、分離培養(yǎng)與鑒定： 選擇培養(yǎng)基，生化反應(yīng)鑒定 致病性大腸埃希菌須用血清學(xué)試驗(yàn)定型 必要時(shí)鑒定腸毒素（ELISA、基因探針等）尿路感染：確定大腸埃希菌+計(jì)數(shù)， 尿菌量10萬(wàn)/mL

9、時(shí)才有診斷意義SpecimensIsolation cultivation: seletive or differential medium(SS,EMB,MAC)biochemical test KIA，IMViC antibiotic susceptibility testserological test微生物學(xué)檢查衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查 大腸菌群數(shù)：每1000ml樣品中的大腸菌群數(shù)。 微生物學(xué)檢查標(biāo)準(zhǔn)：大腸菌群數(shù)飲水3個(gè)/ 1000ml 果汁、瓶裝汽水 5個(gè)/100ml尿路感染：確定大腸埃希菌+計(jì)數(shù)， 尿菌量10萬(wàn)/mL時(shí)才有診斷意義防治原則預(yù)防：菌毛疫苗治療： 磺胺藥、慶大霉素等Shigell

10、a志賀菌屬 志賀菌屬是人類(lèi)細(xì)菌性痢疾的病原菌，俗稱(chēng)痢疾桿菌（dysentery bacterium）。 主要致病特點(diǎn)是能侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞，引起自限性化膿性感染病灶。形態(tài)染色與培養(yǎng)特性 無(wú)鞭毛、有菌毛 生化反應(yīng)不活躍 SS培養(yǎng)基上呈無(wú)色半透明菌落 克氏雙糖管斜面不發(fā)酵底層產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 硫化氫陰性、動(dòng)力陰性抗原構(gòu)造與分類(lèi)我國(guó)以福氏志賀菌引起的菌痢最常見(jiàn)。O抗原K抗原 阻抑抗O抗體與O抗原結(jié)合菌種群型亞型痢疾志賀菌 A110福氏志賀菌B16，X，Y變種鮑氏志賀菌C118宋內(nèi)志賀菌D1分為4群44個(gè)血清型（包括亞型） 對(duì)理化因素的抵抗力較其他腸道桿菌為弱。 對(duì)氯霉素、鏈霉素、氟哌酸、四環(huán)素、痢特靈、

11、黃連素、磺胺類(lèi)等藥物敏感，但容易出現(xiàn)耐藥變異株。抵抗力 抗原結(jié)構(gòu)、生化反應(yīng)、毒力及對(duì)藥物的敏感性易發(fā)生變異變異致病物質(zhì)侵襲力：菌毛黏附回腸末端和結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞， 并侵入生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生炎癥。毒素：外毒素內(nèi)毒素派伊爾淋巴結(jié)的M細(xì)胞通過(guò)型分泌系統(tǒng)向上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌4種蛋白志賀菌IpaA IpaB黏附并侵入IpaCIpaD誘導(dǎo)細(xì)胞膜凹陷 導(dǎo)致細(xì)菌內(nèi)吞志賀菌溶解吞噬小泡 進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)繁殖宿主細(xì)胞內(nèi)肌動(dòng)纖維的重排,推動(dòng)細(xì)菌進(jìn)入毗鄰細(xì)胞細(xì)胞到細(xì)胞傳播細(xì)菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保護(hù)通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞程序性死亡從吞噬中得到了存活1.侵襲力 作用志賀菌派伊爾淋巴結(jié)的M細(xì)胞菌毛黏附并侵入1.侵襲力 繁殖

12、輸送外源性Ag到其下方的巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞膜凹陷 導(dǎo)致細(xì)菌內(nèi)吞細(xì)菌擴(kuò)散并進(jìn)入毗鄰細(xì)胞淋巴組織細(xì)菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保護(hù)通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞程序性死亡從吞噬中得到了存活引起白細(xì)胞介素-1的釋放吸引多形核白細(xì)胞到 感染組織，腸壁完整性破壞細(xì)菌到達(dá)較深層的上皮細(xì)胞，加速了細(xì)菌的擴(kuò)散2.內(nèi)毒素內(nèi)毒素腸黏膜通透性?xún)?nèi)毒素的吸收促進(jìn)發(fā) 熱神志障礙中毒性休克作用內(nèi)毒素腸黏膜破壞炎癥潰瘍形成典型的膿血黏液便內(nèi)毒素腸壁自主神經(jīng)系統(tǒng)作用于腸功能紊亂腸蠕動(dòng)失調(diào)和痙攣腹痛里急后重3.外毒素：志賀毒素由1個(gè)A亞單位和5個(gè)B亞單位組成。A亞單位：可裂解60S核糖體亞單位的28SrRNA，阻止與氨酰tRNA的結(jié)合，終止蛋

13、白質(zhì)合成。B亞單位：與宿主細(xì)胞特異性糖脂受體結(jié)合(腸絨毛和腎上皮細(xì)胞均有高濃度的糖脂受體)毒素作用:引起上皮細(xì)胞微絨毛的破壞。個(gè)別病人志賀毒素可介導(dǎo)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，導(dǎo)致溶血性尿毒綜合征(HUS)所致疾病細(xì)菌性痢疾傳染途徑： 糞-口傳染源： 病人和帶菌者臨床表現(xiàn)急性細(xì)菌性痢疾急性典型：發(fā)熱、腹痛、里急后重,粘液膿血便急性中毒型：小兒中毒型慢性細(xì)菌性痢疾：病程遷移二月以上視頻 中毒性痢疾病人免 疫 性 志賀菌感染局限于腸粘膜，一般不入血，消化道黏膜表面的分泌型IgA（SIgA）為主，病后免疫力短暫。及時(shí)送/暫用30%甘油緩沖水保存SS平板（無(wú)色透明小菌落）血清學(xué)反應(yīng)（玻片凝集）最后診斷分離培

14、養(yǎng)新鮮膿血便/肛拭雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng)）快速診斷熒光菌球試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)微生物學(xué)檢查防治原則（1）控制傳染源、切斷傳播途徑、增進(jìn)機(jī)體免疫力（2）口服減毒活疫苗。預(yù)防多種抗菌素可選擇，但很易引起耐藥性治療Salmonella沙門(mén)菌屬目的要求掌握：對(duì)人致病的沙門(mén)氏菌的種類(lèi)、致病物質(zhì)和所致疾??；肥達(dá)試驗(yàn)的原理、結(jié)果分析與判斷。熟悉：沙門(mén)氏菌的主要生化反應(yīng)、特異性預(yù)防。了解：沙門(mén)氏菌的形態(tài)、抵抗力及變異。概 述 是一大群寄生于人類(lèi)和動(dòng)物腸道中，生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭氏陰性桿菌。 菌群菌型甚多，僅少數(shù)對(duì)人致?。▊抽T(mén)菌、副傷寒沙門(mén)氏菌等）。 有些沙門(mén)菌對(duì)動(dòng)物致病，可傳染人，引起食物中毒，如鼠傷寒

15、沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌、鴨沙門(mén)菌、豬霍亂沙門(mén)菌等。生物學(xué)性狀大都周身鞭毛、有菌毛。 不分解乳糖在SS選擇培養(yǎng)基上形成無(wú)色菌落?？耸想p糖管中，斜面不發(fā)酵，底層產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒沙門(mén)菌除外），硫化氫陽(yáng)性或陰性、動(dòng)力陽(yáng)性常見(jiàn)沙門(mén)菌的主要生化特性抗原構(gòu)造與分類(lèi)O抗原：脂多糖，群特異性 O抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM型抗體H抗原：鞭毛蛋白 H抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG型抗體Vi抗原：多糖，與毒力有關(guān)。測(cè)定Vi抗體有助于檢出傷寒及副傷寒帶菌者。抵 抗 力 較差，對(duì)一般消毒劑敏感,但對(duì)膽鹽、煌綠等的耐受性較其他腸道菌強(qiáng)，故膽鹽、煌綠可用作沙門(mén)菌選擇培養(yǎng)基，利于分離糞便中的沙門(mén)氏菌。致 病 物 質(zhì)1、侵襲力：菌毛粘附作用2、內(nèi)

16、毒素：發(fā)熱、白細(xì)胞減少、中毒性休克3、腸毒素：類(lèi)似ETEC產(chǎn)生的腸毒素、引起水樣腹瀉沙門(mén)菌派伊爾淋巴結(jié)的M細(xì)胞菌毛黏附并侵入1.侵襲力 具有耐酸應(yīng)答基因氧化酶、超氧化物歧化酶Vi抗原繁殖輸送外源性Ag到其下方的巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞膜凹陷 導(dǎo)致細(xì)菌內(nèi)吞細(xì)菌擴(kuò)散并進(jìn)入毗鄰細(xì)胞淋巴組織1、腸熱癥（傷寒和副傷寒）傳染源：病人和帶菌者、水源傳播途徑： 糞口典型病程：分四個(gè)階段所 致 疾 病潛伏期傷寒沙門(mén)菌經(jīng)口到小腸，侵入小腸末端的M細(xì)胞，被巨噬細(xì)胞吞噬后在細(xì)胞內(nèi)繁殖。部分細(xì)菌通過(guò)淋巴液到達(dá)腸系膜淋巴結(jié)大量繁殖。初期細(xì)菌隨淋巴液經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入血液（第一次菌血癥），并擴(kuò)散到肝、脾、腎、膽、骨髓等到部位。此階段為臨

17、床上的發(fā)病第一周，出現(xiàn)發(fā)熱、不適、全身疼痛等前驅(qū)期癥狀。第一周取什么樣品為標(biāo)本？抗體的水平如何？極期在肝、脾、腎、膽、骨髓等部位繁殖。由巨噬細(xì)胞帶入血液（第二次菌血癥），膽囊中細(xì)菌通過(guò)膽汁進(jìn)入腸道，部分隨糞便排出，部分再次進(jìn)入腸壁淋巴組織而激發(fā)超敏反應(yīng)，導(dǎo)致局部壞死和潰瘍，嚴(yán)重可造成腸出血及腸穿孔，腎中的細(xì)菌可隨尿排出。此階段為臨床上的第2、3周，出現(xiàn)持續(xù)高熱、相對(duì)緩脈、肝脾腫大、白細(xì)胞下降、皮膚玫瑰疹、全身中毒癥狀顯著。第2、3周取什么樣品為標(biāo)本？抗體的水平如何？恢復(fù)期進(jìn)入恢復(fù)階段。病愈后部分患者可自糞便或尿液繼續(xù)排菌3周至3個(gè)月，甚至1年，稱(chēng)恢復(fù)期帶菌者。約有3%的傷寒患者成為慢性帶菌者。

18、膽囊-腸道-糞排菌皮膚-玫瑰疹腎-尿排菌肝脾-腫大傷寒和副傷寒桿菌小腸黏膜腸系膜淋巴結(jié) 派伊爾淋巴結(jié)的M細(xì)胞進(jìn)入血液再次進(jìn)入血液第一次菌血癥第二次菌血癥腸熱癥（傷寒和副傷寒）的致病過(guò)程糞口途徑傷 寒 瑪 麗 2、腸炎型食物中毒臨床表現(xiàn)：發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。為攝入污染的食物，細(xì)菌在腸內(nèi)繁殖所至。引起細(xì)菌：鼠傷寒沙門(mén)菌、豬霍亂沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌。視頻3、敗血癥引起細(xì)菌：豬霍亂沙門(mén)菌、丙型副傷寒沙門(mén)菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、腸炎沙門(mén)菌。臨床表現(xiàn)：高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血免 疫 性腸熱癥病后產(chǎn)生牢固免疫，細(xì)胞免疫為主。 特異性體液免疫也有輔助殺菌的作用。傷寒和副傷寒 食物中毒 敗血癥第1周取外周血 可疑食物 血液第1-3周取骨髓液 嘔吐物第2周起糞便第3周取尿液 糞便微生物學(xué)檢查：查病原標(biāo)本SS平板生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定雙糖發(fā)酵等凝集試驗(yàn)5020陽(yáng) 性 率（%）12103040607080903456789凝集素糞便血尿傷寒病人不同病期血、糞、尿中病原菌和特異凝集素的檢出陽(yáng)性率1血2便3檢尿，要檢骨髓全知道發(fā)病后周數(shù)血清學(xué)檢查：查抗體1、肥達(dá)試驗(yàn)（Widal test）原理：用已知傷寒沙門(mén)菌菌體O抗原、H抗原以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門(mén)菌、肖氏沙門(mén)菌和希氏沙門(mén)菌H抗原的診斷菌液與受檢血清作試管或微孔板凝集試驗(yàn)，測(cè)定受檢血清中有無(wú)中相應(yīng)