病原微生物腸桿菌科

1、復 習 題1在化膿性感染中，能促感染局限化的細菌產(chǎn)物是 A血漿凝固酶 B鏈道酶 C透明質酸酶 D鏈激酶 E以上都不是A.金黃色葡萄球菌 B.甲型溶血型鏈球菌 C乙型溶血型鏈球菌 D M蛋白 1可引起風濕熱的是2可引起食物中毒的是3.常引起感染性心內(nèi)膜炎的致病菌是4.與腎小球腎炎有關的抗原蛋白是攜帶NDM-1的大腸桿菌感染，會導致許多病人出現(xiàn)尿路感染和血液中毒。在已發(fā)現(xiàn)的NDM-1細菌感染病例中，至少有一例已經(jīng)對所有已知的抗生素具有抗藥性。 超 級 細 菌NDM-1的大腸埃希菌第十章 腸桿菌科知 識 要 點1.掌握：（1）大腸埃希菌的生物學性狀、致病性。（2）志賀菌的生物學性狀、致病性、微生物學

2、檢查法。（3）沙門菌的生物學性狀、致病性、微生物學檢查法；血清學診斷和肥達試驗。2. 熟悉：（1）大腸埃希菌的微生物學檢查法及防治原則。（2）志賀菌和沙門菌感染的防治原則；3.了解：（1）大腸埃希菌在衛(wèi)生細菌學檢查中的意義。（2）志賀菌感染的免疫性；（3）沙門菌的分類及其感染的免疫性；（4）其他菌屬的致病性。概 述大多數(shù)為正常菌群少數(shù)是致病菌，如：致病性大腸埃希菌、傷寒沙門菌、痢疾志賀菌、 腸桿菌科細菌是一大群寄居在人類和動物腸道中生物學性狀近似的革蘭陰性桿菌。形態(tài)結構 形態(tài)相似。中等大小的革蘭陰性桿菌。多有鞭毛，少數(shù)有莢膜或包膜，致病菌多有菌毛。從形態(tài)上無法區(qū)別。共同特性生 化 反 應 活

3、潑致病菌株多不能分解乳糖。乳糖發(fā)酵試驗可初步鑒別腸道致病菌和非致菌能分解多種糖類和蛋白質，形成不同的代謝產(chǎn)物，常以此作為鑒別手段。共同特性大腸埃希菌和痢疾志賀菌，你能區(qū)分嗎？用鑒別培養(yǎng)基，不就行了？SSA指示劑為中性紅，分解乳糖產(chǎn)酸的細菌呈紅色菌落（大腸），不分解乳糖的細菌呈無色菌落?？乖Y構：復雜（1）O抗原（菌體抗原）：LPS的最外層核心多糖（2）H抗原（鞭毛抗原）（3）莢膜抗原：如Vi抗原、K抗原共同特性 對一般消毒劑敏感。 膽鹽、煌綠等染料對大腸埃希菌等非致病菌有選擇性的抑制作用。借選擇培養(yǎng)基來分離致病性腸道菌。抵 抗 力 弱共同特性Escherichia Escherichia 的細

4、菌一般不致病，是人類和動物腸道中的正常菌群。其中以大腸埃希菌（E.coli）最為重要（代表菌）。埃希菌屬形態(tài)染色G-桿菌多有周鞭毛致病株有菌毛 兼性厭氧、營養(yǎng)要求不高普通平板：灰白色、光滑、濕 潤、中等大小的菌 落。選擇培養(yǎng)基中菌 落為紅色液體培養(yǎng)基：均勻混濁生長培養(yǎng)特性： 生化反應能發(fā)酵葡萄糖等多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。大部分菌株迅速發(fā)酵乳糖。在克氏雙糖管中，斜面和底層均產(chǎn)酸產(chǎn)氣同沙門菌、志賀菌區(qū)分 硫化氫陰性、動力陽性 IMViC 試驗為+ + - -。抗原結構：復雜（1）O抗原（菌體抗原）：170種（2）H抗原（鞭毛抗原）：50種（3）K抗原：100種致病性致病物質所致疾病致病物質：黏 附 素

5、：黏附于泌尿道和腸道的細胞上。外 毒 素： 1、不耐熱腸毒素和 2、耐熱腸毒素a和b 3、志賀毒素和 4、溶血素AALT的結構和作用部位BBBBBA亞單位：毒素的活性部位B亞單位：與腸黏膜上皮細胞表面的GM1神經(jīng)節(jié)苷脂結合后,使A亞單位穿過細胞膜與腺苷環(huán)化酶作用腸粘膜細胞上的腺苷環(huán)化酶A亞單位ATPcAMP活化小腸分泌過度，腹瀉ST的作用：激活腸粘膜細胞上的鳥苷環(huán)化酶GTPcGMP液體平衡紊亂，腹瀉所致疾病：1、腸道外感染化膿性感染：腹膜炎、闌尾炎、手術創(chuàng)口感染，體弱者可引起敗血癥。新生兒引起新生兒腦膜炎。泌尿道感染：為上行感染，尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎。表現(xiàn)為尿頻、排尿困難、血尿和膿尿。腸出

6、血性大腸埃希菌 EHEC (enterohemorrhagic E.coli)腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌 ETEC (enterotoxigenic E.coli)腸侵襲性大腸埃希菌 EIEC (enteroinvasive E.coli)腸致病性大腸埃希菌 EPEC (enteropathogenic E.coli )腸集聚性大腸埃希菌EAEC (enteroaggregative E.coli)2、腸道感染：胃腸炎腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌(ETEC ) 疾病：5歲以下嬰幼兒腹瀉和旅行者腹瀉癥狀： 從輕微的腹瀉至水瀉，有惡心、低熱作用部位：小腸粘膜細胞致病物質：定植因子、 不耐熱腸毒素(LT) 、耐熱

7、腸毒素(ST)腸侵襲性大腸埃希菌 （ EIEC）疾?。狠^大兒童和成人腹瀉。癥狀：發(fā)熱、腹痛、腹瀉、膿血便和有里急后重。 類似細菌性痢疾。作用部位：大腸致病物質：內(nèi)毒素致病機理：不產(chǎn)生腸毒素，侵襲和破壞結腸粘膜上皮細胞，造成炎癥和潰瘍，產(chǎn)生黏液膿血便。腸致病性大腸埃希菌（ EPEC）疾?。簨胗變焊篂a。癥狀：發(fā)熱、嘔吐、腹瀉、粘液便。作用部位：小腸致病物質：不產(chǎn)生毒素，粘附素破壞微絨毛刷狀緣，絨毛萎縮、上皮細胞排列紊亂，功能受損。腸出血性大腸埃希菌(EHEC )疾?。撼鲅越Y腸炎，溶血性尿毒綜合征 多見于5歲以下兒童。癥狀：劇烈腹痛、水瀉、大量鮮血便。作用部位：小腸遠端、結腸致病物質：菌毛、志賀毒

8、素等。致病機理：志賀毒素滅活核糖體，終止蛋白質合成。引起腸黏膜水腫、出血、液體蓄積、腸黏膜脫落、腸細胞水腫、壞死、引起血性便。細菌血清型：O157：H7視頻疾?。簨雰焊篂a。癥狀：持續(xù)性水瀉、嘔吐、脫水、低熱、偶有血便。致病物質：毒素和黏附素致病機理：聚集性黏附腸道上皮細胞，導致微絨毛變短，單核細胞浸潤和出血。腸集聚性大腸埃希菌（EAEC）微生物學檢查病人標本中細菌的分離與鑒定 1、標本的采集：不同的病變采集不同的標本 2、分離培養(yǎng)與鑒定： 選擇培養(yǎng)基，生化反應鑒定 致病性大腸埃希菌須用血清學試驗定型 必要時鑒定腸毒素（ELISA、基因探針等）尿路感染：確定大腸埃希菌+計數(shù)， 尿菌量10萬/mL

9、時才有診斷意義SpecimensIsolation cultivation: seletive or differential medium(SS,EMB,MAC)biochemical test KIA，IMViC antibiotic susceptibility testserological test微生物學檢查衛(wèi)生細菌學檢查 大腸菌群數(shù)：每1000ml樣品中的大腸菌群數(shù)。 微生物學檢查標準：大腸菌群數(shù)飲水3個/ 1000ml 果汁、瓶裝汽水 5個/100ml尿路感染：確定大腸埃希菌+計數(shù)， 尿菌量10萬/mL時才有診斷意義防治原則預防：菌毛疫苗治療： 磺胺藥、慶大霉素等Shigell

10、a志賀菌屬 志賀菌屬是人類細菌性痢疾的病原菌，俗稱痢疾桿菌（dysentery bacterium）。 主要致病特點是能侵襲結腸粘膜上皮細胞，引起自限性化膿性感染病灶。形態(tài)染色與培養(yǎng)特性 無鞭毛、有菌毛 生化反應不活躍 SS培養(yǎng)基上呈無色半透明菌落 克氏雙糖管斜面不發(fā)酵底層產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 硫化氫陰性、動力陰性抗原構造與分類我國以福氏志賀菌引起的菌痢最常見。O抗原K抗原 阻抑抗O抗體與O抗原結合菌種群型亞型痢疾志賀菌 A110福氏志賀菌B16，X，Y變種鮑氏志賀菌C118宋內(nèi)志賀菌D1分為4群44個血清型（包括亞型） 對理化因素的抵抗力較其他腸道桿菌為弱。 對氯霉素、鏈霉素、氟哌酸、四環(huán)素、痢特靈、

11、黃連素、磺胺類等藥物敏感，但容易出現(xiàn)耐藥變異株。抵抗力 抗原結構、生化反應、毒力及對藥物的敏感性易發(fā)生變異變異致病物質侵襲力：菌毛黏附回腸末端和結腸黏膜上皮細胞， 并侵入生長繁殖，產(chǎn)生炎癥。毒素：外毒素內(nèi)毒素派伊爾淋巴結的M細胞通過型分泌系統(tǒng)向上皮細胞和巨噬細胞分泌4種蛋白志賀菌IpaA IpaB黏附并侵入IpaCIpaD誘導細胞膜凹陷 導致細菌內(nèi)吞志賀菌溶解吞噬小泡 進入細胞質內(nèi)繁殖宿主細胞內(nèi)肌動纖維的重排,推動細菌進入毗鄰細胞細胞到細胞傳播細菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保護通過誘導細胞程序性死亡從吞噬中得到了存活1.侵襲力 作用志賀菌派伊爾淋巴結的M細胞菌毛黏附并侵入1.侵襲力 繁殖

12、輸送外源性Ag到其下方的巨噬細胞誘導細胞膜凹陷 導致細菌內(nèi)吞細菌擴散并進入毗鄰細胞淋巴組織細菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保護通過誘導細胞程序性死亡從吞噬中得到了存活引起白細胞介素-1的釋放吸引多形核白細胞到 感染組織，腸壁完整性破壞細菌到達較深層的上皮細胞，加速了細菌的擴散2.內(nèi)毒素內(nèi)毒素腸黏膜通透性內(nèi)毒素的吸收促進發(fā) 熱神志障礙中毒性休克作用內(nèi)毒素腸黏膜破壞炎癥潰瘍形成典型的膿血黏液便內(nèi)毒素腸壁自主神經(jīng)系統(tǒng)作用于腸功能紊亂腸蠕動失調和痙攣腹痛里急后重3.外毒素：志賀毒素由1個A亞單位和5個B亞單位組成。A亞單位：可裂解60S核糖體亞單位的28SrRNA，阻止與氨酰tRNA的結合，終止蛋

13、白質合成。B亞單位：與宿主細胞特異性糖脂受體結合(腸絨毛和腎上皮細胞均有高濃度的糖脂受體)毒素作用:引起上皮細胞微絨毛的破壞。個別病人志賀毒素可介導腎小球內(nèi)皮細胞的損傷，導致溶血性尿毒綜合征(HUS)所致疾病細菌性痢疾傳染途徑： 糞-口傳染源： 病人和帶菌者臨床表現(xiàn)急性細菌性痢疾急性典型：發(fā)熱、腹痛、里急后重,粘液膿血便急性中毒型：小兒中毒型慢性細菌性痢疾：病程遷移二月以上視頻 中毒性痢疾病人免 疫 性 志賀菌感染局限于腸粘膜，一般不入血，消化道黏膜表面的分泌型IgA（SIgA）為主，病后免疫力短暫。及時送/暫用30%甘油緩沖水保存SS平板（無色透明小菌落）血清學反應（玻片凝集）最后診斷分離培

14、養(yǎng)新鮮膿血便/肛拭雙糖培養(yǎng)基（生化反應）快速診斷熒光菌球試驗協(xié)同凝集試驗微生物學檢查防治原則（1）控制傳染源、切斷傳播途徑、增進機體免疫力（2）口服減毒活疫苗。預防多種抗菌素可選擇，但很易引起耐藥性治療Salmonella沙門菌屬目的要求掌握：對人致病的沙門氏菌的種類、致病物質和所致疾?。环蔬_試驗的原理、結果分析與判斷。熟悉：沙門氏菌的主要生化反應、特異性預防。了解：沙門氏菌的形態(tài)、抵抗力及變異。概 述 是一大群寄生于人類和動物腸道中，生化反應和抗原構造相似的革蘭氏陰性桿菌。 菌群菌型甚多，僅少數(shù)對人致?。▊抽T菌、副傷寒沙門氏菌等）。 有些沙門菌對動物致病，可傳染人，引起食物中毒，如鼠傷寒

15、沙門菌、腸炎沙門菌、鴨沙門菌、豬霍亂沙門菌等。生物學性狀大都周身鞭毛、有菌毛。 不分解乳糖在SS選擇培養(yǎng)基上形成無色菌落?？耸想p糖管中，斜面不發(fā)酵，底層產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒沙門菌除外），硫化氫陽性或陰性、動力陽性常見沙門菌的主要生化特性抗原構造與分類O抗原：脂多糖，群特異性 O抗原刺激機體產(chǎn)生IgM型抗體H抗原：鞭毛蛋白 H抗原刺激機體產(chǎn)生IgG型抗體Vi抗原：多糖，與毒力有關。測定Vi抗體有助于檢出傷寒及副傷寒帶菌者。抵 抗 力 較差，對一般消毒劑敏感,但對膽鹽、煌綠等的耐受性較其他腸道菌強，故膽鹽、煌綠可用作沙門菌選擇培養(yǎng)基，利于分離糞便中的沙門氏菌。致 病 物 質1、侵襲力：菌毛粘附作用2、內(nèi)

16、毒素：發(fā)熱、白細胞減少、中毒性休克3、腸毒素：類似ETEC產(chǎn)生的腸毒素、引起水樣腹瀉沙門菌派伊爾淋巴結的M細胞菌毛黏附并侵入1.侵襲力 具有耐酸應答基因氧化酶、超氧化物歧化酶Vi抗原繁殖輸送外源性Ag到其下方的巨噬細胞誘導細胞膜凹陷 導致細菌內(nèi)吞細菌擴散并進入毗鄰細胞淋巴組織1、腸熱癥（傷寒和副傷寒）傳染源：病人和帶菌者、水源傳播途徑： 糞口典型病程：分四個階段所 致 疾 病潛伏期傷寒沙門菌經(jīng)口到小腸，侵入小腸末端的M細胞，被巨噬細胞吞噬后在細胞內(nèi)繁殖。部分細菌通過淋巴液到達腸系膜淋巴結大量繁殖。初期細菌隨淋巴液經(jīng)胸導管進入血液（第一次菌血癥），并擴散到肝、脾、腎、膽、骨髓等到部位。此階段為臨

17、床上的發(fā)病第一周，出現(xiàn)發(fā)熱、不適、全身疼痛等前驅期癥狀。第一周取什么樣品為標本？抗體的水平如何？極期在肝、脾、腎、膽、骨髓等部位繁殖。由巨噬細胞帶入血液（第二次菌血癥），膽囊中細菌通過膽汁進入腸道，部分隨糞便排出，部分再次進入腸壁淋巴組織而激發(fā)超敏反應，導致局部壞死和潰瘍，嚴重可造成腸出血及腸穿孔，腎中的細菌可隨尿排出。此階段為臨床上的第2、3周，出現(xiàn)持續(xù)高熱、相對緩脈、肝脾腫大、白細胞下降、皮膚玫瑰疹、全身中毒癥狀顯著。第2、3周取什么樣品為標本？抗體的水平如何？恢復期進入恢復階段。病愈后部分患者可自糞便或尿液繼續(xù)排菌3周至3個月，甚至1年，稱恢復期帶菌者。約有3%的傷寒患者成為慢性帶菌者。

18、膽囊-腸道-糞排菌皮膚-玫瑰疹腎-尿排菌肝脾-腫大傷寒和副傷寒桿菌小腸黏膜腸系膜淋巴結 派伊爾淋巴結的M細胞進入血液再次進入血液第一次菌血癥第二次菌血癥腸熱癥（傷寒和副傷寒）的致病過程糞口途徑傷 寒 瑪 麗 2、腸炎型食物中毒臨床表現(xiàn)：發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。為攝入污染的食物，細菌在腸內(nèi)繁殖所至。引起細菌：鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌。視頻3、敗血癥引起細菌：豬霍亂沙門菌、丙型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門菌。臨床表現(xiàn)：高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血免 疫 性腸熱癥病后產(chǎn)生牢固免疫，細胞免疫為主。 特異性體液免疫也有輔助殺菌的作用。傷寒和副傷寒 食物中毒 敗血癥第1周取外周血 可疑食物 血液第1-3周取骨髓液 嘔吐物第2周起糞便第3周取尿液 糞便微生物學檢查：查病原標本SS平板生化反應血清學鑒定雙糖發(fā)酵等凝集試驗5020陽 性 率（%）12103040607080903456789凝集素糞便血尿傷寒病人不同病期血、糞、尿中病原菌和特異凝集素的檢出陽性率1血2便3檢尿，要檢骨髓全知道發(fā)病后周數(shù)血清學檢查：查抗體1、肥達試驗（Widal test）原理：用已知傷寒沙門菌菌體O抗原、H抗原以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌和希氏沙門菌H抗原的診斷菌液與受檢血清作試管或微孔板凝集試驗，測定受檢血清中有無中相應