艾滋病實驗室檢查課件

1、1艾滋病 (AIDS)1ppt課件2實 驗 室 檢 查2ppt課件3免疫學(xué)檢測AIDS患者正常(109/L)CD40.21(0.81.2)CD4/CD811.22.1淋巴細(xì)胞總數(shù)123流式細(xì)胞儀測定3ppt課件4血清學(xué)檢測（）HIV抗體的初篩試驗ELISA（酶聯(lián)免疫試驗）4ppt課件5血清學(xué)檢測（）HIV抗體的確證試驗Western blot （免疫印跡試驗）5ppt課件6血清學(xué)檢測（）HIV抗原檢測ELISA夾心法測定p24抗原敏感性很高（710 pg/ml）特異性稍差（可有假陽性）6ppt課件7分子生物學(xué)檢測（1）HIV RNA檢測RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)）PCR：高溫變性(94

2、)低溫退火(55)適溫延伸(72)；經(jīng)2530個循環(huán)，成倍數(shù)擴(kuò)增熒光定量PCR：比常規(guī)PCR多一個寡聚核苷酸探針（帶一個熒光發(fā)光分子和一個熒光淬滅分子）應(yīng)用：PCR查PBMCs前病毒DNA；RT-PCR查血漿中的病毒RNA7ppt課件8分子生物學(xué)檢測（2）淋巴細(xì)胞HIV RNA檢測Northern印跡雜交(Northern blot) 原理： RNA片段經(jīng)電泳分離，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜，再用探針雜交8ppt課件9分子生物學(xué)檢測（3）HIV變異株檢測Sanger測序法 原理：核酸擴(kuò)增時，核苷酸在某一固定點開始，隨機(jī)在某一特定的堿基處終止，產(chǎn)生A、T、C、G四組不同長度的一系列核苷酸，通過

3、在尿素變性的PAGE膠上電泳，獲得DNA序列9ppt課件10病毒檢測血漿、單核細(xì)胞、腦脊液可分離出HIV操作復(fù)雜，主要用于科研10ppt課件11診 斷11ppt課件12診斷原則流行病學(xué)史：有靜脈注射毒品史；多個性伴和不潔性生活史；輸入未經(jīng)HIV抗體檢測的血液和血制品史；HIV抗體陽性所生的子女；其它（如職業(yè)暴露或醫(yī)源性感染史）。臨床表現(xiàn)： 高危對象出現(xiàn)上感樣及單核細(xì)胞增多癥樣表現(xiàn)， 頸、腋及枕部淋巴結(jié)腫大，肝脾腫大，可考慮急性HIV感染。 無癥狀期、艾滋病期臨床表現(xiàn)。 實驗室檢查：HIV抗體陽性，并經(jīng)確證試驗確認(rèn)。CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯減少。HIV RNA和P24抗原的檢測有助于早期診斷新生

4、兒的HIV感染。12ppt課件13診斷標(biāo)準(zhǔn)急性期 流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性 僅實驗室檢查HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性無癥狀期 流行病學(xué)史、HIV抗體陽性 僅實驗室檢查HIV抗體陽性 13ppt課件14診斷標(biāo)準(zhǔn)艾滋病期 流行病學(xué)史，HIV抗體陽性，臨床表現(xiàn)有下列一項或以上： 1.短期（6個月內(nèi)）體重下降10以上；2.咳嗽或腹瀉超過4周；3.持續(xù)或間歇發(fā)熱超過4周；4.全身淋巴結(jié)腫大；5.反復(fù)帶狀皰疹或慢性播散性HSV感染；6.口咽念珠菌??；7.全身搔癢性皮炎；8.反復(fù)發(fā)生的敗血癥；9.深部真菌感染，馬爾尼非青霉菌；10.肺孢子蟲肺炎；11.活動性巨細(xì)胞病毒感染；12.弓形蟲腦病

5、。13.反復(fù)發(fā)生、難治性肺部感染或進(jìn)展迅速的活動性結(jié)核??；14.中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損、占位性病變或中、青年癡呆癥；15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。14ppt課件15診斷標(biāo)準(zhǔn) HIV抗體陽性 CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)200/mm3 無上述表現(xiàn)或癥狀15ppt課件16鑒別診斷原發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少癥 無HIV感染流行病學(xué)資料，HIV-1和HIV-2病原學(xué)檢測陰性。繼發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少 腫瘤和自生免疫性疾?。╝utoimmune disease）化療或免疫抑制治療后。16ppt課件17預(yù) 后17ppt課件18影響預(yù)后的因素感染的HIV型別及亞型： HIV-1較HIV-2臨床進(jìn)展快并發(fā)的機(jī)會性感染： 同時合并卡波濟(jì)肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；合并丙型肝炎者預(yù)后差抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療： 治療改變了艾滋病進(jìn)程 18ppt課件19HIV感染未治療者的結(jié)局典型 (70%80%)：510年進(jìn)展為艾滋病