輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究-毛淑杰課件

1、中藥炮制輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 毛淑杰 匯報(bào)綱要一.中藥炮制輔料起源作用及現(xiàn)狀調(diào)研 1.常用輔料的起源及作用 2.現(xiàn)狀調(diào)研二.中藥炮制輔料實(shí)驗(yàn)研究 1.輔料化學(xué)成分研究 2.輔料藥理研究 3. 輔料工藝研究 4.輔料炮制代表藥材研究 5.輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立 6.輔料炮制對(duì)中藥的影響中藥炮制： 是將中藥材制備成優(yōu)質(zhì)中藥飲片的過(guò)程和技術(shù)稱為“炮制”炮制用輔料是指對(duì)飲片有輔助作用的物料，現(xiàn)在也有專家稱其為“助料”用輔料炮制中藥可起到增效、解毒、改變藥性、利于配制及儲(chǔ)存等等。用輔料炮制中藥有什么作用及理論 用輔料炮制中藥在長(zhǎng)期醫(yī)療和生產(chǎn)實(shí)際中逐漸總結(jié)和形成理論： 酒制升提引藥上行，可增

2、強(qiáng)溫補(bǔ)肝腎、活血通絡(luò)作用； 醋制入肝，增強(qiáng)活血祛瘀、理氣止痛作用蜜制后有明顯增強(qiáng)其潤(rùn)肺止咳的作用等等 中藥炮制輔料的分類液體: 酒、醋、蜜、食鹽水、生姜汁、甘草汁、黑豆汁、膽汁、麻油、羊脂油等。固體: 白礬、蛤粉、滑石粉、河砂、稻米、麥麩、豆腐等研究課題：中藥炮制輔料醋和酒規(guī)范化示范研究8種炮制輔料規(guī)范化研究輔料甘草汁吳茱萸汁規(guī)范化研究醋制增效理論研究 等等 以上是科技部等專門立項(xiàng)研究一.常用炮制輔料 的起源作用及現(xiàn)狀調(diào)研 1.常用輔料的起源及作用臨床應(yīng)用最早見(jiàn)于皇帝內(nèi)經(jīng)神農(nóng)本草經(jīng)有黃酒作輔料記載清代出現(xiàn)“白酒”炮制藥材黃酒、白酒藥性不同黃酒(米酒)少飲則和血行氣，壯神御寒燒酒（白酒），散寒破

3、結(jié)，損人尤甚。酒制升提引藥上行，可增強(qiáng)溫補(bǔ)肝腎、活血通絡(luò)作用被應(yīng)用至今。歷代炮制輔料習(xí)用黃酒。酒 蜂蜜 蜂蜜入藥已有二千多年。最早是補(bǔ)益藥，然后才是制劑、炮制的輔料。從野蜜峰釀蜜，逐漸被家蜂替代。 蜂蜜從開始的單純藥用，逐漸演變?yōu)樗幨巢⒂?，目前食用和保健品?yīng)用范圍遠(yuǎn)大于藥用范圍。 用蜜炮制最早雷公炮制論,目的是能和百藥,養(yǎng)脾氣,增強(qiáng)潤(rùn)肺止咳的作用。如：黃芪、甘草、百合麥麩 最早見(jiàn)雷公炮制論記載炮制枳殼，明代的本草蒙荃記載：“麩制抑酷性，勿傷上膈。 目的：麩炒可以降低藥物的燥性，減少耗液傷津。增強(qiáng)健脾和中的作用，這一理論一直沿用至今，被多種書籍收載。 姜汁 姜汁制備始見(jiàn)金匱玉函經(jīng)肘后備急方及本草

4、經(jīng)集注先后提出 “中半夏毒：以生姜汁解之作為炮制輔料始見(jiàn)劉涓子鬼遺方“半夏：湯洗七遍,生姜浸一宿,熬過(guò)”。用姜汁炮制中藥方法,在雷公炮炙論中均有記述。2.市場(chǎng)調(diào)研對(duì)全國(guó)20多個(gè)省市（北京、上海、天津、山西、鎮(zhèn)江、南京、新疆、沈陽(yáng)、長(zhǎng)春、湖南、江西等）30多個(gè)有代表性的中藥飲片廠、輔料廠進(jìn)行了走訪調(diào)查、摸底。取得了第一手資料。填寫調(diào)查表200多張。收集到全國(guó)有代表性輔料樣本幾百個(gè)食醋：約5000多家,規(guī)模較大為江蘇恒順，山西,北京龍門和田寬、四川保寧、石家莊珍極,山東玉兔、上海寶鼎、福建永春等。 分為品牌企業(yè)、作坊式企業(yè)等。 類別分為：釀造醋、配制醋和再造醋調(diào)查結(jié)果： 1.食醋約5000多家,規(guī)

5、模最大為江蘇恒順，山西，北京龍門和田寬、四川保寧、石家莊珍極、山東玉兔、上海寶鼎、福建永春等。 2.分為品牌企業(yè)、作坊式企業(yè)等。 3.類別分為：發(fā)酵醋、配制醋和再造醋液態(tài)發(fā)酵醋工藝流程（白米醋）： 固態(tài)發(fā)酵醋工藝流程（棕色米醋）： 發(fā)酵醋液大米 糖化醋酸發(fā)酵粗醪放罐成品配兌過(guò)濾大米糖化酒化醋酸發(fā)酵熟醅配兌 過(guò)濾曬制、陳釀過(guò)濾淋醋成品研究證明： 近代對(duì)醋的發(fā)酵機(jī)理、內(nèi)在成分 18種以上氨基酸 8種以上有機(jī)酸 6種以上無(wú)機(jī)離子 11種以上糖 13種以上酯、醇類香氣成分。 目前食醋品種繁多，質(zhì)量不一。白礬 為硫酸鹽類礦物明礬石經(jīng)加工提煉而成，由于來(lái)源比較復(fù)雜，白礬傳統(tǒng)的加工工藝又不同，質(zhì)量有差異，其

6、除含主成分硫酸鋁鉀外，還含有其它元素，據(jù)報(bào)道人服用大量白礬有致死病例。工業(yè)用及食用白礬質(zhì)量差別很大。炮制又沒(méi)有明確要求，因此用沒(méi)有藥用標(biāo)準(zhǔn)白礬炮制的中藥飲片質(zhì)量就很難保證。硫酸鹽類礦物如：石膏主含硫酸鈣；芒硝主含硫酸鈉，都有致死人病例問(wèn)題-2 制備工藝不統(tǒng)一 如生姜汁（半夏、厚樸）、吳茱萸汁、甘草汁、煉蜜等要進(jìn)行加工制備，工藝全國(guó)各異，導(dǎo)致質(zhì)量不穩(wěn)定。 煉蜜：藥典規(guī)定：蜜炙飲片要用煉蜜，但未規(guī)定煉蜜的具體方法、程度。中藥炮制學(xué)規(guī)定：將蜂蜜加熱至116118，至鍋起魚泡，用手捻之有粘性，含水量控制在10%13%為宜。江西炮制規(guī)范規(guī)定：先將蜜熬至“米篩花”狀，呈黃棕色，能滴水成珠為度等等 哪種工藝

7、煉制最適合中藥炮制用，未見(jiàn)有實(shí)驗(yàn)報(bào)道。 收集飲片廠煉蜜HPLC法測(cè)定各成分含量（%）樣品產(chǎn)地葡萄糖果糖蔗糖5-HMF（g/g） 良鄉(xiāng)飲片廠北京33.9037.160.9351.3中藥飲片廠天津（未煉）22.1841.060.844.16中藥飲片廠上海31.0134.710.98179.5中藥飲片廠杭州29.9528.450.7615.5百勝藥業(yè)虹橋藥業(yè)四川上海25.2324.4641.9134.244.871.071.3710.9制藥廠制藥廠新疆（生）新疆（煉）22.4848.1638.5120.641.040.2510.503370不同溫度時(shí)間煉蜜成分變化煉蜜時(shí)間：生品、5、8、10、15、

8、20min煉蜜溫度：大火.95.112.105.130.132 5-羥甲基糠醛煉132 20min是生品的86倍。問(wèn)題-3 輔料來(lái)源不清，就近取材 使用過(guò)程中貨源不清，無(wú)法溯源，不辨良莠 不經(jīng)檢驗(yàn)，買來(lái)即用現(xiàn)象非常普遍。 輔料質(zhì)量管理欠缺 缺乏標(biāo)準(zhǔn)，管理有空白 造假較多二.實(shí)驗(yàn)研究輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究?jī)?nèi)容1.輔料化學(xué)成分研究2.輔料藥理研究3.輔料制備工藝研究4.輔料炮制代表藥材研究5.輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立及起草說(shuō)明6.輔料炮制對(duì)中藥的影響1.輔料的化學(xué)成分研究： 醋的化學(xué)成分研究酒的化學(xué)成分研究GC-MS分析醋與酒香氣結(jié)果采用GC-MS頂空進(jìn)樣技術(shù) 醋 發(fā)現(xiàn)醋中有35種揮發(fā)性香氣成分酯類是主要成分，

9、乙酸乙酯（EtOAc）最高。乙酸有窖泥香、使人有愉悅的香氣。聯(lián)乙酰極少量就可以有香甜味。因工藝差別成分不同 ，其中平均固態(tài)發(fā)酵17種、液態(tài)發(fā)酵16種、配制醋3種黃酒構(gòu)成黃酒香氣的主要成分是： 乙酸乙酯,異戊醇,丁酸乙酯等，占8090。酯類可能是由乙酸和乳酸緩慢反應(yīng)生產(chǎn)，在儲(chǔ)存過(guò)程中可能進(jìn)一步使酯化成分含量增加。異戊醇是強(qiáng)的致香劑，使苦澀味的亮氨酸減少，口感有很大改善。建議GB增加檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。 -苯乙醇是米香型酒主體香味成分之一，具清雅香氣，落口有綿甜清爽之感。 醋、酒的其他成分分析 參照GB技術(shù)要求醋 對(duì)初篩出的41個(gè)樣品的感官特性、總酸、不揮發(fā)酸、還原糖、氨基態(tài)氮、游離礦酸、pH值、可溶性無(wú)鹽

10、固形物、鹽等9項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。酒 對(duì)初篩出的26個(gè)樣品進(jìn)行含糖量、酒精度、pH值、相對(duì)密度、菌落總數(shù)等檢查。小結(jié)總酸：27個(gè)樣品中有3個(gè)樣品不合格。還原糖: 11個(gè)樣品還原糖含量在0.5%以下。鎮(zhèn)江恒順、山西陳醋、龍門及配制食醋含量較高，高達(dá)3.2%，氨基態(tài)氮：鎮(zhèn)江恒順、山西陳醋含量較高，高達(dá)0.32%，個(gè)別食醋為零。不揮發(fā)酸： 20個(gè)樣品不合格。鎮(zhèn)江恒順、山西陳醋、龍門米醋、山東玉兔、天津翠波含量較高，達(dá)1.5%以上。綜合結(jié)論發(fā)現(xiàn)不同企業(yè)的產(chǎn)品質(zhì)量差異較大！發(fā)酵米醋質(zhì)量較好，與傳統(tǒng)用法相符！ 醋的質(zhì)量分析結(jié)論酒的質(zhì)量分析結(jié)論小結(jié)收集品含糖量合格率達(dá)到95%以上，基本符合要求收集品相對(duì)密度、p

11、H值的檢測(cè)符合GB標(biāo)準(zhǔn)4個(gè)樣品酒精度低于GB標(biāo)準(zhǔn)合格率達(dá)85%三種黃酒菌落總數(shù)超出國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)十幾倍，其他袋裝或者瓶裝樣品全部合格綜合結(jié)論包裝形式對(duì)酒的質(zhì)量存在影響密封的瓶裝、袋裝、壇裝，質(zhì)量較好 姜汁 榨生姜汁；煮的生、煮干姜汁 HPLC指紋圖譜研究發(fā)現(xiàn)：煮干姜汁液相圖譜極性成分含量增加。煮干、生姜汁40 min后成分急劇減弱或消失，說(shuō)明壓榨汁與煮汁二者的化學(xué)成分差異顯著。通過(guò)HPLC圖比較：榨生姜汁更能反映生姜成分的原貌 姜汁揮發(fā)性成分GC圖譜研究 榨生姜汁中低沸點(diǎn)脂溶性成分較煮生姜汁、煮干姜汁中多，亦更能保留生姜的本色和氣味。 麥麩成分測(cè)定（ % ）序號(hào)來(lái)源總黃酮含量1上海徐匯中藥飲片有限公

12、司0.8422上海養(yǎng)和堂中藥飲片有限公司0.8093上海虹橋藥業(yè)有限公司0.8974上海徐匯中藥飲片有限公司（蜜炙麥麩）0.8375杭州中藥飲片廠1.136四川百盛制藥有限公司0.9757無(wú)錫山禾中藥飲片廠1.268北京通州1.039山東棗莊1.3410內(nèi)蒙古0.7432.輔料藥理研究實(shí)驗(yàn) 醋的安全性試驗(yàn) 同濃度不同類型醋對(duì)小鼠死亡率的影響結(jié)果首次發(fā)現(xiàn)醋酸配置、配制醋，口服25mLkg-1，可引起約30小鼠死亡而發(fā)酵米醋在同等劑量下無(wú)毒因此，選用米醋進(jìn)行炮制是有科學(xué)依據(jù)的甘草汁炮制吳茱萸藥理作用比較大鼠基本體征實(shí)驗(yàn)胃寒證模型實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果大鼠基本體征實(shí)驗(yàn)： 大鼠連續(xù)給藥14天，吳茱萸生品、炮制品

13、與對(duì)照組比，體重顯著增加，生品和不同炮制品之間差異顯著胃寒證模型實(shí)驗(yàn)結(jié)果：用石膏、知母、龍膽連續(xù)灌服造模14天造成大鼠胃寒證模型.吳茱萸各組給藥14天后，體重、心率與對(duì)照組相比均有增加，體現(xiàn)了一定治療作用。吳茱萸屬熱性，能耗液傷津，甘草汁炮制能緩和藥性，通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)證明炮制是有一定道理。3.輔料制備工藝研究 甘草汁（炮制用） 通過(guò)正交設(shè)計(jì)篩選，考察四因素三水平，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際驗(yàn)證，以3個(gè)指標(biāo)篩選，最終確定制備工藝：凈甘草6，干切成約12 小段，加入12倍量水，煎1h，重復(fù)煎煮1次，合并煎煮液為100即得。吳茱萸汁 通過(guò)正交設(shè)計(jì)四因素的三水平篩選結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際確定工藝：取吳茱萸10kg，加入12、8

14、、6倍水，煎煮45分，3次，濾出藥汁；合并濃縮至90升 煉蜜 通過(guò)7個(gè)指標(biāo)實(shí)驗(yàn)篩選，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際，確定制備工藝如下： 取凈蜂蜜加水5（可根據(jù)原蜜含水量加水，因?yàn)?0煉10min加水量和失水率基本相當(dāng)），80-90蒸汽加熱煉制6-10 min即可。 姜汁由正交試驗(yàn)結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際確定制備工藝：煮干姜汁：取干姜，搗碎，煎煮3次，每次時(shí)間1 h，加水依次為12、10、8倍量，合并過(guò)濾，濃縮至為0.33 g（干姜）mL-1。榨生姜汁：取生姜，洗凈，切塊，每次加水量10，反復(fù)壓榨23次，合并汁液，過(guò)濾，所得姜汁約為1 mLg（生姜）-1。黑 豆 汁炮制工藝確定： 取黑豆10公斤，加水適量，約煮4小時(shí)、3小時(shí)

15、，2次。熬汁約15公斤、10公斤，合并得黑豆汁約25公斤即得。4.輔料炮制代表藥材研究 以同批合格藥材，按照規(guī)定的炮制工藝，用不同的輔料進(jìn)行炮制，以評(píng)價(jià)酒、醋的優(yōu)劣選27種醋炮制延胡索、芫花選9種酒炮制黃芩、黃連、龍膽代表藥材評(píng)價(jià)指標(biāo)延胡索 延胡索乙素、總生物堿及鎮(zhèn)痛作用；芫花 測(cè)定芫花酯甲及安全性實(shí)驗(yàn)；黃芩 測(cè)定有效成分煎出率、浸出物、黃芩苷含量；黃連 測(cè)定水浸出物、小檗堿、巴馬汀、藥根堿含量；龍膽 測(cè)定水浸出物、龍膽苦苷含量延胡索模擬實(shí)驗(yàn)考察醋增效作用醋樣遴選原則： 1.通過(guò)GMP認(rèn)證飲片廠用醋 2.按照工藝 固態(tài)、液態(tài)、配制醋 3.按照地域和食醋企業(yè)規(guī)模 4.實(shí)驗(yàn)篩選結(jié)果對(duì)全國(guó)各地27種

16、不同類型、不同品牌有代表性的醋進(jìn)行模擬炮制篩選結(jié)果作為炮制用輔料醋的指標(biāo)之一。醋制延胡索模擬實(shí)驗(yàn)： 首先建立了延胡索中延胡索乙素的HPLC含量測(cè)定方法，并進(jìn)行了方法學(xué)研究，證明該法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。aaa延胡索高效液相色譜圖（對(duì)照品、生品、炮制品）序號(hào) 延胡索乙素較生品提高率RSD%序號(hào) 延胡索乙素較生品提高率RSD%生品 0.05223.4140.070236.40.41-10.068238.92.3150.074943.51.21-20.05576.700.3160.072338.51.020.070935.80.4170.073741.22.530.072138.10.7180.07

17、1937.83.740.071737.42.5190.071336.61.050.074442.50.5200.064723.92.560.059213.41.8210.05505.360.870.070334.71.1220.074142.00.580.076045.60.8230.075043.70.490.081556.10.2240.077748.90.1100.074041.73.4250.072138.12.9110.063722.00.9260.069833.71.7120.071837.52.0270.061016.91.0130.070034.12.3 延胡索煎劑中總生物堿的

18、測(cè)定建立了總生物堿的分析方法，完成27個(gè)模擬樣品中總生物堿含量的測(cè)定，結(jié)果如下表：序號(hào)生物堿含量提高率RSD%序號(hào)生物堿含量提高率RSD%生品 0.1664.70140.20825.303.401-10.20825.303.40150.20322.290.321-20.21328.310.15160.18712.654.1720.20322.290.23170.19819.283.9430.18712.654.17180.197819.163.9440.20322.290.18190.22434.946.9450.22434.940.45200.18712.654.1760.19819.283

19、.94210.18612.054.1770.25151.203.11220.1766.024.0280.26760.845.57230.19819.283.9490.24648.196.04240.20322.290.33100.25151.203.11250.19215.660.23110.24547.590.35260.21328.310.15120.20322.297.33270.19215.660.25130.20825.303.40 延胡索炮制品對(duì)鎮(zhèn)痛作用比較（扭體法） 組別給藥劑量動(dòng)物數(shù)扭體反應(yīng)次數(shù)鎮(zhèn)痛率 ( /k)(只)(XSD)（%） 對(duì)照組 1415.3611.694龍門米醋

20、10104.306.15*72 4珍極米醋10106.306.78*58.98 上海天魚米醋10108.307.3545.96 鎮(zhèn)江原液10105.506.9*64.19 18青花白醋10133.383.86*77.99 天津翠波米醋10105.808.08*62.24陽(yáng)性對(duì)照組0.2100.20.63*98.70 不同品種醋炮制延胡索鎮(zhèn)痛作用比較（熱板法） 組別 劑量 動(dòng)物數(shù) 藥前痛閾值 痛閾值 ( /k )(只)藥后1h1.5h2 hXSD 對(duì)照組 1013.54.713.72.912.72.113.95.2 4龍門米醋101011.42.716.2 3.5*15.46.018.35.8*

21、 4珍極米醋101014.3 4.013.9 4.318.45.614.93.6 上海天魚米醋101014.42.722.46.4*22.314.623.216.1鎮(zhèn)江原液101012.82.523.214.5*22.314.623.216.1* 18青花白醋101013.83.419.310.7*21.114.821.215.0 天津翠波米醋101012.23.616.57.2*16.34.221.69.7 陽(yáng)性對(duì)照組301012.41.745.215.2*39.517.1*3414.0*結(jié)果：不同的醋炮制延胡索后鎮(zhèn)痛作用不同，以鎮(zhèn)江原液、18 青花、龍門米醋等鎮(zhèn)痛作用較好。研究小結(jié)1醋制延

22、胡索醋制有利于延胡乙素及總生物堿含量的煎出，增加幅度在6%60%不等。提示不同質(zhì)量的醋對(duì)延胡索有效成份影響不同。不同的醋炮制延胡索后鎮(zhèn)痛作用不同，以鎮(zhèn)江原液、18 青花、龍門米醋等鎮(zhèn)痛作用較好。結(jié)果：總酸含量高的米醋炮制效果好。醋制芫花模擬實(shí)驗(yàn) 首先建立了芫花中芫花酯甲的HPLC含量測(cè)定方法，并進(jìn)行了方法學(xué)研究，證明該法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。芫花模擬實(shí)驗(yàn)HPLC圖芫花酯甲對(duì)照品芫花生品芫花醋制品樣品名稱含量（%）下降率（%）生芫花0.017808。龍門白0.01685.62鎮(zhèn)江米醋0.015811.24上海寶鼎0.01657.889。白醋0.01780福建永春0.0174.49山西米醋0.01

23、5512.92山東玉兔0.0174.49匯仁另打0.01732.8萬(wàn)通白醋0.01685.62表1 不同品種醋制芫花對(duì)有毒成分芫花酯甲含量影響天津翠波0.01742.24古燈陳醋0.01780上海川崎0.01647.87新疆笑廚0.01610.11古燈白醋0.01666.74珍極米醋0.01638.43東湖名醋0.01628.99丹東光華0.01657.3青花醋精0.01695.06紅梅陳醋0.015811.24紫林頭醋0.015910.67水塔老陳醋0.01732.18續(xù)表1不同品種醋制對(duì)芫花毒性影響 動(dòng)物： 小鼠 劑型： 煎劑給藥途徑：口服 劑量： 10/K 不同品種15醋制芫花毒性比較

24、樣品名稱藥前體重(g)3天體重(g)7天體重(g)死亡只數(shù) 死亡率(%)對(duì)照組19.8923.0424.7800生芫花19.0521.9621.945504龍門19.5822.2125.7900鎮(zhèn)江原液19.4322.1324.4900上海寶鼎19.4622.1526.39020天津翠波19.0622.6224.67004珍極醪19.3622.2126.6100福建永春19.4922.0725.3200徐州萬(wàn)通20.1420.4326.400古燈陳醋19.7122.8224.5000山東玉兔19.1121.5325.06110沈陽(yáng)青花19.2721.6724.64110上海川崎19.8823.

25、2325.2900水塔老陳醋19.6422.3624.821109珍極19.8722.1724.04110東湖名醋19.8623.0825.7800研究小結(jié)2醋制芫花醋制后，有2個(gè)醋無(wú)作用，其它可降低毒性成分芫花酯甲，降低幅度2%15%不等。醋制后，小鼠毒性降低50%左右實(shí)現(xiàn)了減毒目的不同醋減毒作用不同研究小結(jié)3酒制黃芩炮制后的有效成分高于生品說(shuō)明酒制有利于有效成分的煎出黃酒炮制的有效成分高于白酒炮制品提示黃酒炮制優(yōu)于白酒結(jié)論用含糖量低的干型黃酒更佳研究小結(jié)4酒黃連酒制的有效成分含量煎出率高于生品在出膏率方面：半甜型黃酒半干型黃酒干型黃酒3個(gè)生物堿總和：干型黃酒半干型黃酒半甜型黃酒，但總體水平

26、相差不大白酒炮制類似于半干型黃酒結(jié)論用含糖量低的干型黃酒更佳研究小結(jié)5酒龍膽酒制的有效成分含量明顯高于生品說(shuō)明炮制過(guò)程有利于水溶性物質(zhì)的浸出。用白酒比黃酒炮制有利于有效成分的煎出結(jié)論醋：炮制輔料用醋為固態(tài)發(fā)酵米醋和液態(tài)發(fā)酵米醋黃酒：炮制輔料用含糖量低的干型黃酒更佳5.輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及起草說(shuō)明 根據(jù)以上研究 目前已對(duì)：醋、酒、麥麩、姜汁、膽汁、甘草汁、吳茱萸汁、鹽水、羊脂油、黑豆汁、蜂蜜等11個(gè)輔料制定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并撰寫了起草說(shuō)明。其中部分指標(biāo)填寫空白。如：炮制輔料醋質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定感官鑒別：4項(xiàng)檢查：灰分、重金屬、農(nóng)殘、微生物鑒別實(shí)驗(yàn)：（薄層）成分測(cè)定：8項(xiàng)指標(biāo)合計(jì)17項(xiàng) 米醋項(xiàng)目固態(tài)發(fā)酵液態(tài)發(fā)酵鑒

27、別感官特性（色澤、香氣、滋味、體態(tài)）琥珀色、具米醋香氣、酸味柔和、無(wú)異味、體態(tài)澄清淺黃色、具米醋香氣、酸味較刺激、無(wú)異味、體態(tài)澄清薄層（乳酸、果糖）檢查總灰分2.0%0.20%菌落總數(shù)（cfu/mL）3028致病菌不得檢出不得檢出大腸不得檢出不得檢出輔料醋質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定-1 米醋項(xiàng)目固態(tài)發(fā)酵液態(tài)發(fā)酵氨基酸（18種總量）2.62.4總酸4.5g/100ml以上4.5g/100ml以上乳酸0.6g/100ml0.2g/100ml氨基態(tài)氮0.05g/100ml0.009g/100ml還原糖1.0g/100ml1.0g/100ml不揮發(fā)酸0.8g/100ml0.15g/100ml可溶性無(wú)鹽固形物3.0g

28、/100ml2.0g/100ml游離礦酸不得檢出不得檢出 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 121乳酸標(biāo)準(zhǔn)品 2龍門米醋 3龍門低度白醋 4龍門高度白醋 5寬牌五糧香醋 6天津翠波米醋 7上海天魚米醋 8上海川奇精研醋 9遼寧北康食醋 10遼寧丹東食醋 11沈陽(yáng)紅梅陳醋 12沈陽(yáng)青花醋精 乳酸的HPLC測(cè)定 -4儀器、試劑和藥品 HP1100單元液相色譜泵，HP1100紫外可見(jiàn)檢測(cè)器，乳酸為北京化學(xué)試劑公司提供，分析純；磷酸為分析純；磷酸二氫鉀為二級(jí)；純水；強(qiáng)堿性苯乙烯陰離子交換樹脂(濕計(jì))2017(717) CL.醋為全國(guó)收集的27種不同的市面常售醋，方法學(xué)考察中所用北京龍門米

29、醋。 方法與結(jié)果 色譜條件Kromasil-C18柱，柱溫25 ，流動(dòng)相為0.1 molL-1 KH2PO4,（H3PO4調(diào)pH=3.0），流速0.5 mL/min,檢測(cè)波長(zhǎng)215 nm，進(jìn)樣量10 L。 醋酸 乳酸 總酸含量-5序號(hào)品 名產(chǎn)地乳 酸（不揮發(fā)酸）醋 酸（揮發(fā)酸）總 酸1龍門米醋北京1.0573.404.462龍門白醋（4 ）北京4.054.053龍門白醋（8 ）北京8.048.044翠波米醋天津1.9393.395.875天魚陳釀 米醋上海0.393.353.746川崎精研醋上海0.6293.964.597佳賓食醋長(zhǎng)春2.932.938光華醋丹東9.529.529青花白醋精沈陽(yáng)

30、19.119.110紅梅陳醋沈陽(yáng)0.1433.453.5911玉兔米醋山東1.0814.375.4512燈塔特制 甘醋青島0.9743.594.5613古燈白醋山西0.1534.544.6914古燈陳醋山西0.3873.814.215紫林頭醋山西1.1344.966.0916東湖名醋山西0.4613.323.7817益園慶陳醋山西0.744.545.2818水塔老陳醋山西0.2654.584.8519珍極9米醋石家莊9.049.0420珍極4米醋醪石家莊4.024.0221珍極清香 米醋石家莊0.1713.954.1222萬(wàn)通白醋徐州0.4175.175.5923恒順米醋（原液）江蘇1.403

31、5.977.3724五糧香醋北京0.7613.294.0525匯仁米醋江西0.303.934.2326永春香醋福建0.6765.045.7227笑廚香醋新疆0.7482.983.73乳酸的薄層鑒定果糖的薄層鑒定乳酸HPLC的測(cè)定（首次建立HPLC方法）乳酸僅見(jiàn)于糧食發(fā)酵醋中，可調(diào)節(jié)醋之酸味，使之由尖酸變得柔和，口感醇厚。配置白醋不含乳酸，味道刺激性強(qiáng)名牌醋的乳酸含量較高，均在6mg/mL以上。輔料醋標(biāo)準(zhǔn)對(duì)GB的補(bǔ)充 根據(jù)歷史和以上所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定適合炮制輔料用，排在前面的醋為:1.鎮(zhèn)江米醋 2.北京龍門米醋 3.山西紫林頭醋4.山西益源慶米醋 5.沈陽(yáng)紅梅米醋 6.東湖明醋7.上海川崎 8.

32、丹東光華米醋 9.新疆笑廚米醋 10.龍門白醋8炮制輔料黃酒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定PH酸度含糖量總酸非糖固形物-苯乙醇 輔料黃酒標(biāo)準(zhǔn)1 本品是稻米、小麥等為主要原料經(jīng)發(fā)酵而成的釀造酒性狀1.外觀 橙黃色至深褐色，清涼透明，有光 澤，允許瓶（壇）底有微量聚集物。2.香氣 具有黃酒特有的醇香，無(wú)異香。3.口味 純厚，較柔和甜爽，無(wú)異味。理化指標(biāo)-2項(xiàng)目 標(biāo)準(zhǔn)PH 3.54.5相對(duì)密度 g/cm2 0.91.1鉛 mg/kg 1.0鉻 mg/kg 0.02砷 mg/kg 0.5汞 mg/kg 0.02六六六 mg/kg 0.05滴滴涕（DDT）mg/kg 0.05菌落總數(shù) 個(gè)/mL 100大腸菌群 個(gè)/100

33、mL 6酵母菌 個(gè)/g 25霉菌 不得檢出致病菌（沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄菌、溶血性鏈球菌） 不得檢出含量測(cè)定- 3： 1.酒精度 參照國(guó)標(biāo)GB/T 13662-2000測(cè)定 乙醇含量不得低于8% 2.總糖 參照國(guó)標(biāo)GB/T 13662-2000 測(cè)定 黃酒的含糖量應(yīng)不大于40g/L （以葡萄糖計(jì)） 3. -苯乙醇 采用氣相色譜儀，（安捷倫6890N、按GB/T13662-2000）規(guī)定，炮制輔料黃酒中-苯乙醇含量，干黃酒應(yīng)大于或等于60.0mg/L ;半干黃酒應(yīng)大于或等于80.0mg/L 輔料酒與GB的不同結(jié)合炮制歷史和研究結(jié)果確定黃酒為主要炮制輔料用酒黃酒中應(yīng)選擇干型黃酒作為炮制用酒

34、乙醇含量應(yīng)8，含糖量40g/L，pH: 3.54.5，密度:0.9 1.1 g/cm2。包裝形式：瓶裝或壇裝炮制輔料姜汁質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定原料：姜科植物姜的新鮮根莖或干燥根莖制法：煮干姜汁：取干姜，搗碎，煎煮3次，每次時(shí)間1 h，加水依次為12、10、8倍量，合并過(guò)濾，濃縮至為0.33 g（干姜）mL-1。 榨生姜汁：取生姜，洗凈，切塊，每次加水量10，反復(fù)壓榨23次，合并汁液，過(guò)濾，所得姜汁約為1 mLg-1（生姜） 性狀：搾生姜汁為黃色懸濁液，稍放置底部有白色粉末狀沉淀，具有濃重的姜的辛辣氣味。 干姜汁為黃褐色懸濁液，放置底部有沉淀，具有熟姜香味。鑒別：6-姜辣素薄層鑒別檢查：相對(duì)密度：搾生姜汁

35、應(yīng)不低于1.013；干姜汁應(yīng)不低于1.027pH值：搾生姜汁：應(yīng)為5.3-6.9；干姜汁：應(yīng)為4.6-6.2含固量：搾生姜汁應(yīng)不低于2.8%； 干姜汁應(yīng)不低于5.9%含量測(cè)定：總酚含量：以6-姜辣素計(jì) 搾生姜汁不應(yīng)低于1.1 mgmL-1； 干姜汁不應(yīng)低于7.4 mgmL-1 炮制輔料煉蜜質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定原料制法性狀相對(duì)密度鑒別(葡萄糖、果糖、蔗糖)檢查（水分）酸度、淀粉酶含量測(cè)定：5-羥甲基糠醛；葡萄糖、果糖、蔗糖以上根據(jù)測(cè)定各地搜集樣品及自煉蜜制定煉蜜的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定-1原料：為蜜蜂科昆蟲中華蜜蜂Apis cerana Fabricius或意大利蜂Apis mellifera Linnaeus所

36、釀的蜂蜜制法：取濾過(guò)的合格蜂蜜加水5%，在80-90 蒸汽加熱煉制6-10min即可性狀：本品為半透明、帶光澤、濃稠的液體，橘黃色至黃褐色，放久或遇冷漸有白色顆粒狀結(jié)晶析出。氣芳香，味極甜。煉蜜的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定-2相對(duì)密度：本品如有結(jié)晶析出，可置于不超過(guò)60的水浴中，待結(jié)晶全部融化后，攪勻，冷至25，照相對(duì)密度測(cè)定法(2010版藥典附錄 A)項(xiàng)下的韋氏比重秤法測(cè)定，相對(duì)密度應(yīng)在1.349以上。檢查：酸度 取本品10g，加新沸過(guò)的冷水50ml，混勻，加酚酞指示液2滴與氫氧化鈉滴定液(0.1molL)4ml，應(yīng)顯粉紅色，10秒鐘內(nèi)不消失。煉蜜的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定-3檢查灰分：小于或等于0.4%檢查水分：小

37、于或等于25%檢查淀粉酶：按照GB/T18932.162003中測(cè)定方法，1g煉蜜在1h內(nèi)水解1%淀粉應(yīng)小于或等于8mL。鑒別：薄層色譜（葡萄糖、果糖、蔗糖）含量測(cè)定： 1. 5-羥甲基糠醛：照高效液相色譜法測(cè)定，其含量應(yīng)小于或等于40mg/Kg2. 葡萄糖、果糖:照高效液相色譜法測(cè)定，其含量應(yīng)大于或等于65/%3.蔗糖：照高效液相色譜法測(cè)定，其含量應(yīng)小于或等于5/% 總之，我們購(gòu)買煉蜜原料，其主要成分含量要合格，同時(shí)酶值要高、糠醛指標(biāo)低、生物活性好、新鮮度高、且香氣重、口感好的為佳。 另外含水量在25%以下，可以低至20%因?yàn)榉涿塾小皾饪s蜂蜜”和“成熟蜂蜜”前者為含水量較高濃縮而成，后者為天

38、然自然干燥脫水蜂蜜（花期采蜜少），顯然后者更是天然產(chǎn)品的特性。炮制輔料用煉蜜質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的起草說(shuō)明1.煉蜜中的水分、灰分、酸度、淀粉酶標(biāo)準(zhǔn)制定：是根據(jù)測(cè)定搜集的30多個(gè)樣品及我們自己煉蜜樣品含量，參考GB 標(biāo)準(zhǔn)制定。（1）含水量測(cè)定方法：儀器：阿貝折光儀、超級(jí)恒溫器 具體操作： 將阿貝折色儀與超級(jí)恒溫器連接好，并將超級(jí)恒溫器的溫度調(diào)為40，當(dāng)達(dá)到恒溫，先用新制的蒸餾水校正折光儀（ 40下的蒸餾水折光指數(shù)為1.3305）。取蜂蜜一滴，滴于阿貝折光儀磨砂面上，合嚴(yán)儀器，打開采光鏡蓋，與目鏡觀察，旋轉(zhuǎn)旋鈕，使目鏡黑白界限清晰，而后使黑白界限剛好通過(guò)目鏡視野中交叉點(diǎn)，讀出視野下部之讀數(shù)為n,按下式計(jì)算水分

39、的百分率。 水分（%）=100-78+390.7(n-1.4768) =(n-1.4768) 390.7-22 式中：n為式樣蜜在40時(shí)測(cè)得的實(shí)際折光指數(shù)。 （2）5-HMF測(cè)定：儀器 ：美國(guó)Waters 600高效液相色譜儀，Waters 2487雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器。色譜條件 ：Kromasil-C18柱（4.6 mm250 mm,5 m）；柱溫25 ；流動(dòng)相甲醇-水-磷酸（15:85:0.165），流速0.8 mL/min；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為285 nm。 本方法準(zhǔn)確，簡(jiǎn)便，重復(fù)性好，可用于蜂蜜中5-羥甲基糠醛的限量測(cè)定。 圖1 5-羥甲基糠醛對(duì)照品（5-HMF） 圖2 廣州寶生園桂花蜜（5-H

40、MF）自煉生熟蜜中葡萄糖果糖蔗糖5-HMF含量(%)樣品時(shí)間溫度5-HMF（g/g） 葡萄糖變化率果糖變化率蔗糖水分生品-5.1430.63034.7500.1825.415大火32.341.6535.9842.3121.762.0525959.2932.465.9734.251.401.4323.73811223.738.2925.0039.3713.291.663.241010524.737.0020.8038.5911.011.8112.951513088.439.3330.3637.999.322.0513.5262013243948.0347.2928.4418.191.976.29

41、（3）葡萄糖、果糖、蔗糖：儀器：Agilent 1100 高效液相色譜儀，Alltech ELSD 2000 蒸發(fā)光檢測(cè)器。色譜條件：Rezex RCMMonosaccharide(300 7.80 mm）；柱溫80；流動(dòng)相高純水，流速0.6 mL/min；ELSD氣體流速2.85L/min,漂移管溫度120 。本方法用高純水作流動(dòng)相，毒性小、簡(jiǎn)便，重復(fù)性好，可用于蜂蜜中葡萄糖、果糖、蔗糖的含量測(cè)定。 圖1 對(duì)照品（蔗糖、葡萄糖、果糖） 圖2 樣品（浙江慈溪市紫云英蜂蜜）min24681012140min2468101214各省市商品蜂蜜成分測(cè)定（%）序號(hào)品牌產(chǎn)地葡萄糖果糖蔗糖5-HMF （g

42、/g） 1百花牌棗花蜂蜜北京25.6335.9913.77.42百花牌山荊花蜂蜜北京31.1637.196.7926.03百花牌槐花蜂蜜北京28.1740.195.9114.54寶生園純正桂花蜜廣州27.1141.746.7847.95寶生園純正荔枝蜜廣州33.8137.286.3719.86洋槐蜜蘇州大山蜂業(yè)有限公司28.3533.049.5231.47洋槐蜜揚(yáng)州大學(xué)實(shí)驗(yàn)蜂場(chǎng)25.7339.089.4310.98洋槐蜂蜜青?；▽毞錁I(yè)股份公司30.6139.248.288.869洋槐蜂蜜無(wú)錫添氏保健品29.8230.8510.4942.210蜂蜜上海虹橋藥業(yè)22.1529.767.3310.9

43、序號(hào)品牌產(chǎn)地葡萄糖果糖蔗糖5-HMF（g/g） 11椴樹蜜牡丹江市蜜蜂生物工程有限責(zé)任公司31.2037.3110.552.7312過(guò)龍山蜜海南卓津蜂業(yè)有限公司29.1940.496.4213.613瑞康有機(jī)洋槐蜜南京瑞康蜂業(yè)有限公司29.3541.672.3325.514雪脂蓮蜂蜜甄城劭氏蜂業(yè)有限公司40.7638.892.4020.115油菜花蜂蜜上海食品有限公司32.834.56209.516金百康槐花蜜大連天山實(shí)業(yè)有限公司保健食品廠31.2040.318.6421.317金百康棗花蜜大連天山實(shí)業(yè)有限公司保健食品廠26.4534.247.4613.818刺槐蜜臨沂食品有限公司31.473

44、1.327.6599719紫云英蜂蜜臨沂食品有限公司33.5732.698.33983序號(hào)品牌產(chǎn)地葡萄糖果糖蔗糖5-HMF（g/g） 20紫云英蜂蜜浙江慈溪市蜜雪兒有限公司32.8037.508.096.9121枇杷蜂蜜浙江慈溪市蜜雪兒有限公司33.2537.088.407.2022葵花蜂蜜浙江慈溪市蜜雪兒有限公司33.9436.658.1071.923荔枝蜂蜜浙江慈溪市蜜雪兒有限公司35.3537.678.267.2524荔枝蜂蜜陜西老蜂農(nóng)生物科技有限責(zé)任司35.2240.219.2618.725野玫瑰蜂蜜陜西老蜂農(nóng)生物科技有限責(zé)任司29.9036.438.194.3826野桂花蜂蜜陜西老蜂

45、農(nóng)生物科技有限責(zé)任司31.9938.708.294.86序號(hào)品牌產(chǎn)地葡萄糖果糖蔗糖5-HMF27刺槐蜜陜西老蜂農(nóng)生物蜂業(yè)有限公司31.9537.748.068.4628黃芪蜜陜西老蜂農(nóng)生物蜂業(yè)有限公司33.2839.488.904.9729五味子蜜陜西老蜂農(nóng)生物蜂業(yè)有限公司33.6339.719.265.0630板蘭根蜜陜西老蜂農(nóng)生物蜂業(yè)有限公司32.9339.198.936.8631野菊花蜂蜜湖北揚(yáng)子江蜂業(yè)公司30.6238.428.3959.732野桂花蜂蜜湖北揚(yáng)子江蜂業(yè)公司30.0636.086.8920433陜西山陽(yáng)蜜陜西25.4833.331.311.03結(jié)論-11. 5-HMF為蜂

46、蜜長(zhǎng)期存放或加工過(guò)程中溫度過(guò)高產(chǎn)生的物質(zhì)，是糖的降解產(chǎn)物，對(duì)人體橫紋肌和內(nèi)臟有害。要求 g/g以下。測(cè)定結(jié)果表明有3個(gè)樣品不合格。臨沂兩個(gè)樣品高達(dá)。特別是新疆煉蜜達(dá)3370 g/g ，比國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)高出80多倍。2. 蔗糖標(biāo)準(zhǔn)要求5%結(jié)論-23.蜂蜜中果糖和葡萄糖為主要成分，標(biāo)準(zhǔn)要求5以上。測(cè)定全國(guó)搜集樣品結(jié)果表明有個(gè)樣品未達(dá)要求。4. 煉蜜中果糖含量個(gè)別明顯低，新疆煉蜜比生蜜下降20%多。5. 新疆煉蜜葡萄糖含量比生蜜高70%左右，這與我們自煉蜜的結(jié)論一致。自煉蜜不同工藝條件下成分含量（%）樣品加水量時(shí)間溫度蔗糖葡萄糖果糖水分5-HMF （g/g） 生品0000.3730.6334.7525.4

47、3.65106581.3833.3634.1122.94.29258550.6035.1836.2225.63.9431010770.5531.6132.0026.44.0442012770.5530.4130.6632.23.71556600.7331.3832.9725.63.99608810.6833.6434.9521.74.6972010780.4028.2629.7131.13.93樣品加水量時(shí)間溫度蔗糖葡萄糖果糖水分5-HMF （g/g） 81012830.6730.2731.7526.44.929106690.5930.5932.0926.03.9210208600.4327.

48、2228.3631.13.3211010920.6032.6533.7922.95.0512512880.6431.8032.8825.25.9313206800.6228.4729.5932.74.0414108800.6729.9831.5128.84.8515510800.6830.9032.0626.65.1216012880.7433.2634.2923.76.85結(jié)論溫度在80 左右煉8min不加水煉蜜，生蜜含水量下降10%左右。蔗糖 葡萄糖 果糖含量略有增加.在80 左右煉8min加5%的水煉蜜，生蜜含水量下降13%左右，蔗糖 葡萄糖 果糖含量略有增加.加10%和20%水分在80

49、 左右煉8min煉蜜含水量都不合格。5-HMF含量16個(gè)樣品煉蜜溫度從5592，時(shí)間從6min12min都在合格范圍內(nèi)。因此推薦:在80 左右煉8min加5%的水煉蜜,并且不要直火。6.輔料炮制對(duì)中藥的影響 甘草汁炮制吳茱萸成分變化吳茱萸成分甘草成分樣品編號(hào)炮炙方法石虎小粒S1煮制：甘草汁2500 ml煮沸，放入凈吳茱萸，拌勻，文火條件下，不斷翻炒，直至煮至藥汁近干，烘箱內(nèi)烘干。S2炒制：取甘草汁300 mL煮沸，放入?yún)擒镙?，悶?rùn)6 h，文火條件下，炒至約10 min，取出，晾干。S3烘制：先將甘草汁300 mL煮沸，放入凈吳茱萸，悶潤(rùn)6 h，之后在烘箱內(nèi)干燥30 min。S4生品凈生藥材，自然陰干。吳茱萸大粒S5煮制：甘草汁約 浸泡過(guò)夜。次日，將藥材煮至藥汁近干，后烘箱中干燥。S6炒制：取甘草汁300 mL煮沸，放入?yún)擒镙?，悶?rùn)6 h，文火條件下，炒至約10 min，晾干。S7烘制：甘草汁300 mL