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文檔簡介

1、微生物學實驗 實驗二（P74) 微生物測數(shù)稀釋平板測數(shù)法 一、實驗原理微生物測數(shù)：測定各類樣品中微生物的數(shù)量。 土壤、食品、微生物制品（菌肥、農(nóng)藥等） 微生物測數(shù)方法DBCA稀釋平板測數(shù)法顯微鏡直接計數(shù)法比 濁 法濾膜濃縮法稀釋平板測數(shù)法原理： 又叫平板菌落計數(shù)法。 將待測樣品經(jīng)適當稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個細胞，取一定量稀釋樣液接種到平板上。經(jīng)過培養(yǎng)，由每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞。統(tǒng)計菌落數(shù)，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。 優(yōu)點：能夠獲得活菌的信息；對環(huán)境微生物分離純化。 缺點：受多種因素限制，計數(shù)的結(jié)果比實際含

2、菌量偏低。 以小組為單位，用實驗一準備的物品、采用稀釋平板測數(shù)測定土壤樣品中的細菌、放線菌、真菌 的數(shù)量。 學習無菌操作（接種、菌液稀釋、倒培養(yǎng)基）的基本方法。二、實驗內(nèi)容馬丁氏培養(yǎng)基接種液稀釋濃度：細菌：104、105、106放線菌：103、104、10-5真 菌：10-2、10-3、10-4每組每個稀釋度作2個重復，共6個人平板四、實驗結(jié)果觀察與計算 菌落計數(shù) 培養(yǎng)后取出培養(yǎng)平板，計數(shù)平板上的菌落數(shù),計算出同一稀釋度2個平板上的菌落平均數(shù)。 計算 含菌量（CFU）/g(ml)鮮樣=（計數(shù)皿平均菌落數(shù)計數(shù)皿稀釋倍數(shù)）接種量 含菌量（CFU）/g(ml)干樣= CFU /g(ml)鮮樣樣品水分系數(shù)樣品水分系數(shù)=1/(1-樣品水分含量) CFU： colony forming units，菌落形成單位計數(shù)皿的選擇方法1.只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合范圍： 選擇該稀釋度計算含菌數(shù)。2.兩個稀釋度的菌落數(shù)符合范圍： 高稀釋倍數(shù)菌落數(shù)稀釋倍數(shù) 低稀釋倍數(shù)菌落數(shù)稀釋倍數(shù) 比值2，取稀釋倍數(shù)較低的菌落平均數(shù)計算CFU。3.所有的稀釋度平均菌落數(shù)300或100： 按稀釋倍數(shù)最高的平均菌落數(shù)計算。4. 所有的稀釋度平均菌落數(shù)10或30： 按稀釋倍數(shù)最低的平均

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