臨床檢驗(yàn)科操作SOP

PAGE..一、檢驗(yàn)科檢測項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程〔見附錄A、臨檢室A1、血常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程A2、尿常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程B、生化室B1、糖尿病檢測〔診斷酶聯(lián)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程二、檢驗(yàn)室工作流程圖各實(shí)驗(yàn)室接收各類標(biāo)本并核對(duì)各實(shí)驗(yàn)室接收各類標(biāo)本并核對(duì)定期檢驗(yàn)標(biāo)本當(dāng)天檢驗(yàn)標(biāo)本特殊結(jié)果或疑難結(jié)果,報(bào)各實(shí)驗(yàn)室組長簽發(fā)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室技術(shù)主管核準(zhǔn)質(zhì)控及分析結(jié)果記錄儀器有關(guān)參數(shù)室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果室內(nèi)質(zhì)量控制調(diào)整各類儀器運(yùn)行狀態(tài)檢驗(yàn)分析按要求處理標(biāo)本、存放貼條碼編號(hào),并處理標(biāo)本定期檢驗(yàn)標(biāo)本當(dāng)天檢驗(yàn)標(biāo)本特殊結(jié)果或疑難結(jié)果,報(bào)各實(shí)驗(yàn)室組長簽發(fā)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室技術(shù)主管核準(zhǔn)質(zhì)控及分析結(jié)果記錄儀器有關(guān)參數(shù)室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果室內(nèi)質(zhì)量控制調(diào)整各類儀器運(yùn)行狀態(tài)檢驗(yàn)分析按要求處理標(biāo)本、存放貼條碼編號(hào),并處理標(biāo)本住院病人就診檢驗(yàn)流程醫(yī)生在電腦網(wǎng)絡(luò)中申請(qǐng)檢驗(yàn)項(xiàng)目醫(yī)生在電腦網(wǎng)絡(luò)中申請(qǐng)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)、填寫檢驗(yàn)申請(qǐng)輸入電腦網(wǎng)絡(luò)各類穿刺液等各類穿刺液等護(hù)士工作站打印條碼粘貼護(hù)士工作站打印條碼粘貼大小便血液大小便血液囑病人按要求留取標(biāo)本穿刺標(biāo)本按要求處理囑病人按要求留取標(biāo)本穿刺標(biāo)本按要求處理按有關(guān)要求抽取血液樣本按有關(guān)要求抽取血液樣本送回各病房并簽收各實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)后簽發(fā)報(bào)告單具體實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)檢驗(yàn)科各實(shí)驗(yàn)室簽收送回各病房并簽收各實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)后簽發(fā)報(bào)告單具體實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)檢驗(yàn)科各實(shí)驗(yàn)室簽收門診病人就診檢驗(yàn)流程病人就診卡病人就診卡醫(yī)生填寫檢驗(yàn)申請(qǐng)單輸入電腦網(wǎng)絡(luò)醫(yī)生填寫檢驗(yàn)申請(qǐng)單輸入電腦網(wǎng)絡(luò)病人持就診卡到收費(fèi)處、記帳或交費(fèi)病人持就診卡到收費(fèi)處、記帳或交費(fèi)體液大小便血液標(biāo)本檢驗(yàn)體液大小便血液標(biāo)本檢驗(yàn)到相應(yīng)科室取標(biāo)本病人留取標(biāo)本病人憑就診卡到門診抽血中心刷卡打印條碼,按有關(guān)要求抽血,囑到相應(yīng)科室取標(biāo)本病人留取標(biāo)本病人憑就診卡到門診抽血中心刷卡打印條碼,按有關(guān)要求抽血,囑病人取報(bào)告時(shí)間體液實(shí)驗(yàn)室或相關(guān)部門體液實(shí)驗(yàn)室或相關(guān)部門取回報(bào)告各實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)后并簽發(fā)報(bào)告各實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)后并簽發(fā)到醫(yī)生處診療取回報(bào)告三、檢驗(yàn)科各項(xiàng)規(guī)章制度取回報(bào)告各實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)后并簽發(fā)報(bào)告各實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)后并簽發(fā)到醫(yī)生處診療取回報(bào)告生物安全制度1、醫(yī)務(wù)人員1每1—２年做體檢一次,并接受乙肝疫苗接種。2每1—2年檢查乙肝病毒抗原抗體水平,發(fā)現(xiàn)乙型肝炎者應(yīng)進(jìn)行隔離治療。3檢驗(yàn)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿好工作服,不允許在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)食和吸煙。4檢驗(yàn)人員在工作前后和被污染后,應(yīng)用肥皂和流水清洗,必要時(shí)由消毒液浸泡雙手,每季度抽查檢驗(yàn)人員的手,并做細(xì)菌培養(yǎng)一次。2、環(huán)境消毒隔離1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為清潔區(qū)和操作區(qū),清潔區(qū)要注意保護(hù)不受污染。操作有氣溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護(hù)設(shè)置,如紫外線燈,排氣扇等操作區(qū)的工作臺(tái)及地面每日用消毒液擦拭一次,有污染時(shí)隨時(shí)消毒,每周大掃除一次。2采血室每日操作前用清水擦拭操作臺(tái)一次,采血結(jié)束用消毒液擦拭操作臺(tái)、桌子和地面一次,紫外線每日照射消毒一次,每月空氣細(xì)菌培養(yǎng)一次,紫外線強(qiáng)度定期測定。并做記錄。3、各種檢驗(yàn)標(biāo)本的收集,送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取,不得外溢污染。4、靜脈及末稍采血,應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離措施,靜脈抽血做到一人一針一筒一巾一帶一消毒,所用止血帶及紙墊每日消毒,末稍采血一人一片一管,杜絕交叉污染。5、一次性醫(yī)用器具包括采血針,注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管,應(yīng)嚴(yán)格做好領(lǐng)發(fā)登記,注射器先浸泡消毒后由供應(yīng)室一對(duì)一調(diào)換,統(tǒng)一處理,其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。6、檢驗(yàn)人員在進(jìn)行靜脈抽血時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù),操作前必須洗手必須戴好帽子與口罩,操作臺(tái)和手被污染時(shí)應(yīng)用肥皂和流水認(rèn)真洗手,必要時(shí)用消毒液浸泡雙手,酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。7、凡是肝炎病人和透析病人的血液標(biāo)本及疑有黃疸的血標(biāo)本,都視為肝炎的污染標(biāo)本,應(yīng)貼上紅色危險(xiǎn)標(biāo)記,放在規(guī)定區(qū)域內(nèi),引起警惕和防止擴(kuò)大污染面。8、溢出試管外的血液,應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈,注意防止玻璃碎片刺傷手,并注意試管有無破裂。9、當(dāng)針頭和碎玻璃刺傷手時(shí),用流水沖洗,擠出血水,應(yīng)立即用碘酒消毒局部。10、實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)應(yīng)戴上手套。吸取標(biāo)本,離心振蕩等應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程,防止自身和實(shí)驗(yàn)室受污染。11、已檢查標(biāo)本與容器分別浸泡于施康1號(hào)消毒液<2000mg/L>中兩小時(shí)后,標(biāo)本傾棄,一次性容器送焚燒,重復(fù)使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用,均要有記錄。有毒化學(xué)試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無害化處理,防止污染環(huán)境。12、菌種、毒種按《傳染病防治法》進(jìn)行管理。13、三級(jí)醫(yī)院必須設(shè)置清潔區(qū),污染區(qū),操作有氣溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護(hù)設(shè)置,如紫外線燈,排氣扇等。14、非科室工作人員不準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,外來人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進(jìn)入質(zhì)量管理制度1、各專業(yè)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)省臨檢中心的有關(guān)規(guī)定,開展實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的質(zhì)量控制,并制定有關(guān)措施。對(duì)室內(nèi)質(zhì)控應(yīng)每日有記錄,對(duì)失控情況有糾正方法,有預(yù)防性措施,對(duì)于目前尚無完整的室內(nèi)質(zhì)控體系的實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)積極創(chuàng)造條件,建立室內(nèi)質(zhì)量控制體系。2、各專業(yè)實(shí)驗(yàn)室必須參加部、省的各次室間質(zhì)控活動(dòng),對(duì)每次質(zhì)控評(píng)價(jià)應(yīng)有記錄。3、計(jì)量儀器〔包括分析天平,天平、分光光度計(jì)等應(yīng)定期校正,每年一次。4、大型分析儀器必須專人負(fù)責(zé),有使用維修記錄。5、商品化的試劑盒的申購由各專業(yè)室的組長負(fù)責(zé)申報(bào),每月一次報(bào)科主任審批,不得使用過期,無批準(zhǔn)文號(hào)的劣質(zhì)試劑,進(jìn)貨統(tǒng)一由科室管理,自配試劑須嚴(yán)格校正后方可使用。6、各專業(yè)實(shí)驗(yàn)室必須建立完整的操作程序,并應(yīng)嚴(yán)格按程序執(zhí)行。7、當(dāng)日發(fā)出的全部檢驗(yàn)報(bào)告單須經(jīng)當(dāng)日科室總值班人員嚴(yán)格審核后方可發(fā)出。8、科室在完成嚴(yán)格的室內(nèi)、室間質(zhì)量控制體系的同時(shí),應(yīng)逐步建立全面質(zhì)量控制體系,對(duì)標(biāo)本的采集,運(yùn)送,保存等納入嚴(yán)格的管理之中。每日送檢的標(biāo)本應(yīng)簽收。9、急診檢驗(yàn)應(yīng)嚴(yán)格按照急診制度執(zhí)行。安全制度1、菌種、毒種、劇毒品及貴重儀器物品指定專人保管、有防盜措施,建立帳冊(cè),記錄進(jìn)出數(shù)量,定期檢查制度。劇毒藥品專人保管,由科室主任,主管試劑的同志負(fù)責(zé),放保險(xiǎn)柜,領(lǐng)用時(shí)須有主管同志在場,作好領(lǐng)用登記。2、易燃物品專柜存放,普通試劑按常規(guī)分類存放,并由科室主任和主管試劑同志負(fù)責(zé),注意用電安全,特別是電爐子、大烤箱、火焰光度計(jì),由各科使用同志負(fù)責(zé)安全,嚴(yán)防火災(zāi)。對(duì)工作中可能發(fā)生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中毒、傳染性標(biāo)本的污染,各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有應(yīng)急處理的方法,有關(guān)人員均應(yīng)熟悉。4、用電設(shè)備、電源線路、CO2氣體、給排水系統(tǒng)的安全性符合使用要求,不能帶電檢修儀器。5、使用強(qiáng)酸堿腐蝕品時(shí),應(yīng)在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境下正確操作,防止腐蝕、灼傷、中毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生。注意安全,隨手隨時(shí)關(guān)門,下班時(shí)要做好水,電,門的安全保衛(wèi)工作,防火防盜防水。7、科室安全保衛(wèi)負(fù)責(zé)：鄭軍〔四試劑管理制度1、各專業(yè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)各自的工作需要,按月向科主任申報(bào)所購試劑,并應(yīng)做到及時(shí)盤存清點(diǎn),入庫做到心中有數(shù)。2、所有試劑的申請(qǐng),進(jìn)貨一律由科室統(tǒng)一管理,嚴(yán)格按市衛(wèi)生局招標(biāo)要求執(zhí)行,做到三證齊全。無三無產(chǎn)品。3、各專業(yè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)試劑庫存定期檢查,不使用過期變質(zhì)的試劑。4、自配試劑須以嚴(yán)格校正后方可使用。5、試劑的保存應(yīng)嚴(yán)格按照要求,以保證有效期內(nèi)能有效地使用,杜絕浪費(fèi)現(xiàn)象。6、試劑外借一律須經(jīng)科主任同意方可執(zhí)行。7、劇毒試劑必須由科主任和負(fù)責(zé)科室保衛(wèi)的同志負(fù)責(zé)保存,放保險(xiǎn)箱內(nèi),使用時(shí)應(yīng)有兩人在場,并做好登記。8、易燃,易爆試劑應(yīng)分開存放遠(yuǎn)離火源和電源。9、供應(yīng)商所送的試劑必須先經(jīng)藥庫清點(diǎn)才能接受,檢驗(yàn)科人員清點(diǎn)后必須在貨單上簽字,有出入者必須向科主任或試劑管理員、組長報(bào)告,再將貨單交給試劑管理員,以便月底結(jié)帳。10、科室試劑管理員：鐘梁。〔五實(shí)習(xí)生管理制度1、科室按實(shí)習(xí)大綱安排實(shí)習(xí)時(shí)間表,如遇特殊情況科室統(tǒng)一安排。2、實(shí)習(xí)生必須服從實(shí)習(xí)單位和科室的直接管理,遵守實(shí)習(xí)單位的規(guī)章制度,參加實(shí)習(xí)單位的政治、業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)和有關(guān)活動(dòng)、會(huì)議。3、實(shí)習(xí)生必須加強(qiáng)醫(yī)德醫(yī)風(fēng)修養(yǎng),文明行醫(yī),禮貌待人,主動(dòng)熱情為病人服務(wù)。4、實(shí)習(xí)生應(yīng)在指導(dǎo)老師指導(dǎo)下進(jìn)行實(shí)習(xí)和工作,一切實(shí)驗(yàn)結(jié)果均須指導(dǎo)老師簽名后方能發(fā)出報(bào)告。不得擅自簽名發(fā)出報(bào)告,指導(dǎo)老師應(yīng)嚴(yán)格把關(guān)逐步培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立工作能力。5、嚴(yán)格請(qǐng)假制度,學(xué)生一般情況下不得請(qǐng)事假,節(jié)假日按國家法定給與準(zhǔn)假,請(qǐng)假一律寫報(bào)告,一天內(nèi)經(jīng)指導(dǎo)老師同意,科主任批準(zhǔn),報(bào)告交俞北偉老師登記,三天內(nèi)經(jīng)醫(yī)教科批準(zhǔn),三天以上經(jīng)學(xué)校批準(zhǔn)。6、實(shí)習(xí)生必須準(zhǔn)時(shí)上班,不遲到早退,要有嚴(yán)格的實(shí)習(xí)作風(fēng),不得離崗,為了培養(yǎng)學(xué)生的應(yīng)急處理能力,實(shí)習(xí)生必須每天晚上輪流跟班〔6.00-9.007、實(shí)習(xí)生必須嚴(yán)格保護(hù)實(shí)驗(yàn)儀器和公物,科室貴重儀器必須在指導(dǎo)老師具體指導(dǎo)下進(jìn)行操作?！擦鶚?biāo)本管理制度一、標(biāo)本采集按每個(gè)項(xiàng)目要求,告訴病人、病房護(hù)士或本室采血人員最佳采血時(shí)間、采血前空腹或飲食注意、用藥情況、活動(dòng)情況、體位等。2、明確抗凝劑種類、抗凝劑與血的比例、抽血時(shí)注意事項(xiàng)。3、體液、分泌物、細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本按要求留足量、及時(shí)送檢。標(biāo)本運(yùn)送運(yùn)送過程中,原則上帶蓋〔不能用棉花等吸水物品,以防倒翻和溢出或雨淋。凡含傳染源的標(biāo)本必須帶蓋,外套尼龍袋,以防溢出而污染環(huán)境。不能劇烈振蕩,以防標(biāo)本溶血和有形成分破壞。必須及時(shí)送檢。標(biāo)本接收必須認(rèn)真核對(duì)標(biāo)本上病人姓名、病區(qū)、床號(hào)、聯(lián)號(hào)與申請(qǐng)單符合。必須觀察標(biāo)本的量、標(biāo)本類型、是否抗凝或有小凝塊、細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本是否符合無菌要求。是否有明顯溶血或脂濁。不符要求的標(biāo)本,必須及時(shí)填寫退回理由單,及時(shí)反饋臨床。標(biāo)本檢測在檢測每一過程中,都應(yīng)復(fù)核標(biāo)本接收過程中的每一步驟。在標(biāo)本足夠的情況下,不能浪費(fèi)、隨意丟棄或損壞標(biāo)本。標(biāo)本儲(chǔ)存當(dāng)天不能完成的標(biāo)本,必須分離血清,按要求儲(chǔ)存在2℃-8℃或-20℃。當(dāng)天檢測完成的標(biāo)本,血常規(guī)儲(chǔ)存在2℃-8℃3天以上,生化免疫儲(chǔ)在2℃-8℃7天以上,腦脊液、胸腹水等重要標(biāo)本儲(chǔ)存在2℃-8℃7天以上。特殊標(biāo)本按要求保存。標(biāo)本處理檢驗(yàn)標(biāo)本先用含2-3g/L有效氯消毒靈浸泡半小時(shí),再煮沸清洗試管,烘干備用。用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)用垃圾處統(tǒng)一處理。并做好登記。.七．外單位標(biāo)本外單位送檢的樣本,一律由服務(wù)臺(tái)同志登記后,再轉(zhuǎn)交各實(shí)驗(yàn)室檢測。實(shí)驗(yàn)室保留原始申請(qǐng)單。八、多張檢驗(yàn)單標(biāo)本凡有兩張以上的檢驗(yàn)申請(qǐng)單<包括其他實(shí)驗(yàn)室或外送兄弟醫(yī)院>原則上要分裝各管,隨檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起分別放置各樣本盒,對(duì)采樣困難者要主動(dòng)跟蹤樣本,并作詳細(xì)記錄以免漏檢,分清責(zé)任。附錄：檢驗(yàn)科檢測項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程A、檢室A1、血常規(guī)檢驗(yàn)〔1標(biāo)本用EDTA-K20.2ul抗凝靜脈血1ml,門診病人在CD-1700儀器上做三分類測定,住院病人在COULTERHMX儀器上做五分類測定?！?試劑及儀器COULTERHMX五分類血球分析儀及配套試劑,質(zhì)控用COULTER4CPLUS全血質(zhì)控品,COULTERHMX五分類血分析儀及配套試劑,質(zhì)控用COULTER5C全血質(zhì)控品?！惭杭?xì)胞自動(dòng)化分析儀介紹〔3操作門診：收到血常規(guī)標(biāo)本后,查看核對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目,立即編號(hào),放混勻器上混勻3分鐘。如有血型立即用玻片法和試管法測定血型,輸入電腦。血標(biāo)本在ABBOTCD-1700上檢測,結(jié)果入庫。對(duì)于中間細(xì)胞比較多的應(yīng)當(dāng)手工涂片染色分類,對(duì)于血小板等圖形不好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查。結(jié)果核對(duì)后,在半小時(shí)內(nèi)報(bào)告。病房：采集血常規(guī)標(biāo)本后,立即編號(hào),試管加蓋后放于專用試管架上放入HMX上自動(dòng)混勻,如有血型用玻片法和試管法測定血型,輸入電腦。血標(biāo)本在COULTERHMX上機(jī)檢測,結(jié)果入庫。對(duì)于分類圖形不好的結(jié)果應(yīng)當(dāng)手工涂片染色分類,對(duì)于血小板等結(jié)果圖形不好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查?！矎?fù)查條件結(jié)果核對(duì)后,簽發(fā)報(bào)告單。如果急診則電話報(bào)告,有血型的話,通知病房來拿報(bào)告單?！惭喉?xiàng)目〔4項(xiàng)目代號(hào)中文名單位WBC白細(xì)胞計(jì)數(shù)×109/LLY%<LY>淋巴細(xì)胞分類%MO%單核細(xì)胞分類%NE%<GR>中性細(xì)胞分類%LY#淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)×109/LMO#單核細(xì)胞計(jì)數(shù)×109/LNE#中性細(xì)胞計(jì)數(shù)×109/LRBC紅細(xì)胞計(jì)數(shù)×1012/LHGB血紅蛋白g/LHCT紅細(xì)胞壓積MCV平均紅細(xì)胞體積flMCH平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量pgMCHC平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度g/LRDW紅細(xì)胞分布寬度PLT血小板計(jì)數(shù)×109/LMPV平均血小板體積flPCT血小板比積%PDW血小板分布寬度EO%嗜酸性細(xì)胞分類%BO%嗜堿性細(xì)胞分類%EO#嗜酸性細(xì)胞計(jì)數(shù)×109/LBO#嗜堿性細(xì)胞計(jì)數(shù)×109/L〔5特殊規(guī)定在檢驗(yàn)血常規(guī)時(shí),科室所有工作人員及同志如發(fā)現(xiàn)以下樣本結(jié)果過高可過低,務(wù)必作登記,復(fù)查和及時(shí)報(bào)告,以備查詢。1.血紅蛋白低于100g/L.2.白細(xì)胞低于3000/ul.3.血小板低于8萬/ul.4.發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞分類異常圖形時(shí).5.發(fā)現(xiàn)其中一項(xiàng)過高時(shí),或是臨床指定要鏡檢時(shí).〔6臨床意義〔6．1WBC計(jì)數(shù)參考范圍4-10×109/L1、增加<l>生理性：初生兒、妊娠末期、分娩期、經(jīng)期、飯后、劇烈運(yùn)動(dòng)后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。<2>病理性：大部分化膿性細(xì)菌所引起的炎癥、尿毒癥、嚴(yán)重?zé)齻?、傳染性單核?xì)胞增多癥、傳染性淋巴細(xì)胞增多癥、急性出血、組織損傷、手術(shù)創(chuàng)傷后、白血病等。2．減少病毒感染、傷寒、副傷寒、黑熱病、瘧疾、再生障礙性貧血、極度嚴(yán)重感染、X線及鐳照射、腫瘤化療后、非白血性白血病等。〔6．2白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)<>染色液1.瑞氏—姬姆薩復(fù)合染色液I液取瑞氏染粉lg、姬姆薩染粉1g,加入甲醇<分析純>,充分振搖,第二天加甘油10ml,混勻即能使用。Ⅱ液pH6．4—6．8磷酸鹽緩沖液〔或用H2O替代緩沖液磷酸二氫鉀<無水>6．648磷酸氫二鈉<無水>2．56g加少量蒸餾水溶解,用磷酸鹽調(diào)整pH,加水至1000ml。染色置玻片于染色架上,滴加染液3—5滴,使其迅速蓋滿血膜,約1min后,滴加緩沖液5一10滴,輕輕搖動(dòng)玻片或?qū)?zhǔn)血片吹氣,與染液充分混和,5一10min后用水沖去染液,待干?；蛉旧荷w滿血片后半分鐘即可水洗鏡檢。2．快速染色液I液:磷酸二氫鉀6．648磷酸氫二鈉2．56g水溶性伊紅Y4g<或伊紅B2．5g>蒸餾水1000ml石炭酸40ml煮沸,待冷備用。Ⅱ液亞甲藍(lán)4g蒸餾水1000m1高錳酸鉀2．48g煮沸,待冷備用。染色把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s,水洗,再浸入Ⅱ液30s,水洗待干。注：本染色法除了能快速用于急癥外,對(duì)玻片質(zhì)量要求也不高。隨著染液多次使用,可適當(dāng)延長染色時(shí)間或更換新液。3．30s快速單一染色液貯存液瑞氏染粉2．0g姬姆薩染粉0．68天青E0．6g甘油10．0ml聚乙烯D比咯烷酮<PVP>20．0g甲醇1000mI磷酸鹽緩沖液<pH6.2-6．8>磷酸二氫鉀6．648磷酸氫二鈉0．268石炭酸4．0ml蒸餾水加至1000mI應(yīng)用液l液、2液按3：1比例混合放置14天后備用。染色將染液鋪滿血膜或?qū)⒀肴旧變?nèi),30s后用自來水沖洗。注：加表面活性劑PVP可增加染料的溶解度并起穩(wěn)定作用,加入天青E可縮短染色時(shí)間。<>參考范圍LY:18．7％-47％LY#：<1．0—3．3>×109／LMO:3．5％-7．9％MO#：<0．2—0．7>×109／LGR:46．0％一76．5％GR#：<1．8—6．4>×109／L1．增多<l>中性粒細(xì)胞：急性化膿感染、粒細(xì)胞白血病、急性出血、溶血、手術(shù)后、尿毒癥、酸中毒、急性汞中毒、急性鉛中毒等。<2>嗜酸性粒細(xì)胞：變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲病、某些皮膚病、某些血液病、手術(shù)后、燒傷等。<3>嗜堿性粒細(xì)胞：慢性粒細(xì)胞白血病、何杰金病、癌轉(zhuǎn)移、鉛及鉍中毒等。<4>淋巴細(xì)胞：百日咳、傳染性單核細(xì)胞增多癥、慢性淋巴細(xì)胞白血病、麻疹、腮腺炎、結(jié)核、傳染性肝炎等。<5>單核細(xì)胞：結(jié)核、傷寒、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病、單核細(xì)胞白血病、急性傳染病的恢復(fù)期等。2．減少<l>中性粒細(xì)胞：傷寒、副傷寒、瘧疾、流感、化學(xué)藥物中毒、X線和鐳照射、抗癌藥物化療、極度嚴(yán)重感染、再障、粒細(xì)胞缺乏等。<2>嗜酸性粒細(xì)胞：傷寒、副傷寒以及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素后。<3>淋巴細(xì)胞：多見于傳染病急性期、放射病、細(xì)胞免疫缺陷等?！?.3常見的異常白細(xì)胞形態(tài)的變化在外周血象中,除了各類白血病幼稚細(xì)胞外,通常能見到一些細(xì)胞形態(tài)上的異常變化。<6.3.1>中性粒細(xì)胞1．核象變化：反映中性粒細(xì)胞的成熟程度。正常血象中有少量桿狀核細(xì)胞出現(xiàn),它與分葉核細(xì)胞之間的比值約占1：13。<1>核左移：是指桿狀核細(xì)胞增多,常見于感染。如晚幼粒、中幼粒等細(xì)胞增多為核象極度左移,多見于類白血病反應(yīng)或白血病。①伴白細(xì)胞總數(shù)增高的核左移：稱再生性左移,常見于急性化膿性感染,如大葉性肺炎等。②白細(xì)胞總數(shù)不增加或減低的核左移：稱退行性左移,常見于嚴(yán)重感染、機(jī)體抵抗力低下時(shí),如傷寒、伴感染中毒性休克的敗血癥等。<2>核右移：是指不僅分葉核粒細(xì)胞增多,且分葉過多,常見4葉、5葉<正常時(shí)多分3葉>,這是造血功能衰退或造血物質(zhì)缺乏的表現(xiàn)。常見于營養(yǎng)性巨幼細(xì)胞性貧血和使用抗代謝藥物后。此外,在疾病進(jìn)行期突然出現(xiàn)核象右移,表示預(yù)后不良。2.毒性變化：嚴(yán)重感染、惡性腫瘤、各種重金屬或藥物中毒、大面積燒傷等癥時(shí),中性粒細(xì)胞可出現(xiàn)形態(tài)變異。<l>細(xì)胞大小不均：為骨髓內(nèi)幼稚粒細(xì)胞發(fā)生不規(guī)則的分裂增殖所致。<2>毒性顆粒：胞漿中部分或全部顆粒變粗,著色深,顆粒的分布及大小不等?？赡転橹行灶w粒成熟過程中發(fā)生變性所致。<3>空泡：可在胞漿或核中出現(xiàn),常為多個(gè),被認(rèn)為是細(xì)胞脂肪變性后未能著色所致。<4>Dohle體：腦漿內(nèi)出現(xiàn)嗜堿性點(diǎn)、線、梨形或云霧狀物質(zhì),可能為核漿發(fā)育不平衡所致,為細(xì)胞嚴(yán)重毒性變的表現(xiàn)。<5>核棘突：胞核有各種形態(tài)的芽狀突出,臨床意義尚不明確,可能與中毒、癌轉(zhuǎn)移、嚴(yán)重放射損傷等有關(guān)。3.退行性變：表現(xiàn)為胞體腫大,結(jié)構(gòu)模糊,邊緣不清。胞核可呈固縮、腫脹、破碎、溶解等變化,退行變可以是細(xì)胞衰老死亡的表現(xiàn)。<>淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞形態(tài)變異在多種疾病如各種病毒感染、傳染性單核細(xì)胞增多癥最為常見。此外,瘧疾、過敏性疾病、淋巴結(jié)炎等亦可見,統(tǒng)稱為異型淋巴細(xì)胞。傳染性單核細(xì)胞增多癥患者血液中常可出現(xiàn)3種異型淋巴細(xì)胞,即空泡型、不規(guī)則型和幼稚型?！?.4血紅蛋白[參考值]男:120-160g/L女:110-150g/L〔6.5紅細(xì)胞分布寬度RDW為反映紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù),常以所測得紅細(xì)胞體積大小的變異系數(shù)<CV％>來表示。它比血涂片上紅細(xì)胞形態(tài)大小不均的觀察更為客觀、準(zhǔn)確。RDW增大時(shí)有臨床意義。<l>用于缺鐵性貧血<IDA>的診斷與療效觀察：缺鐵性貧血時(shí)RDW增大,尤其是MCV尚處于參考值范圍時(shí)<缺鐵性貧血時(shí)MCV應(yīng)下降>RDW增大更是早期缺鐵的指征；MCV減小時(shí),RDW增大更為顯著,當(dāng)給予鐵劑治療有效時(shí),RDW將比給藥前更大,以后逐漸降至正常水平。產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因,主要是因補(bǔ)鐵后產(chǎn)生網(wǎng)織紅細(xì)胞,及正常紅細(xì)胞生成并釋放人血與給藥前的小紅細(xì)胞并存,故RDW先增大,隨著正常紅細(xì)胞的增多和小紅細(xì)胞的減少,RDW便逐漸降至參考范圍。<2>用于小細(xì)胞低色素性貧血的鑒別診斷：IDA和輕型地中海性貧血時(shí),MCV均可減小。但I(xiàn)DA時(shí)RDW增大,而輕型地中海性貧血時(shí)RDW正常。<3>用于貧血的分類<Bessman分類法>：MCV只能反映紅細(xì)胞平均體積的大小,不能代表紅細(xì)胞體積大小的異質(zhì)性,對(duì)紅細(xì)胞體積大小的評(píng)價(jià),過去靠血涂片上紅細(xì)胞形態(tài)的觀察,這種觀察常受血涂片制作以及觀察者的主觀因素的影響較大,而且不能定量,RDW能較好地反映紅細(xì)胞體積的異質(zhì)性,把MCV和RDW結(jié)合用于對(duì)貧血的分類將更為完善<表l—l—2>。表l-1-2BessmanMCV／RDW貧血分類類別MCVRDW正常→→缺鐵性貧血↓↑巨幼細(xì)胞性貧血↑↑溶血性貧血↑↑鐵粒幼細(xì)胞貧血→↑再生障礙性貧血→→單純小細(xì)胞性貧血↓→注：→無變化;↑增大;↓減少〔6.6平均血小板體積MPV的臨床意義要結(jié)合PLT變化才有價(jià)值。<1>鑒別血小板減少的原因：①當(dāng)骨髓造血功能損傷致血小板減少時(shí),MPV減少；②當(dāng)血小板在周圍血液中破壞增多時(shí),導(dǎo)致血小板減少,MPV增大；③血小板分布異常致血小板減少時(shí),MPV正常。<2>MPV增大可作為骨髓造血功能恢復(fù)的較早期指征：骨髓造血功能衰竭時(shí),MPV與PLT同時(shí)持續(xù)下降；造血功能抑制越嚴(yán)重,功能恢復(fù)時(shí),MPV增大常先于PI。T升高。MPV越??；當(dāng)造血<3>其他方面應(yīng)用：①M(fèi)PV增大：見于骨髓纖維化、原發(fā)性血小板減少性紫痰<ITP>、血栓性疾病及血栓前狀態(tài)、脾切除、慢粒、巨大血小板綜合征、鐮刀細(xì)胞性貧血等。②MPV減小：見于脾亢、化療后、再障、巨幼細(xì)胞性貧血等?！?.7.血小板比積<plateletcrit,PCT>參考范圍男0．108％-0．272％女0．114％一0．282％PCT與PLT和MPV正相關(guān),所以PLT、MPV的增減均可使PCT發(fā)生變化。增高：見于骨髓纖維化、脾切除、慢粒等。減低：見于再障、化療后、血小板減少癥等。〔6.8血小板體積分布寬度<plateletvolumedistributionwidth,PDW>參考范圍0．155-0．181<15．5％-18．1％><以血小板體積變異系數(shù)CV％表示>PDW是反映血小板體積大小的異質(zhì)性參數(shù)。增大：急非淋化療后、巨幼細(xì)胞性貧血、慢粒、脾切除、巨大血小板綜合征、血栓性疾病等?！?.9血細(xì)胞體積分布直方圖的應(yīng)用<l>紅細(xì)胞體積分布直方圖：將MCV和RDW配合直方圖分析,可直接觀察紅細(xì)胞體積的分布情況。①只現(xiàn)一個(gè)峰：見于正常人、缺鐵性貧血<峰左移>、巨幼細(xì)胞性貧血<峰右移>。②可現(xiàn)兩個(gè)峰：缺鐵性貧血給予鐵劑治療有效時(shí),可出現(xiàn)一個(gè)小紅細(xì)胞峰和另一個(gè)正紅細(xì)胞<或網(wǎng)織紅細(xì)胞>峰。巨幼<紅>細(xì)胞性貧血給予葉酸、維生素Bl2治療有效時(shí)亦可見兩個(gè)峰。<2>白細(xì)胞體積分布直方圖：靜脈血比毛細(xì)管血白細(xì)胞數(shù)量略低。中檔的血細(xì)胞分析儀一般為三分群,它是根據(jù)加入溶血?jiǎng)┖?白細(xì)胞膜通透性改變而發(fā)生皺縮,不同類型的白細(xì)胞皺縮后體積有明顯差別,每個(gè)皺縮白細(xì)胞通過血細(xì)胞分析儀的微孔時(shí)產(chǎn)生的脈沖信號(hào)經(jīng)放大、甄別后,微機(jī)處理數(shù)據(jù)得到其體積分布直方圖。淋巴細(xì)胞群為35—90fI大小中間細(xì)胞群為90一160fl大小粒細(xì)胞群為160—450fI大小三群細(xì)胞的百分比與白細(xì)胞數(shù)量的乘積為其絕對(duì)數(shù)正常人白細(xì)胞體積分布直方圖,可見兩個(gè)明顯分離的峰,左峰為小細(xì)胞群<淋巴細(xì)胞>,右峰為大細(xì)胞群<粒細(xì)胞>,兩峰之間為中間細(xì)胞群的分布。急性白血病時(shí),由于異常的原始、幼稚細(xì)胞增多,可見中間細(xì)胞明顯增高,這時(shí)直方圖上見一個(gè)峰,峰值常在90一160fl之間。這時(shí)必須推片染色鏡檢。<3>血小板體積分布直方圖：正常人血小板體積主要分布在2—20fl之間,21—30fI之間有少量大血小板,一般儀器以30fI為最大的分析界標(biāo)。血小板體積增大時(shí),直方圖會(huì)出現(xiàn)明顯拖尾現(xiàn)象。有小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片干擾時(shí),直方圖尾部會(huì)抬高。〔6.10三種紅細(xì)胞參數(shù)平均值的計(jì)算1、原理根據(jù)紅細(xì)胞、血紅蛋白濃度和紅細(xì)胞比積,計(jì)算紅細(xì)胞平均容量、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度,用作貧血的形態(tài)學(xué)分類。2、計(jì)算方法〔1平均紅細(xì)胞體積<meancorpuscularvolume,MCV>：是指每個(gè)紅細(xì)胞的平均體積,以飛升<fI>為單位。每L血液中紅細(xì)胞體積<L>×1015MCV＝──────────────＝××fl每L血液紅細(xì)胞數(shù)<個(gè)>〔2平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量<meanCorpuscularhemoglobin,MCH>：是指每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量,以皮克<pg>為單位。每L血液中血紅蛋白濃度<g>×1012MCH＝──────────────＝××pg每L血液紅細(xì)胞數(shù)<個(gè)>〔3平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度<meanCorpuscularhemoglobinconcentration,MCHC>：是指平均每L紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃度<g/L>。每L血液中血紅蛋白g數(shù)<g/L>MCHC＝──────────────＝××g/L每L血液紅細(xì)胞比積<L/L>3、臨床意義正常人和各型貧血時(shí)紅細(xì)胞平均參考值表平均值MCH<pg>MCV<fl>MCHC<g/L>正常27-3182-95320-360大細(xì)胞性貧血↑↑-正常細(xì)胞性貧血單純小細(xì)胞性貧血↓↓-小細(xì)胞低色素性貧血↓↓↓注：-正常;↑增大;↓減少〔6.11紅細(xì)胞參數(shù)1、紅細(xì)胞<redbloodceII,RBC>男<4．0-5．5>×1012／L女<3．5-5．0>×1012／L2、血紅蛋白<hemoglobin,HGB>男120一160g／L女l10-150g／L3、紅細(xì)胞比積<hematocrit,HCT>男0．40—0．50<40％一50％>女0．35—0．45<35％一45％>A2、嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)[標(biāo)本]EDTA-K210ul抗凝靜脈血1ml[原理]手工法血液中嗜酸性粒細(xì)胞在含有伊紅的低滲溶液中被染成紅色,而紅細(xì)胞及其他白細(xì)胞破裂或溶解。儀器法〔VCS原理[試劑]手工法嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)的稀釋液種類較多,各有一定的優(yōu)缺點(diǎn),尚待大家繼續(xù)實(shí)驗(yàn),找出最佳配方。下列3種稀釋液供參考。1．Hinkelmann液伊紅0．2g95％石炭酸0．5m140％甲醛0．5ml蒸餾水加到100m12．乙醇—伊紅稀釋液90％乙醇30ml甘油10ml碳酸鉀lg枸櫞酸鈉0．5g20g幾伊紅液10ml蒸餾水加至100m1本配方背景清晰,嗜酸性粒細(xì)胞著色鮮明,缺點(diǎn)是含10％甘油,比較粘稠,細(xì)胞不易混勻,故計(jì)數(shù)前必須充分振搖。3．伊紅—丙酮稀釋液20g/L伊紅液5mI丙酮5mI蒸餾水90ml新鮮配制效果好,每周配1次。儀器法COULTERHMX五分類血細(xì)胞儀及專用試劑[操作]手工法1．小試管中加稀釋液0．38mI。2．常法取末梢血20μl,加入管內(nèi)混勻,待紅細(xì)胞溶解后兩側(cè)充池。3．靜置3—5min,用低倍鏡<必要時(shí)用高倍鏡>鏡下計(jì)數(shù)10個(gè)大方格內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)。儀器法操作同血常規(guī)[計(jì)算]10個(gè)大方格內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)×20×lO＝嗜酸性粒細(xì)胞/L[參考值]<50-300>×106／L<50-300／μl>[附注]l.血液稀釋后應(yīng)于1h內(nèi)計(jì)數(shù)完畢,否則嗜酸性粒細(xì)胞會(huì)逐漸被破壞,使結(jié)果偏低或不易辨認(rèn)。2.充池前要充分混勻,但又不宜用力過猛,特別是使用含甘油的稀釋液要適當(dāng)延長混勻時(shí)間。3.注意與中性粒細(xì)胞區(qū)別,以免誤認(rèn),中性粒細(xì)胞一般不著色,但也有著淺紅色的,其顆粒較小。4．住院病人采標(biāo)本時(shí)間力求統(tǒng)一,以免受日間生理變化的影響。5．用白細(xì)胞總數(shù)與分類百分率求得的絕對(duì)值不如直接計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確。[臨床意義]1．直接計(jì)數(shù)主要用于觀察傳染病預(yù)后、手術(shù)和燒傷病人的預(yù)后及測定腎上腺皮質(zhì)功能。2．其他變化的臨床意義同白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)中嗜酸性粒細(xì)胞的增減。A3、紅細(xì)胞沉降率測定[標(biāo)本]200ul枸櫞酸鈉抗凝靜脈血1.1ml,顛倒混勻。[原理]離體抗凝血液置于特制刻度測定管<魏氏法血沉管>內(nèi),垂直立于室溫中,一定時(shí)間時(shí)觀察上層血漿高度的毫米數(shù)值報(bào)告之。[儀器及試劑]MONITORJI血沉儀、專用血沉管109mmoI／L<32g/L>枸櫞酸鈉溶液：取含二分子結(jié)晶水的枸櫞酸鈉<分子量294．12>3．28,用蒸餾水溶解,稀釋至100ml。此液在室溫保存不得超過2周。[操作]1．專用血沉管1支,加抗凝劑0．2ml。2．靜脈采血后,取下針頭,加血至刻度,顛倒混勻。3．用血沉管<300mm×2．5mm>吸取上述混勻血液至"0"刻度處,拭去管外附著的血液,將血沉管直立在血沉架上?！睲ONITORJI操作4．記時(shí),室溫中靜置lh,讀出血沉儀上的讀數(shù)即是血沉值。[參考值]男:＜15mm／60min女：＜20mm／60min[附注]1．紅細(xì)胞在單位時(shí)間內(nèi)下沉的速度與血漿蛋白的量和質(zhì),血漿中脂類的量和質(zhì),紅細(xì)胞的大小與數(shù)量,是否成串錢相聚以及血沉管的內(nèi)徑、清潔度、放置位置是否垂直,室溫高低等因素都有關(guān)系。2．要求<l>標(biāo)本采集時(shí)避免脂肪血。<2>血液和抗凝劑比例要準(zhǔn)確。<3>血沉管內(nèi)徑要標(biāo)準(zhǔn)<2．5mm>,放置要垂直。<4>做血沉的標(biāo)本要在采集后3h內(nèi)測定,并充分混勻。3．室溫過低、過高和貧血時(shí),對(duì)結(jié)果都有影響。為此,血沉應(yīng)盡量放在18—25℃室溫下測定。室溫過高時(shí)血沉加快,可以按溫度系數(shù)校正。室溫過低時(shí)血沉減慢,無法校正。[臨床意義]增快：<l>生理性：年幼小兒、經(jīng)期、妊娠3個(gè)月至產(chǎn)后1個(gè)月。<2>病理性：急性炎癥、結(jié)締組織病、活動(dòng)性結(jié)核、風(fēng)濕熱活動(dòng)期、組織嚴(yán)重破壞、貧血、惡性腫瘤、高球蛋白血癥、重金屬中毒等。A4、血型鑒定〔1ABO血型鑒定根據(jù)紅細(xì)胞上有或無A抗原或／和B抗原,將血型分為A型、B型、AB型及O型4種。可利用紅細(xì)胞凝集試驗(yàn),通過正、反定型準(zhǔn)確鑒定ABO血型。所謂正定型,是用已知抗—A和抗—B分型血清來測定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的A抗原或／和B抗原；所謂反定型,是用已知A細(xì)胞和B細(xì)胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗—A或／和抗—B。[試劑和材料]1．抗—A<B型血>、抗—B<A型血>及抗—A十B<O型血>分型血清,制備方法見本節(jié)附注；2．5％A、B及O型試劑紅細(xì)胞鹽水懸液,制備方法見本節(jié)附注；3．受檢者血清；4．受檢者5％紅細(xì)胞鹽水懸液,制備方法見本節(jié)附注。[方法]1．試管法<1>取潔凈小試管<內(nèi)徑10mm×60mm>3支,分別標(biāo)明抗—A、抗—B和抗—A十B,用滴管分別加抗—A、抗—B和抗—A十B。分型血清各l滴于試管底部,再以滴管分別加入受檢者5％紅細(xì)胞鹽水懸液1滴,混和。<2>另取潔凈小試管<內(nèi)徑10mm×60mm>3支,分別標(biāo)明A、B和O細(xì)胞。用滴管分別加入受檢者血清l滴于試管底部,再分別以滴管加入A、B和O型5％試劑紅細(xì)胞懸液l滴,混和。<3>立即以1000r／min離心lmin。<4>將試管輕輕搖動(dòng),使沉于管底的紅細(xì)胞浮起,先以內(nèi)眼觀察有無凝集<或溶血>現(xiàn)象。如內(nèi)眼不見凝集,應(yīng)將反應(yīng)物倒于玻片上,再以低倍鏡檢查。<5>觀察結(jié)果時(shí)既要看有無凝集,更要注意凝集強(qiáng)度,此有助于A、B亞型、類B或cisAB的發(fā)現(xiàn)。<6>凝集強(qiáng)度判斷標(biāo)準(zhǔn)4十紅細(xì)胞凝集成一大塊,血清清晰透明。3十紅細(xì)胞凝集成數(shù)小塊,血清尚清晰。2十紅細(xì)胞凝塊分散成許多小塊,見到游離紅細(xì)胞。1十肉眼可見大顆粒,周圍有較多游離紅細(xì)胞土鏡下可見數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起,周圍有很多游離紅細(xì)胞MF混合凝集外觀<mixedfield>是指鏡下可見少數(shù)紅細(xì)胞凝集,而極大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布。一表示陰性,鏡下未見凝集,紅細(xì)胞均勻分布。2．玻片法<1>取清潔玻片1張<或白瓷板1塊>,用蠟筆劃成方格,標(biāo)明抗-A、抗-B和抗-A十B,分別用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清l滴于標(biāo)明的方格內(nèi),再各加受檢者2％紅細(xì)胞懸液1滴,混和。<2>另取潔凈玻片一張<或白瓷板1塊>,用蠟筆劃成方格,標(biāo)明A細(xì)胞、B細(xì)胞和O細(xì)胞,用滴管各加受檢者血清1滴,再分別用滴管滴加A、B和O型試劑紅細(xì)胞懸液1滴。<3>將玻片<或白瓷板>不斷輕輕轉(zhuǎn)動(dòng),使血清與細(xì)胞充分混勻,連續(xù)約15min,以肉眼觀察有無凝集<或溶血>反應(yīng)。如以玻片作試驗(yàn)時(shí),也可用低倍鏡觀察結(jié)果。[結(jié)果判定]ABO血型正反定型結(jié)果分型血清+受檢者紅細(xì)胞受檢者血型受檢者血清+試劑紅細(xì)胞抗-A抗-B抗-A十BA細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞十─十A─十──十十B十一────O十十─十十十AB───注：十為凝集；一為─不凝集。[附注]1．分型血清質(zhì)量性能符合要求,用畢后應(yīng)放置冰箱保存,以免細(xì)菌污染。2．試劑紅細(xì)胞以3個(gè)健康者同型新鮮紅細(xì)胞混和,用生理鹽水洗滌1次,以除卻存在于血清中的抗體及可溶性抗原。3．試管、滴管和玻片必須清潔干燥,防止溶血。4．操作方法應(yīng)按規(guī)定,一般應(yīng)先加血清,然后再加紅細(xì)胞懸液,以便容易核實(shí)是否漏加血清。5．按理IgM抗-A和抗-B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃為最強(qiáng),但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾,一般仍在室溫<20—24℃>內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn),37℃可使反應(yīng)減弱。6．離心時(shí)間不宜過長或過短,速度不宜過快或過慢,以防假陽性或假陰性結(jié)果。7．觀察時(shí)應(yīng)注意紅細(xì)胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。8．判斷結(jié)果后應(yīng)仔細(xì)核對(duì)、記錄,避免筆誤。[正反定型結(jié)果不一致的原因]有技術(shù)性問題或紅細(xì)胞和血清本身的問題,常見者有以下幾種：1.分型血清效價(jià)太低、親和力不強(qiáng)。如抗—A血清效價(jià)不高,可將A亞型誤定為O型,AB型誤定為B型。2．紅細(xì)胞懸液過濃或過淡,抗原抗體比例不適當(dāng),使反應(yīng)不明顯,誤判為陰性反應(yīng)。3．受檢者紅細(xì)胞上抗原位點(diǎn)過少<如亞型>或抗原性減弱<見于白血病或惡性腫瘤：以及類B或cisAB等。4．受檢者血清中蛋白紊亂<高球蛋白血癥>,或?qū)嶒?yàn)時(shí)溫度過高,常引起紅細(xì)胞呈緡錢狀排列。5．受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗-A及或抗—B抗體,如丙種球蛋白缺乏癥。6．各種原因引起的紅細(xì)胞溶解,誤判為不凝集。部分溶血時(shí),可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體.7．由細(xì)菌污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。8．血清中有意外抗體,如自身抗—I,常引起干擾。9．老年人血清中抗體水平大幅度下降正反定型結(jié)果不一致的解決辦法如發(fā)現(xiàn)ABO正反定型結(jié)果不一致,先要重復(fù)作試驗(yàn)1次。嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,使用質(zhì)量合格的試劑以及細(xì)心觀察和解釋試驗(yàn)結(jié)果,就可解決明顯的問題,對(duì)一些疑難問題月必須進(jìn)一步研究。[檢查步驟]1．另從受檢者采取l份新鮮血液標(biāo)本這樣可以糾正因污染或搞錯(cuò)樣本造成的不符合。2．將紅細(xì)胞洗滌數(shù)次,配成5％鹽水細(xì)胞懸液,用抗—A、抗—B、抗—Al,抗—A十B及抗H做試驗(yàn)可以得到其它有用的信息。3．對(duì)受檢紅細(xì)胞作直接抗球蛋白試驗(yàn),如結(jié)果呈陽性,表示紅細(xì)胞已被抗體致敏。4．用Al、Az、B、O紅細(xì)胞及自身紅細(xì)胞檢查受檢血清。如果懷疑是抗—I,用O型<或ABO相合的>臍血紅細(xì)胞檢查。5．如果試驗(yàn)結(jié)果未見凝集,應(yīng)將細(xì)胞及血清試驗(yàn)至少在室溫和4℃放置30min,用顯微鏡檢查核實(shí)。6．如疑為A抗原或B抗原減弱,則可將受檢紅細(xì)胞與抗—A或抗—B血清作吸收及放散試驗(yàn)以及受檢者唾液作A、B、H血型物質(zhì)測定。后者只對(duì)80％HAB分泌型的人有用。7．如試驗(yàn)結(jié)果紅細(xì)胞呈絹錢狀排列,加等滲鹽水l滴,混和,往往可使絹錢現(xiàn)象消失。應(yīng)注意不應(yīng)先加鹽水l滴于受檢者血清中而后和紅細(xì)胞作試驗(yàn),以免使血清中抗體被稀釋。8．如受檢者為A型血而疑為有類B抗原時(shí),可用下列方法進(jìn)行鑒別：<1>觀察細(xì)胞與抗—A及抗—B的凝集強(qiáng)度,與抗—A的反應(yīng)要比與抗—B的反應(yīng)強(qiáng)。這種區(qū)別用玻片法作試驗(yàn)更為明顯。<2>用受檢者紅細(xì)胞與自身血清作試驗(yàn),血清中的抗—B不凝集自身紅細(xì)胞上的類B抗原。<3>檢查唾液中是否有A、B物質(zhì),如果是分泌型,可檢出A物質(zhì)而無B物質(zhì)。<4>核對(duì)患者的診斷,類B抗原的形成與結(jié)腸癌、直腸癌、革蘭陰性桿菌感染有關(guān)。9．如發(fā)現(xiàn)多凝集現(xiàn)象,應(yīng)考慮由遺傳產(chǎn)生的Cad抗原活性；被細(xì)菌酶激活的T或丁K受體；或產(chǎn)生機(jī)制不太明了的丁n受體所引起。多凝集紅細(xì)胞具有以下特點(diǎn)：<1>能被人和許多家兔的血清凝集。<2>能與大多數(shù)成年人的血清凝集,不管有無相應(yīng)的同種抗體。<3>不被臍帶血清凝集。<4>通常不與自身的血清凝集。A5、尿常規(guī)〔1尿液標(biāo)本處理[收集]1．應(yīng)留取新鮮尿,以清晨第一次尿?yàn)橐?較濃縮,條件恒定,便于對(duì)照。急診患者可隨時(shí)留取。2．使用清潔有蓋容器<一次性容器為好>。3．容器上應(yīng)貼上檢驗(yàn)條碼。4．尿標(biāo)本應(yīng)避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便等混入。此外,還應(yīng)注意避免煙灰、糖紙等異物混入。5．標(biāo)本留取后,應(yīng)及時(shí)送驗(yàn),以免細(xì)菌繁殖、細(xì)胞溶解等。6．尿膽原等化學(xué)物質(zhì)可因光分解或氧化而減弱。[防腐與保存]1．冷藏：防腐劑隨檢驗(yàn)?zāi)康亩?一般放4℃冰箱可保存6h。2．甲醛：用于管型、細(xì)胞的防腐,按400g兒甲醛0．5ml／100ml尿加入。由于甲醛具有還原性,不適于尿糖等化學(xué)成分檢查。3．甲苯<或二甲苯>：用于尿糖、尿蛋白的防腐,按甲苯0．5ml／100m1尿加入。4．麝香草酚：用于檢查尿中化學(xué)成分及細(xì)菌的防腐劑,每100ml加入＜0．18。[標(biāo)本處理]收到門診標(biāo)本后,核對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目后,倒入普通長試管內(nèi)。液面距管中約1cm收到病房標(biāo)本后,核對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目后,倒入普通長試管內(nèi)約10ml。液面距管中約1cm,放于UF-100專用試管架上。[檢驗(yàn)后處理]標(biāo)本檢驗(yàn)后,必須經(jīng)過消毒處理后才能排放入下水道內(nèi)。所用盛尿容器及試管等須經(jīng)30—50g兒漂白粉澄清液或10g/L次氯酸鈉液中浸泡2h,也可用5g／L過氧乙酸浸泡30—60min,再用清水沖洗干凈?！?常規(guī)檢查<一>、尿量隨氣候、出汗量、飲水量等不同而異,一般健康成人約為1．0—1．5L／24h,即1m1／<h/kg體重>；小兒按k8體重計(jì)算尿量較成人多3—4倍。<二>、顏色根據(jù)尿的顏色進(jìn)行報(bào)告：淡黃色、深黃色、褐黃色、紅色、乳白色、深紅如濃茶、紅茶色、乳白色<三、透明度分為透明、微渾、渾濁、明顯渾濁、乳糜狀等。〔3生化檢查[儀器及試劑]儀器盈東URISCAN試劑盈東尿十一聯(lián)試紙[操作]把試紙條全部浸沒于尿液中約3-5秒后,取出放于盈東URISCAN的試紙條架上測定?！?尿沉渣檢查1非染色尿沉渣鏡檢〔門診1．取刻度離心管,倒入混合后的新鮮尿液10ml,1500r／min離心5min。2．待離心停止后,取出離心管,棄去上層清液,留下0.2m1沉渣,輕搖離心管,使尿沉渣有形成分充分混勻。3．取尿沉渣0．02m1,滴在載玻片上,用18mm×18mm的蓋玻片覆蓋。4、結(jié)果判斷尿沉渣鏡檢觀察,用10×10鏡頭,觀察其中有形成分的全貌及管型。用10×40鏡頭觀察鑒定細(xì)胞成分和計(jì)算數(shù)量,應(yīng)觀察10個(gè)視野所見最低和最高值,記錄結(jié)果。管型用低倍鏡鑒定,但計(jì)數(shù)數(shù)量應(yīng)低倍鏡觀察20個(gè)視野,算出一個(gè)視野的平均值,記錄結(jié)果。2UF-100尿沉渣分析〔病房在尿生化檢查完成后,立即把試管架放于UF-100的進(jìn)架儀上,進(jìn)行尿沉渣分析。如果結(jié)果發(fā)現(xiàn)以下情況者應(yīng)手工鏡檢?！茬R檢條件3特殊規(guī)定在檢驗(yàn)?zāi)虺Ｒ?guī)時(shí),所有工作人員及進(jìn)修實(shí)習(xí)同志,如發(fā)現(xiàn)以下情況者,當(dāng)用顯微鏡進(jìn)行復(fù)檢,登記備查.1.未用UF-100尿沉渣分析時(shí)所有樣本必須做鏡檢.2.尿常規(guī)如發(fā)現(xiàn)尿干化學(xué)和尿沉渣結(jié)果發(fā)生偏差.3.尿UF-100正常,但尿蛋白為陽性或尿NIT為陽性時(shí).4.尿干化學(xué)和尿UF-100均正常,但病人是腎科或泌尿科時(shí).5.其他臨床指定必須鏡檢的.〔5臨床意義1、顏色正常尿液因含尿色素可呈淡黃色,尿液濃縮時(shí),顏色可呈深黃色,并受某些食物及藥物的影響。病理性尿色可呈褐黃色、紅色、乳白色等,均應(yīng)報(bào)告。尿色深紅如濃茶樣見于膽紅素尿；紅茶色見于血尿、血紅蛋白尿；乳白色可能為乳糜尿、膿尿。2、尿量增多見于：1．生理性：飲水過多,飲濃茶、咖啡及酒精類或精神緊張等。2．病理性：常見于糖尿病、尿崩癥、慢性腎炎及神經(jīng)性多尿等。減少見于：1．生理性：飲水少、出汗多等。2．病理性：常見于休克、脫水、嚴(yán)重?zé)齻⒓甭阅I炎、心功能不全、肝硬變腹水等。流行性出血熱少尿期、尿毒癥、急慢性腎功能衰竭等。3、非染色尿沉渣鏡檢<1>．尿內(nèi)白細(xì)胞增加,表示泌尿系統(tǒng)有化膿性炎癥。紅細(xì)胞增加,常見于腎小球腎炎、泌尿系結(jié)石、結(jié)核或惡性腫瘤。<2>．透明管型可偶見于正常人清晨濃縮尿中；當(dāng)有輕度或暫時(shí)性腎或循環(huán)功能改變時(shí),尿內(nèi)可有少量透明管型；在腎實(shí)質(zhì)性病變?nèi)缒I小球腎炎時(shí),可見較多的顆粒管型。<3>．紅細(xì)胞管型的出現(xiàn)常見于急性腎小球腎炎等。顆粒管型的出現(xiàn),提示腎單位有淤滯的現(xiàn)象。脂肪管型的出現(xiàn),見于慢性腎炎腎病型及類脂性腎病。<4>．在慢性腎功能不全時(shí),尿內(nèi)出現(xiàn)腎衰竭管型,提示預(yù)后不良。<5>．蠟樣管型的出現(xiàn)提示腎臟有長期而嚴(yán)重的病變,見于慢性腎小球腎炎的晚期和腎淀粉樣變時(shí)。A6、一小時(shí)尿沉渣計(jì)數(shù)[標(biāo)本收集]患者先排尿棄去,準(zhǔn)確收集3h尿液于清潔干燥容器內(nèi)送檢<標(biāo)本留取時(shí)間5：30-8：30>。[操作]手工法準(zhǔn)確測量3h尿量,充分混合。取混勻尿液10m1,置刻度離心管中,1500r／min離心5min,用吸管吸棄上層尿液9m1,留下lm1,充分混勻。吸取混勻尿液1滴,注于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi)。細(xì)胞共數(shù)10個(gè)大方格,管型計(jì)數(shù)20個(gè)大方格。儀器法〔UF-100操作準(zhǔn)確測量3h尿量,充分混合。取混勻尿液10m1,倒入U(xiǎn)F-100專用的試管內(nèi),直接上機(jī)測定,讀出定量的尿液細(xì)胞數(shù)。乘以1000除以3即得1小時(shí)細(xì)胞數(shù)。[計(jì)算]10003小時(shí)尿總量ml數(shù)1小時(shí)細(xì)胞數(shù)＝10大方格細(xì)胞總數(shù)×──×─────────10320大方格管型總數(shù)10003小時(shí)尿總量ml數(shù)1小時(shí)管型數(shù)＝─────────×──×────────2103式中：1000為μl換算成m1數(shù)；10為尿液濃縮倍數(shù)。[參考值]紅細(xì)胞:男性＜3萬／h;女性＜4萬／h白細(xì)胞:男性＜7萬／h;女性＜14萬／h管型:＜3400／h[附注]1．尿液應(yīng)新鮮檢查,pH應(yīng)在6以下,若為堿性尿,則血細(xì)胞和管型易溶解。2．被檢尿液比重最好在1．026以上,如小于1．016為低滲尿,細(xì)胞易破壞。3．如尿中含多量磷酸鹽時(shí),應(yīng)加入少量稀醋酸液,使其溶解；但切勿加酸過多,以免紅細(xì)胞及管型溶解；含大量尿酸鹽時(shí),應(yīng)加溫使其溶解,以便觀察。[臨床意義]1．急性腎炎患者紅細(xì)胞增加。2．腎盂腎炎患者白細(xì)胞可明顯增加。A7、尿乳糜定性檢查脂肪尿是指混有脂肪的尿液。而乳糜尿是指乳糜微粒與蛋白質(zhì)混合,致使呈乳化狀態(tài)的渾濁的尿液。[原理]脂肪可溶解于乙醚中,而脂肪小滴可通過染色識(shí)別。[試劑]1．乙醚<AR>；2．蘇丹m醋酸乙醇染色液：5％乙醇10m1,冰醋酸90m1,蘇丹m粉末一藥匙,先將乙醇與冰醋酸混合,再傾入蘇丹m粉末,使之充分溶解；3．猩紅染色液：先配70％乙醇和丙酮1：1溶液,后將猩紅加入至飽和為止。[操作]1．取尿5一10m1,加乙醚2—3m1,混合振搖后,使脂肪溶于乙醚。靜置數(shù)分鐘后,2000r／min離心5min。2．吸取乙醚與尿液的界面層涂片,加蘇丹m醋酸乙醇染色液或猩紅染色液1滴。3．鏡檢觀察是否有紅色脂肪小滴。[結(jié)果判斷]1．渾濁尿液因加乙醚而澄清,則為脂肪或乳糜尿。2．鏡檢下可見紅色脂肪滴。[附注]1．尿液中加少量飽和氫氧化鈉,再加乙醚,有助于澄清。2．將分離的乙醚層隔水蒸干,若留有油狀沉淀,也可加蘇丹m,鏡檢證實(shí)有無脂肪小滴。[臨床意義]1．正常人為陰性。2．因絲蟲或其他原因阻塞淋巴管,使尿路淋巴管破裂而形成乳糜尿。絲蟲病患者的乳糜尿的沉渣中常見紅細(xì)胞,并可找到微絲蝴。A8、大便常規(guī)〔1標(biāo)本采集1．采集糞便標(biāo)本的方法因檢查目的不同而有差別,如一般檢驗(yàn)留取新鮮指頭大小<約5g>即可,放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內(nèi)送檢,標(biāo)本容器最好用內(nèi)層涂臘的硬紙盒,便于檢查后焚毀。血吸蟲毛蝴孵化則留全量新鮮便<不少于30g>。細(xì)菌檢查的糞便標(biāo)本應(yīng)收集于滅菌封口的容器內(nèi),勿混入消毒劑及其它化學(xué)藥品。2．檢查蟯蟲卵需要用軟玻璃紙拭子,在清晨排便前由肛門四周拭取標(biāo)本,也可用棉拭子拭取,但均須立即鏡檢。3．檢查阿米巴滋養(yǎng)體,應(yīng)于排便后立即檢查。冬季需采取保溫措施,迅速送檢。4．不應(yīng)該采取尿壺或便盆中的糞便標(biāo)本。若標(biāo)本中混入尿液,可使柔弱的原蟲致死。用白明膠膜法檢查糞便中的胰蛋白酶活性時(shí),可因尿液中存在溶解白明膠的物質(zhì)而導(dǎo)致其檢查結(jié)果錯(cuò)誤的增高。糞便標(biāo)本中也不可混入植物、泥土、污水等,因腐生性原蟲、真菌抱子、植物種子、花粉易混淆實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5．盛糞便標(biāo)本的容器必須有蓋,有明顯標(biāo)記。糞便標(biāo)本應(yīng)選擇其中膿血粘液等病理成分,若無病理成分,可多部位取材。采取標(biāo)本后,應(yīng)在一小時(shí)內(nèi)完成檢查,否則可因9H及消化酶等影響,而使糞便中細(xì)胞成分破壞分解。6．檢查膽石、胰石、寄生蟲體及蟲卵計(jì)數(shù),應(yīng)收集24h糞便送驗(yàn)。7．隱血試驗(yàn),應(yīng)囑患者收集標(biāo)本前3日禁食動(dòng)物性食物。連續(xù)檢查3天,并選取外表及內(nèi)層糞便。收集標(biāo)本后須迅速進(jìn)行檢查,以免因長時(shí)間放置使隱血反應(yīng)的敏感度降低。8．糞膽原定量檢查應(yīng)收集二天的糞便,混合稱量,從其中取出約20g送驗(yàn)。查膽汁成分的糞便標(biāo)本不應(yīng)在室溫中長時(shí)間放置,以免陽性率減低。9．脂肪定量檢查時(shí),應(yīng)先食定量脂肪食,每天進(jìn)食脂肪50—1508,連續(xù)6天。從第三天起,收集72h糞便,也可定時(shí)口服色素<剛果紅>,作為留取糞便的指示劑,將收集的糞便混合稱量,從中取出608左右送檢。簡易法為在正常膳食情況下,收集24h的全部糞便,混合稱量,從其中取出約60g送檢,測脂肪含量。10．細(xì)菌檢驗(yàn)用標(biāo)本應(yīng)全部用無菌操作收集。〔2常規(guī)檢驗(yàn)1顏色可根據(jù)觀察所見報(bào)告,如黃色、褐色、土灰色、綠色、紅色、柏油樣等。正常糞便因糞膽素而呈棕黃色,但可因飲食、藥物或病理原因影響而改變糞便顏色。灰白色見于鋇餐后、服硅酸鋁、阻塞性黃疽、膽汁減少或缺乏。綠色見于食用含葉綠素的蔬菜后及含膽綠素時(shí)。紅色見于下消化道出血、食用西紅柿、西瓜等。柏油樣便見于上消化道出血等。醬色常見于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等。米泔水樣見于霍亂。2性狀可報(bào)告為軟、硬、糊狀、泡沫樣、稀汁樣、血水樣、血樣、粘液血樣、粘液膿樣、有不消化食物等。正常時(shí)為有形軟便。1．球形硬便：便秘時(shí)可見。2．粘液稀便：見于腸壁受刺激或發(fā)炎時(shí),如腸炎、痢疾和急性血吸蟲病等。3．粘液膿性血便：多見于細(xì)菌痢疾。4．醬色粘液<可帶膿>便：多見于阿米巴痢疾。5．稀汁樣便:可見于急性腸胃炎,大量時(shí)見于偽膜性腸炎及隱孢子蟲感染。6．米泔樣便并有大量腸粘膜脫落,見于霍亂、副霍亂等。7．扁平帶狀便：可能因直腸或肛門狹窄所致。3寄生蟲蟲體蛔蟲、蟯蟲、絳蟲節(jié)片等較大蟲體,肉眼即可分辨。鉤蟲蟲體常需將糞便沖洗過篩后方可看到。服驅(qū)蟲劑后排便時(shí)應(yīng)檢查有無蟲體。驅(qū)絳蟲后應(yīng)仔細(xì)尋找有無蟲頭。4直接涂片鏡檢1．潔凈玻片上加等滲鹽水1—2滴,選擇糞便的不正常部分,或挑取不同部位的糞便做直接涂片檢查。2．最好取大玻片,制成涂片后,應(yīng)覆以蓋片。涂片的厚度以能透過印刷物字跡為準(zhǔn)。3．在涂片中如發(fā)現(xiàn)疑似包囊,則在該涂片上加1滴碘液,在高倍下仔細(xì)鑒別,如仍不能決定時(shí),可取全量糞便濃縮法檢查。4．蟲卵的報(bào)告方式：未找到者注明"未找到蟲卵",找到一種報(bào)告一種,找到幾種報(bào)告幾種,并在該蟲卵后面注明數(shù)量若干,以低倍視野計(jì)算。5．應(yīng)注意將植物纖維及其細(xì)胞與寄生蟲、人體細(xì)胞相鑒別,并應(yīng)注意有無肌纖維、結(jié)締組織、彈力纖維、淀粉顆粒、脂肪小滴球等。若大量出現(xiàn),則提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。6．細(xì)胞中應(yīng)該注意紅細(xì)胞、白細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞<直接涂片干后用瑞氏染色>、上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等。7．夏科—雷登<Charcot—Leyden>結(jié)晶：為無色或淺黃色兩端尖而透明具有折光性的菱形結(jié)晶,大小不一。常見于腸道潰瘍,尤以阿米巴感染糞便中最易檢出。過敏性腹瀉及鉤蟲病患者糞便亦?？梢姷?。8．細(xì)菌：占糞便凈重的l／3<4000億／g干糞>,正常菌群主要是大腸桿菌和腸球菌,占80％；而過路菌<產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌等>不超過10％；芽胞茵<如梭狀菌>和酵母菌為常住菌,但總量不超過10％。正常菌群消失或比例失調(diào)可因大量應(yīng)用抗生素所致,除涂片染色找細(xì)菌外,應(yīng)采用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)鑒定。A9、蟲卵及包囊濃縮檢查〔1漂浮法本法適用于鉤蟲卵等線蟲類蟲卵。操作取拇指<蠶豆>大小糞便1塊,放于大號(hào)青霉素瓶或小酒杯內(nèi),先加入少量飽和鹽水<粗食鹽400g加水1000m1,應(yīng)成飽和液,煮沸、冷卻后,取上清液>,用玻棒將糞便充分混合,再加入飽和鹽水至瓶口。也可用硫酸鎂浮聚液,即硫酸鎂1858、食鹽2908溶于1L水中,比重為1,230,用潔凈載玻片覆蓋瓶口,靜置30一40min后,平執(zhí)載玻片向上提拿,翻轉(zhuǎn)后鏡檢。〔2清水沉淀法1．取糞便208左右,置小搪瓷杯中,加水少許,并用竹簽搗碎使成糊狀。2．用16孔／cm或40孔／寸之鐵篩或紗布過濾,除去粗糙糞質(zhì),濾入三角燒瓶內(nèi)。再加清水約500m1,靜置20、30min,小心傾去上面3／4的液體。3．再加清水500m1,混勻后靜置30min,小心傾去上面4／5液體。4．再加清水500m1,靜置30min,傾去上面的水,留下底部沉淀,混合后用吸管取沉淀鏡檢?！?原蟲及包囊碘液染色法染劑D’Antoni氏碘液：取碘化鉀1．Og,溶于100m1蒸餾水中,再加入碘1．58溶解。操作1．用生理鹽水涂布糞便于載玻片上,再滴加碘液1—2滴混勻,覆以蓋片。2．病理糞便查滋養(yǎng)體時(shí),應(yīng)盡可能在15min內(nèi)檢查完畢。3．包裹染色后,包囊壁、包涵體、細(xì)胞核均清楚可見?！?血吸蟲卵沉淀孵化法操作1．取新鮮標(biāo)本約308,放入廣口容器內(nèi),加入少量清水,用長柄攪拌器將糞調(diào)勻成糊狀。2．通過金屬紗網(wǎng)<40孔／寸>或兩層紗布濾去糞渣,將濾液放入500m1尖底量杯或三角燒瓶內(nèi)。3．加清水至容器口,靜置20一30min,傾去上層清液,將沉渣移入三角燒瓶內(nèi),加清水至接近瓶口,靜置15min。4．如此操作共3次,待上層液體澄清即可,勿超過2h。5．也可用自動(dòng)換水裝置小心地洗至上液澄清,不沖去沉淀。6．放入25—30℃溫箱或溫室中,孵化4—6h,觀察有無作一定方向運(yùn)動(dòng)的毛蚴。7．次晨復(fù)查,出具報(bào)告。8．孵化陰性應(yīng)吸取沉渣涂片,注意有無寄生蟲卵。報(bào)告方式"毛蚴沉孵陽性"或"毛蚴沉孵陰性"。附注1．自來水中如含氯含氨濃度較高者應(yīng)將水預(yù)先煮沸,或用大缸預(yù)先將水儲(chǔ)存以去氯。也可在水中加硫代硫酸鈉<120kg水中加50g／L硫代硫酸鈉6m1>以除去水中的氯或氨。2．農(nóng)村如使用河水者,應(yīng)防止水中雜蟲混入,對(duì)所換的水應(yīng)先煮沸,冷卻后使用。3．如水質(zhì)渾濁,可先用明礬澄清<100k8水約用明礬38>。4．毛蚴孵出時(shí)間與溫度有密切關(guān)系,高于30℃僅需1—3h,25—30℃4—6h,而小于25℃應(yīng)過夜觀察。如室溫過高,為防止毛蚴逸出過早,可用108／I,鹽水換洗,但最后換水孵化時(shí),必須用淡水,不可含鹽。A10、隱血試驗(yàn)上消化道有少量出血時(shí),紅細(xì)胞被消化而分解破壞,由于顯微鏡下不能發(fā)現(xiàn),故稱為隱血?！?免疫學(xué)檢測法[原理]大便隱血的免疫一步檢驗(yàn)法是一個(gè)高靈敏度的夾心式酶聯(lián)免疫測定法。該法采用抗人血紅蛋白的單克隆抗體和多克隆抗體,特異地針對(duì)糞便樣品中的人血紅蛋白。因此,本試驗(yàn)不受動(dòng)物血紅蛋白的干擾,試驗(yàn)前不須禁食肉類。[操作]取一片潔凈干燥的載玻片,滴加2—3滴蒸餾水,取糞便小許,調(diào)成均勻混懸液。取便隱血試紙條,按說明書操作,將試紙條的反應(yīng)端浸濕。在5min內(nèi)觀察結(jié)果。若反應(yīng)線<T>和質(zhì)控線<C>同時(shí)呈藍(lán)色色帶即為陽性；若只有C線呈色為陰性；若丁線與C線均不顯色,說明試驗(yàn)無效。[附注]1．敏感性和特異性<1>敏感性：樣品中血紅蛋白濃度超過0．2μg／m1,就可得到陽性結(jié)果。<2>特異性：便潛血免疫一步檢驗(yàn)法是特異對(duì)人體血紅蛋白的檢驗(yàn),樣品中若含有如下干擾物,實(shí)驗(yàn)結(jié)果不會(huì)受影響：雞血紅蛋白500μg／ml牛血紅蛋白500μg／m1馬血紅蛋白500μg／ml豬血紅蛋白500μg／m1羊血紅蛋白500μg／m1兔血紅蛋白500μg／m1辣根過氧化酶200μg／m12．試驗(yàn)局限性<1>本法可以幫助醫(yī)生早期發(fā)現(xiàn)胃腸道病變,然而,由于家族性息肉或直腸癌可能不出血,或間斷性出血,或出血在糞便中分布不均勻,都可造成陰性結(jié)果。<2>本法對(duì)正常人檢驗(yàn)有時(shí)也會(huì)得到陽性結(jié)果,這是由于某種刺激胃腸道的藥物造成便潛血所至。<3>本檢驗(yàn)法只能作為篩選或輔助診斷用,不能替代胃鏡、直腸鏡、內(nèi)窺鏡和X光檢查。[臨床意義]1．消化道出血時(shí)<如潰瘍病、惡性腫瘤、腸結(jié)核、傷寒、鉤蟲病等>本試驗(yàn)可陽性。2．消化道惡性腫瘤時(shí),糞便隱血可持續(xù)陽性,潰瘍病時(shí)呈間斷性陽性。3．本法可作為消化道惡性腫瘤普查初篩試驗(yàn)?！?試帶法國內(nèi)外生產(chǎn)以四甲基聯(lián)苯胺為顯色基質(zhì)的隱血試驗(yàn)試帶,使用方便,患者也可自留標(biāo)本檢測?！?鄰甲聯(lián)苯胺法[原理]

血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過氧化物酶的活性,能催化過氧化氫,放出新生態(tài)氧,將受體鄰甲苯胺氧化成鄰甲偶氮苯而顯藍(lán)色。[試劑]1．10g／L鄰甲聯(lián)苯胺<o-tolidine>溶液：取鄰甲聯(lián)苯胺18,溶于冰醋酸及無水乙醇各50m1的混合液中,置棕色瓶中,保存于4℃冰箱中,可用8—12周,若變?yōu)榘瞪?應(yīng)重新配制；2．3％過氧化氫液[操作]1．用竹簽挑取少量糞便,涂在消毒棉簽上或白瓷板上。2．墑加0．15L/L鄰甲苯胺冰乙酸溶液2—3滴于糞便上。3．滴加3％過氧化氫2—3滴。4．立即觀察結(jié)果,在2min內(nèi)顯藍(lán)色為陽性。[結(jié)果判斷]陰性：加入試劑2min后仍不顯色。十,加入試劑10s后,由淺藍(lán)色漸變藍(lán)色。2十：加入試劑后初顯淺藍(lán)褐色,逐漸呈明顯藍(lán)褐色。3十：加入試劑后立即呈現(xiàn)藍(lán)褐色。4十：加入試劑后立即呈現(xiàn)藍(lán)黑褐色。[附注]1．O—tolidine[3,3’-Dimethyl-<1,1’-biphenyl>—4,4’-Diamine,Cl4Hl6N2,MW212．3],中文名稱鄰甲聯(lián)苯胺,亦稱鄰聯(lián)甲苯胺。另有,O—toluidine<2-Aminot01uene,C7H9N,MWl07。2>,中文名稱鄰甲苯胺,可用于血糖測定,兩者應(yīng)予區(qū)別。2．糞便標(biāo)本必須及時(shí)檢查,以免靈敏度降低。3．3％過氧化氫必須有效,應(yīng)進(jìn)行陽性對(duì)照試驗(yàn),將過氧化氫滴血片上,產(chǎn)生泡沫,或滴加于重鉻酸鉀硫酸液,顯褐色示有效。4．強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)前三天內(nèi)禁食動(dòng)物血、肉、肝臟及富含葉綠素食物、鐵劑、中藥,以免假陽性反應(yīng)。齒齦出血、鼻出血、月經(jīng)血等均可導(dǎo)致陽性反應(yīng)。5．用具應(yīng)加熱處理<如試管、玻片、滴管等>,以破壞污染的過氧化物酶。A11、腦脊液檢驗(yàn)〔1標(biāo)本處理1．標(biāo)本送驗(yàn)必須及時(shí),收到標(biāo)本后應(yīng)立即檢驗(yàn)。久置可致細(xì)胞破壞,影響細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類檢查；葡萄糖分解使含量降低；病原菌破壞或溶解。2．細(xì)胞計(jì)數(shù)管應(yīng)避免標(biāo)本凝固,遇高蛋白標(biāo)本時(shí),可用EDTA鹽抗凝?！?一般性狀檢查主要觀察顏色與透明度,可記錄為水樣透明、白霧狀渾濁、微黃渾濁、綠黃渾濁、灰白渾濁等。膿性標(biāo)本應(yīng)立即直接涂片進(jìn)行革蘭染色檢查細(xì)菌,并應(yīng)及時(shí)接種培養(yǎng)基。1紅色：如標(biāo)本為血性,為區(qū)別蛛網(wǎng)膜下腔出血或穿刺性損傷,應(yīng)注意：<1>將血性腦脊液試管離心沉淀<1500r／min>,如上層液體呈黃色,隱血試驗(yàn)陽性,多為蛛網(wǎng)膜下腔出血,且出血的時(shí)間已超過4h。如上層液體澄清無色,紅細(xì)胞均沉管底,多為穿刺損傷或因病變所致的新鮮出血。<2>紅細(xì)胞皺縮,不僅見于陳舊性出血,在穿刺外傷引起出血時(shí)也可見到。因腦脊液滲透壓較血漿高所致。2黃色：除陳舊性出血外,在腦脊髓腫瘤所致腦脊液滯留時(shí),也可呈黃色。黃疸患者的腦脊液也可呈黃色。但前者呈黃色透明的膠凍狀。3米湯樣：由于白<膿>細(xì)胞增多,可見于各種化膿性細(xì)菌引起的腦膜炎。4綠色：可見于綠膿桿菌、肺炎鏈球菌、甲型鏈球菌引起的腦膜炎。5褐或黑色：見于侵犯腦膜的中樞神經(jīng)系統(tǒng)黑色素肉瘤。〔3潘氏<Pandy>球蛋白定性試驗(yàn)[原理]腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合,可形成不溶性蛋白鹽而下沉,產(chǎn)生白色渾濁或沉淀。[試劑]5％苯酚溶液：取純苯酚25m1,加蒸餾水至500m1,用力振搖,置37℃溫箱內(nèi)1—2天,待完全溶解后,置棕色瓶內(nèi)保存。[操作]取試劑2—3m1,置于小試管內(nèi),用毛細(xì)滴管滴入腦脊液l一2滴,襯以黑背景,立即觀察結(jié)果。[結(jié)果判斷]陰性：清晰透明,不顯霧狀。極弱陽性<土>：微呈白霧狀,在黑色背景下,才能看到。弱陽性<十>：灰白色云霧狀。陽性<2十>：白色渾濁。強(qiáng)陽性<3十>：白色濃絮狀沉淀。最強(qiáng)陽性<4十>：白色凝塊。[臨床意義]正常時(shí)多為陰性。有腦組織和腦膜疾患時(shí)常呈陽性反應(yīng),如化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、梅毒性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、脊髓灰白質(zhì)炎、流行性腦炎等。腦出血時(shí)多呈強(qiáng)陽性反應(yīng),如外傷性血液混入腦脊液中,亦可呈陽性反應(yīng)。〔4細(xì)胞計(jì)數(shù)1細(xì)胞總數(shù)[器材及試劑]1．細(xì)胞計(jì)數(shù)板；2．紅細(xì)胞稀釋液<配法同血液紅細(xì)胞稀釋液>。[操作]1．對(duì)澄清的腦脊液可混勻后用滴管直接滴入計(jì)數(shù)池,計(jì)數(shù)10個(gè)大方格內(nèi)紅、白細(xì)胞數(shù),其總和即為每μl的細(xì)胞數(shù)。再換算成每升腦脊液中的細(xì)胞數(shù)。如細(xì)胞較多,可計(jì)數(shù)一大格內(nèi)的細(xì)胞×10,即得每μl腦脊液中細(xì)

胞總數(shù)。如用升表示,則再乘以10。2．渾濁或帶血的腦脊液可用血紅蛋白吸管吸取混勻的腦脊液20μl,加入含紅細(xì)胞稀釋液0．38m1的小試管內(nèi),混勻后滴入計(jì)數(shù)池內(nèi),用低倍鏡計(jì)數(shù)4個(gè)大方格中的細(xì)胞總數(shù),乘以50,即為每μl腦脊液的細(xì)胞總數(shù)。2白細(xì)胞數(shù)1．非血性標(biāo)本：小試管內(nèi)放入冰乙酸1—2滴,轉(zhuǎn)動(dòng)試管,使內(nèi)壁沾有冰乙酸后傾去之,然后滴加混勻的腦脊液3—4滴,數(shù)分鐘后,混勻充入計(jì)數(shù)池,按細(xì)胞總數(shù)操作中的紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。2．血性標(biāo)本：將混勻的腦脊液用1％冰乙酸溶液稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。為剔除因出血而來的白細(xì)胞數(shù),用下式進(jìn)行校正。每μl腦脊液內(nèi)白細(xì)胞校正數(shù)＝每μl腦脊液內(nèi)白細(xì)胞未校正數(shù)每μl腦脊液內(nèi)內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×每μl血液內(nèi)白細(xì)胞-──────────────────────每μl血液內(nèi)紅細(xì)胞[參考值]正常人腦脊液中無紅細(xì)胞,僅有少量白細(xì)胞。成人：<0—8>×106/L兒童：<0一15>×106/L多為淋巴細(xì)胞及大單核細(xì)胞,兩者之比約為7：3,偶見內(nèi)皮細(xì)胞。[附注]1．計(jì)數(shù)應(yīng)及時(shí)進(jìn)行,以免腦脊液凝固,使結(jié)果不準(zhǔn)確。2．細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),應(yīng)注意新型隱球菌與白細(xì)胞的區(qū)別。前者不溶于乙酸,加優(yōu)質(zhì)墨汁后可見不著色的莢膜。3．計(jì)數(shù)池用后,應(yīng)用75％乙醇消毒60min。忌用苯酚消毒,因有損計(jì)數(shù)池的刻度。3細(xì)胞分類<1>．直接分類法：白細(xì)胞計(jì)數(shù)后,將低倍鏡換為高倍鏡,直接在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)分別計(jì)數(shù)單個(gè)核細(xì)胞<包括淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞>和多核細(xì)胞,應(yīng)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞,并以百分率表示。若白細(xì)胞少于100個(gè),應(yīng)直接寫出單核、多核細(xì)胞的具體數(shù)字。<2>．染色分類法：如直接分類不易區(qū)分細(xì)胞時(shí),可將腦脊液離心沉淀,取沉淀物2滴,加正常血清l滴,推片制成均勻薄膜,置室溫或37℃溫箱內(nèi)待干,進(jìn)行瑞氏染色后用油鏡分類。如見有不能分類的細(xì)胞,應(yīng)另行描述報(bào)告,如腦膜白血病或腫瘤時(shí)。4>、臨床意義1．中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變的腦脊液,細(xì)胞數(shù)可增多,其增多的程度及細(xì)胞的種類與病變的性質(zhì)有關(guān)。2．中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染、結(jié)核性或霉菌性腦膜炎時(shí),細(xì)胞數(shù)可中度增加,常以淋巴細(xì)胞為主。3．細(xì)菌感染時(shí)<化膿性腦膜炎>,細(xì)胞數(shù)顯著增加,以中性粒細(xì)胞為主。4．腦寄生蟲病時(shí),可見較多的嗜酸性粒細(xì)胞。5．腦室或蛛網(wǎng)膜下腔出血時(shí),腦脊液內(nèi)可見多數(shù)紅細(xì)胞。<5>細(xì)菌直接涂片檢查臨床懷疑流行性腦脊髓膜炎或化膿性腦脊髓膜炎時(shí),應(yīng)作細(xì)菌學(xué)涂片檢查。操作如下：1．將腦脊液立即離心沉淀,取沉淀物涂片2張。2．涂片應(yīng)在室溫中,或置37℃溫箱中干燥,切勿以火焰烘烤。3．經(jīng)火焰固定后,一張涂片用亞甲藍(lán)染色30s,另一張作革蘭染色。4．注意細(xì)胞內(nèi)外的細(xì)菌形態(tài),報(bào)告時(shí)應(yīng)予以描述。<6>真菌檢查-新形隱球菌檢查[操作]1．取腦脊液,以2000r／min離心10min,以沉淀物作涂片,加阿利新蘭染液l滴,混合,加蓋玻片檢查。2．先用低倍鏡檢查,如發(fā)現(xiàn)有新形隱球菌,內(nèi)部結(jié)構(gòu)清晰,用高倍鏡仔細(xì)觀察結(jié)構(gòu),新形隱球菌直徑5—20μm,可見明顯的厚膜,并有出芽的球形孢子。[報(bào)告方式]涂片找到"隱球菌屬"。A12、漿膜腔積液檢查〔1標(biāo)本的收集1．由穿刺取得的標(biāo)本為防止細(xì)胞變性出現(xiàn)凝塊或細(xì)菌破壞溶解等,送檢及檢查必須及時(shí)。2．為防止凝固,最好加入1008／L乙二胺四乙酸二鈉<EDTA鈉鹽>抗凝,每0．1m1可抗凝6m1漿膜腔積液,及時(shí)完成細(xì)胞涂片檢查?！?理學(xué)檢查1．記錄標(biāo)本送檢量、顏色及透明度,有無凝固物質(zhì)或沉淀物,可按漿液性、粘液性、黃色透明、膿樣渾濁、乳糜樣、血樣等報(bào)告。2．測比重前,標(biāo)本應(yīng)充分混勻,其方法與尿比重測定相同。量少時(shí),可用微量法測定?！?漿膜粘蛋白定性試驗(yàn)<Rivalta反應(yīng)>原理滲出液中可含多量漿膜粘蛋白,在酸性條件下可產(chǎn)生白色霧狀沉淀。操作取100m1量筒,加蒸餾水100m1,滴入冰醋酸0．1m!<pH3—5>,充分混勻,靜止數(shù)分鐘,將穿刺液靠近量筒液面逐滴輕輕滴下,在黑色背景下,觀察白色霧狀沉淀的發(fā)生及其下降速度等。結(jié)果判斷陰性：清晰不顯霧狀；<土>漸呈白霧狀；<十>加后呈白霧狀；<2十>白薄云狀；<3十>白濃云狀。附注在滴下穿刺液后,如見濃厚的白色云霧狀沉淀很快地下降,而且形成較長的沉淀物,即Rivalta反應(yīng)陽性。如產(chǎn)生白色渾濁不明顯,下沉緩慢,并較快消失者為陰性反應(yīng)。臨床意義1．滲出液中含較多漿膜粘蛋白,故呈Rivalta陽性,而漏出液為陰性,但如漏出液經(jīng)長期吸收蛋白濃縮后,也可呈陽性反應(yīng)。2．炎癥性疾患<化膿性、結(jié)核性等>蛋白含量多為408/L以上3惡性腫瘤為20-40g／L；肝靜脈血栓形成綜合征為40—60g／L;淤血性心功能不全、腎病變患者的胸腹水中蛋白濃度最低,為l一108／L；肝硬變的腹水多為5—20g兒。〔4細(xì)胞學(xué)檢查<一>細(xì)胞總數(shù)及有核細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)方法基本與腦脊液相同,漏出液中有核細(xì)胞數(shù)量常在100×106/L以下；滲出液中有核細(xì)胞數(shù)量較多,常在500×106/L以上。<二>細(xì)胞分類穿刺液應(yīng)在抽出后立即離心,用沉淀物涂片后以瑞氏染色法進(jìn)行分類。必要時(shí)制備稍厚涂片,在干燥前放置乙醚乙醇等量混合液中固定30min,用蘇木素—伊紅<HE>或巴氏法染色查找癌細(xì)胞。<三>臨床意義1．穿刺液中以多形核白細(xì)胞為主,提示化膿性炎癥或早期結(jié)核性積液。在結(jié)核性滲出液的吸收期可見嗜酸性粒細(xì)胞增多。2．以淋巴細(xì)胞增多為主,提示慢性炎癥?？梢娪诮Y(jié)核性滲出液、病毒感染、系統(tǒng)性紅斑狼瘡的多發(fā)性漿膜炎等。以間皮細(xì)胞及組織細(xì)胞增多為主,提示漿膜上皮脫落旺盛,可見于淤血、惡性腫瘤等。五、滲出液與漏出液的鑒別滲出液與漏出液的鑒別鑒別點(diǎn)漏出液滲出液原因非炎癥所致炎癥、腫瘤或物理、化學(xué)刺激所致外觀淡黃漿液性不定,可黃色、膿性、血性、乳糜性透明度透明或微混大多渾濁比密低于1．018高于1．018凝固性不自凝能自凝粘蛋白定性試驗(yàn)陰性陽性蛋白總量常小于25g/L常大于30g/L蛋白總量／血清總蛋白＜0．5＞0．5LD總活性／血清LD總活性＜0．6＞0．6葡萄糖定量與血糖相近常低于血糖水平蛋白電泳以白蛋白為主,白／球比高于血漿電泳譜與血漿相似有核細(xì)胞計(jì)數(shù)常小于100×106/L常大于500×106/L細(xì)菌檢查無細(xì)菌發(fā)現(xiàn)可找到病原菌A13、精液檢查〔1標(biāo)本收集用清潔干燥小瓶收集精液,不宜采用避孕套內(nèi)的精液。〔2檢查內(nèi)容記錄精液量、顏色、透明度、粘稠度和是否液化。顯微鏡檢查包括精子計(jì)數(shù)、活動(dòng)力、活動(dòng)率、形態(tài)。1>精子活動(dòng)率操作取新鮮標(biāo)本混勻后,在溫玻片上用高倍鏡觀察100個(gè)精于,計(jì)數(shù)活動(dòng)精于與不活動(dòng)精子的比例,計(jì)算精子活動(dòng)的百分率。精子活動(dòng)率＝×100％參考值在排精30—60min內(nèi),應(yīng)有70％以上精子為活動(dòng)精子。附注如室溫低于10℃時(shí),應(yīng)將標(biāo)本先放入37℃溫育5—10min后鏡檢。2>精子活力,取上述新鮮濕片標(biāo)本,觀察精于的活動(dòng)力,可按下列5級(jí)報(bào)告：0級(jí)：無活動(dòng)力,加溫后仍不活動(dòng)。I級(jí)：不良精子、擺動(dòng)或抖動(dòng),運(yùn)動(dòng)遲緩。Ⅱ級(jí)：較好,精子活動(dòng)方向不明確,不呈直線運(yùn)動(dòng),也不活潑。Ⅲ級(jí)：為中速運(yùn)動(dòng)。Ⅳ級(jí)：良好,為快速直線運(yùn)動(dòng),很快超越一個(gè)視野,運(yùn)動(dòng)活潑。3>精子計(jì)數(shù)試劑精子稀釋液：碳酸氫鈉58,40％甲醛溶液1ml,蒸餾水100m1,待完全溶解過濾后使用,操作1．于小試管內(nèi)加精子稀釋液0．38m1,吸液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)搖勻。2．充分搖勻后,滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1—2min,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。3．如精子數(shù)少,可計(jì)數(shù)2個(gè)大方格內(nèi)精子數(shù),數(shù)得總數(shù)乘10萬即為每毫升精液內(nèi)精子數(shù),再換算成×109/L報(bào)告。4．如精子數(shù)多,可計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)精子數(shù),加6個(gè)零,即為每ml精液內(nèi)精子數(shù),再換算成×109/L報(bào)告。參考值正常男性<10—130>×109/L,附注1．收集精液前避免性生活3—7天。收集精液標(biāo)本后應(yīng)在一小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn),冬季應(yīng)注意保溫。2．出現(xiàn)一次異常結(jié)果,應(yīng)隔一周后復(fù)查,反復(fù)查2—3次方能得出比較正確的結(jié)果.3．如低倍鏡、高倍鏡檢查均無精于,應(yīng)將精液離心沉淀后再涂片檢查,如兩次均無精于,報(bào)告"無精子"。4>精子形態(tài)觀察革蘭或瑞氏染色后用油鏡觀察。異常精子可有：頭部過大、過小、尖細(xì)、外緣不齊、雙頭等；中部消失、分枝或腫脹；尾部呈雙尾,卷曲度短或消失<缺尾>。參考值正常人精液中異常精子應(yīng)少于20％,如超過20％為不正常。5>細(xì)胞正常人精液中：紅、白細(xì)胞＜5／高倍視野。6>pH正常7．2—8．0<平均7．8>7>其他成分精液中可以有結(jié)晶體、卵磷脂小體、淀粉樣體、脂滴、脫落上皮細(xì)胞等?！?臨床意義1．正常精液呈灰白色,久未排精者可呈淡黃色,離體30min后,完全液化。根據(jù)精液檢查結(jié)果,臨床上常用于診斷男子不育癥及觀察輸精管結(jié)扎術(shù)后的效果。2．正常精子活動(dòng)力一般在Ⅲ級(jí)以上,如0級(jí)和I級(jí)精子＞40％,可成為男性不育的原因。3．精索靜脈曲張癥患者精液中常出現(xiàn)形態(tài)不正常的精子。4．血液中有毒性代謝產(chǎn)物、接觸鉛等污染物、應(yīng)用大劑量放射線及細(xì)胞毒藥物等可使精子形態(tài)異常。A14、前列腺液檢查〔1標(biāo)本收集臨床醫(yī)師作前列腺按摩術(shù)后,采集標(biāo)本于清潔玻片上,立即送檢?！?檢查內(nèi)