食品廠涂抹試驗規(guī)程

空氣、食品接觸面微生物檢驗方法、檢驗標準1、目的：檢測生產(chǎn)車間空氣、操作人員手部、與食品有直接接觸面的機械設(shè)備 的微生物指標，生產(chǎn)區(qū)域環(huán)境當(dāng)中病原微生物的監(jiān)控，達到規(guī)定標準，以 控制食品成品的質(zhì)量。2、參照標準 ：中華人民共和國國家標準 《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標準》 GB15979－1995、HACCP原理與實施》、中華人民共和國國家標準《公共場所空氣微生物檢驗方法細菌總數(shù)測定》GB/T18204.1－2000、中華人民共和國進出口商品檢驗行業(yè)標準SN0169-92/SN0172-92/SN0170-92 、出入境檢驗檢疫局二 000四年《出入食品微生物檢驗培訓(xùn)教材》中《出入食品生產(chǎn)廠衛(wèi)生細菌檢驗方法》 、日本東京冷凍食品檢驗方 法。3、采樣與檢測方法 ：3.1空氣的采樣與測試方法 樣品采集：取樣頻率：車間轉(zhuǎn)換不同衛(wèi)生要求的產(chǎn)品時，在加工前進行采樣，以便了解車間衛(wèi)生清掃消毒情況。全廠統(tǒng)一放長假后，車間生產(chǎn)前，進行采樣。產(chǎn)品檢驗結(jié)果超內(nèi)控標準時，應(yīng)及時對車間進行采樣，如有檢驗不合格點,整改后再進行采樣檢驗。d）實驗性新產(chǎn)品，按客戶規(guī)定頻率采樣檢驗。e）正常生產(chǎn)狀態(tài)的采樣，每周一次。叮叮小文庫（2）采樣方法在動態(tài)下進行，室內(nèi)面積不超過 30m2，在對角線上設(shè)里、中、外三點，里、外點位置距墻 1m;室內(nèi)面積超過30m2，設(shè)東、西、南、北、中五點，周圍4點距墻1m。采樣時，將含平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的平板 （直徑9cm）置采樣點（約桌面高度），并避開空調(diào)、門窗等空氣流通處，打開 平皿蓋，使平板在空氣中暴露5min。采樣后必須盡快對樣品進行相應(yīng) 指標的檢測，送檢時間不得超過 6h，若樣品保存于0?4°C條件時，送檢 時間不得超過24h。菌落培養(yǎng)：（1）在采樣前將準備好的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板置 37C±1C培養(yǎng)24h，取出檢查有無污染，將污染培養(yǎng)基剔除。（2）將已米集樣品的培養(yǎng)基在 6h內(nèi)送實驗室，細菌總數(shù)于 37C±1C培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，計數(shù)平板上細菌菌落數(shù)。（3）菌落計算：a） 記錄平均菌落數(shù)，用“個 /皿”來報告結(jié)果。用肉眼直接計數(shù)，標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用 5?10倍放大鏡檢查，不可遺漏。b）若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以 2個或2個以上菌落計數(shù)。3.2工作臺（機械器具）表面與工人手表面采樣與測試方法 : 樣品采集：（1）取樣頻率：a）車間轉(zhuǎn)換不同衛(wèi)生要求的產(chǎn)品時，在加工前進行擦拭檢驗，以便了解車 間衛(wèi)生清掃消毒情2叮叮小文庫況。b） 全廠統(tǒng)一放長假后，車間生產(chǎn)前，進行全面擦拭檢驗。c）產(chǎn)品檢驗結(jié)果超內(nèi)控標準時，應(yīng)及時對車間可疑處進行擦拭，如有檢驗不 合格點，整改后再進行擦拭檢驗。d） 實驗新產(chǎn)品，按客戶規(guī)定擦拭頻率擦拭檢驗。e） 對工作表面消毒產(chǎn)生懷疑時，進行擦拭檢驗。f）正常生產(chǎn)狀態(tài)的擦拭，每周一次。（2）采樣方法：a）工作臺（機械器具） ：用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面（取 與食品直接接觸或有一定影響的表面）取 25cm2的面積，在其內(nèi)涂抹 10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含 10mL滅菌生理鹽水 的采樣管內(nèi)送檢。b）工人手：被檢人五指并攏，用浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面，從指尖到指端來回涂擦 10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含 10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。3）采樣注意事項：擦拭時棉簽要隨時轉(zhuǎn)動， 保證擦拭的準確性。 對每個擦拭點應(yīng)詳細記 錄所在分場的具體位置、擦拭時間及所擦拭環(huán)節(jié)的消毒時間322細菌?大腸菌群的檢測培養(yǎng)：樣液稀釋：將放有棉棒的試管充分振搖。此液為 1：10稀釋液。如污染嚴重，可十倍遞增稀釋，吸取 1ml1：10樣液加 9ml無菌生理鹽 水中，混勻，此液為1：100稀釋液。 細菌總數(shù)：3叮叮小文庫(1) 以無菌操作，選擇 1?2個稀釋度各取1ml樣液分別注入到無菌平皿 內(nèi)，每個稀釋度做兩個平皿(平行樣)，將已融化冷至 45C左右的平 板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基傾入平皿，每皿約15ml，充分混合。(2)待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，置36C±C培養(yǎng)48h后計數(shù)。「結(jié)果報告：報告每25cm2食品接觸面中或每只手的菌落數(shù) 大腸菌群：(1)平板法 :以無菌操作，選擇1?2個稀釋度各取1ml樣液分別注入到無菌平皿內(nèi)，每個稀釋度做兩個平皿(平行樣)，將已融化冷至45C左右的去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基傾入平皿，每皿約 15ml，充分混合。待瓊脂凝固后 ,再覆蓋一層培 養(yǎng)基， 約3-5ml。b)待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，置36C±C培養(yǎng)24h后計數(shù)。1結(jié)果計算：以平板上出現(xiàn)紫紅色菌落的個數(shù)乘以稀釋倍數(shù)得出。結(jié)果報告：報告每25cm2食品接觸面中或每只手的菌落數(shù)(2)試管法 :a)以無菌操作，選擇 3個稀釋度各取 1ml樣液分別接種到 BGLB肉湯培養(yǎng)基中，每個稀釋度接種三管。置BGLB肉湯管于36C±1C培養(yǎng)48±2h。記錄所有BGLB肉湯管的產(chǎn)氣管數(shù)。c）結(jié)果報告：按 BGLB肉湯管產(chǎn)氣管數(shù)，查 MPN表報告每 25cm2食品接觸面中或每只手的大腸菌群值。金黃色葡萄球菌檢測1）定性檢測4叮叮小文庫a）取1ml稀釋液注入滅菌的平皿內(nèi)，傾注 15-20ml的B-P培養(yǎng)基，（或 是吸取0.1稀釋液，用 L棒涂布于表面干燥的 B-P瓊脂平板），放進 36±「C的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2小時。b）從每個平板上至少挑取 1個可疑金黃色葡萄球菌的菌落作血漿凝固酶實驗。c）結(jié)果報告：B-P瓊脂平板的可疑菌落作血漿凝固酶實驗為陽性， 即報告手（工器具）上有金黃色葡萄球菌存在。2）定量檢測a）以無菌操作，選擇 3個稀釋度各取1ml樣液分別接種到含 10%氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基中，每個稀釋度接種三管。b）置肉湯管于36±1C的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48小時。劃線接種于表面干燥的B-P瓊脂平板，置36C±1C培養(yǎng)45?48小時。c）從B-P瓊脂平板上，挑取典型或可疑金黃色葡萄球菌菌落接種肉湯培 養(yǎng)基，36C±1C培養(yǎng)20?24小時。d）取肉湯培養(yǎng)物做血漿凝固酶試驗，記錄試驗結(jié)果。e）報告結(jié)果：根據(jù)凝固酶試驗結(jié)果，查 MPN表報告每 25cm2食品接觸面中或每只手的金黃色葡萄球菌值。3.3工廠環(huán)境中病原體的檢測計劃與方法檢測計劃： 為了保證食品安全， 工廠應(yīng)該對生產(chǎn)環(huán)境中的病原微生物進 行檢測和評估，檢測項目包括李斯特菌，沙門氏菌等病原體微生物，化驗 室應(yīng)該按照一定的計劃對生產(chǎn)場所環(huán)境中的病原體進行檢測，其中包括地 面、下水道、 排水溝、墻壁、天花5叮叮小文庫板、設(shè)備框架、運輸?shù)闹Ъ埽?冷藏裝置、 速凍機、傳送帶、設(shè)備的螺絲、維修工具等部位。當(dāng)某個點檢測到病員微 生物時，應(yīng)該對環(huán)境中的相似點加大檢測頻率；在把所有的預(yù)定點檢測完 后，應(yīng)該對環(huán)境中的病原微生物的存在狀況進行全面評估，在下一次環(huán)境檢測循環(huán)過程中加強檢測容易出現(xiàn)病原體的環(huán)境點， 達到持續(xù)改進的目的。檢測頻率 :每月兩次 ,每次每個區(qū)域至少選取 5個檢測點 ,分別進行檢 測。環(huán)境李斯特菌的檢測方法（ 3MTMPetrifilmTM環(huán)境李斯特菌的測 試片）用涂抹棒，海綿或者其他采樣設(shè)備收集環(huán)境樣本。 將收集的樣本添加 10毫升滅菌的緩沖蛋白胨水，將樣本與緩沖蛋白胨混合1分鐘，將樣品置于室溫（ 20-30C）1小時，最久不超過 1.5小時，以修復(fù)損傷的李斯特菌。 將測試片放在平坦處，掀起上層膜。 用移液器垂直滴加 3毫升樣品到下層膜中央， 將上層膜緩慢蓋下， 以免產(chǎn)生氣泡。 輕輕將塑料壓板放在位于接種區(qū)上層膜上，不要壓，扭轉(zhuǎn)或者滑動壓板。提起壓板等至少十分鐘，以使膠體凝固331.6將測試片透明面朝上，可疊放至十片，在37C±C培養(yǎng)26-30「小時，可以用標準菌落記數(shù)器或者其他光學(xué)放大器判讀， 不要記數(shù)圓形輪廓上的菌落，因為他們不受選擇性培養(yǎng)基的影響。對于定性檢測，根據(jù)紫紅色菌落是否存在，結(jié)果記為檢出或者未 檢出。環(huán)境中沙門氏菌的檢測方法采樣地點：選取采樣點時因盡量選取微生物容易滋生的地方6叮叮小文庫冷凍車間 FD車間傳遞窗口表面、排水溝、 墻壁、墻角、地面、天花板、東區(qū)初加工 卸料間排水溝出口、墻壁、地面 物料車表面地面、墻壁、墻角、排水溝、 排水東區(qū)精加工 暫存間 墻壁、地面、天花板、墻角、墻縫溝出口、速動機鏈條、天花板西區(qū)初 傳遞窗口表面、地面、墻壁、挑選間 墻壁、地面、天花板、墻角、墊板加工 排水溝、排水溝出口地面、墻壁、墻角、排水溝、排水