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10醫(yī)學檢驗不要的部分第一章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能思考題:1、敘述L-a氨基酸結(jié)構(gòu)特征,比較各種結(jié)構(gòu)異同并分析結(jié)構(gòu)與性質(zhì)的關(guān)系。結(jié)構(gòu)特征:除甘氨酸外,其他氨基酸的a-碳原子都結(jié)合了4個不同的原子和基團:羧基、氨基、R基和一個H原子。比較:非極性脂肪族R基氨基酸:R基是非極性疏水的極性不帶電荷R基氨基酸:R基是極性親水的,可以與水形成氫鍵。芳香族R基氨基酸:R基有苯環(huán)結(jié)構(gòu)帶正電荷R基氨基酸:R基生理條件下可以結(jié)合H離子而帶正電荷帶負電荷R基氨基酸:R基生理條件下可以給出H離子而帶負電荷關(guān)系:結(jié)構(gòu)決定性質(zhì)。2、蛋白質(zhì)的基本組成單位是什么?什么是肽鍵?什么是肽單元?組成單位是氨基酸肽鍵是一分子氨基酸的a-羧基和一分子氨基酸的a-氨基脫水縮合形成的酰胺鍵,即-CO-NH-肽單元,肽鍵中的4個原子及相鄰的2個a-C原子重復形成的長鏈結(jié)構(gòu)。4、解釋蛋白質(zhì)分子中模體和結(jié)構(gòu)域概念及其與二、三級結(jié)構(gòu)的關(guān)系。模體,又稱超二級結(jié)構(gòu),是指幾個二級結(jié)構(gòu)單元進一步聚集和結(jié)合形成的特定構(gòu)象單元。它是蛋白質(zhì)在二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上形成三級結(jié)構(gòu)時經(jīng)過的一個新的結(jié)構(gòu)層次。結(jié)構(gòu)域,存在于許多較大(由幾百個氨基酸構(gòu)成)蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)中的一個或多個穩(wěn)定的球形折疊區(qū),有時與其他部分之間界限分明,可以通過對多肽鏈的適當酶切與分子的其他部分分開。結(jié)構(gòu)域是三級結(jié)構(gòu)的一部分。第二章功能核酸的結(jié)構(gòu)與功能思考題:1、說明堿基與戊糖、核苷與磷酸的連接化學鍵是什么?核苷酸與核苷酸之間的化學鍵是什么?堿基與戊糖的連接化學鍵是糖苷鍵;核苷與磷酸的連接化學鍵是磷酸酯鍵;核苷酸與核苷酸之間的化學鍵3'5'-磷酸二酯鍵。7、簡述核酸的理化性質(zhì)、敘述核酸的理化性質(zhì)。一、紫外吸收性質(zhì)1、嘌吟和嘧啶都含有共軛雙鍵。因此,堿基、核苷、核苷酸和核酸在260nm處紫外波段有較強的光吸收。2、A260=1.0相當于:50ug/ml雙鏈DNA、40ug/ml單鏈DNA或RNA、或20ug/ml寡核苷酸。3、利用260nm與280nm的吸光度比值(A260/A280)還可以判斷所提取的核酸樣品的純度,DNA純品的A260/A280應(yīng)為1.8;而RNA純品的A260/A280應(yīng)為2.00。二、DNA變性與復性1、變性:某些理化因素(溫度,pH,離子強度等)會導致DNA雙鏈互補堿基對之間的氫鍵發(fā)生斷裂,使DNA雙鏈解離為單鏈。這種現(xiàn)象稱為DNA變性。2、解鏈曲線:如果以溫度相對于A260值作圖,所得的曲線稱為DNA的解鏈曲線。3、解鏈溫度:在解鏈過程中,紫外吸光度的變化△A260達到最大變化值的一半時所對應(yīng)的溫度定義為DNA的解鏈溫度或融解溫度。在此溫度時,50%的DNA雙鏈解離成為單鏈。DNA的Tm值與DNA長短以及堿基的GC含量相關(guān)。GC的含量越高,Tm值越高;離子強度越高,Tm值也越高。3、復性:當變性條件緩慢地除去后,兩條解離的互補鏈可重新互補配對,恢復原來的雙螺旋結(jié)構(gòu)。這一現(xiàn)象稱為復性。三、核酸復性可形成雜交雙鏈:如果將不同種類的DNA單鏈或RNA放在同一溶液中,只要兩種核酸單鏈之間存在著一定程度的堿基配對關(guān)系,它們就有可能形成雜化雙鏈。這種雜化雙鏈可以在不同的DNA單鏈之間形成,也可以在RNA單鏈之間形成,甚至還可以在DNA單鏈和RNA單鏈之間形成。這種現(xiàn)象稱為核酸雜交第三章酶思考題:1、什么是酶?酶的化學本質(zhì)是什么?酶是由活細胞產(chǎn)生的、對其底物具有高度特異性和高度催化效能的蛋白質(zhì)。本質(zhì):蛋白質(zhì)2、什么是全酶?在酶促反應(yīng)中酶蛋白與輔助因子分別起什么作用?全酶:指酶蛋白和輔助因子結(jié)合在一起稱為全酶酶蛋白主要決定:酶促反應(yīng)的特異性。輔助因子主要決定:酶促反應(yīng)的性質(zhì)和類型。3、試述酶促反應(yīng)的特點。酶對底物具有極高的催化效率:酶的催化效率通常比非催化反應(yīng)高108-1020倍,比一般催化劑高107-1013倍。酶對底物具有高度的特異性:一種酶僅作用于一種或一類化合物,或一定的化學鍵,催化一定的化學反應(yīng)并產(chǎn)生一定的產(chǎn)物。一般分為兩種類型,即絕對專一性和相對專一性。酶的活性和酶的量具有可調(diào)節(jié)性:體內(nèi)許多酶的酶活性和酶量受體內(nèi)代謝物或激素的調(diào)節(jié)。酶具有不穩(wěn)定性:酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)。在某些理化性質(zhì)的作用下,酶會發(fā)生變性而失去催化活性。第六章糖代謝—不要的部分1、糖酵解:(1)概念:一分子葡萄糖在胞質(zhì)中可裂解為兩分子丙酮酸,是葡萄糖無氧氧化和有氧氧化的共同起始途徑,稱為糖酵解。在不能利用氧或氧供應(yīng)不足時,人體將丙酮酸在胞質(zhì)中還原生成乳酸,稱為乳酸發(fā)酵。(2)部位:胞質(zhì)(3)大的反應(yīng)過程(包括與CO2、H2O、ATP生成有關(guān)的部位):(一)葡萄糖經(jīng)糖酵解分解為兩分子丙酮酸(二)丙酮酸被還原為乳酸(4)關(guān)鍵酶:己糖激酶、磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶5)調(diào)節(jié):糖酵解的調(diào)控是對3個關(guān)鍵酶活性的調(diào)節(jié)磷酸果糖激酶-1:別構(gòu)抑制劑:ATP和檸檬酸;別構(gòu)激活劑:AMP,ADP、果糖-1,6二磷酸、果糖-2,6-二磷酸丙酮酸激酶:別構(gòu)激活劑:果糖-1,6-二磷酸;別構(gòu)抑制劑:ATP和丙氨酸己糖激酶:受到反應(yīng)產(chǎn)物葡糖-6磷酸的反饋抑制,長鏈脂酰CoA對其有別構(gòu)抑制作用,胰島素可誘導葡糖激酶基因的轉(zhuǎn)錄,促進酶的合成。(6)生理意義:1)無氧氧化最主要的生理意義在于迅速提供能量,這對肌收縮更為重要。2)是某些細胞在氧供應(yīng)正常情況下的重要供能途徑例如成熟紅細胞沒有線粒體,只能依賴糖的無氧氧化提供能量。神經(jīng)細胞、白細胞、骨髓細胞等代謝極為活躍,即使不缺氧也常由糖無氧氧化提供部分能量。5、糖原的合成與分解(1)概念:糖原合成:是指由葡萄糖生成糖原的過程。糖原分解:是指糖原分解為葡糖-6-磷酸或葡萄糖的過程。(2)部位:肝和骨骼?。?)大的反應(yīng)過程(包括與CO2、H2O、ATP生成有關(guān)的部位):糖原合成過程:葡萄糖活化為尿苷二磷酸葡萄糖尿苷二磷酸葡萄糖連接形成直鏈和支鏈關(guān)鍵酶:糖原合酶糖原分解過程:糖原磷酸化酶分解a-1,4-糖苷鍵關(guān)鍵酶:糖原磷酸化酶脫支酶分解a-1,6-糖苷鍵(4)調(diào)節(jié):(一)糖原磷酸化酶受化學修飾和別構(gòu)調(diào)節(jié)糖原磷酸化酶磷酸化有活性(二)糖原合酶受化學修飾和別構(gòu)調(diào)節(jié)去磷酸化的糖原合酶有活性(5)生理意義:肝糖原是血糖的重要來源,這對于某些依賴葡萄糖供能的組織(如腦、紅細胞等)尤為重要。而肌糖原主要為肌收縮提供急需的能量。第七章脂質(zhì)代謝—不要的部分3、脂肪酸的合成的部位、原料、關(guān)鍵酶?碳鏈加長的部位及原料是什么?(1)部位:組織:肝(主要)、腎、腦、肺、乳腺及脂肪等組織亞細胞:胞液:主要合成16碳的軟脂酸(棕櫚酸)碳鏈延長:在肝線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(2)原料:乙酰CoA、NADPH、ATP、HCO3-、Mn2+(3)關(guān)鍵酶:乙酰CoA羧化酶(4)碳鏈加長:肝線粒體一原料:乙酰CoA內(nèi)質(zhì)網(wǎng)原料:丙二酸單酰CoA5、1分子軟脂酸徹底氧化凈生成多少分子ATP?(說明過程)1)過程:(1)脂肪酸活化為脂酰CoA(2)脂酰CoA進入線粒體:長鏈脂酰CoA不能直接透過線粒體內(nèi)膜,需要肉堿協(xié)助轉(zhuǎn)運。在線粒體內(nèi)膜內(nèi)側(cè)肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I作用下脂酰CoA進人線粒體。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I是脂肪酸B-氧化的關(guān)鍵酶。(3)脂酰CoAB—氧化:過程有脫氫、加水、再脫氫及硫解四步反應(yīng)來完成一次B—氧化。脫氫生成烯脂酰CoA:加水生成羥脂酰CoA:再脫氫生成B—酮脂酰CoA:硫解產(chǎn)生乙酰CoA:經(jīng)過上述四步反應(yīng),脂酰CoA的碳鏈被縮短2個碳原子。脫氫、加水、再脫氫及硫解反復進行,最終完成脂肪酸B-氧化。能量計算:脂肪酸氧化是機體ATP的重要來源脂肪酸徹底氧化生成大量ATP。以軟脂酸為例,1分子軟脂酸徹底氧化需進行7次B-氧化,生成7分子FADH,7分子NADH及8分子乙酰2CoA。每分子FADH產(chǎn)生1.5分子ATP,每分子NADH產(chǎn)生2.5分子ATP;每分子乙酰CoA經(jīng)2檸檬酸循環(huán)徹底氧化產(chǎn)生10分子ATP。因此1分子軟脂酸徹底氧化共生成(7x1.5)+(7x2.5)+(8x10)二108分子ATP,,9、膽固醇合成原料、關(guān)鍵酶有哪些?如何調(diào)節(jié)?如何轉(zhuǎn)化?膽固醇合成原料:乙酰CoA和NADPH是膽固醇合成基本原料。關(guān)鍵酶:HMG-CoA還原酶調(diào)節(jié):酶的活性具有晝夜節(jié)律性(午夜最高,中午最低)可被磷酸化而失活,脫磷酸可恢復活性受膽固醇的反饋抑制作用胰島素、甲狀腺素能誘導肝HMG-COA還原酶的合成調(diào)節(jié):膽固醇可轉(zhuǎn)變?yōu)槟懼崮懝檀伎赊D(zhuǎn)化為類固醇激素①膽固醇可轉(zhuǎn)化為維生素D的前體3第九章氨基酸代謝不要的部分1、蛋白質(zhì)有哪些功能?維持組織細胞的生長、更新和修補參與體內(nèi)多種重要的生理活動可作為能源物質(zhì)氧化供能什么是氮平衡?氮平衡有什么意義?①氮平衡是指每日氮的攝入量與排出量之間的關(guān)系②氮平衡可以反映體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的概況。什么是營養(yǎng)必需氨基酸?它包括哪些?什么是蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值?什么是蛋白質(zhì)的互補作用?定義:指體內(nèi)需要而又不能自身合成,必須由食物供給的氨基酸。營養(yǎng)必需氨基酸包括:賴氨酸、色氨酸、蘇氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、甲硫氨酸、亮氨酸、異亮氨酸。白質(zhì)的營養(yǎng)價值:是指食物蛋白質(zhì)在體內(nèi)的利用率。蛋白質(zhì)的互補作用:營養(yǎng)價值較低的蛋白質(zhì)混合食用,彼此間必需氨基酸可以得到相互補充,從而提高蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值,這種作用稱為蛋白質(zhì)的互補作用。蛋白質(zhì)消化需要的部位與酶有哪些?部位:胃和小腸,蛋白質(zhì)在胃中被水解為多肽和氨基酸,在小腸被水解成小肽和氨基酸。酶:胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、彈性蛋白酶、羧基肽酶和氨基肽酶、腸激酶、二肽酶。何謂轉(zhuǎn)氨基作用?體內(nèi)重要的轉(zhuǎn)氨酶有哪幾種?測定血清中這些轉(zhuǎn)氨酶的活性有何意義?①轉(zhuǎn)氨基作用是在轉(zhuǎn)氨酶的催化下,可逆地把a-氨基酸的氨基轉(zhuǎn)移給a-酮酸,結(jié)果是氨基酸脫去氨基生成相應(yīng)的a-酮酸,而原來的a-酮酸則轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N氨基酸。內(nèi)重要的轉(zhuǎn)氨酶:L-谷氨酸轉(zhuǎn)氨酶,a-酮酸轉(zhuǎn)氨酶常情況下,轉(zhuǎn)氨酶主要存在于細胞內(nèi),血清中的活性很低。當某種原因使細胞膜通透性增高或細胞破壞時,轉(zhuǎn)氨酶可大量釋放入血,使血清中轉(zhuǎn)氨酶活性明顯升高。例如急性肝炎患者血清ALT活性顯著升高;心肌梗死患者血清AST明顯上升。臨床上可以以此作為疾病診斷和預(yù)后的參考指標之簡述甲硫氨酸循環(huán)及其生理意義?①甲硫氨酸—腺苷轉(zhuǎn)移酶>S-腺苷甲硫氨酸―甲基轉(zhuǎn)移酶>S-腺苷同型半胱氨酸―脫腺苷>S-同型半胱氨酸一接受甲基>甲硫氨酸(甲硫氨酸循環(huán):接受甲基,活化甲基,合成S-同型半胱氨酸,還原同型半胱氨酸意義:為體內(nèi)廣泛存在的甲基化反應(yīng)提供活性甲基,促進FH4再生。第十四章DNA的生物合成不要的部分一、原核生物DNA的復制體系有哪些酶及蛋白質(zhì)成分?各有何作用?DNApolI對復制中的錯誤進行校對,對復制和修復中出現(xiàn)的空隙進行填補。用特異的蛋白酶可以將DNApolI水解為2個片段。大片段被稱為Klenow片段,具有DNA聚合酶活性和3'-5'核酸外切酶活性;小片段有5'-3'核酸外切酶活性。DNApolII參與DNA損傷的應(yīng)急狀態(tài)修復。DNApolIII是原核生物復制延長中真正起催化作用的酶。DnaA負責辨認并結(jié)合起始點DnaB解開DNA雙鏈DnaC運送和協(xié)同DnaBDnaG引物酶,催化RNA引物生成SSB具有結(jié)合單鏈DNA的能力,維持模板的單鏈穩(wěn)定狀態(tài)并使其免受胞內(nèi)廣泛存在的核酸酶降解8)拓撲異構(gòu)酶:解開超螺旋。拓撲酶I可以切斷DNA雙鏈中一股,這一反應(yīng)不需要ATP。拓撲酶II可在一定位置上,切斷DNA雙鏈中兩股,這一反應(yīng)需要ATP。9)DNA連接酶:連接復制中產(chǎn)生的單鏈缺口。DNA連接酶連接DNA鏈3'-0H末端和另一DNA鏈的5'-P末端,二者間生成磷酸二酯鍵。連接酶的催化作用需要消耗ATP。七、闡述逆轉(zhuǎn)錄的基本過程和逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)的重大研究價值。1、逆轉(zhuǎn)錄的基本過程分為三步:逆轉(zhuǎn)錄酶以病毒基因組RNA為模板,催化dNTP聚合生成DNA互補鏈,產(chǎn)物是RNA/DNA雜化雙鏈。雜化雙鏈中的RNA被逆轉(zhuǎn)錄酶中有RNase活性的組分水解,被感染細胞內(nèi)的RNaseH(H=Hybrid)也可水解RNA鏈。RNA分解后剩下的單鏈DNA再用作模板,由逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成第二條DNA互補鏈。2、逆轉(zhuǎn)錄酶有三種活性,:RNA指導的DNA聚合酶活性、DNA指導的DNA聚合酶活性、RNaseH活性。1、逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)的重大研究價值:中心法則認為:DNA的功能兼有遺傳信息的傳代和表達,因此DNA處于生命活動的中心位置。逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象說明:至少在某些生物,RNA同樣兼有遺傳信息傳代與表達功能。這是對傳統(tǒng)的中心法則的挑戰(zhàn)。對逆轉(zhuǎn)錄病毒的研究,拓寬了20世紀初已注意到的病毒致癌理論,至20世紀70年代初,從逆轉(zhuǎn)錄病毒中發(fā)現(xiàn)了癌基因。至今,癌基因研究仍是病毒學、腫瘤學和分子生物學的重大課題。艾滋病病原人類免疫缺陷病毒(HIV)也是RNA病毒,有逆轉(zhuǎn)錄功能。第十六章RNA的生物合成不要的部分三、啟動子在RNA轉(zhuǎn)錄中有何作用?對啟動子研究的方法是什么?1、啟動子的作用:啟動子是RNA聚合酶結(jié)合模板DNA的部位,也是控制轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵部位。2、研究方法:RNA聚合酶保護法。四、簡述原核生物轉(zhuǎn)錄的過程。原核生物的轉(zhuǎn)錄過程可分為轉(zhuǎn)錄起始、轉(zhuǎn)錄延長和轉(zhuǎn)錄終止三個階段。1、轉(zhuǎn)錄起始過程:RNA聚合酶全酶(a2BBb)識別并結(jié)合啟動子,形成閉合轉(zhuǎn)錄復合體DNA雙鏈打開,形成開放轉(zhuǎn)錄復合體;DNA分子接近-10區(qū)域的部分雙螺旋解開后轉(zhuǎn)錄開始。在RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應(yīng),形成第一個磷酸二酯鍵.2、RNApol核心酶獨立延長RNA鏈o亞基脫落,RNA-pol聚合酶核心酶變構(gòu),與模板結(jié)合松弛,沿著DNA模板前移在核心酶作用下,NTP不斷聚合,RNA鏈不斷延長。①核心酶負責RNA鏈延長反應(yīng);RNA鏈從/r/
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