生物土壤中分離尿素的細(xì)菌的分離及計數(shù)課程新人教選修

課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與記數(shù)一、背景知識測定微生物數(shù)量的方法：直接計數(shù)法：最常用的顯微鏡直接計數(shù)法。先將待測樣品制成懸液，然后取一定量的懸液放在顯微鏡下進(jìn)行計數(shù)。根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來計算出單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)。優(yōu)點：設(shè)備簡單、能觀察微生物的形態(tài)特征。缺點：難以計數(shù)微小的細(xì)菌。一般用于純培養(yǎng)懸浮液中各種單細(xì)胞菌體的計數(shù)。

間接計數(shù)法：最常用稀釋平板計數(shù)法。含菌數(shù)較少的情形下，也可以完成計數(shù)。實踐案例

土壤中好氣性細(xì)菌的計數(shù)測定土壤中的含菌量可以作為判定土壤肥力的一個重要指標(biāo)?；顒映绦颍?/p>

1、制備土壤稀釋液

①取土壤表層土樣②稱取1g土樣，放入99ml無菌水錐形瓶中，振蕩20min，即成100倍稀釋液。③移液、稀釋

1ml無菌移液管吸取100倍稀釋液0.5，移入裝有4.5ml無菌水試管中，配制成1000倍稀釋液。用同樣方法可制成的系列稀釋菌液。2、取樣及倒平板①培養(yǎng)皿編號：各編號三個培養(yǎng)皿。②培養(yǎng)皿中加入土壤稀釋液：用移液管按照編號分別加入不同濃度土壤稀釋液各0.2ml。③每個培養(yǎng)皿加入牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基15ml，轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使土壤稀釋液與培養(yǎng)基混合均勻。

3、培養(yǎng)

將平板冷卻倒置放入28~30攝氏度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4、觀察記錄

每個培養(yǎng)皿內(nèi)菌落數(shù)不能太多或太少。細(xì)菌、放線菌每個培養(yǎng)皿30~300個菌落為宜，霉菌10~100個為宜。

練一練測定土壤中細(xì)菌數(shù)量一般選倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)；而真菌的數(shù)量，一般選用100、1000、倍稀釋，其原因是（）

A細(xì)菌個體小，真菌個體大

B細(xì)菌易稀釋真菌不易稀釋

C細(xì)菌在土壤中含量比真菌高

D隨機的，沒有原因

C每克土壤樣品菌數(shù)=某稀釋倍數(shù)的菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù)÷細(xì)菌培養(yǎng)時所用的稀釋液體積

練一練

某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每克樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1ml）()

A.2.34××

B

練一練

用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，其結(jié)果與實際值相比（）

A.比實際值高

B.比實際值低

C.和實際值一致

D.比實際值可能高也可能低B探究活動

測定特定樣品中的微生物數(shù)量1.檢測天然水源中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)人的糞便中含有致病菌，但是因數(shù)量少而不易檢測。大腸桿菌是生存于人體腸道中的正常菌群，且能夠與致病菌混雜生長。如果食品和飲用水中出現(xiàn)大腸桿菌，就意味著食物可能被糞便污染而帶上致病菌。因而常將大腸桿菌數(shù)量作為食品衛(wèi)生的檢測指標(biāo)之一。大腸菌群是指在37攝氏度條件下，24小時內(nèi)能發(fā)酵乳糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣的一類兼性厭氧型革蘭氏陰性無芽孢桿菌的總稱。大腸菌群數(shù)的檢測，使用乳糖膽鹽蛋白胨培養(yǎng)基、EMB培養(yǎng)基、乳糖發(fā)酵管?；顒颖尘癊MB培養(yǎng)基與大腸桿菌代謝產(chǎn)物產(chǎn)生紫色帶金屬光邊的菌落2.土壤中分解尿素細(xì)菌的計數(shù)有些細(xì)菌含有尿素分解酶，能將尿素瓊脂培養(yǎng)基中的尿素分解生成氨，氨溶于水變成氫氧化銨，導(dǎo)致培養(yǎng)基變成堿性，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色。下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是()

A.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水

B.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、瓊脂、水

C.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、瓊脂、水

D.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水練一練A；

申博創(chuàng)贏會wrf39xuz凌娢心里這樣想，她還想知道笑點在哪里呢。“你放心的笑，我保證不打死你?！闭f完這句話，她突然感覺自己好作死?！肮勅松€是談理想……虧你想得出來……誰會找你談那種東西啊……”好想打他啊……真的好想打他……慕容凌娢感覺自己此時已經(jīng)石化，尷尬癌都犯了?！澳莻€……”慕容凌娢皺了皺眉，強壯鎮(zhèn)定的問道，“你到底想干什么？”“想你了，過來看看。”“裝，你繼續(xù)裝！”慕容凌娢輕蔑的看著韓哲軒。我就不信情節(jié)能發(fā)展的那么快?！膀}年啊～好說咱們認(rèn)識那么久了，我已經(jīng)徹底明白你的套路了?！泵蛄艘豢诓瑁饺萘鑺我桓崩现\深算的樣子，“你看似是為了刷存在感而出現(xiàn)，其實每一次的出現(xiàn)都能引起一系列的連鎖反應(yīng)。比如說我第一次遇到你……”“等等，這里不需要回憶殺！”韓哲軒急忙攔住了她，“本來每一章的內(nèi)容已經(jīng)很短小了，你在這個樣子回憶下去，豈不是又要水好幾章了嗎。我知道你要表達(dá)什么，是不是蝴蝶效應(yīng)啊……”“錯！都什么年代了……”“晴朝燾祿年間。”“你還能想出‘蝴蝶效應(yīng)’這么難聽的命名詞……”“也可以叫‘拓?fù)鋵W(xué)連鎖反應(yīng)’。”“嗯嗯……這個聽起來很有水平。不過……”慕容凌娢沉思了片刻，“它應(yīng)該有一個更霸氣的名稱，就叫--慕容凌娢定律，又名--配角光環(huán)論?！薄芭丁呛恰恰憔彤?dāng)什么也沒聽見就好了?！蓖ｎD時間累計達(dá)到九秒，韓哲軒才回過神來，“我想讓你幫個忙?！薄皻⑷朔呕鹬挛医^對不干，我可是大天朝的一等良民?！薄爱?dāng)然不是那種事情?！币钦夷戕k那種事情，除非我腦子里進(jìn)水銀了。韓哲軒換上了關(guān)懷備至的笑容，這表情讓慕容凌娢有些心虛，不會是什么喪盡天良的行為吧……只間韓哲軒慢慢把手從身后拿出，笑容更加和藹，把一個圓餅型的東西按在了桌子上。他難不成穿越的時候帶了炸彈！慕容凌娢第一反應(yīng)就是往后退，隨時可以從二樓跳下去?！澳愀墒裁窗?。”韓哲軒很奇怪的看著已經(jīng)溜到窗邊的慕容凌娢，“放心吧，這只是一個充電寶，絕對沒有輻射?！薄俺潆妼殻吭趺床辉缯f。”一聽沒有危險，慕容凌娢馬上又湊了過來。這真的只是一個普通的充電寶，呈盾牌狀，正面有紅白藍(lán)三色的圓環(huán)，正中間還有一顆白色的五角星?！斑@充電寶還真是特別啊(居然專門給了它整整41字的特寫)?！毕氲阶约簭某鰣龅浆F(xiàn)在，似