生物土壤中分離尿素的細(xì)菌的分離及計(jì)數(shù)課程新人教選修

課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與記數(shù)一、背景知識(shí)測(cè)定微生物數(shù)量的方法：直接計(jì)數(shù)法：最常用的顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。先將待測(cè)樣品制成懸液，然后取一定量的懸液放在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)。根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來(lái)計(jì)算出單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)。優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備簡(jiǎn)單、能觀察微生物的形態(tài)特征。缺點(diǎn)：難以計(jì)數(shù)微小的細(xì)菌。一般用于純培養(yǎng)懸浮液中各種單細(xì)胞菌體的計(jì)數(shù)。

間接計(jì)數(shù)法：最常用稀釋平板計(jì)數(shù)法。含菌數(shù)較少的情形下，也可以完成計(jì)數(shù)。實(shí)踐案例

土壤中好氣性細(xì)菌的計(jì)數(shù)測(cè)定土壤中的含菌量可以作為判定土壤肥力的一個(gè)重要指標(biāo)?；顒?dòng)程序：

1、制備土壤稀釋液

①取土壤表層土樣②稱取1g土樣，放入99ml無(wú)菌水錐形瓶中，振蕩20min，即成100倍稀釋液。③移液、稀釋

1ml無(wú)菌移液管吸取100倍稀釋液0.5，移入裝有4.5ml無(wú)菌水試管中，配制成1000倍稀釋液。用同樣方法可制成的系列稀釋菌液。2、取樣及倒平板①培養(yǎng)皿編號(hào)：各編號(hào)三個(gè)培養(yǎng)皿。②培養(yǎng)皿中加入土壤稀釋液：用移液管按照編號(hào)分別加入不同濃度土壤稀釋液各0.2ml。③每個(gè)培養(yǎng)皿加入牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基15ml，轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使土壤稀釋液與培養(yǎng)基混合均勻。

3、培養(yǎng)

將平板冷卻倒置放入28~30攝氏度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4、觀察記錄

每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)菌落數(shù)不能太多或太少。細(xì)菌、放線菌每個(gè)培養(yǎng)皿30~300個(gè)菌落為宜，霉菌10~100個(gè)為宜。

練一練測(cè)定土壤中細(xì)菌數(shù)量一般選倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)；而真菌的數(shù)量，一般選用100、1000、倍稀釋，其原因是（）

A細(xì)菌個(gè)體小，真菌個(gè)體大

B細(xì)菌易稀釋真菌不易稀釋

C細(xì)菌在土壤中含量比真菌高

D隨機(jī)的，沒(méi)有原因

C每克土壤樣品菌數(shù)=某稀釋倍數(shù)的菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù)÷細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)所用的稀釋液體積

練一練

某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每克樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1ml）()

A.2.34××

B

練一練

用稀釋涂布平板法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，其結(jié)果與實(shí)際值相比（）

A.比實(shí)際值高

B.比實(shí)際值低

C.和實(shí)際值一致

D.比實(shí)際值可能高也可能低B探究活動(dòng)

測(cè)定特定樣品中的微生物數(shù)量1.檢測(cè)天然水源中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)人的糞便中含有致病菌，但是因數(shù)量少而不易檢測(cè)。大腸桿菌是生存于人體腸道中的正常菌群，且能夠與致病菌混雜生長(zhǎng)。如果食品和飲用水中出現(xiàn)大腸桿菌，就意味著食物可能被糞便污染而帶上致病菌。因而常將大腸桿菌數(shù)量作為食品衛(wèi)生的檢測(cè)指標(biāo)之一。大腸菌群是指在37攝氏度條件下，24小時(shí)內(nèi)能發(fā)酵乳糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣的一類兼性厭氧型革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌的總稱。大腸菌群數(shù)的檢測(cè)，使用乳糖膽鹽蛋白胨培養(yǎng)基、EMB培養(yǎng)基、乳糖發(fā)酵管?；顒?dòng)背景EMB培養(yǎng)基與大腸桿菌代謝產(chǎn)物產(chǎn)生紫色帶金屬光邊的菌落2.土壤中分解尿素細(xì)菌的計(jì)數(shù)有些細(xì)菌含有尿素分解酶，能將尿素瓊脂培養(yǎng)基中的尿素分解生成氨，氨溶于水變成氫氧化銨，導(dǎo)致培養(yǎng)基變成堿性，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色。下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是()

A.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水

B.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、瓊脂、水

C.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、瓊脂、水

D.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水練一練A；

申博創(chuàng)贏會(huì)wrf39xuz凌娢心里這樣想，她還想知道笑點(diǎn)在哪里呢?！澳惴判牡男?，我保證不打死你。”說(shuō)完這句話，她突然感覺(jué)自己好作死?！肮勅松€是談理想……虧你想得出來(lái)……誰(shuí)會(huì)找你談那種東西啊……”好想打他啊……真的好想打他……慕容凌娢感覺(jué)自己此時(shí)已經(jīng)石化，尷尬癌都犯了?！澳莻€(gè)……”慕容凌娢皺了皺眉，強(qiáng)壯鎮(zhèn)定的問(wèn)道，“你到底想干什么？”“想你了，過(guò)來(lái)看看?！薄把b，你繼續(xù)裝！”慕容凌娢輕蔑的看著韓哲軒。我就不信情節(jié)能發(fā)展的那么快。“騷年啊～好說(shuō)咱們認(rèn)識(shí)那么久了，我已經(jīng)徹底明白你的套路了。”抿了一口茶，慕容凌娢一副老謀深算的樣子，“你看似是為了刷存在感而出現(xiàn)，其實(shí)每一次的出現(xiàn)都能引起一系列的連鎖反應(yīng)。比如說(shuō)我第一次遇到你……”“等等，這里不需要回憶殺！”韓哲軒急忙攔住了她，“本來(lái)每一章的內(nèi)容已經(jīng)很短小了，你在這個(gè)樣子回憶下去，豈不是又要水好幾章了嗎。我知道你要表達(dá)什么，是不是蝴蝶效應(yīng)啊……”“錯(cuò)！都什么年代了……”“晴朝燾祿年間?！薄澳氵€能想出‘蝴蝶效應(yīng)’這么難聽(tīng)的命名詞……”“也可以叫‘拓?fù)鋵W(xué)連鎖反應(yīng)’?！薄班培拧@個(gè)聽(tīng)起來(lái)很有水平。不過(guò)……”慕容凌娢沉思了片刻，“它應(yīng)該有一個(gè)更霸氣的名稱，就叫--慕容凌娢定律，又名--配角光環(huán)論?！薄芭丁呛恰恰憔彤?dāng)什么也沒(méi)聽(tīng)見(jiàn)就好了?！蓖ｎD時(shí)間累計(jì)達(dá)到九秒，韓哲軒才回過(guò)神來(lái)，“我想讓你幫個(gè)忙?！薄皻⑷朔呕鹬挛医^對(duì)不干，我可是大天朝的一等良民。”“當(dāng)然不是那種事情?！币钦夷戕k那種事情，除非我腦子里進(jìn)水銀了。韓哲軒換上了關(guān)懷備至的笑容，這表情讓慕容凌娢有些心虛，不會(huì)是什么喪盡天良的行為吧……只間韓哲軒慢慢把手從身后拿出，笑容更加和藹，把一個(gè)圓餅型的東西按在了桌子上。他難不成穿越的時(shí)候帶了炸彈！慕容凌娢第一反應(yīng)就是往后退，隨時(shí)可以從二樓跳下去?！澳愀墒裁窗　！表n哲軒很奇怪的看著已經(jīng)溜到窗邊的慕容凌娢，“放心吧，這只是一個(gè)充電寶，絕對(duì)沒(méi)有輻射。”“充電寶？怎么不早說(shuō)?！币宦?tīng)沒(méi)有危險(xiǎn)，慕容凌娢馬上又湊了過(guò)來(lái)。這真的只是一個(gè)普通的充電寶，呈盾牌狀，正面有紅白藍(lán)三色的圓環(huán)，正中間還有一顆白色的五角星?！斑@充電寶還真是特別啊(居然專門給了它整整41字的特寫)?！毕氲阶约簭某鰣?chǎng)到現(xiàn)在，似