醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷

醫(yī)院感染標(biāo)本的采集與結(jié)果判斷李芳芳講師醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁(yè)!病例１：某院胸外科在一個(gè)星期內(nèi)分別送來(lái)三份不同病人的標(biāo)本（痰標(biāo)本、切口分泌物標(biāo)本、血標(biāo)本），經(jīng)檢測(cè)均檢出了金黃色葡萄球菌，PCR結(jié)果相同，耐藥譜結(jié)果相同：耐藥：頭孢唑啉、頭孢哌酮、頭孢三嗪、青霉素Ｇ、氨芐青霉素、羧芐青霉素，敏感：萬(wàn)古霉素。？What？How耐甲氧西林金黃色葡萄球菌爆發(fā)醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁(yè)!臨床標(biāo)本檢驗(yàn)對(duì)病人及帶菌者進(jìn)行監(jiān)測(cè)配合醫(yī)院感染爆發(fā)的調(diào)查配合抗生素合理使用的管理醫(yī)院環(huán)境的細(xì)菌學(xué)監(jiān)測(cè)研究與教育臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的任務(wù)醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁(yè)!臨床需要――醫(yī)生選擇合適的方法、開(kāi)醫(yī)囑、填寫(xiě)申請(qǐng)單――護(hù)士備物、采集標(biāo)本（正確的用物、時(shí)間、方法）――衛(wèi)勤中心運(yùn)送標(biāo)本――微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)――出報(bào)告、指導(dǎo)臨床用藥標(biāo)本采集及檢驗(yàn)－一般程序您認(rèn)為在標(biāo)本采集和檢驗(yàn)時(shí)要注意什么？醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁(yè)!Lipsky和Plorde將標(biāo)本按存在部位的深淺分為三層深層標(biāo)本：循環(huán)血液、胸液、腹腔液、關(guān)節(jié)液深層標(biāo)本但與外界相通：子宮內(nèi)膜、膀胱、瘺管嚴(yán)重污染有正常菌群的標(biāo)本：皮膚或糞便等醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁(yè)!三、各類標(biāo)本的采集和檢驗(yàn)血標(biāo)本尿標(biāo)本呼吸道標(biāo)本糞標(biāo)本腦脊液標(biāo)本膿及傷口標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁(yè)!血標(biāo)本采樣方法消毒抽?。ǜ稍铩缇尼樛玻└鼡Q針頭注入培養(yǎng)基混合周圍血推片量：培養(yǎng)基的1/10成人：5-10mL（SBE10-20ml）嬰兒及兒童：1-2mL醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁(yè)!血標(biāo)本抽血至培養(yǎng)瓶（需氧或厭氧）35℃普通孵育置全自動(dòng)血培養(yǎng)儀每日觀察儀器陽(yáng)性報(bào)警無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)第5、7天作盲目移種第7天作盲目移種陰性報(bào)告無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)檢驗(yàn)方法醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁(yè)!結(jié)果分析有意義菌：類桿菌、腸桿菌科細(xì)菌、銅綠假單胞菌、嗜血流感桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌無(wú)病原學(xué)意義菌：非溶血性鏈球菌（D族除外）、類白喉?xiàng)U菌、芽胞桿菌血標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁(yè)!其它采樣方法恥骨上膀胱穿刺抽吸采樣：膀胱充盈時(shí)，19號(hào)或20號(hào)針頭及針筒，穿刺點(diǎn)----臍與恥骨聯(lián)合中點(diǎn)連線的下1/3處長(zhǎng)期導(dǎo)尿者：消毒尿管與引流管接頭，無(wú)菌空針抽取膀胱鏡檢、導(dǎo)尿管導(dǎo)尿、逆行腎盂造影術(shù)：術(shù)中采取輸尿管膀胱梗阻：分段采集數(shù)份，分別培養(yǎng)尿標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁(yè)!1份標(biāo)本－10個(gè)油鏡視野，每個(gè)視野細(xì)菌數(shù)：1-10個(gè)------每1mL尿液有104-105個(gè)細(xì)菌

污染或特殊情況100-1000個(gè)------每1mL尿液有106-108個(gè)細(xì)菌

尿路感染

常見(jiàn)病原菌：大腸埃希菌、葡萄球菌、鏈球菌、變形桿菌、傷寒沙門菌等臨床意義尿標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁(yè)!（三）呼吸道標(biāo)本標(biāo)本采集采集時(shí)間----晨痰采集方法：咽拭子：灌注活性炭粉的棉拭、Stuart運(yùn)輸培養(yǎng)基痰標(biāo)本：清晨咳痰法、小兒取痰法、導(dǎo)管取痰法、氣管穿刺吸痰法、氣管切開(kāi)者深入透氣孔中取痰、纖維支氣管鏡采取痰標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁(yè)!痰標(biāo)本檢查方法直接鏡檢:標(biāo)本是否合格、區(qū)分正常部分和病變部分結(jié)核菌檢查：抗酸染色、羅氏培養(yǎng)基----鑒定----藥敏試驗(yàn)分離培養(yǎng)（巧克力平板、血平板）：菌落觀察---鑒定呼吸道標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁(yè)!檢驗(yàn)報(bào)告直接鏡檢報(bào)告（約2h）：標(biāo)本是否合格、有無(wú)膿細(xì)胞、柱狀上皮細(xì)胞、扁平上皮細(xì)胞的數(shù)量、陽(yáng)性球菌？陰性球菌？培養(yǎng)檢查結(jié)果報(bào)告：5%血平板、中國(guó)蘭平板、藥敏試驗(yàn)結(jié)果呼吸道標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁(yè)!（四）糞標(biāo)本采集：量----0.5～2g，保存液，4oC<24h檢驗(yàn)的方法：直接涂片鏡檢：只用于懷疑霍亂弧菌感染或偽膜性結(jié)腸炎、葡萄球菌小腸結(jié)腸炎、白色念珠菌病培養(yǎng)檢查：與臨床微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法相同醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁(yè)!（六）膿及傷口標(biāo)本采集：膿腫未破口、深部膿腫：局部消毒，以無(wú)菌法抽取，隔絕空氣送檢膿腫已破口：應(yīng)用針頭抽取深部膿液，放入Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基送檢開(kāi)放傷口、潰瘍、瘺管：清洗、消毒，刮取或切取燒傷創(chuàng)面：痂下變黑或變形的不健康區(qū)邊緣醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁(yè)!四、檢驗(yàn)結(jié)果分析直接涂片染色及鏡檢結(jié)果分析鏡檢陰性培養(yǎng)結(jié)果陽(yáng)性鏡檢陽(yáng)性無(wú)臨床表現(xiàn)與培養(yǎng)結(jié)果相同培養(yǎng)陰性醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁(yè)!最低抑菌濃度（Minimalinhibitoryconcentration,MIC）最低殺菌濃度（Minimalbactericidalconcentration,MBC）藥物敏感試驗(yàn)醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁(yè)!抑菌試驗(yàn)醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁(yè)!尿培養(yǎng)報(bào)告單金黃色葡萄球菌敏感：萬(wàn)古霉素中介：氧氟沙星（諾氟沙星）耐藥：青霉素Ｇ、頭孢唑啉、頭孢哌酮、頭孢三嗪、氨芐青霉素、羧芐青霉素報(bào)告單結(jié)果分析醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁(yè)!醫(yī)院感染標(biāo)本采集及檢驗(yàn)標(biāo)本采集、檢驗(yàn)的一般程序醫(yī)院感染標(biāo)本采集的一般標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本的運(yùn)送與處理各類醫(yī)院感染標(biāo)本的采集和檢驗(yàn)醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁(yè)!標(biāo)本采集的一般標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本容器的要求：無(wú)菌干燥、寬口棉拭要求：不同部位的標(biāo)本采集：眼、耳、鼻、喉、創(chuàng)面、膿腫、組織標(biāo)本、痰、腦脊液標(biāo)本及化驗(yàn)單：病人姓名、采集時(shí)間及日期、病區(qū)、床號(hào)、標(biāo)本名、采集部位、臨床診斷、檢驗(yàn)項(xiàng)目與抗生素使用的時(shí)間關(guān)系存在正常菌群部位：消毒或繞道醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁(yè)!標(biāo)本的運(yùn)送與處理標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送檢采集與培養(yǎng)有時(shí)間間隔收到標(biāo)本后的處理：

檢查----肉眼觀察---處理---涂片檢查---電話通知

立即處理的標(biāo)本：腦脊液、眼分泌物，洗胃液肺組織(查結(jié)核分支桿菌)

可暫緩處理的標(biāo)本：創(chuàng)面拭子、痰、糞便（冷藏2-3小時(shí)）、尿（冷藏24小時(shí)）醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁(yè)!（一）血標(biāo)本采樣時(shí)機(jī)：菌血癥出現(xiàn)于發(fā)熱或寒戰(zhàn)前1h內(nèi)細(xì)菌性心內(nèi)膜炎3次血培養(yǎng)（24h內(nèi)3次,次間隔>1h）間歇性菌血癥3次/24-48h內(nèi)、不同部位已接受抗生素治療的病人4-6次，吸收或中和血中的抗生素醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁(yè)!血標(biāo)本抽血至培養(yǎng)瓶（需氧或厭氧）35℃普通孵育置全自動(dòng)血培養(yǎng)儀藥敏試驗(yàn)獲得純菌菌種鑒定（生化鑒定：傳統(tǒng)或自動(dòng)化）二級(jí)報(bào)告，微生物學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告單每日觀察儀器陽(yáng)性報(bào)警涂片革蘭染色一級(jí)報(bào)告，通知臨床血平板、巧克力平板、麥康凱平板分離培養(yǎng)檢驗(yàn)方法醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁(yè)!血標(biāo)本檢驗(yàn)方法醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁(yè)!（二）尿標(biāo)本中段尿采樣女性：清潔----清洗----無(wú)菌紗布擦干----分開(kāi)陰唇----置棉花于陰道口----留取中段尿10ml（滅菌容器）男性：清洗----沖洗----留取中段尿老年人和兒童：清潔外生殖器及肛門部位，用清潔的尿盆或燒瓶接取醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁(yè)!檢查方法濕片鏡檢----指導(dǎo)培養(yǎng)離心----沉淀----涂片----染色分離培養(yǎng)----菌落觀察---涂片----鏡檢純培養(yǎng)結(jié)核桿菌檢查----抗酸染色培養(yǎng)（羅氏培養(yǎng)基）尿標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁(yè)!尿快速檢驗(yàn)報(bào)告（24h報(bào)告）無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)或尿液含菌數(shù)≦103cfu/ml尿液含菌數(shù)>105cfu/ml,確定為大腸桿菌或糞鏈球菌,直接藥敏試驗(yàn)結(jié)果滿意，作最后報(bào)告尿液含菌數(shù)>105cfu/ml，但鑒定結(jié)果不典型，24小時(shí)預(yù)報(bào)，第二天作細(xì)菌鑒定和純菌的藥敏試驗(yàn)，爭(zhēng)取48小時(shí)最后報(bào)告尿標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁(yè)!痰標(biāo)本的處理取可疑部分（膿、血）接種及涂片涂片三張：1張革蘭染色、1張抗酸染色、1張備用接種5%血平板1個(gè)：分離全部細(xì)菌中國(guó)蘭平板1個(gè)：直接藥敏試驗(yàn)呼吸道標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁(yè)!不合格標(biāo)本：標(biāo)本中平均每個(gè)視野內(nèi)扁平上皮細(xì)胞多于25個(gè)，找不到病變部分。合格標(biāo)本：標(biāo)本中可見(jiàn)白細(xì)胞（膿細(xì)胞）、柱狀上皮細(xì)胞集中，有時(shí)還可見(jiàn)到不少黏液絲（標(biāo)本來(lái)自氣管或支氣管內(nèi)分泌物）。鏡下觀察醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁(yè)!上呼吸道正常寄生菌：草綠色鏈球菌常見(jiàn)病原菌：肺炎鏈球菌、A族鏈球菌、金黃色葡萄球菌、卡他布蘭漢菌、白喉棒狀桿菌、結(jié)核分支桿菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、腸桿菌和軍團(tuán)菌等臨床意義呼吸道標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁(yè)!（五）腦脊液標(biāo)本采集時(shí)間：立即送檢采集方法：備物腰椎穿刺分裝處理：直接涂片分離培養(yǎng)（注意保溫）抗生素敏感試驗(yàn)（立即報(bào)告）醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁(yè)!檢驗(yàn)及報(bào)告直接涂片：分離培養(yǎng)：厭氧培養(yǎng)、需氧培養(yǎng)抗生素藥敏實(shí)驗(yàn)：只有一種、足夠數(shù)量----直接藥敏試驗(yàn)多種細(xì)菌----分離出純菌后----藥敏試驗(yàn)報(bào)告：直接涂片2h內(nèi)，分離培養(yǎng)順利者24h,需補(bǔ)充試驗(yàn)者24h預(yù)告，48h出最后報(bào)告一般可在72h報(bào)告有無(wú)厭氧菌，爭(zhēng)取4天出最后報(bào)告膿及傷口標(biāo)本醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁(yè)!尿培養(yǎng)報(bào)告單金黃色葡萄球菌敏感：萬(wàn)古霉素中介：氧氟沙星（諾氟沙星）耐藥：青霉素Ｇ、頭孢唑啉、頭孢哌酮、頭孢三嗪、氨芐青霉素、羧芐青霉素報(bào)告單結(jié)果分析醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁(yè)!用于測(cè)定抗菌藥物體外抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的效能。定性測(cè)試的擴(kuò)散法（diffusiontest）定量測(cè)定的稀釋法（dilutiontest）臨床常用由Bauer和Kirby建立的紙片瓊脂擴(kuò)散法，即Kirby－Bauer法。抑菌試驗(yàn)（bacteriostatictest）醫(yī)院感染學(xué)-標(biāo)本采集和判斷共38頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁(yè)!敏感（susceptible，S）：所測(cè)