習(xí)題1：動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體

課時(shí)達(dá)標(biāo)訓(xùn)練(六)動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體(時(shí)間：25分鐘；滿分：50分)一、選擇題(每小題2分，共20分)1．培養(yǎng)人細(xì)胞與小鼠融合細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞會(huì)隨機(jī)丟失來(lái)自人細(xì)胞的染色體，在僅含有人的1號(hào)染色體的融合細(xì)胞中，合成出人的尿苷單磷酸激酶。下列有關(guān)敘述中，不合理的是()A．與人或小鼠細(xì)胞相比，融合細(xì)胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變B．研究方法中需要選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和細(xì)胞融合誘導(dǎo)技術(shù)C．在融合細(xì)胞中，人的1號(hào)染色體DNA與小鼠DNA發(fā)生了重組D．這種研究可能發(fā)現(xiàn)人的某一特定基因與特定染色體的關(guān)系2．單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是()A．特異性強(qiáng)、靈敏度高B．與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”C．體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體D．由B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌3．動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是()A．誘導(dǎo)融合的方法完全相同B．所用的技術(shù)手段完全相同C．所采用的原理完全相同D．都能形成雜種細(xì)胞4．20世紀(jì)30年代，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核、天花、水痘和麻疹等疾病的患者的病理組織中存在多核細(xì)胞，這些多核細(xì)胞最可能的來(lái)源是()A．細(xì)胞進(jìn)行了無(wú)絲分裂造成的B．細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂時(shí)，染色體復(fù)制后沒(méi)有分開形成兩個(gè)子細(xì)胞C．有絲分裂時(shí)，細(xì)胞核進(jìn)行了分裂，而細(xì)胞質(zhì)沒(méi)有進(jìn)行分裂D．細(xì)胞在體內(nèi)病毒的作用下發(fā)生了細(xì)胞融合5．用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是()A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B．用氯化鈣作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合C．篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體D．該雜交瘤細(xì)胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體6．(重慶高考)如圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖，下列有關(guān)敘述正確的是()A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C．③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群7．單克隆抗體制備過(guò)程中，對(duì)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細(xì)胞是()①B淋巴細(xì)胞②骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A．①②③④B．①③⑤C．②④D．①③8．下列與細(xì)胞工程技術(shù)相關(guān)的表述中，不正確的是()A．植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性B．細(xì)胞融合技術(shù)使研究人員得以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙C．動(dòng)、植物細(xì)胞融合技術(shù)的基本原理相同，誘導(dǎo)融合的方法類似D．培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞與培養(yǎng)植物細(xì)胞所用的培養(yǎng)基成分基本相同9．如圖是某種細(xì)胞工程技術(shù)，若圖表示動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交，則對(duì)于兩者的比較中，正確的是()①誘導(dǎo)融合的方法完全相同②用的技術(shù)手段不相同③采用的原理完全相同④都能形成雜種細(xì)胞A．①②B．①③C．②④D．③④10．以H1N1病毒核衣殼蛋白為抗原，采用細(xì)胞工程制備單克隆抗體，下列敘述正確的是()A．用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清為單克隆抗體B．體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)H1N1病毒的單克隆抗體C．將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D．利用該單克隆抗體與H1N1病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可以診斷該病毒感染體二、非選擇題(共30分)11．(10分)如圖表示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過(guò)程，據(jù)圖回答：(1)從A和B細(xì)胞到C細(xì)胞的過(guò)程中，必須用_______________________________處理。(2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞，那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉了細(xì)胞壁，這種酶可能是______________，由此生成的A和B細(xì)胞稱為________________。由A、B到C的過(guò)程中，常用的物理方法有__________。融合完成的標(biāo)志是______________，形成D細(xì)胞還要應(yīng)用______________技術(shù)，把其培養(yǎng)成植株。(3)若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞，B為淋巴細(xì)胞，那么D細(xì)胞稱為____________，由D細(xì)胞連續(xù)分裂產(chǎn)生大量細(xì)胞的過(guò)程，稱為____________，這種細(xì)胞既能無(wú)限繁殖，又能產(chǎn)生____________________。(4)若A為人細(xì)胞，B為鼠細(xì)胞，并分別用紅、綠熒光染料標(biāo)記細(xì)胞上的蛋白質(zhì)，在C細(xì)胞階段，細(xì)胞一半發(fā)紅色熒光，一半發(fā)綠色熒光，到D細(xì)胞階級(jí)，兩種顏色的熒光均勻分布，原因是____________________________________________。(5)若A、B細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞，一般取自________________________，然后用________將其分散開。由A、B到C的過(guò)程中，采用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是________________________________________。(6)若該過(guò)程為制備單克隆抗體，A和B融合后形成的C有幾種？(只考慮兩兩結(jié)合)____________。12．(10分)人類在預(yù)防與診療傳染疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如圖：請(qǐng)回答：(1)過(guò)程①代表的是____________。(2)過(guò)程②構(gòu)建A基因表達(dá)載體時(shí)，必須使用________和__________兩種工具酶。(3)過(guò)程③采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是____________，獲得的X是____________。(4)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的________所制備的疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行________比較；或用圖中的________________進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。13．(10分)某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料，測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題：(1)將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時(shí)間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量________。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是______________________________________________。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是_________________________________。(3)在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中，當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí)，其生長(zhǎng)________。藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更________。若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用______處理。(4)為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的________。(5)已知癌基因X過(guò)量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，可將甲細(xì)胞分為A、B兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入______，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入無(wú)菌生理鹽水，經(jīng)培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細(xì)胞，通過(guò)分別檢測(cè)X基因在A、B兩組細(xì)胞中的________或________合成水平的差異，確定Y的藥效。答案1．選C在人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞的融合細(xì)胞中，與人或小鼠細(xì)胞相比，染色體數(shù)目發(fā)生了變化，融合細(xì)胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變，屬于染色體變異，并非DNA重組。2．選C抗體是由B淋巴細(xì)胞分泌的，每一種B淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體。要想獲得大量單一抗體，需要將某一種B淋巴細(xì)胞大量克隆，但是在體外培養(yǎng)的條件下，B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖。由B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞，能在體外培養(yǎng)的條件下大量增殖，并分泌單克隆抗體。3．選D兩種細(xì)胞工程技術(shù)中都要進(jìn)行細(xì)胞融合，但融合的技術(shù)不完全相同；動(dòng)物細(xì)胞的融合常用滅活的病毒做誘導(dǎo)劑，而植物細(xì)胞融合則不用；動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性，植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性；兩者都能形成雜種細(xì)胞，但植物的雜種細(xì)胞最終形成雜種植株。4．選D選項(xiàng)C、D都可形成多核細(xì)胞，但結(jié)合題干信息，此種現(xiàn)象與感染病毒有關(guān)，故選項(xiàng)D最有可能。5．選BB淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來(lái)誘導(dǎo)。氯化鈣不能作為誘導(dǎo)劑，氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高細(xì)胞壁的通透性，便于重組質(zhì)粒進(jìn)入微生物細(xì)胞內(nèi)。6．選D①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)B細(xì)胞(漿細(xì)胞)，A項(xiàng)錯(cuò)誤；胰蛋白酶常用在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，其作用是使組織分散成單個(gè)細(xì)胞，圖示②中應(yīng)使用促融劑如聚乙二醇(PEG)，B項(xiàng)錯(cuò)誤；圖示③為雜交瘤細(xì)胞，其同時(shí)具有漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體的特性和骨髓瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性，C項(xiàng)錯(cuò)誤；圖示④是經(jīng)篩選獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，D項(xiàng)正確。7．選A在題中特定的選擇培養(yǎng)基上，能夠存活、增殖的細(xì)胞只有雜交瘤細(xì)胞。8．選D植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性，即已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能，A正確；動(dòng)物細(xì)胞融合能突破有性雜交的障礙，即可以克服生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，B正確；動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理是基本相同的，即細(xì)胞膜的流動(dòng)性，誘導(dǎo)融合的手段都有物理法和化學(xué)法，C正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，必須添加血清等天然成分，而植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，需要添加植物激素，D錯(cuò)誤。9．選C若圖表示動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交，這兩者的共同點(diǎn)是：都能形成雜種細(xì)胞。兩者的區(qū)別是①誘導(dǎo)融合的方法不完全相同：前者是使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合，而后者是去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；②用的技術(shù)手段不完全相同：前者是離心、電激、聚乙二醇、滅活的病毒等試劑誘導(dǎo)，而后者是離心、電激、聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)；③采用的原理不完全相同：前者是細(xì)胞膜的流動(dòng)性，而后者是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性。10．選D單克隆抗體是相應(yīng)的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，單個(gè)漿細(xì)胞的培養(yǎng)不能獲得單克隆抗體；用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，血清中的抗體不是單一抗體，其還含有體內(nèi)已存在的其他抗原的抗體；等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，可以形成三種雜交細(xì)胞，但只有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的細(xì)胞稱為雜交瘤細(xì)胞。11．解析：植物體細(xì)胞雜交前需先去掉細(xì)胞壁，因?yàn)榧?xì)胞壁由纖維素和果膠組成，應(yīng)用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。第二步就是讓不同的原生質(zhì)體融合，融合必須采用一定的技術(shù)手段，進(jìn)行人工誘導(dǎo)。在完成細(xì)胞融合后，還要用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培育成植株。動(dòng)物在免疫反應(yīng)過(guò)程中，每一種B淋巴細(xì)胞能分泌一種特異性抗體，要想獲得大量的特異性抗體，必須使能分泌該單一抗體的B淋巴細(xì)胞大量增殖。B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力，但不能在體外增殖；骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞，它能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體，將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞同時(shí)培養(yǎng)，在滅活的病毒(或聚乙二醇)的誘導(dǎo)下，促使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞。它兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性——既能大量增殖，又能產(chǎn)生某種特異性的抗體。答案：(1)誘導(dǎo)因素(2)纖維素酶和果膠酶原生質(zhì)體電激、振動(dòng)產(chǎn)生細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng)(3)雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)單一抗體(4)構(gòu)成細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)和磷脂分子具有一定的流動(dòng)性(5)動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的組織或器官胰蛋白酶用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合(6)3種12．解析：(1)根據(jù)圖中①過(guò)程中由RNA指導(dǎo)合成DNA可判斷①為逆轉(zhuǎn)錄。(2)基因工程中構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)用限制酶將目的基因和運(yùn)載體切出相同的黏性末端或平末端，再用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接起來(lái)。(3)圖中③為小鼠骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合過(guò)程，可得到雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。(4)病毒表面的A蛋白為主要抗原，因此可用A蛋白制備疫苗，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。對(duì)于病毒的檢測(cè)可采用與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較的方法，也可根據(jù)抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合的特點(diǎn)，用抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè)。答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)限制酶DNA連接酶(3)細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞(4)A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的單克隆抗體13．解析：(1)甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞為無(wú)限增殖的細(xì)胞，細(xì)胞周期短。在相同條件下，培養(yǎng)相同的時(shí)間，甲細(xì)胞的數(shù)量多于乙細(xì)胞。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中必須加入動(dòng)物血清，血清中含有血清蛋白、生長(zhǎng)因子、激素等合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。(3)甲為腫瘤細(xì)胞，能