2023學(xué)年福建省寧德市部分一級達(dá)標(biāo)中學(xué)高二生物第二學(xué)期期末達(dá)標(biāo)檢測模擬試題（含解析）

2023學(xué)年高二年級下學(xué)期生物模擬測試卷注意事項(xiàng):1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．在分離、純化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)中，劃線接種（甲）、培養(yǎng)結(jié)果（乙）如下圖，且甲乙的對應(yīng)位置不變。有關(guān)敘述，錯誤的是（）A．配制培養(yǎng)基時需進(jìn)行髙壓蒸汽滅菌B．甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置C．連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落D．圖示實(shí)驗(yàn)過程中接種環(huán)灼燒了5次2．下列有關(guān)人體生命活動調(diào)節(jié)的敘述，正確的是A．神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后膜上的受體結(jié)合后，會引起突觸后膜產(chǎn)生動作電位B．突觸間隙中的神經(jīng)遞質(zhì)經(jīng)主動運(yùn)輸穿過突觸后膜而傳遞興奮C．激素和抗體都具有特異性，只能作用于特定的靶細(xì)胞D．過敏反應(yīng)是人體特異性免疫反應(yīng)的一種異常生理現(xiàn)象3．下列不屬于細(xì)胞凋亡現(xiàn)象的是()①霜凍導(dǎo)致香蕉植株死亡②蝌蚪發(fā)育成青蛙的過程中尾部消失③極端的物理、化學(xué)因素導(dǎo)致的細(xì)胞死亡④花瓣的自然凋落A．①② B．①③ C．②④ D．③④4．當(dāng)一只狼捕食了一只野兔后，從生態(tài)學(xué)角度看，下列敘述正確的是A．完成了物質(zhì)循環(huán) B．狼破壞了生態(tài)平衡C．野兔不能適應(yīng)環(huán)境 D．野兔的能量流向了狼5．某種遺傳病由位于兩對常染色體上的等位基因控制，只有同時存在兩種顯性基因時才不患病,經(jīng)遺傳咨詢可知5號和6號生育后代患病的概率為7/16。據(jù)此分析,下列說法中正確的是A．該病在人群中男性患者多于女性B．3號和4號個體的基因可能相同C．7號個體的基因型可能有2種D．8號個體是純合子的概率為3/76．下面是某同學(xué)用動物肝臟做“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的操作，正確的是A．在燒杯中加入肝臟和蒸餾水并進(jìn)行攪拌，即可獲得DNAB．調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度至0.14mol/L，過濾后取濾液進(jìn)行后續(xù)步驟的操作C．在含DNA的濾液中加入嫩肉粉，使蛋白質(zhì)與DNA分開D．向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后，溶液呈藍(lán)色7．為研究酵母菌的呼吸方式，某生物小組制作了如下圖中a—f所示裝置，下列判斷不合理的是A．若a裝置液滴不移動，b裝置液滴右移，說明酵母菌僅進(jìn)行無氧呼吸B．若a裝置液滴左移，b裝置液滴右移，說明酵母菌僅進(jìn)行有氧呼吸C．連接e→c→d，并從e側(cè)通氣，d中石灰水變渾濁，可驗(yàn)證酵母菌進(jìn)行了有氧呼吸D．連接f→d，d中石灰水變渾濁，可驗(yàn)證酵母菌進(jìn)行了無氧呼吸8．（10分）種群密度是種群最基本的數(shù)量特征。下列敘述正確的是A．可通過計數(shù)所有樣方內(nèi)的個體數(shù)，再除以這些樣方的總面積的方法獲得種群密度值B．樣方的多少不會影響調(diào)查結(jié)果C．草原上某種羊的養(yǎng)殖密度不同，單位面積該羊的產(chǎn)量可能相同D．培養(yǎng)瓶中細(xì)菌種群數(shù)量達(dá)到K值前，密度對其增長的制約逐漸減弱二、非選擇題9．（10分）已知一種有機(jī)物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌（目標(biāo)菌）。Ⅰ號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X（5g/L）。Ⅱ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機(jī)鹽（適量），X（15g/L）。Ⅲ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機(jī)鹽（適量）。X（45g/L）。回答下列問題。（1）在Ⅰ號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是___________。Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基為微生物提供碳源的有機(jī)物是_________。（2）若將土壤懸浮液種在Ⅱ號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細(xì)菌比例會_________，其原因是_________。（3）Ⅱ號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對菌落進(jìn)行計數(shù)，接種時，應(yīng)采用的方法是______________。（4）假設(shè)從Ⅲ號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供_________和_________。10．（14分）研究人員利用小鼠的單倍體ES細(xì)胞（只有一個染色體組），成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠。其主要技術(shù)流程如圖所示，請分析回答下列問題：注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶。箭頭指向的位置為限制酶的切割位點(diǎn)：Ampr是氨芐青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。（1）利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增目的基因，PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物外，還應(yīng)含有_____；引物應(yīng)選用下圖中的_____（填圖中字母）。（2）在基因工程操作步驟中，過程①②稱為_____。已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細(xì)胞。結(jié)合上圖推測，過程①選用的2種限制酶是_____（填圖中的編號），③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加_____（填“氨芐青霉素”或“G418”）。（3）圖中桑椹胚需通過_____技術(shù)移入代孕小鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，進(jìn)行該操作前需對受體小鼠進(jìn)行_____處理。11．（14分）蟲草中的超氧化物歧化酶(SOD)具有抗衰老作用，研究人員培育了能合成SOD的轉(zhuǎn)基因酵母菌?；卮鹣铝袉栴}：注:HindⅢ和ApaLⅠ是兩種限制酶,箭頭表示酶的切割位置。（1）將圖中的重組DNA分子用HinⅢ和ApaLⅠ完全酶切后,可得到____種DNA片段。圖示的表達(dá)載體存在氨芐青霉素抗性基因，不能導(dǎo)入用于食品生產(chǎn)的酵母菌中,據(jù)圖分析，可用______（填限制酶的種類）切除該抗性基因的部分片段使其失效，再用_________酶使表達(dá)載體重新連接起來。（2）作為受體細(xì)胞的酵母菌缺失URA3基因，必須在含有尿嘧啶的培養(yǎng)基中才能存活，因此，圖示表達(dá)載體上的URA3基因可作為________供鑒定和選擇，為了篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的酵母菌，所使用的培養(yǎng)基______(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為______。為了確定受體細(xì)胞中SOD基因是否轉(zhuǎn)錄,可用標(biāo)記的__________作探針進(jìn)行分子雜交檢測，分子雜交的原理是___________________。（4）利用蛋白質(zhì)工程獲得活性更高的SOD時,需根據(jù)所設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測其_____________序列,最終確定相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列并經(jīng)____________獲得所需的基因。12．金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白。某研究小組計劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增獲得目的基因，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌，用于重金屬廢水的凈化處理。PCR擴(kuò)增過程示意圖圖像，請回答下列問題：（1）從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA，通過______________獲得cDNA用于PCR擴(kuò)增。（2）設(shè)計一對與MT基因兩端序列互補(bǔ)配對的引物（引物1和引物2），為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，在引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn)。設(shè)計引物時需要避免引物之間形成______________，而造成引物自連。（3）圖中步驟1代表____________________，步驟2代表退火，步驟3代表延伸，這三個步驟組成一輪循環(huán)。（4）PCR擴(kuò)增時，退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過高會破______________的堿基配對。退火溫度的設(shè)定與引物長度、堿基組成有關(guān)，長度相同但______________的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。（5）如果PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，則可以采取的改進(jìn)措施有______________（填序號：①升高退火溫度②降低退火溫度③重新設(shè)計引物）。

參考答案（含答案詳細(xì)解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【答案解析】

平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落?！绢}目詳解】為了能徹底滅菌，配制的培養(yǎng)基需進(jìn)行髙壓蒸汽滅菌，A正確；起始劃線的區(qū)域長出的菌落多且密，根據(jù)甲乙對應(yīng)區(qū)域?qū)Ρ?，甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的結(jié)束位置，B錯誤；連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落，C正確；由于每次使用接種環(huán)前后都要灼燒滅菌，從圖示甲中4次劃線接種就可推出，接種過程中接種環(huán)至少灼燒了5次，D正確。2、D【答案解析】

神經(jīng)遞質(zhì)只存在于突觸前膜的突觸小泡中，只能由突觸前膜釋放，進(jìn)入突觸間隙，作用于突觸后膜上的特異性受體，引起下一個神經(jīng)元興奮或抑制，神經(jīng)遞質(zhì)不進(jìn)入突觸后膜?！绢}目詳解】神經(jīng)遞質(zhì)分為興奮型遞質(zhì)和抑制型遞質(zhì)，其中興奮型遞質(zhì)與突觸后膜上的受體結(jié)含后，會引起突觸后膜產(chǎn)生動作電位，而抑制型遞質(zhì)不會引起突觸后膜產(chǎn)生動作電位，A錯誤；

神經(jīng)遞質(zhì)不進(jìn)入突觸后膜，而是與突觸后膜上的受體結(jié)合進(jìn)而傳遞信息，B錯誤；

激素和抗體都具有特異性，激素只作用于特定的靶細(xì)胞，但抗體只能與特定的抗原結(jié)合，C錯誤；

過敏反應(yīng)指已免疫的機(jī)體在再次接受相同物質(zhì)的刺激時所發(fā)生的反應(yīng)，是人體特異性免疫反應(yīng)的一種異常生理現(xiàn)象，D正確。故選D?！敬鸢更c(diǎn)睛】識記興奮在神經(jīng)元之間的傳遞和免疫的有關(guān)知識是解題關(guān)鍵。3、B【答案解析】

本題是關(guān)于細(xì)胞凋亡現(xiàn)象的分析，細(xì)胞凋亡指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡，細(xì)胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程；細(xì)胞壞死則是在外環(huán)境作用下的被動的過程，細(xì)胞壞死是細(xì)胞受到強(qiáng)烈理化或生物因素作用引起細(xì)胞無序變化的死亡過程?！绢}目詳解】①霜凍導(dǎo)致香蕉植株死亡，是受到不良環(huán)境引起的死亡，屬于細(xì)胞壞死；②蝌蚪發(fā)育成青蛙的過程中尾部消失是生物生長發(fā)育過程中主動的過程屬于細(xì)胞凋亡；③極端的物理、化學(xué)因素導(dǎo)致的細(xì)胞死亡，是不良環(huán)境引起的屬于細(xì)胞壞死；④花瓣的自然凋落是細(xì)胞的自然更新，屬于細(xì)胞凋亡；①③不屬于細(xì)胞凋亡，B正確?！敬鸢更c(diǎn)睛】細(xì)胞凋亡包括多細(xì)胞生物正常生長發(fā)育過程中的細(xì)胞自然更新，也包括被病原體感染的細(xì)胞的清除，對于維持機(jī)體內(nèi)部環(huán)境的相對穩(wěn)定起重要作用。4、D【答案解析】

能量流動指生態(tài)系統(tǒng)中能量的輸入、傳遞、轉(zhuǎn)化和散失的過程?！绢}目詳解】A、物質(zhì)循環(huán)具有全球性，狼捕食兔子后未完成物質(zhì)循環(huán)，A錯誤；B、狼捕食兔子是正常的種間關(guān)系，未破壞生態(tài)平衡，B錯誤；C、狼捕食兔子是正常的捕食，不能說明野兔不能適應(yīng)環(huán)境，C錯誤；D、狼捕食兔子后，野兔的一部分能量流向了狼，D正確。故選D。5、D【答案解析】試題分析：假設(shè)控制該病的基因?yàn)锳/a和B/b，由題意可知只有A-B-的個體才不患病，5號和6號都沒有病生育后代患病的概率是7/16，說明他們兩個的基因型是AaBb。因?yàn)槭浅Ｈ旧w上的基因控制的疾病，所以在人群中男女患者一樣多，故A錯誤。3號和4號是患者，而其子代6的基因型是AaBb，所以3號和4號應(yīng)是AAbb或aaBB，故B錯誤。7號個體不患病基因型是A-B-，基因型有4種，故C錯誤。8號患病是純合子的概率是3/7，因?yàn)槭Ｓ嗟?份中有5種基因型，但純合子只有3份，故D正確?？键c(diǎn)：本題考查基因自由組合定律相關(guān)知識，意在考察考生對知識點(diǎn)的理解掌握程度和分析能力。6、C【答案解析】肝臟細(xì)胞沒有分散開，在燒杯中加入肝臟和蒸餾水并進(jìn)行攪拌，不能使細(xì)胞破裂，燒杯中的肝臟應(yīng)進(jìn)行研磨，A項(xiàng)錯誤；DNA在0.14mol/L

的NaCl溶液中溶解度最低，過濾后DNA不在濾液中，而存在于析出物中，所以過濾后取析出物進(jìn)行后續(xù)步驟的操作，B項(xiàng)錯誤；嫩肉粉中有蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解，而蛋白酶對DNA沒有影響，因此可以在含DNA的濾液中加入嫩肉粉，使蛋白質(zhì)與DNA分開，C項(xiàng)正確；向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后需加熱溶液才能呈藍(lán)色，D項(xiàng)錯誤?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題旨在考查學(xué)生對DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理和具體操作步驟的理解和掌握程度，考生可先梳理相關(guān)知識點(diǎn)，然后根據(jù)題意分析選項(xiàng)進(jìn)行解答。7、B【答案解析】

分析實(shí)驗(yàn)裝置圖：酵母菌進(jìn)行有氧呼吸消耗氧氣，產(chǎn)生二氧化碳；進(jìn)行無氧呼吸不消耗氧氣，但仍產(chǎn)生二氧化碳。a中的氫氧化鈉可以吸收二氧化碳，所以a中液滴移動的距離代表酵母菌有氧呼吸消耗的氧氣量；b中蒸餾水不吸收氧氣和不吸收二氧化碳，所以b中液滴移動的距離代表酵母菌呼吸作用釋放二氧化碳量與吸收氧氣量的差值?！绢}目詳解】若a裝置液滴不移動，說明酵母菌沒有消耗氧氣，即酵母菌沒有進(jìn)行有氧呼吸；b裝置液滴右移，說明酵母菌產(chǎn)生二氧化碳多于氧氣的吸收量，結(jié)合a、b裝置可知，酵母菌只進(jìn)行無氧呼吸，A正確；若a裝置液滴左移，說明酵母菌進(jìn)行有氧呼吸消耗了部分氧氣；b裝置液滴右移，說明酵母菌呼吸作用釋放二氧化碳量比吸收氧氣量多，即酵母菌同時進(jìn)行有氧呼吸和無氧呼吸，B錯誤；連接e→c→d，并從e側(cè)通氣，保證有氧條件，若d中石灰水變渾濁，可驗(yàn)證酵母菌進(jìn)行了有氧呼吸，C正確；連接f→d，由于f是密閉裝置，若d中石灰水變渾濁，可驗(yàn)證酵母菌進(jìn)行了無氧呼吸，D正確?！敬鸢更c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸的過程及其相關(guān)氣體的變化，明確a、b裝置中氫氧化鈉和水的作用，進(jìn)而判斷兩個裝置中液滴移動的距離的含義。8、C【答案解析】

種群密度常用的調(diào)查方法包括樣方法和標(biāo)志重捕法，二者均屬于估算的方法。使用樣方法時，應(yīng)注意隨機(jī)取樣，以使調(diào)查數(shù)據(jù)接近真實(shí)情況?！绢}目詳解】A、調(diào)查植物的種群密度，常用樣方法進(jìn)行隨機(jī)取樣，而不是計數(shù)所有樣方內(nèi)的個體數(shù)，A錯誤；B、樣方法屬于估算法，樣方越多，調(diào)查數(shù)值越接近真實(shí)數(shù)值，B錯誤；C、單位面積羊的產(chǎn)量與養(yǎng)殖密度、單位面積所能提供的食物有關(guān)，草原上某種羊的養(yǎng)殖密度不同，單位面積羊的產(chǎn)量可能相同，C正確；D、培養(yǎng)瓶中細(xì)菌種群數(shù)量達(dá)到K值前，細(xì)菌密度越來越大，對空間、食物的爭奪越來越劇烈，對其增長的制約逐漸增強(qiáng)，D錯誤。故選C。二、非選擇題9、牛肉膏、蛋白胨X下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細(xì)菌能夠增殖稀釋涂布平板法能量合成其他物質(zhì)的原料【答案解析】

1、選擇培養(yǎng)基的概念：在微生物學(xué)中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基必須是固體培養(yǎng)基，本題中選擇培養(yǎng)基中的唯一碳源是有機(jī)物X，這樣能分解X的微生物能夠從該有機(jī)物獲得碳源，其他微生物由于無法獲得碳源而不能生存。2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，獲得由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落，微生物的計數(shù)通常采用稀釋涂布平板法?！绢}目詳解】（1）氮源是微生物生長需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，是含氮化合物，可為微生物的生長提供氮元素，牛肉膏、蛋白胨來源于動物原料，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營養(yǎng)物質(zhì)，因此在1號培養(yǎng)基中，可為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生長所需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，可為微生物的生長提供碳元素，而有機(jī)物均含碳元素，II、III號培養(yǎng)基均含有有機(jī)物X，因此，II、III號培養(yǎng)基為微生物的生長提供碳源的均為有機(jī)物X。（2）由于II號培養(yǎng)基含有的碳源只有有機(jī)物X，因此若將土壤懸浮液接種在II號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細(xì)菌由于無法獲得碳源而無法增殖導(dǎo)致其比例減少。（3）微生物的接種方法很多，最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法，由于稀釋涂布平板法中，稀釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面形成的一個菌落是由菌液中的一個活菌繁殖而來，所以常用來進(jìn)行微生物的計數(shù)。（4）丙酮酸參與有氧呼吸的第二階段，能被分解產(chǎn)生能量，且丙酮酸可作為許多物質(zhì)合成的中間產(chǎn)物，因此其可為微生物的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料?！敬鸢更c(diǎn)睛】選擇培養(yǎng)基能選擇特定的微生物。微生物的接種方法有多種，其中稀釋涂布平板法常用來進(jìn)行微生物的計數(shù)。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽等。10、熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（或Taq酶）A和D基因表達(dá)載體的構(gòu)建Ⅰ和ⅡG418胚胎移植同期發(fā)情【答案解析】

分析題圖可知：圖中過程①表示利用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，過程②表示利用DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒，過程③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入小鼠單倍體ES細(xì)胞后對該細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)、篩選，經(jīng)過細(xì)胞核移植后對獲得細(xì)胞核的卵母細(xì)胞進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)?！绢}目詳解】（1）PCR反應(yīng)的條件：模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶；該技術(shù)的原理是DNA復(fù)制，要擴(kuò)增目的基因，應(yīng)選擇一對方向相反的引物，由圖中延伸方向可知，應(yīng)選擇引物A和D；（2）過程①表示利用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，過程②表示利用DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒，在基因工程中過程①②稱為基因表達(dá)載體的構(gòu)建；根據(jù)題意可知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細(xì)胞，因此應(yīng)選擇Neor作為標(biāo)記基因，即質(zhì)粒上Neor不能用限制酶切割，則過程①應(yīng)選用Ⅰ和Ⅱ2種限制酶，圖中③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加G418；（3）將桑椹胚需移入代孕小鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育的技術(shù)為胚胎移植技術(shù)；為保證移植的成活率，進(jìn)行該操作前需對受體小鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理?！敬鸢更c(diǎn)睛】解答此題要求考生能夠圖示和題干信息確定合適的限制酶，并根據(jù)限制酶識別序列和切割位點(diǎn)確定DNA連接酶的種類，再結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確答題。11、3ApaLⅠDNA連接標(biāo)記基因不需要轉(zhuǎn)化SOD基因堿基互補(bǔ)配對氨基酸基因修飾【答案解析】

分析題圖可知，圖中基因表達(dá)載體中的目的基因是外源PSSOD基因，氨芐青霉素抗性基因是標(biāo)記基因；該基因表達(dá)載體中存在HindIII的一個酶切位點(diǎn)，存在ApaLI的兩個酶切位點(diǎn)，因此用兩種酶同時切割環(huán)狀質(zhì)粒，會得到3種不同的DNA片段?！绢}目詳解】（1）根據(jù)以上分析已知，圖中的重組DNA分子中存在HindIII的一個酶切位點(diǎn)，存在ApaLI的兩個酶切位點(diǎn)，因此用兩種酶同時切割環(huán)狀質(zhì)粒，會得到3種不同的DNA片段。根據(jù)題意分析，圖示的表達(dá)載體存在氨芐青霉素抗性基因，不能導(dǎo)入用于食品生產(chǎn)的酵母菌中，因此可以利用ApaLⅠ切除該抗性基因的部分片段使其失效，再用DNA連接酶使表達(dá)載體重新連接起來。（2）根據(jù)題意分析，已知作為受體細(xì)胞的酵母菌缺失URA3基因，必須在含有尿嘧啶的培養(yǎng)基中才能存活，因此圖示表達(dá)載體上的URA3基因可作為標(biāo)記基因，供鑒定和選擇；由于導(dǎo)入的表達(dá)載體的酵母菌中含有URA3基因，而普通酵母菌中不含有URA3基因，因此為了篩選出成功導(dǎo)人表達(dá)載體的酵母菌，所使用的培養(yǎng)基不需要添加尿嘧啶。（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化。為了確定受體細(xì)胞中SOD基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的RNA，可用標(biāo)記的SOD基因作探針進(jìn)行分子雜交檢測，其原理是堿基互補(bǔ)配對。（