維生素類(lèi)藥物

維生素分類(lèi)按溶解度：脂溶性、水溶性按化學(xué)結(jié)構(gòu)：醇、酯、胺、酸、酚、醛等

本章討論：

vitaminA、D、E----脂溶性

vitaminB1、C----水溶性第一頁(yè)，共六十一頁(yè)。第一節(jié)維生素A的分析維生素A主要包括：

維生素A1：視黃醇，retinol

維生素A2：去氫維生素A，dehydroretinol

維生素A3：去水維生素A，anhydroretinol生物活性：維生素A1>維生素A2>維生素A3第二頁(yè)，共六十一頁(yè)。（一）結(jié)構(gòu)R:-H，vitaminA醇

R:-COCH3，vitaminA醋酸酯

R:-COC15H31，vitaminA棕櫚酸酯天然維生素A:主要是全反式維生素A一.結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第三頁(yè)，共六十一頁(yè)。第四頁(yè)，共六十一頁(yè)。（二）性質(zhì)

1.UV吸收特性：在325-328nm內(nèi)有最大吸收2．不穩(wěn)定性易被空氣中的氧或氧化劑氧化無(wú)生物活性的環(huán)氧化合物、維生素A醛或酸易被紫外光裂解對(duì)酸不穩(wěn)定：遇Lewis酸或無(wú)水HCl乙醇液去水VitA

維生素A酯比維生素A醇穩(wěn)定第五頁(yè)，共六十一頁(yè)。二.鑒別試驗(yàn)(一)三氯化銻反應(yīng)(Carr-Price反應(yīng))1、原理維生素A在飽和無(wú)水SbCl3的無(wú)醇三氯甲烷溶液中，顯藍(lán)色維生素A和SbCl3中存在的親電試劑氯化高銻（5價(jià)）作用，形成不穩(wěn)定的藍(lán)色碳正離子第六頁(yè)，共六十一頁(yè)。反應(yīng)式：水：使SbCl3水解成氯化氧銻（SbOCl）醇：與藍(lán)色碳正離子作用，使正電荷消失第七頁(yè)，共六十一頁(yè)。（二）UV法

維生素A的無(wú)水乙醇-鹽酸溶液：

326nm處有單一吸收峰溶液加熱，發(fā)生脫水反應(yīng)去水維生素A：

332nm處有較低的吸收峰或拐點(diǎn)

348、367、389nm處有3個(gè)尖銳的吸收峰

第八頁(yè)，共六十一頁(yè)。三．含量測(cè)定（一）UV法(三點(diǎn)校正法)維生素A：在325-328nm范圍內(nèi)具有最大吸收維生素A原料中混有的雜質(zhì)：在310-340nm內(nèi)，有吸收第九頁(yè)，共六十一頁(yè)。１．對(duì)維生素A測(cè)定有影響的雜質(zhì)

維生素A2、維生素A3

維生素A的氧化產(chǎn)物環(huán)氧化物、維生素A醛和維生素A酸

維生素A在光照下產(chǎn)生的無(wú)活性聚合物鯨醇(維生素A醇的二聚體)

維生素A異構(gòu)體、有關(guān)中間體植物油第十頁(yè)，共六十一頁(yè)。2．三點(diǎn)校正法在3個(gè)波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度后，在規(guī)定條件下以校正公式校正吸收度，再進(jìn)行含量計(jì)算。消除雜質(zhì)等無(wú)關(guān)吸收的影響，求得維生素A的真實(shí)含量。第十一頁(yè)，共六十一頁(yè)。3．測(cè)定原理雜質(zhì)的無(wú)關(guān)吸收在310-340nm范圍內(nèi)幾乎呈一條直線，且隨波長(zhǎng)的增大吸收度下降。物質(zhì)對(duì)光的吸收呈加和性。即在某一樣品的吸收曲線上，各波長(zhǎng)處的吸收度是維生素A與雜質(zhì)吸收度的代數(shù)和，吸收曲線也是二者吸收的疊加。第十二頁(yè)，共六十一頁(yè)。4．波長(zhǎng)的選擇三點(diǎn)波長(zhǎng)的選擇原則：一點(diǎn)選擇在維生素A的最大吸收波長(zhǎng)處（λ1）其它2點(diǎn)選擇在λ1的兩側(cè)（λ2，λ3）第十三頁(yè)，共六十一頁(yè)。等波長(zhǎng)差法：

λ3－λ1=λ1－λ2

Chp規(guī)定測(cè)定維生素A醋酸酯時(shí)，

λ1=328nmλ2=316nmλ3=340nmΔλ=12nm等吸收比法

Aλ2=Aλ3=(6/7)Aλ1

Chp規(guī)定測(cè)定維生素A醇時(shí)，

λ1=325nm

λ2=310nmλ3=334nm具體選擇方法：第十四頁(yè)，共六十一頁(yè)。5．測(cè)定方法直接測(cè)定法(適用于純度高的維生素A醋酸酯）（1）方法

精密稱(chēng)定維生素A醋酸酯適量，加環(huán)己烷制成每ml含9-15單位的溶液。分別測(cè)定300，316，328，340和360nm波長(zhǎng)處的吸收度，確定最大吸收波長(zhǎng)（應(yīng)為328nm），計(jì)算各波長(zhǎng)下的吸收度與328nm處的吸收度比值。第十五頁(yè)，共六十一頁(yè)。（2）含量計(jì)算I：求，由A=

﹒C﹒L求

A為A328或A328(校正)

A328(校正)=3.52(2A328–A316-A340)---等波長(zhǎng)差校正式C近似等于供試品溶液的濃度A值的選擇

p351-352第十六頁(yè)，共六十一頁(yè)。II：求效價(jià)（IU/g）指每g供試品中所含維生素A的國(guó)際單位數(shù)效價(jià)IU/g=

×19001900：VitA醋酸酯在環(huán)己烷溶液中的換算因子第十七頁(yè)，共六十一頁(yè)。III:求維生素A醋酸酯占標(biāo)示量的百分含量

標(biāo)示量%=

=

A：A328或A328(校正)D：供試品稀釋倍數(shù)W：供試品取用量：膠丸的平均內(nèi)容物重標(biāo)示量：每粒膠丸含VitA醋酸酯的國(guó)際單位數(shù)第十八頁(yè)，共六十一頁(yè)。（3）換算因子：定義：?jiǎn)挝粩?shù)值所相當(dāng)?shù)男r(jià)維生素A醋酸酯：在環(huán)己烷溶液中的換算因子為1900維生素A醇：在異丙醇溶液中的換算因子為1830計(jì)算見(jiàn)p351第十九頁(yè)，共六十一頁(yè)。

皂化法(適用于維生素A醇）皂化的目的:

除去植物油等吸收比校正式:

A325(校正)=6.815A325–2.555A310–4.260A334第二十頁(yè)，共六十一頁(yè)。6.討論直接測(cè)定法適用于高純度維生素A醋酸酯皂化法適用于維生素A醇。維生素A酯經(jīng)皂化處理后，以醇式存在維生素A醇在皂化過(guò)程中不被破壞:也可加入焦性沒(méi)食子酸，防止VitA醇被氧化破壞。第二十一頁(yè)，共六十一頁(yè)。經(jīng)皂化、乙醚提取后，若雜質(zhì)含量仍較多，應(yīng)將未皂化部分（乙醚提取液）經(jīng)色譜法分離，收集含維生素A醇的流出液，揮干溶劑，殘碴溶于異丙醇，再測(cè)定。注意溶液種類(lèi)和供試品類(lèi)別（醇或酯）需對(duì)儀器波長(zhǎng)進(jìn)行校正第二十二頁(yè)，共六十一頁(yè)。

（二）HPLC法

p354NP-HPLC

第二十三頁(yè)，共六十一頁(yè)。（一）結(jié)構(gòu)維生素B1:鹽酸硫胺，thiaminehydrochloride第二節(jié)維生素B1的分析一．結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第二十四頁(yè)，共六十一頁(yè)。季銨類(lèi):氨基嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)通過(guò)-CH2-連接堿性基團(tuán)：噻唑環(huán)上的季銨及嘧啶環(huán)上的氨基

第二十五頁(yè)，共六十一頁(yè)。（二）性質(zhì)

硫色素反應(yīng)

UV特性：其鹽酸液λmax=246nm

與生物堿沉淀試劑反應(yīng)：嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)2個(gè)含氮雜環(huán)

第二十六頁(yè)，共六十一頁(yè)。（一）硫色素反應(yīng)---維生素B1的專(zhuān)屬反應(yīng)堿性溶液中，噻唑環(huán)開(kāi)環(huán)，再與嘧啶環(huán)上的–NH2

環(huán)合，經(jīng)鐵氰化鉀等氧化劑氧化，生成硫色素。硫色素溶于正丁醇（或異丁醇），顯藍(lán)色熒光。加酸使成酸性，熒光消失，再加堿使成堿性，熒光又重現(xiàn)。二．鑒別試驗(yàn)第二十七頁(yè)，共六十一頁(yè)。第二十八頁(yè)，共六十一頁(yè)。（二）沉淀反應(yīng)

與生物堿沉淀劑的反應(yīng)（三）氯化物反應(yīng)（四）硝酸鉛反應(yīng)

維生素B1與NaOH共熱，分解產(chǎn)生硫化鈉，與PbNO3反應(yīng)生成黑色沉淀。第二十九頁(yè)，共六十一頁(yè)。

主要用于維生素B1原料的含測(cè)

VitB1與高氯酸的摩爾比為1：2鹽酸鹽影響的消除：

加醋酐的高氯酸電位滴定法(Chp2010)用醋酸汞的冰HAc溶液消除(Chp2005)

三.含量測(cè)定（一）非水滴定法第三十頁(yè)，共六十一頁(yè)。

主要用于VitB1片劑和注射劑的測(cè)定直接測(cè)定法：

p360

HCl溶液（9→1000）中，246nm處測(cè)定

差示分光光度法pH=2（0.1mol/LHCl）：

λmax＝246nm，＝421pH=7(磷酸鹽緩沖液)：

232-233nm：＝345

266nm：＝255（二）UV法第三十一頁(yè)，共六十一頁(yè)。用于VitB1原料及其制劑的含測(cè)定量基礎(chǔ)：一定條件下，形成硫色素的量與VitB1濃度成正比。應(yīng)采用強(qiáng)堿，且應(yīng)過(guò)量硫色素在強(qiáng)堿性條件下才生成無(wú)水乙醇的加入：p361（三）硫色素?zé)晒夥ǖ谌?yè)，共六十一頁(yè)。一．結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)二烯醇內(nèi)酯環(huán)2個(gè)手性碳原子第三節(jié)維生素C的分析第三十三頁(yè)，共六十一頁(yè)。

溶解性：水中易溶糖類(lèi)的性質(zhì)：化學(xué)結(jié)構(gòu)與糖類(lèi)相似旋光性:2個(gè)手性C，L(+)-VitC活性最大酸性還原性水解性UV吸收特性不穩(wěn)定性（二）性質(zhì)第三十四頁(yè)，共六十一頁(yè)。二烯醇結(jié)構(gòu)：顯酸性C3-OH酸性較強(qiáng)（pKa1=4.17)C2-OH酸性很弱

(pKa2=11.57)一般表現(xiàn)為一元酸，可與NaHCO3作用成鈉鹽

H2CO3：pKa1=6.38

pKa2=10.25酸性第三十五頁(yè)，共六十一頁(yè)。二烯醇基：強(qiáng)還原性易被氧化為去氫抗環(huán)血酸，在強(qiáng)堿或強(qiáng)酸作用下，進(jìn)一步水解成酮酸（鹽）。在強(qiáng)堿(NaOH)中，內(nèi)酯環(huán)水解，生成酮酸鹽vitC和碳酸鈉作用生成單鈉鹽，不水解還原性水解性UV吸收特性稀鹽酸溶液中，243nm處有最大吸收中性或堿性條件下，最大吸收紅移至265nm第三十六頁(yè)，共六十一頁(yè)。（一）與硝酸銀反應(yīng)

二．鑒別試驗(yàn)去氫VitC黑色第三十七頁(yè)，共六十一頁(yè)。（二）與2，6-二氯靛酚反應(yīng)

++玫瑰紅色(酸性介質(zhì)中)無(wú)色酚亞胺第三十八頁(yè)，共六十一頁(yè)。（三）與其它氧化劑的反應(yīng)

亞甲藍(lán)高錳酸鉀磷鉬酸堿性酒石酸銅試液---斐林試液（四）糖類(lèi)的反應(yīng)p264

水解、脫羧、失水藍(lán)色產(chǎn)物（五）UV

0.01mol/L鹽酸中，243nm處有惟一的

最大吸收與吡咯縮合糠醛第三十九頁(yè)，共六十一頁(yè)。目的:

控制有色雜質(zhì)的含量有色雜質(zhì)的產(chǎn)生:VitC受空氣、光線和溫度的影響，內(nèi)酯環(huán)水解脫羧失水

糠醛（易聚合呈黃色）檢查方法:

控制供試品溶液的吸收度三．雜質(zhì)檢查（一）溶液的澄清度和顏色第四十頁(yè)，共六十一頁(yè)。（二）鐵、銅離子的檢查

鐵、銅離子可加速VitC氧化AAS法第四十一頁(yè)，共六十一頁(yè)。

原理：醋酸酸性條件下，VitC被碘定量氧化四．含量測(cè)定（一）碘量法第四十二頁(yè)，共六十一頁(yè)。注意：滴定在酸性溶液中進(jìn)行可減慢VitC受空氣中氧的氧化速度加新沸過(guò)的冷水：減少水中溶解的氧對(duì)測(cè)定的影響注射液測(cè)定：加入丙酮，消除NaHSO3抗氧劑的影響

第四十三頁(yè)，共六十一頁(yè)。

用于VitC制劑的含測(cè)氧化型：酸性液中顯紅色

還原型：無(wú)色的酚亞胺終點(diǎn)判斷：不需指示劑酸性液中，用2，6-二氯靛酚標(biāo)準(zhǔn)液滴定，至溶液顯紅色，即終點(diǎn)（二）2，6-二氯靛酚法（三）HPLC法p367第四十四頁(yè)，共六十一頁(yè)。（一）結(jié)構(gòu)

VitE：苯并二氫吡喃醇衍生物

α-生育酚

(tocopherol)及其各種酯類(lèi)生育酚：有α、β、γ、δ四種異構(gòu)體第四節(jié)維生素E的分析一．結(jié)構(gòu)和性質(zhì)第四十五頁(yè)，共六十一頁(yè)。

Chp收載：人工合成的消旋α-生育酚醋酸酯第四十六頁(yè)，共六十一頁(yè)。溶解性：水中不溶，有機(jī)試劑中易溶水解性：酸性或堿性液中加熱，水解成游離生育酚還原性：對(duì)氧十分敏感，易被氧化成α-生育醌和α-生育酚的二聚體水解產(chǎn)物游離生育酚更易氧化UV吸收：其無(wú)水乙醇液λmax284nm（二）性質(zhì)第四十七頁(yè)，共六十一頁(yè)。

硝酸酸性條件下，水解成生育酚生育酚被硝酸氧化成生育紅（一）硝酸反應(yīng)二．鑒別試驗(yàn)橙紅色第四十八頁(yè)，共六十一頁(yè)。

堿性條件下，水解成生育酚

生育酚與FeCl3發(fā)生氧化還原反應(yīng)，

生育酚對(duì)-生育醌

Fe3+

Fe2+

Fe2+與聯(lián)吡啶，生成紅色的配位離子(二)三氯化鐵反應(yīng)

第四十九頁(yè)，共六十一頁(yè)。（三）UV法VitE的0.01%無(wú)水乙醇液：

284nm處有最大吸收

254nm處有最小吸收（四）其他方法

TLCGCIR第五十頁(yè)，共六十一頁(yè)。

酸度：控制制備過(guò)程中引入的游離醋酸有關(guān)物質(zhì)生育酚：

Chp采用硫酸鈰滴定法檢查游離生育酚可被硫酸鈰定量氧化三．雜質(zhì)檢查第五十一頁(yè)，共六十一頁(yè)。GC：

直接GC，內(nèi)標(biāo)校正因子法定量RP-HPLC：外標(biāo)一點(diǎn)法定量

α-生育酚及其醋酸酯的出峰順序四．含量測(cè)定第五十二頁(yè)，共六十一頁(yè)。維生素D：甾醇的衍生物Chp主要收載：維生素D2、D3原料藥及其制劑