臨床檢驗(yàn)技師-臨床血液學(xué)檢驗(yàn)(2019)講義第二十章-血栓與止血檢驗(yàn)的基本方法

第二十章血栓與止血檢驗(yàn)的基本方法三、血管壁檢驗(yàn)四、血小板檢驗(yàn)六、抗凝物質(zhì)測定八、纖溶活性測定九、血液流變學(xué)檢測一、一期止血缺陷篩查試驗(yàn)1.出血時(shí)間（bleedingtime，BT）原理：測定在皮膚受特定條件外傷后，出血自然停止所需的時(shí)間即為出血時(shí)間。BT反映了毛細(xì)血管與血小板的相互作用，包括內(nèi)皮下組織與血小板黏附（通過vWF的作用）、血小板第1頁共14頁的聚集和釋放等反應(yīng)，以及PGI與TXA的動態(tài)平衡。2 2血管性血友病一般凝血因子缺乏出血時(shí)間不延長，但某些嚴(yán)重的因子缺乏（如因子Ⅹ和Ⅺ）以延長。出血時(shí)間縮短見于某些嚴(yán)重的高凝狀態(tài)和血栓性疾病。此外，出血時(shí)間還廣泛用于外科手術(shù)前的出血篩選和抗血小板藥物的監(jiān)控，以免發(fā)生出血。2.束臂試驗(yàn)（tourniquettestcapillaryfragility現(xiàn)的出血點(diǎn)數(shù)目，來估計(jì)血管壁的完整性及其脆性。臨床意義：新出血點(diǎn)的數(shù)目超過正常為陽性，見于：①血管壁結(jié)構(gòu)和（或）血管性紫癜。②血小板的量和（或）質(zhì)異常，如原發(fā)性和繼發(fā)性血小板減少癥、血小板增多癥、先天性（遺傳性）第2頁共14頁和獲得性血小板功能缺陷癥。（vWD）。二、二期止血缺陷篩查試驗(yàn)?zāi)冈瓡r(shí)間測定（prothrombin原理：在受檢血漿中加入過量的組織凝血活酶（人腦、兔腦、胎盤及肺組織等制品的浸出液）鈣離子，使凝血酶原變?yōu)槟?，后者使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白。觀察血漿凝固所需時(shí)間即凝血酶原該試驗(yàn)是反映外源凝血系統(tǒng)最常用的篩選試驗(yàn)。參考值及報(bào)告方式①直接報(bào)告患者及正常對照的PT秒數(shù)，參考值為11～14s。超過正常3s為異常。凝血酶原時(shí)間比值（prothrombintimeratio，PTR）PT（s）/PT（s）。份正常人血漿PTPT1±0.15。國際標(biāo)準(zhǔn)化比值（internationalnormalizedratio，INR），INR=PTRISI。ISI：所用組織活酶的國際敏感度指數(shù)sensitivityISI是所用組織凝血活酶與ISI已知的國際參比品或經(jīng)其標(biāo)定過的參比品之間敏感度相比較的一個(gè)參數(shù)。測定方法是用多份不同凝血因子水平的血漿（包括正常人和口服抗凝劑患者），用參比品測得它們PT的對數(shù)（logPT），再用待標(biāo)定的組織凝血活酶測得它們的logPT，以前者為縱坐標(biāo)，后者為橫坐標(biāo)作圖。經(jīng)回歸求得直線斜率。則待標(biāo)定的組織凝血活酶的ISI=已知ISIISI降低的敏感性越高。臨床意義①PT延長見于遺傳性外源凝血系統(tǒng)的因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纖維蛋白原減低，但均很少見。②肝臟疾病：由于外源性凝血因子主要在肝臟合成，因而肝臟疾病時(shí)，PT延長。③維生素K缺乏癥：膽石癥、膽道腫瘤、慢性腸炎、偏食、2～7月齡的新生兒以及長期服用廣譜抗生素的患者等，由于維生素K吸收或合成障礙，導(dǎo)致肝臟合成異常的凝血酶原、FⅦ、FⅨ、FⅩ等分子，PT延長。④血液循環(huán)中抗凝物質(zhì)增加，如肝素或FDP增多等。DIC和原發(fā)性纖溶時(shí)，由于FDP生成增加，F(xiàn)DP有較強(qiáng)的抗凝能力，故也使PT延長。用于香豆素類等口服抗凝劑的監(jiān)控，一般認(rèn)為以維持PT2（1.3～2.5）25～30sPTR1.3～1.5（2），INR2.0～3.0⑥PT縮短見于口服避孕藥、高凝狀態(tài)和血栓性疾病等。影響：不同患者HCT不同，導(dǎo)致血漿量多少不一，因此游離的Ca2＋濃度不同，從而導(dǎo)致PT結(jié)果異常。對于HCT＜35%和＞55%的患者，采血量或抗凝劑用量按下述公式計(jì)算。采血量=抗凝劑用量（ml）×9×（1-0.45）/（1-HCT）。②血漿標(biāo)本離心：相對離心力1500×g、離心10分鐘制備乏血小板血漿，若血漿中富含有血小板，PT將假性縮短。③溶血、脂血標(biāo)本：溶血時(shí)由于紅細(xì)胞中有促凝成分，可使PT假性縮短；脂血干擾某些儀器檢測過程中的濁度變化，因此會引起PT檢測結(jié)果的異常?；罨糠帜蠲笗r(shí)間測定partialthromboplastin以白陶土激活因子Ⅻ和Ⅺ，以腦磷脂（部分凝血活酶）在Ca2＋是內(nèi)源凝血系統(tǒng)較敏感和常用的篩選試驗(yàn)。第3頁共14頁參考值男性：31.5～43.5s女性：32～43s受檢者的測定值超過正常對照10s以上有病理意義。臨床意義①對內(nèi)源凝血途徑因子（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ）缺乏較CT敏感（血小板異常不影響APTT），能檢出Ⅷ：C小于25%的輕型血友病。對凝血酶原、纖維蛋白原缺乏則不夠敏感，故APTT延長的最常見疾病為血友病。此時(shí)可進(jìn)一步作糾正試驗(yàn)，即于患者血漿中加入1/4量的正常新鮮血漿、硫酸鋇吸附血漿或正常血清（試劑參見凝血酶原消耗試驗(yàn)的糾正試驗(yàn)），再檢測APTT。如正常血漿和吸附血漿能糾正延長的結(jié)果而血清不能糾正，則為因子Ⅷ缺乏；如吸附血漿不能糾正，其余兩者都能糾正，則為因子Ⅸ缺乏；如三者都不能糾正，則為病理性循環(huán)抗凝物質(zhì)。APTT及糾正試驗(yàn)結(jié)果判定所含因子 結(jié)果因子Ⅷ

因子Ⅸ

被糾正

不被糾正正常新鮮血漿 √正常血清 ×正常BaSO4 吸附血漿

√ 因子Ⅷ或Ⅸ缺乏√ 因子Ⅸ缺乏× 因子Ⅷ缺乏

病理性循環(huán)抗凝物質(zhì)在使用肝素治療時(shí)，多用APTT2（1.5～3.0為宜（75～100s）。但應(yīng)事先檢測所用部分凝血活酶試劑是否對肝素敏感，即向正常人血漿中加入不同量肝素（0.1～1.0IU），看其APTT③血管性血友?。河捎诨颊遶WF缺陷，使FⅧ不穩(wěn)定，導(dǎo)致FⅧ：C活性減低，故APTT延長。不同類型vWDFⅧ：C活性降低不一樣，故APTT延長的程度也不同。④異?？鼓镌龆啵貉巡患者長期輸注FⅧ，可產(chǎn)生FⅧ抑制物，引起APTT延長。一些患者存在狼瘡抗凝物（LAC），使APTT延長。纖溶亢進(jìn)：原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)（如DIC），F(xiàn)DP，使APTT注意事項(xiàng)：同PT。三、血管壁檢驗(yàn)血管性血友病因子檢測是一種大分子蛋白多聚體，析，必要時(shí)還可進(jìn)行基因診斷。原理①vWF抗原測定：可利用免疫電泳法、ELISA或膠乳凝集散射比濁法進(jìn)行準(zhǔn)確定量。②vWF通過與血小板膜GPⅠb-用使正常血小板發(fā)生凝集。凝集的強(qiáng)度與被檢血漿中vWF的含量和結(jié)構(gòu)有關(guān)。將正常人混合血漿作為100%瑞斯托霉素輔因子，用緩沖液將其稀釋成不同稀釋度，加入瑞斯托霉素和新鮮洗滌過的或甲醛固定過的正常血小板懸液，血小板會出現(xiàn)不同強(qiáng)度的凝集。根據(jù)正常血漿的稀釋度及其相應(yīng)的凝集反應(yīng)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。被檢血漿的瑞斯托霉素輔因子活性可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查到。臨床意義第4頁共14頁①vWF減低：主要用于vWD的診斷和分型。②vWF增高：vWF是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，很多情況下都增高，常見于血栓性疾?。ㄈ缧募」Ｋ赖龋?、腎小球疾病、DM、妊高征及大手術(shù)后。6-酮-前列腺素

（6-Keto-PGF）檢測1α 1α-PGF-牛血清白蛋白連接物）包被酶標(biāo)反應(yīng)板，加入受檢血漿或1α6-酮-PGF標(biāo)準(zhǔn)品和一定量的抗6-酮-PGF抗血清，作用一定時(shí)間后，再加入酶標(biāo)記第二抗體，最后加入底1α 1α物顯色。標(biāo)準(zhǔn)品或受檢血漿中的6-酮-PGF與包被抗原競爭性地與抗體結(jié)合，抗體與包被抗原結(jié)合的量與1α受檢標(biāo)準(zhǔn)品或血漿中的6-酮-PGF量呈負(fù)相關(guān)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出受檢血漿中6-酮-PGF的含量。1α 1α6-酮-PGF減低：見于血栓性疾病，如急性心肌梗死、心絞痛、腦血管病變、糖1α尿病、動脈粥樣硬化、腫瘤轉(zhuǎn)移、腎小球病變、周圍血管血栓形成及血栓性血小板減少性紫癜等。四、血小板檢驗(yàn)血小板生存時(shí)間（plateletsurvival原理：丙二醛法或TXB2法：由于阿司匹林能不可逆性地抑制血小板AA代謝過程中環(huán)氧酶的活性，使其代謝產(chǎn)物MDA和TXB2生成減少。與此同時(shí)，因新生血小板未受阿司匹林的抑制，故其TXB2MDATXB2MDA可以用放射免疫法或酶聯(lián)免疫法測定。本試驗(yàn)可反映血小板生成與破壞之間的平衡，但在血小板計(jì)數(shù)過低時(shí)本法的敏感性較差。血小板生存期縮短，見于：①血小板破壞增多性疾?。喝缭l(fā)性血小板減少性紫癜、同種和藥物免疫性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡；②血小板消耗過多性疾?。喝鏒IC、血栓性血小板減少性紫癜（TTP）、溶血尿毒癥綜合征（HUS）；疾病、惡性腫瘤。血小板相關(guān)免疫球蛋白（plateletassociatedimmunoglobulin，PAIg）檢測包括PAIgGPAIgMPAIgAPAC3PAIgGELISA（雙抗體夾心法將抗人IgGPAIgG，便與包被的抗體結(jié)合，再加入酶標(biāo)的抗人IgG抗體，與結(jié)合在板上的PAIgG結(jié)合，最后加入底物顯色，其深淺與血小板裂解液中的PAIgG成正比。根據(jù)被檢者所測得的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出血小板裂解液中的PAIgG含量。臨床意義PAIgITPPAIgG，若同時(shí)測定PAIgMPAIgAPAC3，其靈敏度可高達(dá)100，許多疾病如同種免疫性血小板減少性紫癜（多次輸血、輸血后紫癜）、藥Evan只能作為篩查指標(biāo)?；颊叩腜AIg3.血小板聚集試驗(yàn)（plateletaggregation原理：濁度法：在富含血小板血漿中加入致聚劑，血小板發(fā)生聚集，血漿濁度變化，透線可了解血小板聚集的程度和速度。電阻法（阻抗法）激光散射法進(jìn)行血小板聚集檢測的儀器。第5頁共14頁血小板聚集試驗(yàn)（透射比濁法）血小板聚集曲線與血小板狀態(tài)對應(yīng)示意圖臨床意義PAgT增高：反映血小板聚集功能增強(qiáng)。見于高凝狀態(tài)和（或），如心肌梗死PAgT①見于獲得性血小板功能減低，如尿毒癥、肝硬化、MDS、原發(fā)性血小板減少性紫癜、急性白血病、服用抗血小板藥物、低（無）纖維蛋白原血癥等。②遺傳性血小板功能缺陷，不同的血小板功能缺陷病對各種誘導(dǎo)劑的反應(yīng)不同。血小板無力癥（Glanzmann病）：ADP、膠原和花生四烯酸誘導(dǎo)的血小板聚集減低和不聚集。巨大血小板綜合征：ADP、膠原和花生四烯酸誘導(dǎo)的血小板聚集正常，但瑞斯托霉素誘導(dǎo)的血小板不凝集。貯存池?。褐旅茴w粒缺陷時(shí)，ADP誘導(dǎo)的聚集常減低，無二相聚集；膠原和花生四烯酸誘導(dǎo)的血小板聚集正常；α顆粒缺陷時(shí)，血小板凝集和聚集均正常。血小板花生四烯酸代謝缺陷：ADP誘導(dǎo)的聚集常減低，無二相聚集，膠原和花生四烯第6頁共14頁第第14頁共14頁酸誘導(dǎo)的血小板聚集均低下。操作注意事項(xiàng)1）抗凝劑采用枸櫞酸鈉抗凝，不能以EDTA阿司匹林、潘生丁、肝素、華法林等藥物均可抑制血小板聚集，故采血前一段時(shí)間不應(yīng)服用此類藥物。3h血小板釋放反應(yīng)產(chǎn)物測定和血小板第四因子factorPF4）是血小板α顆粒中特有的蛋白。當(dāng)體內(nèi)有過多的血小板被激活，釋放反應(yīng)亢進(jìn)時(shí)，二者血漿中的濃度PF4二者的檢測多采用ELISA臨床意義增高：反映血小板被激活及其釋放反應(yīng)亢進(jìn)，見于血栓前狀態(tài)和（或）腦血管病變、尿毒癥、妊高征、糖尿病、腎病綜合征、彌散性血管內(nèi)凝血、靜脈血栓形成等。減低：見于先天性或獲得性貯存池?。é令w粒缺陷癥）。破壞過多時(shí)，血漿PF4血塊收縮試驗(yàn)retraction原理：在富含血小板血漿中加入Ca2＋伸出偽足，偽足前端連接到纖維蛋白束上。當(dāng)偽足向心性收縮，使纖維蛋白網(wǎng)眼縮小，測定析出血清的體積可反映血小板血塊收縮能力。臨床意義1）減低：見于原發(fā)性血小板減少性紫癜、血小板增多癥、血小板無力癥、紅細(xì)胞增多癥、低（無）維蛋白原血癥、多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等。2）增高：見于先天性（遺傳性）因子ⅩⅢ缺乏癥等。五、凝血因子的檢測血漿纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)IB）含量測定原理：FIB）、比濁法）以及免疫學(xué)的方法等。①Clauss法：以凝血酶作用于待測血漿中的FIB，使其轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，血漿凝固。血漿中FIB的含量與凝固時(shí)間呈負(fù)相關(guān)，檢測結(jié)果與參比血漿制成的標(biāo)準(zhǔn)曲線對比可得出纖維蛋白原的含量。②PT衍生法：當(dāng)PT測定完成時(shí)，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，其形成的濁度與FIB的含量成正比，因此無需另加任何試劑，即可由產(chǎn)生的濁度，用終點(diǎn)法或速率法算出FIB含量。③免疫學(xué)方法：是利用抗FIB多克隆抗體與FIB特異性結(jié)合反應(yīng)進(jìn)行測定。方法有免疫濁度、單向免疫擴(kuò)散和ELISA等。瘤、休克、大手術(shù)后、妊高征、急性感染、惡性腫瘤和應(yīng)急狀態(tài)等。降低見于先天性低或無FIB血癥、遺傳性FIB異常、彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎和肝硬化等。方法學(xué)評價(jià)：ClaussPTFIB的異質(zhì)性，當(dāng)增高時(shí)，Clauss血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性測定原理：一期法是將待測血漿分別與乏FFⅨFFⅫ基質(zhì)血漿混合，進(jìn)行APTT常人混合血漿與乏因子血漿混合，測定APTTFⅧ：C、FⅨ：C、FⅪ：CFⅫ：C。臨床意義減低：FⅧ：C減低見于血友病A、血管性血友病、血中存在因子Ⅷ抗體、DIC；FⅨ：C減低見于血友病B、肝臟病、維生素K缺乏癥、DIC、口服抗凝藥物；FⅪ：C減低見于因子Ⅺ缺乏癥、肝臟疾病、DIC等；FⅫ：C減低見于先天性因子Ⅻ缺乏癥、肝臟疾病、DIC和某些血栓性疾病等。注意事項(xiàng)FⅧ：CFⅧ：C減低時(shí)，需與vWF篩選出vWF目前認(rèn)為，凝血因子促凝活性測定不必等待逐級篩選和糾正試驗(yàn)的結(jié)果，可以在單純APTT延長時(shí)檢測。受檢標(biāo)本檢測凝固時(shí)間不在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍可稀釋后檢測。血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ和Ⅹ的促凝活性測定原理：將待測血漿分別與缺乏FFⅤFⅦ和FⅩ基質(zhì)血漿混合，進(jìn)行PT測定。將正常人混合血漿與乏因子血漿混合，測定PT，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線。從各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線中分別計(jì)算出受檢血漿中、FⅤ：C、FⅦ：CFⅩ：C。臨床意義增高：見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。減低：見于維生素K缺乏癥（FV除外）DIC先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ和Ⅹ缺乏癥較罕見。目前因子和可下降，因子Ⅴ的測定在肝損傷和肝移植中應(yīng)用較多。血漿因子ⅩⅢ定性試驗(yàn)的纖維蛋白。因此，含因子ⅩⅢ的血漿鈣化凝固后不再溶于尿素溶液中，而缺乏ⅩⅢ的血漿聚合物則可溶5mol/L臨床意義：本試驗(yàn)簡單、可靠，是十分有用的過篩試驗(yàn)。24h內(nèi)，尤其是2hSLEDIC血漿因子ⅩⅢ亞基抗原測定原理：凝血因子ⅩⅢ由兩個(gè)亞基α和β構(gòu)成。檢測方法為免疫火箭電泳法：在含有FⅩⅢα亞基和β亞基抗血清的瓊脂凝膠板中，加入受檢血漿（抗原），樣沉淀峰，此峰的高度與受檢血漿中FⅩⅢ亞基的濃度成正比。根據(jù)沉淀峰的高度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出FⅩⅢα：AgFⅩⅢβ：Ag。臨床意義：同上。六、抗凝物質(zhì)測定抗凝血酶Ⅲ（antithrombinactivity，AT-Ⅲ：A）測定血漿抗凝血酶Ⅲ活性測定AT-Ⅲ與凝血酶形成1:1復(fù)合物，剩余的凝血酶作用于發(fā)色底物S-2238，釋出顯色基因?qū)ο趸桨凤@色的深淺與剩余凝血酶呈正相關(guān)，而與AT-Ⅲ呈負(fù)相關(guān)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出AT：A血漿抗凝血酶Ⅲ抗原檢測1）臨床意義①增高見于血友病、白血病和再生障礙性貧血等的急性出血期以及口服抗凝藥物治療過程中。②減低見于先天性和獲得性AT-Ⅲ缺乏癥，后者見于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病和肝臟疾病、腎病綜合征等。注意事項(xiàng)①標(biāo)本不能用肝素抗凝。②AT-Ⅲ抗原和活性測定最好同時(shí)檢測，以利于進(jìn)行先天性AT-Ⅲ缺乏的分型。③在疑難DIC診斷時(shí)，AT-Ⅲ水平下降具有診斷價(jià)值；急性白血病時(shí)AT-Ⅲ水平降低更可看作是DIC發(fā)生的信號；抗凝治療中，如懷疑肝素抵抗，可測定AT-Ⅲ來確定；抗凝血酶代替治療時(shí)，也應(yīng)首選AT-Ⅲ檢測來監(jiān)測。血漿蛋白C（protein測定血漿蛋白CC激活劑（從蛇毒中提?。㏄CAPC作用于發(fā)色底物，釋出顯色基團(tuán)對硝基苯胺PC的含量呈平行關(guān)系。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出AT：A血漿蛋白C2）臨床意義：減低見于：①先天性PC缺陷：根據(jù)正常而PC：A減低）；②獲得性PC缺陷：DIC、肝功能不全、手術(shù)后、口服雙香豆素抗凝劑、呼吸窘迫綜合征等。血漿蛋白S血漿總蛋白SproteinC4結(jié)合的。由于二者對于抗人蛋白S抗體有相似反應(yīng)，因此用免疫學(xué)方法（如火箭電泳、酶聯(lián)免疫法）檢測的是TPS。臨床意義：減低見于先天性和獲得性PS血漿游離蛋白S（freeprotein測定原理：凝固法。受檢血漿中加入缺乏PS基質(zhì)血漿（提供除PS外的其他凝血因子可促進(jìn)APC對因子Ⅴa的抑制作用，纖維蛋白形成所需的時(shí)間與受檢血漿中FPS準(zhǔn)曲線中計(jì)算出FPS臨床意義：參見血漿總蛋白S七、病理性抗凝物檢測狼瘡抗凝物質(zhì)（lupusanticoagulants，LAC）測定篩檢試驗(yàn)1）原理：在腦磷脂和激活劑存在的條件下，檢測血漿凝固時(shí)間（即APTT）。若被檢血漿中有狼瘡抗凝物質(zhì)存在，則血漿凝固時(shí)間延長。2）臨床意義：篩檢試驗(yàn)的血漿凝固時(shí)間延長（篩檢試驗(yàn)陽性）性凝血因子缺乏、口服抗凝劑、肝素治療以及DIC等。確診試驗(yàn)被糾正。=0.8～1.2臨床意義：狼瘡抗凝物質(zhì)存在見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡板減少癥等。的檢測也可利用改良的Russell蛇毒稀釋試驗(yàn)進(jìn)行檢測，該試驗(yàn)不受FⅫ及FⅦ凝血因子Ⅷ抑制物檢測37中的FⅧ活性，同時(shí)與正常血漿中的FⅧ活性比較。若受檢血漿中存在因子Ⅷ抗體，則正常人血漿的FⅧ活性被抑制或被中和。以Bethesda單位來計(jì)算抑制物的含量，能抑制正常人FⅧ活性501BethesdaF50%的受檢血漿最高稀釋倍數(shù)為FⅧ抗體的單位數(shù)。參考范圍：正常人無FⅧ抑制物。陽性見于反復(fù)輸血、接受抗血友病球蛋白治療的血友病A患者、SLEDM、結(jié)節(jié)病等。臨床評價(jià)：Bethesda法還可用于其他因子如FⅨFFⅪFⅧ抑制物的確定最終還需進(jìn)行LAC八、纖溶活性測定凝血酶時(shí)間（thrombintime，TT）及甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn)甲苯胺藍(lán)可糾正肝素的抗凝作用，在TTTT縮短，表示受檢血漿中肝素或類肝素樣物質(zhì)增多，否則為其他類抗凝物或是纖維蛋白原異常。臨床意義：受檢TT3秒為延長，見于低（無）纖維蛋白原血癥；血中增高（DIC）；血中有肝素和類肝素物質(zhì)存在（SLE）。血漿纖溶酶原測定血漿纖溶酶原活性（plasminogenactivity，PLG：A）測定1）原理：發(fā)色底物法，受檢血漿中加鏈激酶和發(fā)色底物（S-2251），PLG在的作用下，轉(zhuǎn)變成PL，后者作用于發(fā)色底物，釋出對硝基苯胺呈正相關(guān)，通過計(jì)算求得血漿中PLG：A2）臨床意義：增高表示纖溶活性減低，見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。減低表示纖溶活性增高，見于原發(fā)性纖溶、繼發(fā)性纖溶和先天性PLG缺乏癥。PLG缺陷癥：可分為CRM＋型（PLG：Ag或PLG：A減低）和CRM－型（PLG：Ag和PLG：A均減低）。此外，前置胎盤、腫瘤擴(kuò)散、大手術(shù)后、肝硬化、重癥肝炎、門脈高壓、肝切除等獲得性PLG缺陷癥，也存在PLG減低。血漿纖溶酶原抗原（plasminogenantigen，PLG：Ag）測定原理：ELISA溶酶原與包被在反應(yīng)板上的抗體結(jié)合，然后加入酶標(biāo)記的兔抗人纖溶酶原抗體，酶標(biāo)記的抗體與結(jié)合在反應(yīng)板上的纖溶酶原結(jié)合，最后加入底物顯色，顯色的深淺與受檢血漿中纖溶酶原的含量呈正相關(guān)。從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出血漿中纖溶酶原的含量。臨床意義：見PLG：A血漿組織纖溶酶原活化劑測定血漿組織纖溶酶原活化劑活性plasminogenactivator測定1）t-PA及全部凝血因子，但不含PAIPLGt-PAPLG轉(zhuǎn)變成PNAt-PAA受檢血漿中t-PA：A2）臨床意義①增高：表明纖溶活性亢進(jìn)，見于原發(fā)性纖溶癥、繼發(fā)性纖溶癥如DIC等。②減低：表明纖溶活性減弱，見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，如動脈血栓形成、深靜脈血栓形成、高脂血癥、口服避孕藥、缺血性中風(fēng)等。血漿組織纖溶酶原活化劑抗原plasminogenactivator測定1）t-PA與包被在反應(yīng)板上的抗體結(jié)合，然后加入酶標(biāo)記的t-PA抗體，酶標(biāo)記的抗體與結(jié)合在反應(yīng)板上的t-PAt-PA的含量呈正相關(guān)。從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出血漿中的含量。2）臨床意義：同t-PA：A檢測。血漿纖溶酶原活化抑制物測定原理：血漿纖溶酶原活化抑制物活性antigeninhibitor測，發(fā)色底物法。根據(jù)PAI：AgPAI-1CRM＋CRM－型。血漿α2原理：血漿α2

纖溶酶抑制物活性（α2

plasmininhibitor2

PI：A）檢測，發(fā)色底物法。DIC先天性αPI根據(jù)αPI：AαPI：AgαPI缺陷分為CRM＋型和CRM－型。2 2 2 2血漿魚精蛋白副凝固（plasmaprotamineparacoagulation試驗(yàn)為陽性反應(yīng)結(jié)果。結(jié)果判斷：正常人為陰性。陽性見于DIC的早、中期DIC[fibrin（ogen）degradationproducts，F(xiàn)DP]測定原理：膠乳凝集法，于被檢血清中加入FDP抗體包被的膠乳顆粒懸液，當(dāng)血清中FDP的濃度等于或超過5μg/mlFDP血清FDPDIC深靜脈血栓形成、腎臟疾病、肝臟疾病、器官移植的排斥反應(yīng)、溶栓治療等。血漿D-二聚體（D-dimer，D-D）測定原理：膠乳凝集法，被檢血漿中加入標(biāo)記D-血漿中D-二聚體含量大于0.5mg/L出血漿D-二聚體的含量。DIC時(shí)，為陽性或增高，是診斷DICD-二聚體含量也增高。D-二聚體在繼發(fā)性纖溶癥為陽性或增高，而原發(fā)性纖溶癥為陰性或不升高，此是兩者鑒別的重要指標(biāo)。1.全血黏度與該管兩端壓力差計(jì)算出血漿黏度值。尿病、高脂血癥等。經(jīng)典例題對于臨床上的出血的篩檢實(shí)驗(yàn)APTT和PT都正常多見于A.內(nèi)源性凝血途徑缺陷引