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酶免疫測(cè)定常用儀器設(shè)備的使用和維護(hù)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心王露楠酶免疫測(cè)定常用儀器設(shè)備的使用和維護(hù)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心1主要儀器設(shè)備加樣器加樣系統(tǒng)洗板機(jī)酶標(biāo)儀全自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)主要儀器設(shè)備加樣器2酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展功能的拓展①更寬的測(cè)定吸光度范圍。②從可見光擴(kuò)展到紫外檢測(cè)。③增加溫控功能。④增加了酶動(dòng)力學(xué)及凝集等測(cè)定功能。⑤增加了濾光片自動(dòng)識(shí)別功能⑥增加了比色測(cè)定前的振板功能⑦增加了雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)測(cè)定功能。⑧增加定性和定量測(cè)定統(tǒng)計(jì)分析軟件功能。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展功能的拓展3酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展適用性的拓展①酶標(biāo)儀由通常的96孔檢測(cè)模式擴(kuò)展到384甚至1536孔模式,這種酶標(biāo)儀對(duì)于工作量較大、檢測(cè)項(xiàng)目較多的實(shí)驗(yàn)室可加快檢測(cè)速度。②酶標(biāo)儀由單純的比色測(cè)定儀器發(fā)展至與發(fā)光、熒光、時(shí)間分辨熒光、紫外檢測(cè)相結(jié)合的多功能檢測(cè)儀器。此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。這些多功能免疫測(cè)定儀器的出現(xiàn),對(duì)于實(shí)驗(yàn)室來說,在進(jìn)行ELISA測(cè)定的同時(shí),也可以很方便地開展使用發(fā)光、熒光、時(shí)間分辨熒光方法的檢測(cè)項(xiàng)目,而無需再額外購(gòu)買儀器設(shè)備,可大大節(jié)省實(shí)驗(yàn)室的空間。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展適用性的拓展4酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用1.測(cè)定波長(zhǎng)
波長(zhǎng)范圍:400nm~750或800nm
常用波長(zhǎng):450nm和492nm目前國(guó)內(nèi)常見的ELISA試劑盒所使用的標(biāo)記用酶均為辣根過氧化物酶(HRP),底物通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)
雙波長(zhǎng)比色:應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用1.測(cè)定波長(zhǎng)5酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用2.測(cè)定的吸光度范圍通常:在0~2.5之間即可以滿足ELISA的測(cè)定拓寬:可達(dá)到3.5以上要求:對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用2.測(cè)定的吸光度范圍6酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用3.光學(xué)系統(tǒng):
酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為八或十二通道,亦有單通道)檢測(cè),一般為硅光管或光導(dǎo)纖維,除測(cè)定通道外,有的酶標(biāo)儀還有一個(gè)參比通道,每次測(cè)定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。性能指標(biāo):吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度多通道:測(cè)定的精密度與測(cè)定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道:可避免因通道不同所致的差異酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用3.光學(xué)系統(tǒng):7酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用4.檢測(cè)速度酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。檢測(cè)速度快,有利于提高檢測(cè)的精密度,即避免由于測(cè)定過程中,因測(cè)定時(shí)間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用4.檢測(cè)速度8酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用5.震板功能震板目的:板孔內(nèi)顏色均一6.溫育功能無需再外配溫箱。溫育功能只是酶標(biāo)儀的一個(gè)附加功能,是否具有并不能說明酶標(biāo)儀檔次的高低及儀器的優(yōu)劣。作為實(shí)驗(yàn)室是否選擇,則可根據(jù)自已實(shí)驗(yàn)室的條件及需要來決定。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用5.震板功能9酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用7.軟件功能:指酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELISA定性和定量測(cè)定及其它測(cè)定方式如酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、紫外和凝集等的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能。
灰區(qū):軟件功能是中高檔酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。
定量:四參數(shù)方程能較好地反映免疫測(cè)定的劑量反應(yīng)曲線,最為適合于定量酶免疫測(cè)定的曲線擬合。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用7.軟件功能:指酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELI10酶標(biāo)儀—酶標(biāo)儀的選擇(1)工作需要(2)酶標(biāo)儀的性能:測(cè)定波長(zhǎng)范圍,濾光片配置,檢測(cè)速度,吸光度范圍,線性范圍,分辨率,準(zhǔn)確度,精密度等。(3)實(shí)驗(yàn)室的財(cái)力(4)售后服務(wù)(5)外語水平酶標(biāo)儀—酶標(biāo)儀的選擇(1)工作需要11根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭人機(jī)界面是否友好,最好是中文顯示。性能指標(biāo):吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度連續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時(shí)使用,吸頭有液體時(shí)不可平放或倒置。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。維護(hù)校準(zhǔn)、培訓(xùn)、售后服務(wù)將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積,選擇合適的吸頭;最小可調(diào)體積(不小于擬校準(zhǔn)體積的10%)。要求:對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何提供常用的、易損的配件,如清洗頭,應(yīng)該8道、12道各備用一個(gè),并且定期淘汰,象洗液瓶、硅膠管等應(yīng)可方便買到酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)灰區(qū):軟件功能是中高檔酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。④增加了酶動(dòng)力學(xué)及凝集等測(cè)定功能。酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)改吸不同液體、樣品或試劑前要換新吸嘴;操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;酶標(biāo)儀—酶標(biāo)儀的選擇酶標(biāo)儀的中心定位儀器會(huì)自動(dòng)對(duì)酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位,中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測(cè)的不準(zhǔn)確。光源的參照通道
參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響
根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭酶標(biāo)儀—酶標(biāo)儀的選擇酶標(biāo)12酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)
1.外觀酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,型號(hào),編號(hào),生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開關(guān)均能正常工作,外表面無明顯機(jī)械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。2.酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)選用492nm波長(zhǎng),在吸光度0.0A處,測(cè)定標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片(測(cè)定操作按儀器說明進(jìn)行),記錄儀器示值或均值,10分鐘后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測(cè)定值之差不應(yīng)超過±0.005A。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)1.外觀13酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)3.吸光度測(cè)定的準(zhǔn)確度
△A=1/3(A1+A2+A3)-As(As為標(biāo)準(zhǔn)值);.
4.吸光度測(cè)定的重復(fù)性
在酶標(biāo)板第一排加注空白溶液,第二排加入濃度為200μg/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)定5次.記錄每次測(cè)定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值.計(jì)算重復(fù)性。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)3.吸光度測(cè)定的準(zhǔn)確度14酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)5.酶標(biāo)儀的線性選用540nm波長(zhǎng),將標(biāo)稱值0.5,1.0A中性濾光片分別放入專用測(cè)試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測(cè)定3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于專用測(cè)試板的同一孔位中,重復(fù)測(cè)定3次.線性誤差6.測(cè)定速度的檢定選用492nm波長(zhǎng),放入96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)定,用秒表計(jì)測(cè)儀器的打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)5.酶標(biāo)儀的線性15酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)7.通道差檢測(cè):取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染)以酶標(biāo)板架作載體,分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200ul先后置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)(測(cè)定波長(zhǎng)490nm,參比波長(zhǎng)630或650nm,以下均相同)連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道之間測(cè)量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差。8.孔間差的測(cè)量:選擇同一廠家、同一批號(hào)酶標(biāo)板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)至0.065~0.070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)檢測(cè),其誤差大小用±1.96s衡量。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)7.通道差檢測(cè):取一只酶標(biāo)板小孔16酶標(biāo)儀—雙波長(zhǎng)問題雙波長(zhǎng)測(cè)定:由于標(biāo)本中干擾組份的存在以及小孔杯本身質(zhì)量等原因,常常導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的假性增高,而酶標(biāo)儀提供的雙波長(zhǎng)測(cè)定功能則可以消除干擾組份或因素對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。對(duì)于標(biāo)本中干擾組份的清除,在選擇參比波長(zhǎng)時(shí),我們應(yīng)對(duì)于擾組份的光譜進(jìn)行研究,以正確選擇參比波長(zhǎng);而對(duì)于小孔杯本身質(zhì)量問題等干擾因素的消除,只要選擇遠(yuǎn)離測(cè)定波長(zhǎng)的參比波長(zhǎng)即可以了,這對(duì)保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性是非常重要的。
酶標(biāo)儀—雙波長(zhǎng)問題雙波長(zhǎng)測(cè)定:17洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用
1.洗滌功能的充分性基本參數(shù):洗板次數(shù)、條數(shù)、浸泡時(shí)間另外盡可能有:底部沖洗、兩點(diǎn)吸液
最小的殘留量2.板孔的兼容性與擴(kuò)展性兼容性主要是對(duì)于國(guó)內(nèi)不同規(guī)格、尺寸略有差異的微孔板的兼容,儀器應(yīng)具有對(duì)微孔板的位置調(diào)節(jié)功能,適應(yīng)國(guó)內(nèi)ELISA試劑盒中微孔板條的實(shí)際情況。
擴(kuò)展性主要是為了適應(yīng)新出現(xiàn)的一些應(yīng)用情況,如8×6式的微孔板,許多洗板機(jī)無法清洗。洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用1.洗滌功能的充分性18洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用(3.儀器自身及洗滌效果的可靠性
一是儀器自身的可靠性,保證儀器在使用壽命期內(nèi)可以正常顯示、精確運(yùn)動(dòng)等,這可通過考查儀器生產(chǎn)廠商的技術(shù)與生產(chǎn)實(shí)力來論證;二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。(4.配件是否充分
提供常用的、易損的配件,如清洗頭,應(yīng)該8道、12道各備用一個(gè),并且定期淘汰,象洗液瓶、硅膠管等應(yīng)可方便買到洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用(3.儀器自身及洗滌效果的可靠性19洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用5.售后服務(wù)是否及時(shí)、價(jià)格是否合理洗板機(jī)是使用率相對(duì)較高的儀器,單從運(yùn)動(dòng)角度對(duì)比,其頻率是酶標(biāo)儀的幾十倍。6.人機(jī)界面是否友好,最好是中文顯示。洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用5.售后服務(wù)是否及時(shí)、價(jià)格是否合理20洗板機(jī)—注意事項(xiàng)1.有一定的洗滌次數(shù)多次洗滌有利于取得好的效果,一般不超過6次。2.注意每孔的加液量以加滿為宜,但不可溢出,一般為每孔300微升3.建議在洗滌前進(jìn)行位置調(diào)節(jié),吸針要到微孔底部,以降低殘留量。4.建議用戶采用兩點(diǎn)吸液與底部沖洗方式,以得到好的洗滌效果。5.每天使用后用雙蒸水沖洗管路。6.定期維護(hù)、檢修儀器及配件。洗板機(jī)—注意事項(xiàng)1.有一定的洗滌次數(shù)21加樣器--加樣器的類型單道連續(xù)可調(diào)式移液器多通道連續(xù)可調(diào)式移液器單道連續(xù)移液器單道移液管配合使用的移液器加樣器--加樣器的類型單道連續(xù)可調(diào)式移液器22二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用單通道:可避免因通道不同所致的差異基本參數(shù):洗板次數(shù)、條數(shù)、浸泡時(shí)間定期維護(hù)、檢修儀器及配件。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)通道差檢測(cè):取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染)以酶標(biāo)板架作載體,分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200ul先后置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)(測(cè)定波長(zhǎng)490nm,參比波長(zhǎng)630或650nm,以下均相同)連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道之間測(cè)量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差。定量:四參數(shù)方程能較好地反映免疫測(cè)定的劑量反應(yīng)曲線,最為適合于定量酶免疫測(cè)定的曲線擬合。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用另外盡可能有:底部沖洗、兩點(diǎn)吸液酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用加樣器標(biāo)定體積的中間體積;操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;定期維護(hù)、檢修儀器及配件。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用將吸頭離開液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體;按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)加樣器。室溫:20~25℃,測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±0.每天使用后用雙蒸水沖洗管路。加樣器--加樣器的使用二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗23加樣器--加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求:室溫:20~25℃,測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±0.5℃。電子天平:放置于無塵和震動(dòng)影響的臺(tái)面上,房間盡可能有空調(diào)。稱量時(shí),為保證天平內(nèi)的濕度(相對(duì)濕度60-90%),天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯。小燒杯:5~10ml體積。測(cè)定液體:溫度為20~25℃的去氣雙蒸水。選定校準(zhǔn)體積:加樣器標(biāo)定體積的中間體積;最小可調(diào)體積(不小于擬校準(zhǔn)體積的10%)。擬校準(zhǔn)體積;如為固定體積加樣器,則只有一種校準(zhǔn)體積。加樣器--加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求:24加樣器--加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)步驟:將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積,選擇合適的吸頭;調(diào)節(jié)好天平;來回吸吹蒸餾水3次,以使吸頭濕潤(rùn),用紗布拭干吸頭垂直握住加樣器,將吸頭浸入液面2~3mm處,緩慢(1~3秒)一致地吸取蒸餾水;將吸頭離開液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體;將加樣器以30℃角放入稱量燒杯中,緩慢一致地將加樣器壓至第一檔,等待1~3秒,再壓至第二檔,使吸頭里的液體完全排出;記錄稱量值;擦干吸頭外面;按上述步驟稱量10次;取10次測(cè)定值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量,按附表所列蒸餾水Z因子計(jì)算體積。按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)加樣器。加樣器--加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)步驟:25加樣器—注意事項(xiàng)根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭吸取液體時(shí)應(yīng)緩慢勻速吸取,避免液體回吸。在調(diào)整取液量的旋鈕時(shí),不要用力過猛,并應(yīng)注意計(jì)數(shù)器顯示的數(shù)值不要超過其可調(diào)范圍。連續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時(shí)使用,吸頭有液體時(shí)不可平放或倒置。操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;改吸不同液體、樣品或試劑前要換新吸嘴;發(fā)現(xiàn)吸嘴內(nèi)有殘液時(shí)必須更換;新吸嘴使用前應(yīng)先預(yù)測(cè)。加樣器—注意事項(xiàng)根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭26加樣器—注意事項(xiàng)使用了酸或有腐蝕蒸氣的溶液后,最好拆下套筒,用蒸餾水清洗活塞及密封圈。連續(xù)可調(diào)式移液器在使用完畢后應(yīng)置于以液器架上,遠(yuǎn)離潮濕及腐蝕性物質(zhì)。在取液之前,所取液體應(yīng)在室溫(15-25C)平衡;液體溫度與室溫有異時(shí),將吸嘴預(yù)洗多次再用;移液溫度不得超過70℃。不可把容量計(jì)數(shù)調(diào)超其適用范圍。加樣器—注意事項(xiàng)使用了酸或有腐蝕蒸氣的溶液后,最好拆下套筒,27自動(dòng)加樣系統(tǒng)-選擇1.通量、速度2.加樣針:一次性,永久性3.洗滌方式,洗滌液4.維護(hù)校準(zhǔn)、培訓(xùn)、售后服務(wù)自動(dòng)加樣系統(tǒng)-選擇1.通量、速度28自動(dòng)加樣系統(tǒng)-維護(hù)、校準(zhǔn)管路沖洗洗滌液量洗滌次數(shù)沖洗時(shí)間洗滌液的選擇日常清潔維護(hù)定期清潔維護(hù)校準(zhǔn)準(zhǔn)確度和精密度自動(dòng)加樣系統(tǒng)-維護(hù)、校準(zhǔn)管路沖洗29記錄每次測(cè)定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值.選用492nm波長(zhǎng),放入96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)定,用秒表計(jì)測(cè)儀器的打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)檢測(cè),其誤差大小用±1.二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。使用了酸或有腐蝕蒸氣的溶液后,最好拆下套筒,用蒸餾水清洗活塞及密封圈。移液溫度不得超過70℃。連續(xù)可調(diào)式移液器在使用完畢后應(yīng)置于以液器架上,遠(yuǎn)離潮濕及腐蝕性物質(zhì)。提供常用的、易損的配件,如清洗頭,應(yīng)該8道、12道各備用一個(gè),并且定期淘汰,象洗液瓶、硅膠管等應(yīng)可方便買到此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶?;緟?shù):洗板次數(shù)、條數(shù)、浸泡時(shí)間酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)室溫:20~25℃,測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±0.灰區(qū):軟件功能是中高檔酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;連續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時(shí)使用,吸頭有液體時(shí)不可平放或倒置。常用波長(zhǎng):450nm和492nm將吸頭離開液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體;(2)酶標(biāo)儀的性能:測(cè)定波長(zhǎng)范圍,濾光片配置,檢測(cè)速度,吸光度范圍,線性范圍,分辨率,準(zhǔn)確度,精密度等。酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。震板目的:板孔內(nèi)顏色均一取10次測(cè)定值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量,按附表所列蒸餾水Z因子計(jì)算體積。性能指標(biāo):吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。不可把容量計(jì)數(shù)調(diào)超其適用范圍。酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。在酶標(biāo)板第一排加注空白溶液,第二排加入濃度為200μg/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)定5次.酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。雙波長(zhǎng)比色:應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積,選擇合適的吸頭;最小的殘留量根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)建議用戶采用兩點(diǎn)吸液與底部沖洗方式,以得到好的洗滌效果。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)檢測(cè),其誤差大小用±1.選用492nm波長(zhǎng),放入96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)定,用秒表計(jì)測(cè)儀器的打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)而對(duì)于小孔杯本身質(zhì)量問題等干擾因素的消除,只要選擇遠(yuǎn)離測(cè)定波長(zhǎng)的參比波長(zhǎng)即可以了,這對(duì)保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性是非常重要的。雙波長(zhǎng)比色:應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片洗板機(jī)是使用率相對(duì)較高的儀器,單從運(yùn)動(dòng)角度對(duì)比,其頻率是酶標(biāo)儀的幾十倍。此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用孔間差的測(cè)量:選擇同一廠家、同一批號(hào)酶標(biāo)板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)至0.維護(hù)校準(zhǔn)、培訓(xùn)、售后服務(wù)根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭每天使用后用雙蒸水沖洗管路。維護(hù)校準(zhǔn)、培訓(xùn)、售后服務(wù)酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。通道差檢測(cè):取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染)以酶標(biāo)板架作載體,分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200ul先后置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)(測(cè)定波長(zhǎng)490nm,參比波長(zhǎng)630或650nm,以下均相同)連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道之間測(cè)量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差。酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。在取液之前,所取液體應(yīng)在室溫(15-25C)平衡;酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)酶免疫測(cè)定常用儀器設(shè)備的使用和維護(hù)此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。性能指標(biāo):吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)雙波長(zhǎng)比色:應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)基本參數(shù):洗板次數(shù)、條數(shù)、浸泡時(shí)間操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;②酶標(biāo)儀由單純的比色測(cè)定儀器發(fā)展至與發(fā)光、熒光、時(shí)間分辨熒光、紫外檢測(cè)相結(jié)合的多功能檢測(cè)儀器。最小可調(diào)體積(不小于擬校準(zhǔn)體積的10%)。070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)檢測(cè),其誤差大小用±1.維護(hù)校準(zhǔn)、培訓(xùn)、售后服務(wù)酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用雙波長(zhǎng)比色:應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片擴(kuò)展性主要是為了適應(yīng)新出現(xiàn)的一些應(yīng)用情況,如8×6式的微孔板,許多洗板機(jī)無法清洗。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)震板目的:板孔內(nèi)顏色均一移液溫度不得超過70℃。人機(jī)界面是否友好,最好是中文顯示。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用室溫:20~25℃,測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±0.操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;不可把容量計(jì)數(shù)調(diào)超其適用范圍。在酶標(biāo)板第一排加注空白溶液,第二排加入濃度為200μg/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)定5次.酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)取10次測(cè)定值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量,按附表所列蒸餾水Z因子計(jì)算體積。酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。連續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時(shí)使用,吸頭有液體時(shí)不可平放或倒置。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用一是儀器自身的可靠性,保證儀器在使用壽命期內(nèi)可以正常顯示、精確運(yùn)動(dòng)等,這可通過考查儀器生產(chǎn)廠商的技術(shù)與生產(chǎn)實(shí)力來論證;無需再外配溫箱。⑤增加了濾光片自動(dòng)識(shí)別功能此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。小燒杯:5~10ml體積。而對(duì)于小孔杯本身質(zhì)量問題等干擾因素的消除,只要選擇遠(yuǎn)離測(cè)定波長(zhǎng)的參比波長(zhǎng)即可以了,這對(duì)保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性是非常重要的。目前國(guó)內(nèi)常見的ELISA試劑盒所使用的標(biāo)記用酶均為辣根②從可見光擴(kuò)展到紫外檢測(cè)。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用維護(hù)校準(zhǔn)、培訓(xùn)、售后服務(wù)謝謝記錄每次測(cè)定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)30酶免疫測(cè)定常用儀器設(shè)備的使用和維護(hù)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心王露楠酶免疫測(cè)定常用儀器設(shè)備的使用和維護(hù)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心31主要儀器設(shè)備加樣器加樣系統(tǒng)洗板機(jī)酶標(biāo)儀全自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)主要儀器設(shè)備加樣器32酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展功能的拓展①更寬的測(cè)定吸光度范圍。②從可見光擴(kuò)展到紫外檢測(cè)。③增加溫控功能。④增加了酶動(dòng)力學(xué)及凝集等測(cè)定功能。⑤增加了濾光片自動(dòng)識(shí)別功能⑥增加了比色測(cè)定前的振板功能⑦增加了雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)測(cè)定功能。⑧增加定性和定量測(cè)定統(tǒng)計(jì)分析軟件功能。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展功能的拓展33酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展適用性的拓展①酶標(biāo)儀由通常的96孔檢測(cè)模式擴(kuò)展到384甚至1536孔模式,這種酶標(biāo)儀對(duì)于工作量較大、檢測(cè)項(xiàng)目較多的實(shí)驗(yàn)室可加快檢測(cè)速度。②酶標(biāo)儀由單純的比色測(cè)定儀器發(fā)展至與發(fā)光、熒光、時(shí)間分辨熒光、紫外檢測(cè)相結(jié)合的多功能檢測(cè)儀器。此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。這些多功能免疫測(cè)定儀器的出現(xiàn),對(duì)于實(shí)驗(yàn)室來說,在進(jìn)行ELISA測(cè)定的同時(shí),也可以很方便地開展使用發(fā)光、熒光、時(shí)間分辨熒光方法的檢測(cè)項(xiàng)目,而無需再額外購(gòu)買儀器設(shè)備,可大大節(jié)省實(shí)驗(yàn)室的空間。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展適用性的拓展34酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用1.測(cè)定波長(zhǎng)
波長(zhǎng)范圍:400nm~750或800nm
常用波長(zhǎng):450nm和492nm目前國(guó)內(nèi)常見的ELISA試劑盒所使用的標(biāo)記用酶均為辣根過氧化物酶(HRP),底物通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)
雙波長(zhǎng)比色:應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用1.測(cè)定波長(zhǎng)35酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用2.測(cè)定的吸光度范圍通常:在0~2.5之間即可以滿足ELISA的測(cè)定拓寬:可達(dá)到3.5以上要求:對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用2.測(cè)定的吸光度范圍36酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用3.光學(xué)系統(tǒng):
酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為八或十二通道,亦有單通道)檢測(cè),一般為硅光管或光導(dǎo)纖維,除測(cè)定通道外,有的酶標(biāo)儀還有一個(gè)參比通道,每次測(cè)定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。性能指標(biāo):吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度多通道:測(cè)定的精密度與測(cè)定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道:可避免因通道不同所致的差異酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用3.光學(xué)系統(tǒng):37酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用4.檢測(cè)速度酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。檢測(cè)速度快,有利于提高檢測(cè)的精密度,即避免由于測(cè)定過程中,因測(cè)定時(shí)間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用4.檢測(cè)速度38酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用5.震板功能震板目的:板孔內(nèi)顏色均一6.溫育功能無需再外配溫箱。溫育功能只是酶標(biāo)儀的一個(gè)附加功能,是否具有并不能說明酶標(biāo)儀檔次的高低及儀器的優(yōu)劣。作為實(shí)驗(yàn)室是否選擇,則可根據(jù)自已實(shí)驗(yàn)室的條件及需要來決定。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用5.震板功能39酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用7.軟件功能:指酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELISA定性和定量測(cè)定及其它測(cè)定方式如酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、紫外和凝集等的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能。
灰區(qū):軟件功能是中高檔酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。
定量:四參數(shù)方程能較好地反映免疫測(cè)定的劑量反應(yīng)曲線,最為適合于定量酶免疫測(cè)定的曲線擬合。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用7.軟件功能:指酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELI40酶標(biāo)儀—酶標(biāo)儀的選擇(1)工作需要(2)酶標(biāo)儀的性能:測(cè)定波長(zhǎng)范圍,濾光片配置,檢測(cè)速度,吸光度范圍,線性范圍,分辨率,準(zhǔn)確度,精密度等。(3)實(shí)驗(yàn)室的財(cái)力(4)售后服務(wù)(5)外語水平酶標(biāo)儀—酶標(biāo)儀的選擇(1)工作需要41根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭人機(jī)界面是否友好,最好是中文顯示。性能指標(biāo):吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度連續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時(shí)使用,吸頭有液體時(shí)不可平放或倒置。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的發(fā)展酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。維護(hù)校準(zhǔn)、培訓(xùn)、售后服務(wù)將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積,選擇合適的吸頭;最小可調(diào)體積(不小于擬校準(zhǔn)體積的10%)。要求:對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何提供常用的、易損的配件,如清洗頭,應(yīng)該8道、12道各備用一個(gè),并且定期淘汰,象洗液瓶、硅膠管等應(yīng)可方便買到酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)灰區(qū):軟件功能是中高檔酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。④增加了酶動(dòng)力學(xué)及凝集等測(cè)定功能。酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)改吸不同液體、樣品或試劑前要換新吸嘴;操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;酶標(biāo)儀—酶標(biāo)儀的選擇酶標(biāo)儀的中心定位儀器會(huì)自動(dòng)對(duì)酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位,中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測(cè)的不準(zhǔn)確。光源的參照通道
參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響
根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭酶標(biāo)儀—酶標(biāo)儀的選擇酶標(biāo)42酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)
1.外觀酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,型號(hào),編號(hào),生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開關(guān)均能正常工作,外表面無明顯機(jī)械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。2.酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)選用492nm波長(zhǎng),在吸光度0.0A處,測(cè)定標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片(測(cè)定操作按儀器說明進(jìn)行),記錄儀器示值或均值,10分鐘后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測(cè)定值之差不應(yīng)超過±0.005A。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)1.外觀43酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)3.吸光度測(cè)定的準(zhǔn)確度
△A=1/3(A1+A2+A3)-As(As為標(biāo)準(zhǔn)值);.
4.吸光度測(cè)定的重復(fù)性
在酶標(biāo)板第一排加注空白溶液,第二排加入濃度為200μg/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)定5次.記錄每次測(cè)定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值.計(jì)算重復(fù)性。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)3.吸光度測(cè)定的準(zhǔn)確度44酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)5.酶標(biāo)儀的線性選用540nm波長(zhǎng),將標(biāo)稱值0.5,1.0A中性濾光片分別放入專用測(cè)試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測(cè)定3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于專用測(cè)試板的同一孔位中,重復(fù)測(cè)定3次.線性誤差6.測(cè)定速度的檢定選用492nm波長(zhǎng),放入96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)定,用秒表計(jì)測(cè)儀器的打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)5.酶標(biāo)儀的線性45酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)7.通道差檢測(cè):取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染)以酶標(biāo)板架作載體,分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200ul先后置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)(測(cè)定波長(zhǎng)490nm,參比波長(zhǎng)630或650nm,以下均相同)連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道之間測(cè)量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差。8.孔間差的測(cè)量:選擇同一廠家、同一批號(hào)酶標(biāo)板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)至0.065~0.070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)檢測(cè),其誤差大小用±1.96s衡量。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)7.通道差檢測(cè):取一只酶標(biāo)板小孔46酶標(biāo)儀—雙波長(zhǎng)問題雙波長(zhǎng)測(cè)定:由于標(biāo)本中干擾組份的存在以及小孔杯本身質(zhì)量等原因,常常導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的假性增高,而酶標(biāo)儀提供的雙波長(zhǎng)測(cè)定功能則可以消除干擾組份或因素對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。對(duì)于標(biāo)本中干擾組份的清除,在選擇參比波長(zhǎng)時(shí),我們應(yīng)對(duì)于擾組份的光譜進(jìn)行研究,以正確選擇參比波長(zhǎng);而對(duì)于小孔杯本身質(zhì)量問題等干擾因素的消除,只要選擇遠(yuǎn)離測(cè)定波長(zhǎng)的參比波長(zhǎng)即可以了,這對(duì)保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性是非常重要的。
酶標(biāo)儀—雙波長(zhǎng)問題雙波長(zhǎng)測(cè)定:47洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用
1.洗滌功能的充分性基本參數(shù):洗板次數(shù)、條數(shù)、浸泡時(shí)間另外盡可能有:底部沖洗、兩點(diǎn)吸液
最小的殘留量2.板孔的兼容性與擴(kuò)展性兼容性主要是對(duì)于國(guó)內(nèi)不同規(guī)格、尺寸略有差異的微孔板的兼容,儀器應(yīng)具有對(duì)微孔板的位置調(diào)節(jié)功能,適應(yīng)國(guó)內(nèi)ELISA試劑盒中微孔板條的實(shí)際情況。
擴(kuò)展性主要是為了適應(yīng)新出現(xiàn)的一些應(yīng)用情況,如8×6式的微孔板,許多洗板機(jī)無法清洗。洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用1.洗滌功能的充分性48洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用(3.儀器自身及洗滌效果的可靠性
一是儀器自身的可靠性,保證儀器在使用壽命期內(nèi)可以正常顯示、精確運(yùn)動(dòng)等,這可通過考查儀器生產(chǎn)廠商的技術(shù)與生產(chǎn)實(shí)力來論證;二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。(4.配件是否充分
提供常用的、易損的配件,如清洗頭,應(yīng)該8道、12道各備用一個(gè),并且定期淘汰,象洗液瓶、硅膠管等應(yīng)可方便買到洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用(3.儀器自身及洗滌效果的可靠性49洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用5.售后服務(wù)是否及時(shí)、價(jià)格是否合理洗板機(jī)是使用率相對(duì)較高的儀器,單從運(yùn)動(dòng)角度對(duì)比,其頻率是酶標(biāo)儀的幾十倍。6.人機(jī)界面是否友好,最好是中文顯示。洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用5.售后服務(wù)是否及時(shí)、價(jià)格是否合理50洗板機(jī)—注意事項(xiàng)1.有一定的洗滌次數(shù)多次洗滌有利于取得好的效果,一般不超過6次。2.注意每孔的加液量以加滿為宜,但不可溢出,一般為每孔300微升3.建議在洗滌前進(jìn)行位置調(diào)節(jié),吸針要到微孔底部,以降低殘留量。4.建議用戶采用兩點(diǎn)吸液與底部沖洗方式,以得到好的洗滌效果。5.每天使用后用雙蒸水沖洗管路。6.定期維護(hù)、檢修儀器及配件。洗板機(jī)—注意事項(xiàng)1.有一定的洗滌次數(shù)51加樣器--加樣器的類型單道連續(xù)可調(diào)式移液器多通道連續(xù)可調(diào)式移液器單道連續(xù)移液器單道移液管配合使用的移液器加樣器--加樣器的類型單道連續(xù)可調(diào)式移液器52二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用洗板機(jī)--洗板機(jī)的選用單通道:可避免因通道不同所致的差異基本參數(shù):洗板次數(shù)、條數(shù)、浸泡時(shí)間定期維護(hù)、檢修儀器及配件。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)通道差檢測(cè):取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染)以酶標(biāo)板架作載體,分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200ul先后置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)(測(cè)定波長(zhǎng)490nm,參比波長(zhǎng)630或650nm,以下均相同)連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道之間測(cè)量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差。定量:四參數(shù)方程能較好地反映免疫測(cè)定的劑量反應(yīng)曲線,最為適合于定量酶免疫測(cè)定的曲線擬合。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用另外盡可能有:底部沖洗、兩點(diǎn)吸液酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用加樣器標(biāo)定體積的中間體積;操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;定期維護(hù)、檢修儀器及配件。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用將吸頭離開液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體;按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)加樣器。室溫:20~25℃,測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±0.每天使用后用雙蒸水沖洗管路。加樣器--加樣器的使用二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗53加樣器--加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求:室溫:20~25℃,測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±0.5℃。電子天平:放置于無塵和震動(dòng)影響的臺(tái)面上,房間盡可能有空調(diào)。稱量時(shí),為保證天平內(nèi)的濕度(相對(duì)濕度60-90%),天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯。小燒杯:5~10ml體積。測(cè)定液體:溫度為20~25℃的去氣雙蒸水。選定校準(zhǔn)體積:加樣器標(biāo)定體積的中間體積;最小可調(diào)體積(不小于擬校準(zhǔn)體積的10%)。擬校準(zhǔn)體積;如為固定體積加樣器,則只有一種校準(zhǔn)體積。加樣器--加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求:54加樣器--加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)步驟:將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積,選擇合適的吸頭;調(diào)節(jié)好天平;來回吸吹蒸餾水3次,以使吸頭濕潤(rùn),用紗布拭干吸頭垂直握住加樣器,將吸頭浸入液面2~3mm處,緩慢(1~3秒)一致地吸取蒸餾水;將吸頭離開液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體;將加樣器以30℃角放入稱量燒杯中,緩慢一致地將加樣器壓至第一檔,等待1~3秒,再壓至第二檔,使吸頭里的液體完全排出;記錄稱量值;擦干吸頭外面;按上述步驟稱量10次;取10次測(cè)定值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量,按附表所列蒸餾水Z因子計(jì)算體積。按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)加樣器。加樣器--加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)步驟:55加樣器—注意事項(xiàng)根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭吸取液體時(shí)應(yīng)緩慢勻速吸取,避免液體回吸。在調(diào)整取液量的旋鈕時(shí),不要用力過猛,并應(yīng)注意計(jì)數(shù)器顯示的數(shù)值不要超過其可調(diào)范圍。連續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時(shí)使用,吸頭有液體時(shí)不可平放或倒置。操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;改吸不同液體、樣品或試劑前要換新吸嘴;發(fā)現(xiàn)吸嘴內(nèi)有殘液時(shí)必須更換;新吸嘴使用前應(yīng)先預(yù)測(cè)。加樣器—注意事項(xiàng)根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭56加樣器—注意事項(xiàng)使用了酸或有腐蝕蒸氣的溶液后,最好拆下套筒,用蒸餾水清洗活塞及密封圈。連續(xù)可調(diào)式移液器在使用完畢后應(yīng)置于以液器架上,遠(yuǎn)離潮濕及腐蝕性物質(zhì)。在取液之前,所取液體應(yīng)在室溫(15-25C)平衡;液體溫度與室溫有異時(shí),將吸嘴預(yù)洗多次再用;移液溫度不得超過70℃。不可把容量計(jì)數(shù)調(diào)超其適用范圍。加樣器—注意事項(xiàng)使用了酸或有腐蝕蒸氣的溶液后,最好拆下套筒,57自動(dòng)加樣系統(tǒng)-選擇1.通量、速度2.加樣針:一次性,永久性3.洗滌方式,洗滌液4.維護(hù)校準(zhǔn)、培訓(xùn)、售后服務(wù)自動(dòng)加樣系統(tǒng)-選擇1.通量、速度58自動(dòng)加樣系統(tǒng)-維護(hù)、校準(zhǔn)管路沖洗洗滌液量洗滌次數(shù)沖洗時(shí)間洗滌液的選擇日常清潔維護(hù)定期清潔維護(hù)校準(zhǔn)準(zhǔn)確度和精密度自動(dòng)加樣系統(tǒng)-維護(hù)、校準(zhǔn)管路沖洗59記錄每次測(cè)定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值.選用492nm波長(zhǎng),放入96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)定,用秒表計(jì)測(cè)儀器的打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(zhǎng)檢測(cè),其誤差大小用±1.二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。使用了酸或有腐蝕蒸氣的溶液后,最好拆下套筒,用蒸餾水清洗活塞及密封圈。移液溫度不得超過70℃。連續(xù)可調(diào)式移液器在使用完畢后應(yīng)置于以液器架上,遠(yuǎn)離潮濕及腐蝕性物質(zhì)。提供常用的、易損的配件,如清洗頭,應(yīng)該8道、12道各備用一個(gè),并且定期淘汰,象洗液瓶、硅膠管等應(yīng)可方便買到此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。基本參數(shù):洗板次數(shù)、條數(shù)、浸泡時(shí)間酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)室溫:20~25℃,測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±0.灰區(qū):軟件功能是中高檔酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。操作時(shí)要慢和穩(wěn),吸嘴浸入液體深度要合適,吸液過程盡量保持不變;連續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時(shí)使用,吸頭有液體時(shí)不可平放或倒置。常用波長(zhǎng):450nm和492nm將吸頭離開液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體;(2)酶標(biāo)儀的性能:測(cè)定波長(zhǎng)范圍,濾光片配置,檢測(cè)速度,吸光度范圍,線性范圍,分辨率,準(zhǔn)確度,精密度等。酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。震板目的:板孔內(nèi)顏色均一取10次測(cè)定值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量,按附表所列蒸餾水Z因子計(jì)算體積。性能指標(biāo):吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。不可把容量計(jì)數(shù)調(diào)超其適用范圍。酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。在酶標(biāo)板第一排加注空白溶液,第二排加入濃度為200μg/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)定5次.酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的使用二是洗滌效果的可靠性,即真正達(dá)到代替手工洗滌、甚至優(yōu)于手工洗滌的目的,這需要咨詢使用該儀器的上級(jí)單位或典型用戶。酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(CUT-OFF)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于CUT-OFF周圍的一定區(qū)域,此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)此外,WallacViewLux也有比色、發(fā)光、熒光和時(shí)間分辨熒光測(cè)定功能。雙波長(zhǎng)比色:應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積,選擇合適的吸頭;最小的殘留量根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)建議用戶采用兩點(diǎn)吸液與底部沖洗方式,以得到好的洗滌效果。酶標(biāo)儀--酶標(biāo)儀的
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