EGFR熒光原位雜交與免疫組化檢測(cè)比較分析課件

EGFR熒光原位雜交與免疫組化檢測(cè)的比較分析廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科林毅妍EGFR熒光原位雜交與免疫組化檢測(cè)的比較分析廣州醫(yī)科大學(xué)附屬前言近年來(lái)，以表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）為治療靶標(biāo)的分子靶向治療在非小細(xì)胞肺癌（non-smallcelllungcancer，NSCLC）治療中越顯突出。EGFR基因的檢測(cè)不僅可以為分子靶向藥物的使用提供有效指導(dǎo)，也可以為肺癌治療措施的制定以及肺癌預(yù)后的判定提供重要信息。目前臨床病理工作中，對(duì)EGFR基因擴(kuò)增的檢測(cè)使用較多的方法有熒光免疫原位雜交（FISH）技術(shù)、免疫組化（IHC）檢測(cè)技術(shù)、PCR擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)等。本文將對(duì)熒光原位雜交與免疫組化兩種檢測(cè)進(jìn)行比較分析。前言近年來(lái)，以表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal材料標(biāo)本來(lái)源：廣州醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2010年1月～2011年1月行支纖鏡及手術(shù)切除的NSCLC病例，其中男性21例，女性19例；年齡30～85歲，中位年齡58歲。所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性緩沖福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋。40例標(biāo)本行連續(xù)切片，同時(shí)行FISH檢測(cè)與免疫組化檢測(cè)。材料主要試劑與儀器蛋白酶K，探針：GLPEGFR/CSP7探針（北京金菩嘉公司），胃蛋白酶消化液，人抗EGFR單克隆抗體（即用型）購(gòu)于福州邁新生物公司。Dako雜交儀、觀察用OlympusBX51型顯微鏡和NikonH600L熒光顯微鏡。主要試劑與儀器檢測(cè)方法

（1）FISH檢測(cè)：

3μm組織切片TO脫蠟至水煮沸去離子水處理15min室溫下2×SSC中漂洗2次，每次5min在組織上滴加蛋白酶K工作液，在37℃預(yù)熱的孵育盒中消化3～5min室溫下用2×SSC溶液中洗滌2次，每次5min，乙醇梯度脫水，自然干燥避光環(huán)境中，探針混合液滴于玻片雜交區(qū)域在溫度80℃的自動(dòng)雜交儀中變性5min，42℃雜交16小時(shí)第二天46℃水浴箱中2×SSC10min，0.1%NP40溶液洗滌5min，室溫70%乙醇3min暗處自然干燥玻片后加DAPI復(fù)染液，放于暗盒中復(fù)染5minOlympusBX51型熒光顯微鏡在DAPI/FIFC/RHOD三色濾光鏡激發(fā)下觀察間期細(xì)胞熒光雜交信號(hào)檢測(cè)方法（1）FISH檢測(cè)：3μm組織切片TO脫蠟至水煮檢測(cè)方法（2）IHC檢測(cè)：

3μm組織涂膠片，57℃烤片過(guò)夜，浸于二甲苯中脫蠟至水在組織上滴加胃蛋白酶消化液，在37℃預(yù)熱的孵育盒中消化30min

采用EnVision二步法，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作

檢測(cè)方法（2）IHC檢測(cè)：3μm組織涂膠片，57℃烤片過(guò)夜結(jié)果判斷

（1）FISH結(jié)果判定：紅色信號(hào)代表檢測(cè)的靶基因，綠色信號(hào)代表靶基因所在的染色體著絲粒。檢測(cè)EGFR基因計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，統(tǒng)計(jì)Ratio值（100個(gè)細(xì)胞核中紅色信號(hào)數(shù)/100個(gè)細(xì)胞核中綠色信號(hào)數(shù)）。FISH陽(yáng)性分為：EGFR基因擴(kuò)增：①Ratio≥2為陽(yáng)性結(jié)果；②≥15個(gè)紅色信號(hào)的細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的10%以上；③出現(xiàn)成團(tuán)紅色信號(hào)的細(xì)胞；高多體性：Ratio＜2，但≥4個(gè)紅色信號(hào)的細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的40%以上。FISH陰性：Ratio＜2為無(wú)擴(kuò)增。結(jié)果判斷（1）FISH結(jié)果判定：紅色信號(hào)代表檢測(cè)的靶基因，結(jié)果判斷（2）IHC結(jié)果判定：染色結(jié)果根據(jù)細(xì)胞膜著色的陽(yáng)性細(xì)胞百分率和陽(yáng)性染色程度評(píng)價(jià)。著色細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞百分率≤5%為0分；6～25%陽(yáng)性細(xì)胞為1分；26～50%陽(yáng)性細(xì)胞為2分；＞50%陽(yáng)性細(xì)胞為3分。再結(jié)合染色強(qiáng)度，無(wú)色為0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。將每張切片著色細(xì)胞百分率得分與著色程度得分相乘，為其最后得分。同一視野如有染色強(qiáng)度不一，取其平均值作最后得分。

0～1分為陰性（－），2～3分為弱陽(yáng)性（1+），4～6分為中等陽(yáng)性（2+），6分以上為強(qiáng)陽(yáng)性（3+）。結(jié)果判斷（2）IHC結(jié)果判定：染色結(jié)果根據(jù)細(xì)胞膜著色的陽(yáng)性細(xì)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行描述性分析。FISH技術(shù)與IHC法檢測(cè)結(jié)果的比較使用x2檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行描述性分析。結(jié)果FISH圖1.EGFRFISH（+）（高多體）圖2.EGFRFISH（+）（點(diǎn)簇狀）圖3.EGFRFISH（-）結(jié)果FISH圖1.EGFRFISH（+）圖2.EGFR結(jié)果IHC++++++-結(jié)果IHC++++++-結(jié)果

FISH技術(shù)與IHC法檢測(cè)EGFR的結(jié)果比較見(jiàn)表1。FISHIHC合計(jì)（-）（1+）（2+）（3+）（+）652215（-）1951025合計(jì)20103240表1FISH技術(shù)與IHC法檢測(cè)EGFR的結(jié)果比較40例NSCLC標(biāo)本中，F(xiàn)ISH顯示為陽(yáng)性的15例，其中IHC檢測(cè)EGFR表達(dá)為（—）的6例（40%），陽(yáng)性的9例（60%）；FISH顯示為陰性的25例，其中IHC檢測(cè)EGFR表達(dá)為（—）的19例（76%），陽(yáng)性的6例（24%）。IHC檢測(cè)陽(yáng)性例數(shù)高于FISH檢測(cè)陽(yáng)性例數(shù)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=5.184，P＞0.05）。結(jié)果FISH技術(shù)與IHC法檢測(cè)EGFR的結(jié)果比較見(jiàn)表1。F討論

表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)是一種蛋白酪氨酸激酶受體，位于第7號(hào)染色體p13～22區(qū),全長(zhǎng)200kb,由28個(gè)外顯子組成，編碼1186個(gè)氨基酸[1],廣泛分布于除成熟骨骼肌細(xì)胞、體壁內(nèi)胚層和造血組織以外的所有組織細(xì)胞。EGFR的異常高表達(dá)可見(jiàn)于多種惡性腫瘤，其活化可激活多種轉(zhuǎn)錄因子,引起細(xì)胞的增殖、分化、遷移、黏附、抗凋亡和細(xì)胞轉(zhuǎn)化等效應(yīng)，在腫瘤進(jìn)展、血管生成、轉(zhuǎn)移擴(kuò)散、凋亡受抑等方面起重要作用[2]。EGFR酪氨酸激酶抑制劑可抑制激活EGFR的酪氨酸激酶活性，從而阻斷EGFR的功能，阻礙腫瘤的發(fā)生發(fā)展[3]。多數(shù)文獻(xiàn)提示，分子靶向治療晚期NSCLC療效明顯，而且治療明顯的患者中，EGFR基因突變的發(fā)生率明顯高于治療無(wú)效的患者，EGFR基因檢測(cè)可以作為患者應(yīng)用分子靶向治療的一個(gè)預(yù)測(cè)指標(biāo)，在NSCLC個(gè)性化治療過(guò)程中提供重要信息。討論表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)是一種蛋白酪氨酸激討論FISH技術(shù)檢測(cè)的敏感性和特異性較高，操作過(guò)程中標(biāo)本受影響較少，可以定量判讀結(jié)果。IHC法是臨床常用的EGFR蛋白表達(dá)的方法。該方法操作簡(jiǎn)便，可重復(fù)性高，對(duì)儀器、材料的要求不高，是國(guó)內(nèi)檢測(cè)EGFR蛋白表達(dá)的主要方法。但I(xiàn)HC法在標(biāo)本固定和處理中可能會(huì)使蛋白質(zhì)變性破壞而影響檢測(cè)結(jié)果，易造成假陰性或假陽(yáng)性，且結(jié)果判斷人為主觀性較強(qiáng)。由于免疫組化方法因抗體類型與來(lái)源不同，以及所使用的評(píng)分系統(tǒng)的差異而導(dǎo)致結(jié)果差異，不同抗體可使結(jié)果范圍從12％變至14％[4]。討論FISH技術(shù)檢測(cè)的敏感性和特異性較高，操作過(guò)程中討論以FISH為標(biāo)準(zhǔn)，IHC與之比較：2例IHC法強(qiáng)陽(yáng)性（3+）標(biāo)本中，F(xiàn)ISH檢測(cè)EGFR基因擴(kuò)增均為陽(yáng)性，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為100%；3例IHC中等陽(yáng)性（2+）標(biāo)本中，F(xiàn)ISH檢測(cè)EGFR基因擴(kuò)增陽(yáng)性為2例，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為66.67%；10例IHC弱陽(yáng)性標(biāo)本（1+），F(xiàn)ISH檢測(cè)EGFR基因擴(kuò)增陽(yáng)性為5例，陰性預(yù)測(cè)值為50%；25例IHC陰性（-）標(biāo)本中，F(xiàn)ISH檢測(cè)EGFR基因擴(kuò)增陰性為19例，陰性預(yù)測(cè)值為76%?？傮w而言，兩種方法的符合率較低。但其中IHC法EGFR表達(dá)（3+）及（2+）的標(biāo)本，尤以強(qiáng)陽(yáng)性（3+）標(biāo)本與FISH檢測(cè)EGFR基因陽(yáng)性的一致性較高，與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)到有所不同[5]，但該類標(biāo)本例數(shù)較少，僅占總例數(shù)的12.5%，其一致性是否可靠需要進(jìn)一步驗(yàn)證。討論以FISH為標(biāo)準(zhǔn)，IHC與之比較：討論表2.2963例乳腺癌HER-2的IHC和FISH檢測(cè)結(jié)果比較以FISH作為標(biāo)準(zhǔn)IHC與之比較，其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值在IHC陽(yáng)性(+++以上)標(biāo)本中為91.6%，陰性預(yù)測(cè)值在IHC陰性(0或+)標(biāo)本中為97.2%，在IHC弱陽(yáng)性和陽(yáng)性(0或+)標(biāo)本中其敏感性為92.6%，在IHC陽(yáng)性標(biāo)本中其敏感性為98.8%[6]。討論表2.2963例乳腺癌HER-2的IHC和FISH檢討論綜上所述，免疫組化法對(duì)于評(píng)價(jià)患者是否使用EGFR酪氨酸激酶抑制劑治療并非最佳的手段，但可作為篩選檢查。討論綜上所述，免疫組化法對(duì)于評(píng)價(jià)患者是否使用EGFR參考文獻(xiàn)

[1]ReiterJL,ThreadgillDW,EleyGD,etal.ComparativegenomicsequenceanalysisandisolationofhumanandmousealternativeEGFRtranscriptsencodingtruncatedreceptorisofornls[J].Genomics,2001,71(1):1.[2］JorissenRN,WalkerF,PouliontN,etal.Epidemalgrowthfactorreceptor：Mechanismsofactivationandsignaling[J].ExpCellRes,2003，284（1）:31.[3]CunninghamD,HumbletY,SienaS,etal.Cetuximabmonotherapyandcetuximabplusirinotecaninirinotecan-refractorymetastaticcolorectalcancer[J].NEnglJMed,2004,351(14):337-345.[4]BuckleyAF。Kakars．comparisonoftheDakoEGFRpharmI)xkitandZymedEGFRantibodyforassessmentofEGFRstatusincolorectaladenocarcinoma[J]．AppllmmunohistochemMolMor_phol，2007，15(3)：305—309．[5]周曉秋，王東關(guān)，孫希印，高搖虹，王琳琳，李新功.非小細(xì)胞肺癌耘鄖云砸基因和蛋白檢測(cè)的比較分析[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2012,28（10）：1124-1132.[6]劉艷輝.乳腺癌組織HER-2的熒光原位雜交和免疫組化聯(lián)合檢測(cè)的評(píng)價(jià)[J].循證醫(yī)學(xué)，2006，6(2)：81-83.參考文獻(xiàn)[1]ReiterJL,Threadgi謝謝！謝謝！EGFR熒光原位雜交與免疫組化檢測(cè)的比較分析廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科林毅妍EGFR熒光原位雜交與免疫組化檢測(cè)的比較分析廣州醫(yī)科大學(xué)附屬前言近年來(lái)，以表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）為治療靶標(biāo)的分子靶向治療在非小細(xì)胞肺癌（non-smallcelllungcancer，NSCLC）治療中越顯突出。EGFR基因的檢測(cè)不僅可以為分子靶向藥物的使用提供有效指導(dǎo)，也可以為肺癌治療措施的制定以及肺癌預(yù)后的判定提供重要信息。目前臨床病理工作中，對(duì)EGFR基因擴(kuò)增的檢測(cè)使用較多的方法有熒光免疫原位雜交（FISH）技術(shù)、免疫組化（IHC）檢測(cè)技術(shù)、PCR擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)等。本文將對(duì)熒光原位雜交與免疫組化兩種檢測(cè)進(jìn)行比較分析。前言近年來(lái)，以表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal材料標(biāo)本來(lái)源：廣州醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2010年1月～2011年1月行支纖鏡及手術(shù)切除的NSCLC病例，其中男性21例，女性19例；年齡30～85歲，中位年齡58歲。所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性緩沖福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋。40例標(biāo)本行連續(xù)切片，同時(shí)行FISH檢測(cè)與免疫組化檢測(cè)。材料主要試劑與儀器蛋白酶K，探針：GLPEGFR/CSP7探針（北京金菩嘉公司），胃蛋白酶消化液，人抗EGFR單克隆抗體（即用型）購(gòu)于福州邁新生物公司。Dako雜交儀、觀察用OlympusBX51型顯微鏡和NikonH600L熒光顯微鏡。主要試劑與儀器檢測(cè)方法

（1）FISH檢測(cè)：

3μm組織切片TO脫蠟至水煮沸去離子水處理15min室溫下2×SSC中漂洗2次，每次5min在組織上滴加蛋白酶K工作液，在37℃預(yù)熱的孵育盒中消化3～5min室溫下用2×SSC溶液中洗滌2次，每次5min，乙醇梯度脫水，自然干燥避光環(huán)境中，探針混合液滴于玻片雜交區(qū)域在溫度80℃的自動(dòng)雜交儀中變性5min，42℃雜交16小時(shí)第二天46℃水浴箱中2×SSC10min，0.1%NP40溶液洗滌5min，室溫70%乙醇3min暗處自然干燥玻片后加DAPI復(fù)染液，放于暗盒中復(fù)染5minOlympusBX51型熒光顯微鏡在DAPI/FIFC/RHOD三色濾光鏡激發(fā)下觀察間期細(xì)胞熒光雜交信號(hào)檢測(cè)方法（1）FISH檢測(cè)：3μm組織切片TO脫蠟至水煮檢測(cè)方法（2）IHC檢測(cè)：

3μm組織涂膠片，57℃烤片過(guò)夜，浸于二甲苯中脫蠟至水在組織上滴加胃蛋白酶消化液，在37℃預(yù)熱的孵育盒中消化30min

采用EnVision二步法，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作

檢測(cè)方法（2）IHC檢測(cè)：3μm組織涂膠片，57℃烤片過(guò)夜結(jié)果判斷

（1）FISH結(jié)果判定：紅色信號(hào)代表檢測(cè)的靶基因，綠色信號(hào)代表靶基因所在的染色體著絲粒。檢測(cè)EGFR基因計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，統(tǒng)計(jì)Ratio值（100個(gè)細(xì)胞核中紅色信號(hào)數(shù)/100個(gè)細(xì)胞核中綠色信號(hào)數(shù)）。FISH陽(yáng)性分為：EGFR基因擴(kuò)增：①Ratio≥2為陽(yáng)性結(jié)果；②≥15個(gè)紅色信號(hào)的細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的10%以上；③出現(xiàn)成團(tuán)紅色信號(hào)的細(xì)胞；高多體性：Ratio＜2，但≥4個(gè)紅色信號(hào)的細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的40%以上。FISH陰性：Ratio＜2為無(wú)擴(kuò)增。結(jié)果判斷（1）FISH結(jié)果判定：紅色信號(hào)代表檢測(cè)的靶基因，結(jié)果判斷（2）IHC結(jié)果判定：染色結(jié)果根據(jù)細(xì)胞膜著色的陽(yáng)性細(xì)胞百分率和陽(yáng)性染色程度評(píng)價(jià)。著色細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞百分率≤5%為0分；6～25%陽(yáng)性細(xì)胞為1分；26～50%陽(yáng)性細(xì)胞為2分；＞50%陽(yáng)性細(xì)胞為3分。再結(jié)合染色強(qiáng)度，無(wú)色為0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。將每張切片著色細(xì)胞百分率得分與著色程度得分相乘，為其最后得分。同一視野如有染色強(qiáng)度不一，取其平均值作最后得分。

0～1分為陰性（－），2～3分為弱陽(yáng)性（1+），4～6分為中等陽(yáng)性（2+），6分以上為強(qiáng)陽(yáng)性（3+）。結(jié)果判斷（2）IHC結(jié)果判定：染色結(jié)果根據(jù)細(xì)胞膜著色的陽(yáng)性細(xì)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行描述性分析。FISH技術(shù)與IHC法檢測(cè)結(jié)果的比較使用x2檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行描述性分析。結(jié)果FISH圖1.EGFRFISH（+）（高多體）圖2.EGFRFISH（+）（點(diǎn)簇狀）圖3.EGFRFISH（-）結(jié)果FISH圖1.EGFRFISH（+）圖2.EGFR結(jié)果IHC++++++-結(jié)果IHC++++++-結(jié)果

FISH技術(shù)與IHC法檢測(cè)EGFR的結(jié)果比較見(jiàn)表1。FISHIHC合計(jì)（-）（1+）（2+）（3+）（+）652215（-）1951025合計(jì)20103240表1FISH技術(shù)與IHC法檢測(cè)EGFR的結(jié)果比較40例NSCLC標(biāo)本中，F(xiàn)ISH顯示為陽(yáng)性的15例，其中IHC檢測(cè)EGFR表達(dá)為（—）的6例（40%），陽(yáng)性的9例（60%）；FISH顯示為陰性的25例，其中IHC檢測(cè)EGFR表達(dá)為（—）的19例（76%），陽(yáng)性的6例（24%）。IHC檢測(cè)陽(yáng)性例數(shù)高于FISH檢測(cè)陽(yáng)性例數(shù)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=5.184，P＞0.05）。結(jié)果FISH技術(shù)與IHC法檢測(cè)EGFR的結(jié)果比較見(jiàn)表1。F討論

表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)是一種蛋白酪氨酸激酶受體，位于第7號(hào)染色體p13～22區(qū),全長(zhǎng)200kb,由28個(gè)外顯子組成，編碼1186個(gè)氨基酸[1],廣泛分布于除成熟骨骼肌細(xì)胞、體壁內(nèi)胚層和造血組織以外的所有組織細(xì)胞。EGFR的異常高表達(dá)可見(jiàn)于多種惡性腫瘤，其活化可激活多種轉(zhuǎn)錄因子,引起細(xì)胞的增殖、分化、遷移、黏附、抗凋亡和細(xì)胞轉(zhuǎn)化等效應(yīng)，在腫瘤進(jìn)展、血管生成、轉(zhuǎn)移擴(kuò)散、凋亡受抑等方面起重要作用[2]。EGFR酪氨酸激酶抑制劑可抑制激活EGFR的酪氨酸激酶活性，從而阻斷EGFR的功能，阻礙腫瘤的發(fā)生發(fā)展[3]。多數(shù)文獻(xiàn)提示，分子靶向治療晚期NSCLC療效明顯，而且治療明顯的患者中，EGFR基因突變的發(fā)生率明顯高于治療無(wú)效的患者，EGFR基因檢測(cè)可以作為患者應(yīng)用分子靶向治療的一個(gè)預(yù)測(cè)指標(biāo)，在NSCLC個(gè)性化治療過(guò)程中提供重要信息。討論表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)是一種蛋白酪氨酸激討論FISH技術(shù)檢測(cè)的敏感性和特異性較高，操作過(guò)程中標(biāo)本受影響較少，可以定量判讀結(jié)果。IHC法是臨床常用的EGFR蛋白表達(dá)的方法。該方法操作簡(jiǎn)便，可重復(fù)性高，對(duì)儀器、材料的要求不高，是國(guó)內(nèi)檢測(cè)EGFR蛋白表達(dá)的主要方法。但I(xiàn)HC法在標(biāo)本固定和處理中可能會(huì)使蛋白質(zhì)變性破壞而影響檢測(cè)結(jié)果，易造成假陰性或假陽(yáng)性，且結(jié)果判斷人為主觀性較強(qiáng)。由于免疫組化方法因抗體類型與來(lái)源不同，以及所使用的評(píng)分系統(tǒng)的差異而導(dǎo)致結(jié)果差異，不同抗體可使結(jié)果范圍從12％變至14％[4]。討論FISH技術(shù)檢測(cè)的敏感性和特異性較高，操作過(guò)程中討論以FISH為標(biāo)準(zhǔn)，IHC與之比較：2例IHC法強(qiáng)陽(yáng)性（3+）標(biāo)本中，F(xiàn)ISH檢測(cè)EGFR基因擴(kuò)增均為陽(yáng)性，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為100%；3例IHC中等陽(yáng)性（2+）標(biāo)本中，F(xiàn)ISH檢測(cè)EGFR基因擴(kuò)增陽(yáng)性為2例，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為66.67%；10例IHC弱陽(yáng)性標(biāo)本（1+），F(xiàn)ISH檢測(cè)EGFR基因擴(kuò)增陽(yáng)性為5例，陰性預(yù)測(cè)值為50%；25例IHC陰性（-）標(biāo)本中，F(xiàn)ISH檢測(cè)EGFR基因擴(kuò)增陰性為19例，陰性預(yù)測(cè)值為76%。總體而言，兩種方法的符合率較低。但其中IHC法EGFR表達(dá)（3+）及（2+）的標(biāo)本，尤以強(qiáng)陽(yáng)性（3+）標(biāo)本與FISH檢測(cè)EGFR基因陽(yáng)性的一致性較高，與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)到有所不同[5]，但該類標(biāo)本例數(shù)較少，僅占總例數(shù)的12.5%，其一致性是否可靠需要進(jìn)一步驗(yàn)證。討論以FISH為標(biāo)準(zhǔn)，IHC與之比較：討論表2.2963例乳腺癌HER-2的IHC和FISH檢測(cè)結(jié)果比較以FISH作為標(biāo)準(zhǔn)IHC與之比較，其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值在IHC陽(yáng)性(+++以上)標(biāo)本中為91.6%，陰性預(yù)測(cè)值在IHC陰性(0或+)標(biāo)本中為97.2%，在IHC弱陽(yáng)性和陽(yáng)性(0或+)標(biāo)本中其敏感性為92.6%，在IHC陽(yáng)性標(biāo)本中其敏感性為98.8%[6]。討論表2.2963例乳腺癌HER-2的IHC和FISH檢討論綜上所述，免疫組化法對(duì)于評(píng)價(jià)患者是否使用EGFR酪氨酸激酶抑制劑治療并非最佳的手段，但可作為篩選檢查。討論綜上所述，免疫組