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實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括主講陳艷麗繼續(xù)醫(yī)學教育課程實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括主講陳艷麗1生物安全基本理論知識基本概念防擴散是指在實驗室環(huán)境中處理、保存和管理傳染性物質(zhì)的安全方法,從而減少或者消除實驗室操作人員及實驗室周圍環(huán)境不受傳染性病原體的污染,可通過規(guī)范的微生物學技術和合理使用安全設備來實現(xiàn)。疫苗的使用也可增加對人員的保護。生物安全基本理論知識基本概念2基本概念二級防擴散,即保護實驗室的外界環(huán)境不受傳染性病原體的污染,這也需要通過良好的實驗室設計和操作技術實現(xiàn)。因此,防擴散的三個要素包括實驗室操作和技術、安全設備以及實驗室設計?;靖拍疃壏罃U散,即保護實驗室的外界環(huán)境不受傳染性病原體的3實驗室操作和技術防擴散最重要的方面是嚴格遵守標準微生物學操作規(guī)程,各實驗室應該制定或者采用一個生物安全操作手冊,對可能遇到的危險進行鑒定,并且明確為減少或者消滅這些暴露的危險所應該采取的措施和步驟。實驗室操作和技術防擴散最重要的方面是嚴格遵守標準微生物學操作4國內(nèi)發(fā)生的實驗室安全事件華東理工大學實驗室發(fā)生氯氣泄漏事件2005年04月29日10:05生活報本報訊28日13時許,華東理工大學8號實驗室的一個氯氣罐發(fā)生泄漏,造成4人當場受傷。傷者包括一名女學生和三名男教師,其中兩人傷勢比較嚴重,正在搶救,但無生命危險。(生活報)國內(nèi)發(fā)生的實驗室安全事件華東理工大學實驗室發(fā)生氯氣泄漏事件5國內(nèi)發(fā)生的實驗室安全事件四川大學化學實驗室發(fā)生氣體泄漏事件

9時35分,四川大學保衛(wèi)處接到2名工作人員報警:207號實驗室化學品發(fā)生泄漏!成都市消防支隊調(diào)派十一中隊和專門應對化學品泄漏搶險的特勤二中隊6臺搶險車趕往川大。搶險隊伍抵達川大時,學校已關閉研究中心整棟大樓的電閘,樓內(nèi)所有實驗室暫停使用,50余名工作人員全部撤離至樓外60米安全地帶。站在大樓門口,已能聞到一股淡淡的異味,“這是丁二烯的味道,它無毒不是很刺鼻,但極易燃燒爆炸,不要說明火了,就是相機快門都有可能引發(fā)爆炸?!毕拦俦嵝延锨皳屌牡臄z影記者。據(jù)校方一工作人員介紹,泄漏出丁二烯的一氣瓶閥門本來就有問題,昨天一大早技術人員修理氣瓶時,打開的閥門怎么也關不住了,這才導致了泄漏。國內(nèi)發(fā)生的實驗室安全事件四川大學化學實驗室發(fā)生氣體泄漏事件6實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括7實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括8英國口蹄疫暴發(fā)疑由于實驗室病毒泄漏導致?lián)氯A社電英國衛(wèi)生和安全管理局7日公布了有關英國薩里郡口蹄疫疫情的調(diào)查報告。報告說,這次疫情暴發(fā)可能是疫點附近兩個實驗室研究用的口蹄疫病毒因排污系統(tǒng)受損等泄漏而造成。英國衛(wèi)生和安全管理局首席執(zhí)行官杰弗里·波杰在記者招待會上說,薩里郡口蹄疫疫情源自這兩個實驗室,這“相當清楚”,但目前還不能查明是哪個實驗室。波杰說,調(diào)查發(fā)現(xiàn),這兩個實驗室共用的排污管道有破裂現(xiàn)象,很有可能含口蹄疫病毒的污水從裂口漏出污染了周圍土壤,其后經(jīng)過的車輛又將受污染的土壤帶到了外面的農(nóng)場,最終導致疫情暴發(fā)。他還說,今年7月當?shù)爻霈F(xiàn)的暴雨增加了病毒從排污管道中泄漏的可能性。今年8月初,英國薩里郡吉爾福德鎮(zhèn)一家農(nóng)場發(fā)生口蹄疫疫情。此后調(diào)查發(fā)現(xiàn),導致這次疫情的口蹄疫病毒與附近兩家實驗室中研究用的口蹄疫病毒類型相同。這兩個實驗室分別由英國動物衛(wèi)生研究所和梅里亞爾動物保健公司管理,都保存著用于科學研究的口蹄疫病毒。

英國口蹄疫暴發(fā)疑由于實驗室病毒泄漏導致?lián)氯A社電英國衛(wèi)生9中國疾控中心病毒病所161人解除觀察無人染非典新華網(wǎng)北京5月7日電(記者朱玉、李揚)7日下午3時,中國疾病預防控制中心病毒病所的161名工作人員走出了位于京郊的隔離點,按時解除了為期14天的醫(yī)學觀察,在這些人員中,無人繼發(fā)感染非典。

4月22日起,北京市、安徽省相續(xù)出現(xiàn)非典疫情。由于安徽非典患者及北京患者曾同在中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所實驗室工作,專家初步判定,此次疫情可能源于實驗室工作人員感染。23日下午3時,衛(wèi)生部責成北京市政府對可能已出現(xiàn)實驗室感染的中國疾控中心病毒病所采取隔離措施,在衛(wèi)生部和北京市的安排下,疾控中心病毒所中接觸可能被病原體污染區(qū)域的可疑暴露人員集中在京郊某度假山莊接受集中醫(yī)學觀察,同時全面進行流行病學調(diào)查,20余位非典患者的密切接觸者統(tǒng)一集中在北京胸科醫(yī)院隔離觀察,另有部分人員在有關區(qū)縣接受集中或分散醫(yī)學觀察。

由于非典疫情緊急,病毒病所的隔離人員甚至沒有來得及從家里拿出換洗衣服就被拉到了隔離地點。解除隔離之時,他們幾乎都穿著疾控中心送來的、在隔離后為他們集體購買的鮮艷運動服裝。

衛(wèi)生部常務副部長高強、北京市市長王岐山到京郊迎接隔離人員解除隔離。高強和王岐山高度贊揚了科研人員的大局觀念和勇敢獻身精神,高強還表示在病毒所今后的安全管理和健康檢查方面要改善管理,提高工作效率。

據(jù)悉,中國疾控中心病毒病所其余被隔離的人員,也將從明天起至10日陸續(xù)解除醫(yī)學觀察。(完)中國疾控中心病毒病所161人解除觀察無人染非典新華網(wǎng)北京510臺灣衛(wèi)生當局昨召開記者會,證實當?shù)匾幻行灾袠榆姽俑腥維ARS病毒。這是今冬全球發(fā)現(xiàn)的首個SARS患者,已引起中國大陸及國際社會關注。疑為實驗中不慎感染據(jù)悉,該患者是一名44歲的中樣,供職于臺灣軍方神秘機構“國防部預防醫(yī)學院所實驗室接觸過SARS病毒”;7日他前往新加坡開會,當時也未發(fā)燒,但在10日晚開始發(fā)燒。15日患者在醫(yī)院被診出感染SARS病毒,昨日已送往臺北和平醫(yī)院往院隔離。臺衛(wèi)生當局推測,該患者可能是5日在實驗室處理SARS病毒時不慎感染。臺衛(wèi)生當局發(fā)言人稱,16日,患者的喉頭方試劑,口水,血液,尿液檢驗都再度證實病人感染了SARS病毒。與患者有密切接觸的家人,包括其父、妻和兩名子女于15日晚被隔離。發(fā)言人說,雖然病人從感染到發(fā)病有7天時間,但因接觸人群較單純,去新加坡期間也未發(fā)病故除密切接觸的家外,包括與患難同赴新加坡開會的6人在內(nèi)的其他人員不必隔離。臺“國防預防醫(yī)學研究所“已暫時關閉,其擁有臺灣最頂尖的實驗設備,藏身于臺灣白雞山中。臺灣衛(wèi)生當局昨召開記者會,證實當?shù)匾幻行灾袠榆姽俑腥維AR11實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括12實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括13安全設備(初級屏障)

安全設備包括生物安全柜、密閉容器以及其他用以減少或者消除危險生物學材料暴露的設備。生物安全柜是在許多微生物學操作步驟中,用以防止液體飛濺物或者氣溶膠污染的主要設備。一級和二級生物安全柜為實驗室人員和環(huán)境提供了有效的初級保護屏障,安全設備(初級屏障)安全設備包括生物安全柜、密閉容器以及其14生物安全柜生物安全柜15實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括16實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括17實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括18安全設備(初級屏障)二級生物安全柜還能保護安全柜內(nèi)的物品(如細胞培養(yǎng)和微生物菌種)不受外界污染,具有氣密性的三級生物安全柜則為實驗室人員和外界環(huán)境提供了目前所能達到的最高水平的保護。安全設備(初級屏障)二級生物安全柜還能保護安全柜內(nèi)的物品(如19安全設備(初級屏障)安全離心杯是初級屏障的另一種常用設備,他是一種密閉的容器,用于防止離心過程中產(chǎn)生的傳染性氣溶膠發(fā)生擴散,為減少傳染性氣溶膠的擴散危害,在處理空氣傳播性傳染病病原體時,必須使用防擴散設備如生物安全柜或者離心杯。安全設備(初級屏障)安全離心杯是初級屏障的另一種常用設備,他20安全設備(初級屏障)安全設備還包括一些為實驗室人員提供保護的物品,如手套、外套、長實驗服、鞋套、靴子、防毒面具、面罩、護目鏡等安全設備(初級屏障)安全設備還包括一些為實驗室人員提供保護的21實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括22實驗設施的設計和建設(二級屏障)

良好的實驗設施設計和建設除了能保護實驗室人員,還能保護周圍社區(qū)的人或動物免受意外擴散的傳染性病原體的感染。實驗設施的設計和建設(二級屏障)良好的實驗設施設計和建設除23實驗設施的設計和建設(二級屏障)

采用何種二級屏障取決于對特定病原體傳播性的危險評估。直接與病原體的接觸,或通過污染的工作環(huán)境不小心接觸到病原體。這些實驗室的二級屏障包括:將實驗室工作區(qū)與公共通道分開;滅菌設施(如高壓滅菌倉)以及洗手設施。實驗設施的設計和建設(二級屏障)采用何種二級屏障取決于對24實驗設施的設計和建設(二級屏障)

當存在接觸傳染性氣溶膠發(fā)生感染的危險時,就必須采用更高水平的初級防擴散措施和更多的二級屏障,以防止傳染性病原體向環(huán)境擴散。包括特殊通風系統(tǒng)、空氣處理系統(tǒng)、受控的人員活動區(qū)和氣壓過渡艙。實驗設施的設計和建設(二級屏障)當存在接觸傳染性氣溶膠發(fā)生25實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括26實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括27實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括28實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括29病原體及生物安全程度分級對于操作一種特定的病原體,根據(jù)病原體或毒素的毒力、致病性、生物穩(wěn)定性、傳播途徑,病原體的傳染性,實驗室的性質(zhì)或職能,涉及病原體的操作步驟和方法,病原體的地方流行性,有效的疫苗和治療方法的可用性來確定安全程度分級。病原體及生物安全程度分級對于操作一種特定的病原體,根據(jù)病原體30國家對實驗室安全的要求國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準,實驗室應該符合國家的標準和要求實驗室的設立單位及其主管部門負責實驗室日?;顒拥墓芾恚袚⒔∪踩芾碇贫?,檢查、維護實驗設施、設備。控制實驗感染的職責國家對實驗室安全的要求國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準,實驗31病原微生物的分類和管理根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度,將病原微生物分為四級:第一類病原微生物是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物,以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類病原微生物是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物或者動物之間傳播的微生物。病原微生物的分類和管理根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或32病原微生物的分類和管理第三類病原微生物,是指能夠引起人或者動物疾病,但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構成嚴重危害,傳播風險有限,實驗室感染后很少引起嚴重疾病,并且具備有效的治療和預防措施的微生物。第四類病原微生物是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物第一、第二類病原微生物通稱高致病性病原微生物。病原微生物的分類和管理第三類病原微生物,是指能夠引起人或者動33采集病原微生物樣本具備的條件具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護水平相適應的設備具有掌握相關專業(yè)知識和操作技能的工作人員具有有效的防止病原微生物擴散和感染的措施具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術方法和手段。對樣本的來源、采集過程和方法等作詳細記錄采集病原微生物樣本具備的條件具有與采集病原微生物樣本所需要的34炭疽桿菌任何操作炭疽桿菌的工作都要求特殊安全考慮,因為它可能會被用于生物恐怖主義活動。自然及實驗感染的動物對實驗室人員及動物飼養(yǎng)員會造成潛在的威脅。炭疽桿菌任何操作炭疽桿菌的工作都要求特殊安全考慮,因為它可能35

實驗室危害

這種病原體可以存在于血液、傷口滲出物、腦脊液、胸水和痰液中,極少存在于尿液和糞便中。完整或破損的皮膚直接和間接接觸培養(yǎng)物、污染的實驗室臺面、意外的胃腸道外接種、以及在將少情況下接觸有傳染性的氣溶膠等是對實驗室人員的主要危害。實驗室危害這種病原體可以存在于血液、傷口滲出物、腦脊液、36推薦的預防措施

建議在使用臨床樣本的實驗操作及感染性培養(yǎng)物的定量診斷中,應用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。建議采用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。對于涉及“生產(chǎn)數(shù)量或濃度”的培養(yǎng)物的工作,以及產(chǎn)生氣溶膠可能性較高的實驗操作,建議采用BSL—3級水平的操作技術、防擴散設備和設施。推薦的預防措施建議在使用臨床樣本的實驗操作及感染性培養(yǎng)物的37推薦的預防措施

有可預防的疫苗,除了經(jīng)常操作臨床樣本或培養(yǎng)物的人員,不推薦對所有實驗室人員進行免疫。建議應用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。推薦的預防措施有可預防的疫苗,除了經(jīng)常操作臨床樣本或培養(yǎng)物38布氏桿菌屬

這種病原體可以存在于血液、腦脊液和精液中,有時也可存在于尿液中。大部分實驗室相關性感染發(fā)生在研究機構,主要是由于接觸了大量生長的布氏桿菌。對于操作含有或可能含有致病性布氏桿菌的人類或動物的臨床樣本的工作,建議應用BSL—2級水平的操作技術。布氏桿菌屬這種病原體可以存在于血液、腦脊液和精液中,有時也39破傷風桿菌實驗室危害意外的胃腸道外接種和攝入破傷風毒素是對實驗室人員的主要危害。推薦的預防措施對于涉及操作培養(yǎng)物或毒素的工作,建議采用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。破傷風桿菌實驗室危害意外的胃腸道外接種和攝入破傷風毒素是40白喉棒狀桿菌實驗室危害這種病原體可以存在于鼻、咽喉部(扁桃體)、咽部、喉部和傷口滲出或分泌物中,也可存在于血液中及皮膚上。吸入、意外的胃腸道外接種以及攝入是這種病原體主要的實驗室危害。推薦的預防措施建議應用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。白喉棒狀桿菌實驗室危害這種病原體可以存在于鼻、咽喉部(扁41結核分枝桿菌、牛型結核分歧桿菌

對實驗室人員以及其他可能暴露在實驗室傳染性氣溶膠中的人員是一種危害。實驗室危害暴露在傳染性氣溶膠中是最主要的危害。結核分枝桿菌、牛型結核分歧桿菌對實驗室人員以及其他可能暴露42結核分枝桿菌

推薦的預防措施對于不產(chǎn)生氣溶膠的臨床樣本的操作,如準備制酸涂片,需要采用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。所有可能產(chǎn)生氣溶膠的實驗操作也必須在二級生物安全柜中進行。結核分枝桿菌推薦的預防措施對于不產(chǎn)生氣溶膠的臨床樣本43鼠疫桿菌

對于涉及處理可能具有感染性的臨床樣本和培養(yǎng)物的實驗操作,建議采用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。鼠疫桿菌對于涉及處理可能具有感染性的臨床樣本和培養(yǎng)物的實驗44實驗室生物安全等級標準

一級和二級生物安全標準

診斷和衛(wèi)生保健實驗室(以公共衛(wèi)生、臨床或醫(yī)院為基礎的)必須設計為二級或更高級生物安全水平。由于沒有一種實驗室能夠完全地控制其所接受的樣品,實驗室的操作人員可能會偶爾和意外地暴露于比預期更高危險度的微生物。因此,在制定生物安全計劃和政策時要注意到這種可能性。在某些國家,臨床實驗室必須要經(jīng)過鑒定授權。全世界范圍都應采納并實行生物安全預防的普遍原則。實驗室生物安全等級標準一級和二級生物安全標準45準入規(guī)定(1)在處理危險度2級或更高危險度級別的微生物時,在房間門上應標有國際通用的生物危害警告標志。(2)只有經(jīng)批準的人員方可進入實驗室工作區(qū)域。(3)實驗室的門應隨時關閉。(4)16歲以下人員不應當被批準或允許進入實驗室工作區(qū)域。(5)進入動物房應當經(jīng)過特別批準。(6)與實驗室工作無關的動物不許帶入實驗室。(7)應當在實驗室內(nèi)外清楚地張貼“禁止吸煙”、“禁止進食”以及“禁止喝水”的標志。準入規(guī)定(1)在處理危險度2級或更高危險度級別的微生物時,在46個體防護(1)在生物安全實驗室工作時,任何時候都必須穿著連體衣、隔離服或制服。(2)在進行可能直接或意外接觸到血液樣品、感染性物質(zhì)或感染性動物的操作時,應當戴合適的手套。用完后,應先消毒再摘除手套,然后必須再次洗手。(3)在處理完感染性實驗材料和動物后,以及在離開實驗室工作區(qū)域前,都必須洗手。(4)為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害,必須戴安全眼鏡、面罩(面具)或其他防護設備。個體防護(1)在生物安全實驗室工作時,任何時候都必須穿著連體47個體防護(5)嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室,如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間。(6)不應在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。(7)禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、化妝和清洗隱形眼鏡。(8)禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。(9)實驗室內(nèi)的防護服不應當和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。個體防護(5)嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室,如去餐廳、咖啡48操作規(guī)程(1)嚴禁用口吸移液管。(2)嚴禁將實驗材料置于口內(nèi),嚴禁舔標簽。(3)所有的技術操作要按盡量減少氣溶膠和液滴形成的方式來進行。生成氣溶膠的可能性增大時,應在生物安全柜中進行操作。(4)應限制使用皮下注射針和注射器。除了進行腸道外注射或抽取實驗動物體液,皮下注射針和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。操作規(guī)程(1)嚴禁用口吸移液管。49操作規(guī)程(5)出現(xiàn)溢出事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時,必須要向?qū)嶒炇抑鞴軋蟾?。實驗室應保存這些事件或事故的書面報告。(6)必須制定關于如何處理溢出物的書面操作規(guī)程,并予以遵守執(zhí)行。操作規(guī)程(5)出現(xiàn)溢出事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時,50實驗室工作區(qū)(1)實驗室應保持干凈整潔,和實驗無關的物品嚴禁擺放在內(nèi)。(2)發(fā)生具有潛在危險性的材料溢出以及在每天工作結束之后,都必須要清除工作臺面的污染。(3)所有受到污染的材料、樣品和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前,必須清除污染。(4)在進行包裝和運轉時必須要遵循國家和/或國際的相關規(guī)定。(5)如果窗戶可以打開,則應安裝可防止節(jié)肢動物進入的紗窗。實驗室工作區(qū)(1)實驗室應保持干凈整潔,和實驗無關的物品嚴禁51生物安全管理(1)實驗室主任(對實驗室直接負責的人員)負責制定和采用生物安全管理計劃、安全或操作手冊。(2)實驗室主管(向?qū)嶒炇抑魅螀R報)應當保證提供常規(guī)的實驗室安全培訓。(3)要將生物安全實驗室的特殊危害告知實驗室人員,同時要求他們熟讀生物安全或操作手冊,并遵循標準的操作和規(guī)程。實驗室主管應當確保所有實驗室人員都了解這些要求。實驗室內(nèi)應備有安全或操作手冊。生物安全管理(1)實驗室主任(對實驗室直接負責的人員)負責制52生物安全管理(4)在適當?shù)那闆r下,應當制定節(jié)肢動物和嚙齒動物的控制方案。(5)如果需要的話,應當為所有實驗室人員提供適宜的醫(yī)學評估、監(jiān)測和治療,應當保存相應的醫(yī)學資料。(6)對于實驗室人員和其他存在危險的人員,應當采集本底血清樣品,同時按照國家和地方的相關規(guī)定加以適當保存。根據(jù)所操作的微生物和實驗室的運行情況,可定期收集其他樣品。生物安全管理(4)在適當?shù)那闆r下,應當制定節(jié)肢動物和嚙齒動物53實驗室的設計和設施在設計實驗室和安排具體的實驗工作時,對于那些可能造成安全問題的情況要加以特別關注,這些情況包括:—氣溶膠的形成—處理大量和/或高濃度微生物—人員和儀器設備過多—嚙齒動物和節(jié)肢動物的孽生—未經(jīng)允許人員進入實驗室—工作流程:一些特殊樣品和試劑的使用實驗室的設計和設施在設計實驗室和安排具體的實驗工作時,對于那54設計特征(1)必須要為實驗室安全運行、清潔和維護提供充足的空間。(2)實驗室墻壁、天花板和地板應當光滑、易清潔、不滲液以及耐化學品和消毒劑的腐蝕。地板應當防滑,同時應盡可能地避免管線暴露在外和有積塵。(3)實驗臺面應密封成一體,不滲液,可耐消毒劑、酸、堿和有機溶劑的腐蝕,并能中等程度耐熱。(4)應保證實驗室內(nèi)操作時間的照明,避免不必要的反光和閃光。設計特征(1)必須要為實驗室安全運行、清潔和維護提供充足的空55設計特征(5)實驗室器具應當堅固耐用,在實驗臺、生物安全柜和其他設備之間及其下面要保證有足夠的空間以供清潔衛(wèi)生。(6)應當有足夠的儲存空間來擺放隨時使用的物品,以免在實驗臺和走廊內(nèi)造成混亂。還應當在實驗室工作區(qū)外提供其他可長期使用的儲存空間。(7)應當為安全地操作及儲存溶劑、放射性物質(zhì)提供足夠的空間和設施。(8)在實驗室的工作區(qū)外應當有存放外衣和私人物品的設施。設計特征(5)實驗室器具應當堅固耐用,在實驗臺、生物安全柜和56設計特征(9)在實驗室的工作區(qū)外應當有進食、飲水和休息的場所。(10)每個實驗室都應有洗手池,應盡可能采用沖洗,洗手池最好安裝在出口處。(11)實驗室的門應有可視窗,可以自動關閉,并達到適當?shù)姆阑鸬燃?。?2)在實驗室所在的建筑內(nèi)應當配備高壓滅菌器。(13)安全系統(tǒng)應當包括消防、應急供電、應急淋浴以及洗眼設施。設計特征(9)在實驗室的工作區(qū)外應當有進食、飲水和休息的場所57設計特征(14)應當配備具有適當裝備并易于進入的急救區(qū)或急救室。(15)在處理危險度1級和2級的微生物時,實驗室不需特殊的通風設備。但是在設計新的設施時,應當考慮要設置機械通風系統(tǒng),如果沒有機械通風系統(tǒng),那么實驗室窗戶應當能夠打開,同時要安裝防蟲的紗窗。(16)必須要為實驗室提供可靠和高質(zhì)量的水。要保證實驗室和飲用水的供應管道沒有交叉連接。應當安裝止回閥(anti—backflowdevice)來保護公共飲水系統(tǒng)。設計特征(14)應當配備具有適當裝備并易于進入的急救區(qū)或急救58設計特征(17)要有可靠和充足的電力供應和應急照明,以保證人員安全離開實驗室。備用發(fā)電機對于保證重要設備的正常運轉,如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等,以及動物籠具的通風都是必要的。設計特征(17)要有可靠和充足的電力供應和應急照明,以保證人59設計特征(18)污染物品的處理方面有以下三點應當注意,以保證滿足實驗室運轉和控制污染的要求:—用于處理固體廢物的高壓滅菌器應當經(jīng)過專門設計安裝,同時要加強維護—焚燒爐也應當經(jīng)過特殊設計,同時應配備有補燃和消煙設備?!廴镜膹U水必須要經(jīng)過消毒(19)實驗室和動物房偶爾會成為某些人惡意破壞的目標。必須考慮進行物理防護和防火,必須使用堅固的門、紗窗以及門禁系統(tǒng)。適當時還應使用其他措施來加強安全防范。設計特征(18)污染物品的處理方面有以下三點應當注意,以保證60實驗室設備

—在設計上應能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸?!梅浪?、耐腐蝕并符合結構要求的材料來制造?!瞥善窇獰o毛刺、銳角以及會被無意移動的部分?!O備的設計、建造與安裝應便于操作、易于維護、清潔、清除污染和質(zhì)量檢驗。應盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。實驗室設備—在設計上應能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的61

基本生物安全設施

(1)移液輔助器—避免用口吸的方式移液。有設計不同的多種產(chǎn)品可供使用。(2)生物安全柜,在以下情況使用:—處理感染性物質(zhì);如果使用密閉的安全離心杯,并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣,則這類材料也可在實驗室的開放空間離心—空氣傳播感染的危險增大時—進行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時;這些操作包括離心、研磨、混勻、劇烈搖動、超聲破碎、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器、動物鼻腔接種以及從動物或卵胚采集感染性組織基本生物安全設施(1)移液輔助器—避免用口吸的方式移液。62基本生物安全設施(3)一次性塑料接種環(huán),也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán),以降低氣溶膠的產(chǎn)生。(4)螺口試管及瓶子。(5)用于清除感染性物質(zhì)污染的高壓滅菌器。(6)盡量使用一次性塑料吸管,避免使用玻璃制品。(7)在投入使用前,像高壓滅菌器和生物安全柜等設備必須用正確方法進行驗收(通常應由有資質(zhì)的人員進行)。應參照生產(chǎn)商的說明書定期重檢。基本生物安全設施(3)一次性塑料接種環(huán),也可在生物安全柜內(nèi)使63衛(wèi)生保健和醫(yī)學監(jiān)測

實驗室有責任通過實驗室主任來確保實驗室全體工作人員接受適當?shù)慕】当O(jiān)測。監(jiān)測的目的是監(jiān)控職業(yè)獲得性疾病。為達到這些目的,應進行如下工作:—根據(jù)需要提供主動或被動免疫—促進實驗室感染的早期檢測—應禁止高敏感人群(如孕婦)在高危險實驗室中工作—提供有效的個體防護裝備和方法衛(wèi)生保健和醫(yī)學監(jiān)測實驗室有責任通過實驗室主任來確保實驗室全64操作危險度1級微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南

歷史證據(jù)表明,這類微生物不太可能引起人類疾病或嚴重的動物疾病。但理想的做法是所有實驗室工作人員進行上崗前的體檢,并記錄其病史。疾病和實驗室意外事故應快速報告,所有工作人員都應意識到應用規(guī)范的實驗室操作技術的重要性。操作危險度1級微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南歷史證據(jù)表明65操作危險度2級微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南(1)必須有錄用前或上崗前的體檢。記錄個人病史,并建議進行一次臨床檢查,保留本底血清樣本。(2)實驗室管理人員要保留工作人員的疾病和缺勤紀錄,實驗室工作人員及其醫(yī)學顧問有責任通知實驗室主任所有因疾病而導致的缺勤。(3)育齡期婦女應知道某些微生物的職業(yè)暴露對未出生孩子的危害,如風疹病毒。保護胎兒的正確措施因婦女所接觸的微生物而異。操作危險度2級微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南(1)必須有錄66廢物處理

廢物是實驗室中將丟棄的所有物品在實驗室內(nèi),廢物最終的處理方式與其污染清除的情況是緊密相關的。對于日常用品而言,很少有污染物需要真正清除出實驗室或銷毀。大多數(shù)的玻璃器皿、儀器以及實驗服都可以重復或循環(huán)使用。廢物處理的首要原則是所有感染性物質(zhì)必須在實驗室內(nèi)清除污染、高壓滅菌或焚燒。廢物處理廢物是實驗室中將丟棄的所有物品67被丟棄前應考慮以下主要問題:是否已采取規(guī)定程序?qū)@些物品進行了有效的清除污染或消毒?如果沒有,它們是否以規(guī)定的方式包裹,以便就地焚燒或運送到其他有焚燒能力的設施處進行處理?丟棄已清除污染的物品時,是否會對直接參與丟棄的人員,或在設施外可能接觸到丟棄物的人員造成任何潛在的生物學或其他方面的危害?被丟棄前應考慮以下主要問題:是否已采取規(guī)定程序?qū)@些物品進行68清除污染高壓滅菌是清除污染時的首選方法。需要清除污染并丟棄的物品應裝在容器(如可以高壓滅菌的塑料袋)中,并根據(jù)內(nèi)容物是否需要進行高壓滅菌和/或焚燒用顏色進行標記。其他可以除去和/或殺滅微生物的替代方法也可采用。清除污染高壓滅菌是清除污染時的首選方法。需要清除污染并丟棄的69消毒劑和化學試劑安全或操作手冊中應有針對不同的目的如何使用消毒劑的書面說明,以及每種消毒劑的生產(chǎn)廠家所推薦的稀釋度。生產(chǎn)商應提供相關文件。要確保每種消毒劑在實驗室內(nèi)具有其指明的作用。對于一般的實驗室消毒,推薦使用次氯酸鈉和酚類化合物等消毒劑。對于特殊途徑,只要已經(jīng)證明病原體對其敏感,則也可以采用各種表面活性劑和脂質(zhì)破壞劑,包括乙醇、碘酒、碘伏及其他氧化劑,以及很高或極低pH條件。消毒劑和化學試劑安全或操作手冊中應有針對不同的目的如何使用消70其他方法不推薦使用干熱法滅菌,因為此方法的效果難以預測。同樣,微波、紫外線和電離輻射也不適用。有些新技術,如堿水解,可作為焚燒的替代方法用于感染性廢物的最終處理。其他方法不推薦使用干熱法滅菌,因為此方法的效果難以預測。同樣71廢物處理和丟棄程序感染性物質(zhì)及其包裝物要使用識別、分離系統(tǒng),包括以下類別:可重復或再循環(huán)使用,或按普通“家庭”廢物丟棄的非污染(非感染性)廢物。污染(感染性)銳器——皮下注射用針頭、手術刀、刀子及破碎玻璃;這些廢物應收集在帶蓋的防刺破容器內(nèi),并按感染性物質(zhì)處理。通過高壓滅菌并清洗來清除污染后重復或循環(huán)使用的污染物。高壓滅菌后廢棄的污染物直接焚燒的污染物廢物處理和丟棄程序感染性物質(zhì)及其包裝物要使用識別、分離系統(tǒng),72銳器皮下注射針頭用過后不應再重復使用,包括不能從注射器上取下、重新帶護套、截斷等,應將其完整地置于盛放銳器的容器中,盛放銳器的容器必須是不易刺破的,而且不能將容器裝得過滿。當達到容量的四分之三時,應將其放入“感染性廢物”的容器中進行焚燒,如果實驗室規(guī)程需要,可以先進行高壓滅菌處理。盛放銳器的容器絕對不能在垃圾場處理。銳器皮下注射針頭用過后不應再重復使用,包括不能從注射器上取73高壓滅菌后重復使用的污染物(感染物)任何高壓滅菌后重復使用的污染物(感染物)不應事先清洗,任何必要的清洗、修復必須在高壓滅菌或消毒后進行。高壓滅菌后重復使用的污染物(感染物)任何高壓滅菌后重復使用的74廢棄的污染物(感染物)除了銳器按上面的方法進行處理以外,所有其他污染物(有潛在感染性)在丟棄前應放置在防滲漏的容器(如有顏色標記的可高壓滅菌塑料袋)中高壓滅菌。高壓滅菌后,物品可以放在運輸容器中運送至焚燒爐。如果可能,即使在消除污染后,廢棄物也不應丟棄到垃圾場。如果實驗室中配有焚燒爐,則可以免去高壓滅菌:污染物應放在指定的容器(如有顏色標記的袋子)內(nèi)直接運送到高壓滅菌器或焚燒爐中??芍貜褪褂玫倪\輸容器應是防滲漏的,有密閉的蓋。這些容器在送回實驗室再次使用前,應進行消毒清潔。廢棄的污染物(感染物)除了銳器按上面的方法進行處理以外,所有75廢棄的污染物(感染物)除了銳器按上面的方法進行處理以外,所有其他污染物(有潛在感染性)在丟棄前應放置在防滲漏的容器(如有顏色標記的可高壓滅菌塑料袋)中高壓滅菌。高壓滅菌后,物品可以放在運輸容器中運送至焚燒爐。如果可能,即使在消除污染后,衛(wèi)生保健單位的廢棄物也不應丟棄到垃圾場。如果實驗室中配有焚燒爐,則可以免去高壓滅菌:污染物應放在指定的容器(如有顏色標記的袋子)內(nèi)直接運送到高壓滅菌器或焚燒爐中??芍貜褪褂玫倪\輸容器應是防滲漏的,有密閉的蓋。在這些容器在送回實驗室再次使用前,應進行消毒清潔。廢棄的污染物(感染物)除了銳器按上面的方法進行處理以外,所有76廢棄的污染物(感染物)應在每個工作臺上放置盛放廢物的罐子、盤子或瓶子,最好是不易破碎的容器(如塑料制品),并盛有每日新鮮配制的適宜消毒劑。應使廢物充分接觸消毒劑(即不能有氣泡阻隔),并根據(jù)所使用消毒劑的不同持續(xù)適當時間。廢棄的污染物(感染物)應在每個工作臺上放置盛放廢物的罐子、盤77廢棄的污染物(感染物)焚燒是對包括實驗動物尸體等的污染物進行最終處理的方法之一。污染物焚燒必須得到公共衛(wèi)生、環(huán)保部門以及實驗室生物安全官員的批準廢棄的污染物(感染物)焚燒是對包括實驗動物尸體等的污染物進行78化學、火、電及輻射安全

化學、火、電或輻射事故可以間接導致病原微生物屏障系統(tǒng)的破壞。因此,所有微生物實驗室在這些方面必須堅持很高的安全標準?;瘜W、火、電及輻射安全化學、火、電或輻射事故可以間接導致病79實驗室微生物操作技術規(guī)范(一)樣品容器樣品容器可以是玻璃的,但最好使用塑料制品。樣品容器應當堅固,正確地使用蓋子或塞子蓋好后應無泄漏。在容器外部不能有殘留物。容器上應當正確地張貼標簽以便于識別。實驗室微生物操作技術規(guī)范(一)樣品容器80實驗室微生物操作技術規(guī)范(二)樣品在設施內(nèi)的傳遞為了避免意外的泄漏或溢出,應當使用盒子等二級容器。二級容器可以是金屬或塑料制品,應該可以耐高壓滅菌或耐受化學消毒劑的作用。(三)樣品接收需要接收大量樣品的實驗室應當指定專門的房間或空間。實驗室微生物操作技術規(guī)范(二)樣品在設施內(nèi)的傳遞81實驗室微生物操作技術規(guī)范

(四)打開包裝接收和打開樣品的人員應當了解樣品對身體健康的潛在危害,樣品要在生物安全柜內(nèi)打開,并準備好消毒劑。實驗室微生物操作技術規(guī)范(四)打開包裝82實驗室微生物操作技術規(guī)范移液管和移液輔助器的使用應使用移液輔助器,所有移液管應帶有棉塞,以減少移液器具的污染。不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體。感染性物質(zhì)不能夠用移液管反復吹吸混合。不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。盛放廢棄移液管的容器應當放在生物安全柜內(nèi),而不能放在外面實驗室微生物操作技術規(guī)范移液管和移液輔助器的使用83實驗室微生物操作技術規(guī)范避免感染性物質(zhì)的食入以及皮膚和眼睛的接觸微生物操作中釋放的較大粒子和液滴(直徑大于5μm)會迅速沉降到工作臺面和操作者的手上。實驗室人員在操作時應戴一次性手套,并避免觸摸口、眼及面部。不能在實驗室內(nèi)飲食和儲存食品。不應在實驗室嚼口香糖。不應在實驗室化妝。在所有可能產(chǎn)生潛在感染性物質(zhì)噴濺的操作過程中,操作人員應將面部、口和眼遮住或采取其他防護措施。實驗室微生物操作技術規(guī)范避免感染性物質(zhì)的食入以及皮膚和眼睛的84實驗室微生物操作技術規(guī)范避免感染性物質(zhì)的注入通過認真練習和仔細操作,可以避免破碎玻璃器皿的意外刺傷。盡可能用塑料制品代替玻璃制品。皮下注射針頭、玻璃吸管以及破碎的玻璃均可能將感染性物質(zhì)注入體內(nèi)。實驗室微生物操作技術規(guī)范避免感染性物質(zhì)的注入85避免感染性物質(zhì)的注入

以下兩點可以減少針刺事故:①注射時特別小心,②減少使用注射器和針頭;不要重新給用過的針頭戴護套。一次性注射器用完后,如有可能,不必將針頭從注射器上取下,應丟棄在防穿透的帶蓋容器中。應當用塑料吸管代替玻璃吸管。避免感染性物質(zhì)的注入

以下兩點可以減少針刺事故:①注射時特別86

謝謝謝謝87實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括主講陳艷麗繼續(xù)醫(yī)學教育課程實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括主講陳艷麗88生物安全基本理論知識基本概念防擴散是指在實驗室環(huán)境中處理、保存和管理傳染性物質(zhì)的安全方法,從而減少或者消除實驗室操作人員及實驗室周圍環(huán)境不受傳染性病原體的污染,可通過規(guī)范的微生物學技術和合理使用安全設備來實現(xiàn)。疫苗的使用也可增加對人員的保護。生物安全基本理論知識基本概念89基本概念二級防擴散,即保護實驗室的外界環(huán)境不受傳染性病原體的污染,這也需要通過良好的實驗室設計和操作技術實現(xiàn)。因此,防擴散的三個要素包括實驗室操作和技術、安全設備以及實驗室設計?;靖拍疃壏罃U散,即保護實驗室的外界環(huán)境不受傳染性病原體的90實驗室操作和技術防擴散最重要的方面是嚴格遵守標準微生物學操作規(guī)程,各實驗室應該制定或者采用一個生物安全操作手冊,對可能遇到的危險進行鑒定,并且明確為減少或者消滅這些暴露的危險所應該采取的措施和步驟。實驗室操作和技術防擴散最重要的方面是嚴格遵守標準微生物學操作91國內(nèi)發(fā)生的實驗室安全事件華東理工大學實驗室發(fā)生氯氣泄漏事件2005年04月29日10:05生活報本報訊28日13時許,華東理工大學8號實驗室的一個氯氣罐發(fā)生泄漏,造成4人當場受傷。傷者包括一名女學生和三名男教師,其中兩人傷勢比較嚴重,正在搶救,但無生命危險。(生活報)國內(nèi)發(fā)生的實驗室安全事件華東理工大學實驗室發(fā)生氯氣泄漏事件92國內(nèi)發(fā)生的實驗室安全事件四川大學化學實驗室發(fā)生氣體泄漏事件

9時35分,四川大學保衛(wèi)處接到2名工作人員報警:207號實驗室化學品發(fā)生泄漏!成都市消防支隊調(diào)派十一中隊和專門應對化學品泄漏搶險的特勤二中隊6臺搶險車趕往川大。搶險隊伍抵達川大時,學校已關閉研究中心整棟大樓的電閘,樓內(nèi)所有實驗室暫停使用,50余名工作人員全部撤離至樓外60米安全地帶。站在大樓門口,已能聞到一股淡淡的異味,“這是丁二烯的味道,它無毒不是很刺鼻,但極易燃燒爆炸,不要說明火了,就是相機快門都有可能引發(fā)爆炸。”消防官兵提醒欲上前搶拍的攝影記者。據(jù)校方一工作人員介紹,泄漏出丁二烯的一氣瓶閥門本來就有問題,昨天一大早技術人員修理氣瓶時,打開的閥門怎么也關不住了,這才導致了泄漏。國內(nèi)發(fā)生的實驗室安全事件四川大學化學實驗室發(fā)生氣體泄漏事件93實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括94實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括95英國口蹄疫暴發(fā)疑由于實驗室病毒泄漏導致?lián)氯A社電英國衛(wèi)生和安全管理局7日公布了有關英國薩里郡口蹄疫疫情的調(diào)查報告。報告說,這次疫情暴發(fā)可能是疫點附近兩個實驗室研究用的口蹄疫病毒因排污系統(tǒng)受損等泄漏而造成。英國衛(wèi)生和安全管理局首席執(zhí)行官杰弗里·波杰在記者招待會上說,薩里郡口蹄疫疫情源自這兩個實驗室,這“相當清楚”,但目前還不能查明是哪個實驗室。波杰說,調(diào)查發(fā)現(xiàn),這兩個實驗室共用的排污管道有破裂現(xiàn)象,很有可能含口蹄疫病毒的污水從裂口漏出污染了周圍土壤,其后經(jīng)過的車輛又將受污染的土壤帶到了外面的農(nóng)場,最終導致疫情暴發(fā)。他還說,今年7月當?shù)爻霈F(xiàn)的暴雨增加了病毒從排污管道中泄漏的可能性。今年8月初,英國薩里郡吉爾福德鎮(zhèn)一家農(nóng)場發(fā)生口蹄疫疫情。此后調(diào)查發(fā)現(xiàn),導致這次疫情的口蹄疫病毒與附近兩家實驗室中研究用的口蹄疫病毒類型相同。這兩個實驗室分別由英國動物衛(wèi)生研究所和梅里亞爾動物保健公司管理,都保存著用于科學研究的口蹄疫病毒。

英國口蹄疫暴發(fā)疑由于實驗室病毒泄漏導致?lián)氯A社電英國衛(wèi)生96中國疾控中心病毒病所161人解除觀察無人染非典新華網(wǎng)北京5月7日電(記者朱玉、李揚)7日下午3時,中國疾病預防控制中心病毒病所的161名工作人員走出了位于京郊的隔離點,按時解除了為期14天的醫(yī)學觀察,在這些人員中,無人繼發(fā)感染非典。

4月22日起,北京市、安徽省相續(xù)出現(xiàn)非典疫情。由于安徽非典患者及北京患者曾同在中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所實驗室工作,專家初步判定,此次疫情可能源于實驗室工作人員感染。23日下午3時,衛(wèi)生部責成北京市政府對可能已出現(xiàn)實驗室感染的中國疾控中心病毒病所采取隔離措施,在衛(wèi)生部和北京市的安排下,疾控中心病毒所中接觸可能被病原體污染區(qū)域的可疑暴露人員集中在京郊某度假山莊接受集中醫(yī)學觀察,同時全面進行流行病學調(diào)查,20余位非典患者的密切接觸者統(tǒng)一集中在北京胸科醫(yī)院隔離觀察,另有部分人員在有關區(qū)縣接受集中或分散醫(yī)學觀察。

由于非典疫情緊急,病毒病所的隔離人員甚至沒有來得及從家里拿出換洗衣服就被拉到了隔離地點。解除隔離之時,他們幾乎都穿著疾控中心送來的、在隔離后為他們集體購買的鮮艷運動服裝。

衛(wèi)生部常務副部長高強、北京市市長王岐山到京郊迎接隔離人員解除隔離。高強和王岐山高度贊揚了科研人員的大局觀念和勇敢獻身精神,高強還表示在病毒所今后的安全管理和健康檢查方面要改善管理,提高工作效率。

據(jù)悉,中國疾控中心病毒病所其余被隔離的人員,也將從明天起至10日陸續(xù)解除醫(yī)學觀察。(完)中國疾控中心病毒病所161人解除觀察無人染非典新華網(wǎng)北京597臺灣衛(wèi)生當局昨召開記者會,證實當?shù)匾幻行灾袠榆姽俑腥維ARS病毒。這是今冬全球發(fā)現(xiàn)的首個SARS患者,已引起中國大陸及國際社會關注。疑為實驗中不慎感染據(jù)悉,該患者是一名44歲的中樣,供職于臺灣軍方神秘機構“國防部預防醫(yī)學院所實驗室接觸過SARS病毒”;7日他前往新加坡開會,當時也未發(fā)燒,但在10日晚開始發(fā)燒。15日患者在醫(yī)院被診出感染SARS病毒,昨日已送往臺北和平醫(yī)院往院隔離。臺衛(wèi)生當局推測,該患者可能是5日在實驗室處理SARS病毒時不慎感染。臺衛(wèi)生當局發(fā)言人稱,16日,患者的喉頭方試劑,口水,血液,尿液檢驗都再度證實病人感染了SARS病毒。與患者有密切接觸的家人,包括其父、妻和兩名子女于15日晚被隔離。發(fā)言人說,雖然病人從感染到發(fā)病有7天時間,但因接觸人群較單純,去新加坡期間也未發(fā)病故除密切接觸的家外,包括與患難同赴新加坡開會的6人在內(nèi)的其他人員不必隔離。臺“國防預防醫(yī)學研究所“已暫時關閉,其擁有臺灣最頂尖的實驗設備,藏身于臺灣白雞山中。臺灣衛(wèi)生當局昨召開記者會,證實當?shù)匾幻行灾袠榆姽俑腥維AR98實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括99實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括100安全設備(初級屏障)

安全設備包括生物安全柜、密閉容器以及其他用以減少或者消除危險生物學材料暴露的設備。生物安全柜是在許多微生物學操作步驟中,用以防止液體飛濺物或者氣溶膠污染的主要設備。一級和二級生物安全柜為實驗室人員和環(huán)境提供了有效的初級保護屏障,安全設備(初級屏障)安全設備包括生物安全柜、密閉容器以及其101生物安全柜生物安全柜102實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括103實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括104實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括105安全設備(初級屏障)二級生物安全柜還能保護安全柜內(nèi)的物品(如細胞培養(yǎng)和微生物菌種)不受外界污染,具有氣密性的三級生物安全柜則為實驗室人員和外界環(huán)境提供了目前所能達到的最高水平的保護。安全設備(初級屏障)二級生物安全柜還能保護安全柜內(nèi)的物品(如106安全設備(初級屏障)安全離心杯是初級屏障的另一種常用設備,他是一種密閉的容器,用于防止離心過程中產(chǎn)生的傳染性氣溶膠發(fā)生擴散,為減少傳染性氣溶膠的擴散危害,在處理空氣傳播性傳染病病原體時,必須使用防擴散設備如生物安全柜或者離心杯。安全設備(初級屏障)安全離心杯是初級屏障的另一種常用設備,他107安全設備(初級屏障)安全設備還包括一些為實驗室人員提供保護的物品,如手套、外套、長實驗服、鞋套、靴子、防毒面具、面罩、護目鏡等安全設備(初級屏障)安全設備還包括一些為實驗室人員提供保護的108實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括109實驗設施的設計和建設(二級屏障)

良好的實驗設施設計和建設除了能保護實驗室人員,還能保護周圍社區(qū)的人或動物免受意外擴散的傳染性病原體的感染。實驗設施的設計和建設(二級屏障)良好的實驗設施設計和建設除110實驗設施的設計和建設(二級屏障)

采用何種二級屏障取決于對特定病原體傳播性的危險評估。直接與病原體的接觸,或通過污染的工作環(huán)境不小心接觸到病原體。這些實驗室的二級屏障包括:將實驗室工作區(qū)與公共通道分開;滅菌設施(如高壓滅菌倉)以及洗手設施。實驗設施的設計和建設(二級屏障)采用何種二級屏障取決于對111實驗設施的設計和建設(二級屏障)

當存在接觸傳染性氣溶膠發(fā)生感染的危險時,就必須采用更高水平的初級防擴散措施和更多的二級屏障,以防止傳染性病原體向環(huán)境擴散。包括特殊通風系統(tǒng)、空氣處理系統(tǒng)、受控的人員活動區(qū)和氣壓過渡艙。實驗設施的設計和建設(二級屏障)當存在接觸傳染性氣溶膠發(fā)生112實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括113實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括114實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括115實驗室安全管理規(guī)程及實驗室環(huán)境污染的概括116病原體及生物安全程度分級對于操作一種特定的病原體,根據(jù)病原體或毒素的毒力、致病性、生物穩(wěn)定性、傳播途徑,病原體的傳染性,實驗室的性質(zhì)或職能,涉及病原體的操作步驟和方法,病原體的地方流行性,有效的疫苗和治療方法的可用性來確定安全程度分級。病原體及生物安全程度分級對于操作一種特定的病原體,根據(jù)病原體117國家對實驗室安全的要求國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準,實驗室應該符合國家的標準和要求實驗室的設立單位及其主管部門負責實驗室日?;顒拥墓芾恚袚⒔∪踩芾碇贫?,檢查、維護實驗設施、設備??刂茖嶒灨腥镜穆氊焽覍嶒炇野踩囊髧覍嵭薪y(tǒng)一的實驗室生物安全標準,實驗118病原微生物的分類和管理根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度,將病原微生物分為四級:第一類病原微生物是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物,以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類病原微生物是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物或者動物之間傳播的微生物。病原微生物的分類和管理根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或119病原微生物的分類和管理第三類病原微生物,是指能夠引起人或者動物疾病,但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構成嚴重危害,傳播風險有限,實驗室感染后很少引起嚴重疾病,并且具備有效的治療和預防措施的微生物。第四類病原微生物是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物第一、第二類病原微生物通稱高致病性病原微生物。病原微生物的分類和管理第三類病原微生物,是指能夠引起人或者動120采集病原微生物樣本具備的條件具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護水平相適應的設備具有掌握相關專業(yè)知識和操作技能的工作人員具有有效的防止病原微生物擴散和感染的措施具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術方法和手段。對樣本的來源、采集過程和方法等作詳細記錄采集病原微生物樣本具備的條件具有與采集病原微生物樣本所需要的121炭疽桿菌任何操作炭疽桿菌的工作都要求特殊安全考慮,因為它可能會被用于生物恐怖主義活動。自然及實驗感染的動物對實驗室人員及動物飼養(yǎng)員會造成潛在的威脅。炭疽桿菌任何操作炭疽桿菌的工作都要求特殊安全考慮,因為它可能122

實驗室危害

這種病原體可以存在于血液、傷口滲出物、腦脊液、胸水和痰液中,極少存在于尿液和糞便中。完整或破損的皮膚直接和間接接觸培養(yǎng)物、污染的實驗室臺面、意外的胃腸道外接種、以及在將少情況下接觸有傳染性的氣溶膠等是對實驗室人員的主要危害。實驗室危害這種病原體可以存在于血液、傷口滲出物、腦脊液、123推薦的預防措施

建議在使用臨床樣本的實驗操作及感染性培養(yǎng)物的定量診斷中,應用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。建議采用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。對于涉及“生產(chǎn)數(shù)量或濃度”的培養(yǎng)物的工作,以及產(chǎn)生氣溶膠可能性較高的實驗操作,建議采用BSL—3級水平的操作技術、防擴散設備和設施。推薦的預防措施建議在使用臨床樣本的實驗操作及感染性培養(yǎng)物的124推薦的預防措施

有可預防的疫苗,除了經(jīng)常操作臨床樣本或培養(yǎng)物的人員,不推薦對所有實驗室人員進行免疫。建議應用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。推薦的預防措施有可預防的疫苗,除了經(jīng)常操作臨床樣本或培養(yǎng)物125布氏桿菌屬

這種病原體可以存在于血液、腦脊液和精液中,有時也可存在于尿液中。大部分實驗室相關性感染發(fā)生在研究機構,主要是由于接觸了大量生長的布氏桿菌。對于操作含有或可能含有致病性布氏桿菌的人類或動物的臨床樣本的工作,建議應用BSL—2級水平的操作技術。布氏桿菌屬這種病原體可以存在于血液、腦脊液和精液中,有時也126破傷風桿菌實驗室危害意外的胃腸道外接種和攝入破傷風毒素是對實驗室人員的主要危害。推薦的預防措施對于涉及操作培養(yǎng)物或毒素的工作,建議采用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。破傷風桿菌實驗室危害意外的胃腸道外接種和攝入破傷風毒素是127白喉棒狀桿菌實驗室危害這種病原體可以存在于鼻、咽喉部(扁桃體)、咽部、喉部和傷口滲出或分泌物中,也可存在于血液中及皮膚上。吸入、意外的胃腸道外接種以及攝入是這種病原體主要的實驗室危害。推薦的預防措施建議應用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。白喉棒狀桿菌實驗室危害這種病原體可以存在于鼻、咽喉部(扁128結核分枝桿菌、牛型結核分歧桿菌

對實驗室人員以及其他可能暴露在實驗室傳染性氣溶膠中的人員是一種危害。實驗室危害暴露在傳染性氣溶膠中是最主要的危害。結核分枝桿菌、牛型結核分歧桿菌對實驗室人員以及其他可能暴露129結核分枝桿菌

推薦的預防措施對于不產(chǎn)生氣溶膠的臨床樣本的操作,如準備制酸涂片,需要采用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。所有可能產(chǎn)生氣溶膠的實驗操作也必須在二級生物安全柜中進行。結核分枝桿菌推薦的預防措施對于不產(chǎn)生氣溶膠的臨床樣本130鼠疫桿菌

對于涉及處理可能具有感染性的臨床樣本和培養(yǎng)物的實驗操作,建議采用BSL—2級水平的操作技術、防擴散設備和設施。鼠疫桿菌對于涉及處理可能具有感染性的臨床樣本和培養(yǎng)物的實驗131實驗室生物安全等級標準

一級和二級生物安全標準

診斷和衛(wèi)生保健實驗室(以公共衛(wèi)生、臨床或醫(yī)院為基礎的)必須設計為二級或更高級生物安全水平。由于沒有一種實驗室能夠完全地控制其所接受的樣品,實驗室的操作人員可能會偶爾和意外地暴露于比預期更高危險度的微生物。因此,在制定生物安全計劃和政策時要注意到這種可能性。在某些國家,臨床實驗室必須要經(jīng)過鑒定授權。全世界范圍都應采納并實行生物安全預防的普遍原則。實驗室生物安全等級標準一級和二級生物安全標準132準入規(guī)定(1)在處理危險度2級或更高危險度級別的微生物時,在房間門上應標有國際通用的生物危害警告標志。(2)只有經(jīng)批準的人員方可進入實驗室工作區(qū)域。(3)實驗室的門應隨時關閉。(4)16歲以下人員不應當被批準或允許進入實驗室工作區(qū)域。(5)進入動物房應當經(jīng)過特別批準。(6)與實驗室工作無關的動物不許帶入實驗室。(7)應當在實驗室內(nèi)外清楚地張貼“禁止吸煙”、“禁止進食”以及“禁止喝水”的標志。準入規(guī)定(1)在處理危險度2級或更高危險度級別的微生物時,在133個體防護(1)在生物安全實驗室工作時,任何時候都必須穿著連體衣、隔離服或制服。(2)在進行可能直接或意外接觸到血液樣品、感染性物質(zhì)或感染性動物的操作時,應當戴合適的手套。用完后,應先消毒再摘除手套,然后必須再次洗手。(3)在處理完感染性實驗材料和動物后,以及在離開實驗室工作區(qū)域前,都必須洗手。(4)為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害,必須戴安全眼鏡、面罩(面具)或其他防護設備。個體防護(1)在生物安全實驗室工作時,任何時候都必須穿著連體134個體防護(5)嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室,如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間。(6)不應在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。(7)禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、化妝和清洗隱形眼鏡。(8)禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。(9)實驗室內(nèi)的防護服不應當和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。個體防護(5)嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室,如去餐廳、咖啡135操作規(guī)程(1)嚴禁用口吸移液管。(2)嚴禁將實驗材料置于口內(nèi),嚴禁舔標簽。(3)所有的技術操作要按盡量減少氣溶膠和液滴形成的方式來進行。生成氣溶膠的可能性增大時,應在生物安全柜中進行操作。(4)應限制使用皮下注射針和注射器。除了進行腸道外注射或抽取實驗動物體液,皮下注射針和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。操作規(guī)程(1)嚴禁用口吸移液管。136操作規(guī)程(5)出現(xiàn)溢出事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時,必須要向?qū)嶒炇抑鞴軋蟾?。實驗室應保存這些事件或事故的書面報告。(6)必須制定關于如何處理溢出物的書面操作規(guī)程,并予以遵守執(zhí)行。操作規(guī)程(5)出現(xiàn)溢出事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時,137實驗室工作區(qū)(1)實驗室應保持干凈整潔,和實驗無關的物品嚴禁擺放在內(nèi)。(2)發(fā)生具有潛在危險性的材料溢出以及在每天工作結束之后,都必須要清除工作臺面的污染。(3)所有受到污染的材料、樣品和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前,必須清除污染。(4)在進行包裝和運轉時必須要遵循國家和/或國際的相關規(guī)定。(5)如果窗戶可以打開,則應安裝可防止節(jié)肢動物進入的紗窗。實驗室工作區(qū)(1)實驗室應保持干凈整潔,和實驗無關的物品嚴禁138生物安全管理(1)實驗室主任(對實驗室直接負責的人員)負責制定和采用生物安全管理計劃、安全或操作手冊。(2)實驗室主管(向?qū)嶒炇抑魅螀R報)應當保證提供常規(guī)的實驗室安全培訓。(3)要將生物安全實驗室的特殊危害告知實驗室人員,同時要求他們熟讀生物安全或操作手冊,并遵循標準的操作和規(guī)程。實驗室主管應當確保所有實驗室人員都了解這些要求。實驗室內(nèi)應備有安全或操作手冊。生物安全管理(1)實驗室主任(對實驗室直接負責的人員)負責制139生物安全管理(4)在適當?shù)那闆r下,應當制定節(jié)肢動物和嚙齒動物的控制方案。(5)如果需要的話,應當為所有實驗室人員提供適宜的醫(yī)學評估、監(jiān)測和治療,應當保存相應的醫(yī)學資料。(6)對于實驗室人員和其他存在危險的人員,應當采集本底血清樣品,同時按照國家和地方的相關規(guī)定加以適當保存。根據(jù)所操作的微生物和實驗室的運行情況,可定期收集其他樣品。生物安全管理(4)在適當?shù)那闆r下,應當制定節(jié)肢動物和嚙齒動物140實驗室的設計和設施在設計實驗室和安排具體的實驗工作時,對于那些可能造成安全問題的情況要加以特別關注,這些情況包括:—氣溶膠的形成—處理大量和/或高濃度微生物—人員和儀器設備過多—嚙齒動物和節(jié)肢動物的孽生—未經(jīng)允許人員進入實驗室—工作流程:一些特殊樣品和試劑的使用實驗室的設計和設施在設計實驗室和安排具體的實驗工作時,對于那141設計特征(1)必須要為實驗室安全運行、清潔和維護提供充足的空間。(2)實驗室墻壁、天花板和地板應當光滑、易清潔、不滲液以及耐化學品和消毒劑的腐蝕。地板應當防滑,同時應盡可能地避免管線暴露在外和有積塵。(3)實驗臺面應密封成一體,不滲液,可耐消毒劑、酸、堿和有機溶劑的腐蝕,并能中等程度耐熱。(4)應保證實驗室內(nèi)操作時間的照明,避免不必要的反光和閃光。設計特征(1)必須要為實驗室安全運行、清潔和維護提供充足的空142設計特征(5)實驗室器具應當堅固耐用,在實驗臺、生物安全柜和其他設備之間及其下面要保證有足夠的空間以供清潔衛(wèi)生。(6)應當有足夠的儲存空間來擺放隨時使用的物品,以免在實驗臺和走廊內(nèi)造成混亂。還應當在實驗室工作區(qū)外提供其他可長期使用的儲存空間。(7)應當為安全地操作及儲存溶劑、放射性物質(zhì)提供足夠的空間和設施。(8)在實驗室的工作區(qū)外應當有存放外衣和私人物品的設施。設計特征(5)實驗室器具應當堅固耐用,在實驗臺、生物安全柜和143設計特征(9)在實驗室的工作區(qū)外應當有進食、飲水和休息的場所。(10)每個實驗室都應有洗手池,應盡可能采用沖洗,洗手池最好安裝在出口處。(11)實驗室的門應有可視窗,可以自動關閉,并達到適當?shù)姆阑鸬燃?。?2)在實驗室所在的建筑內(nèi)應當配備高壓滅菌器。(13)安全系統(tǒng)應當包括消防、應急供電、應急淋浴以及洗眼設施。設計特征(9)在實驗室的工作區(qū)外應當有進食、飲水和休息的場所144設計特征(14)應當配備具有適當裝備并易于進入的急救區(qū)或急救室。(15)在處理危險度1級和2級的微生物時,實驗室不需特殊的通風設備。但是在設計新的設施時,應當考慮要設置機械通風系統(tǒng),如果沒有機械通風系統(tǒng),那么實驗室窗戶應當能夠打開,同時要安裝防蟲的紗窗。(16)必須要為實驗室提供可靠和高質(zhì)量的水。要保證實驗室和飲用水的供應管道沒有交叉連接。應當安裝止回閥(anti—backflowdevice)來保護公共飲水系統(tǒng)。設計特征(14)應當配備具有適當裝備并易于進入的急救區(qū)或急救145設計特征(17)要有可靠和充足的電力供應和應急照明,以保證人員安全離開實驗室。備用發(fā)電機對于保證重要設備的正常運轉,如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等,以及動物籠具的通風都是必要的。設計特征(17)要有可靠和充足的電力供應和應急照明,以保證人146設計特征(18)污染物品的處理方面有以下三點應當注意,以保證滿足實驗室運轉和控制污染的要求:—用于處理固體廢物的高壓滅菌器應當經(jīng)過專門設計安裝,同時要加強維護—焚燒爐也應當經(jīng)過特殊設計,同時應配備有補燃和消煙設備?!廴镜膹U水必須要經(jīng)過消毒(19)實驗室和動物房偶爾會成為某些人惡意破壞的目標。必須考慮進行物理防護和防火,必須使用堅固的門、紗窗以及門禁系統(tǒng)。適當時還應使用其他措施來加強安全防范。設計特征(18)污染物品的處理方面有以下三點應當注意,以保證147實驗室設備

—在設計上應能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸。—用防水、耐腐蝕并符合結構要求的材料來制造?!瞥善窇獰o毛刺、銳角以及會被無意移動的部分。—設備的設計、建造與安裝應便于操作、易于維護、清潔、清除污染和質(zhì)量檢驗。應盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。實驗室設備—在設計上應能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的148

基本生物安全設施

(1)移液輔助器—避免用口吸的方式移液。有設計不同的多種產(chǎn)品可供使用。(2)生物安全柜,在以下情況使用:—處理感染性物質(zhì);如果使用密閉的安全離心杯,并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣,則這類材料也可在實驗室的開放空間離心—空氣傳播感染的危險增大時—進行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時;這些操作包括離心、研磨、混勻、劇烈搖動、超聲破碎、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器、動物鼻腔接種以及從動物或卵胚采集感染性組織基本生物安全設施(1)移液輔助器—避免用口吸的方式移液。149基本生物安全設施(3)一次性塑料接種環(huán),也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán),以降低氣溶膠的產(chǎn)生。(4)螺口試管及瓶子。(5)用于清除感染性物質(zhì)污染的高壓滅菌器。(6)盡量使用一次性塑料吸管,避免使用玻璃制品。(7)在投入使用前,像高壓滅菌器和生物安全柜等設備必須用正確方法進行驗收(通常應由有資質(zhì)的人員進行)。應參照生產(chǎn)商的說明書定期重檢。基本生物安全設施(3)一次性塑料接種環(huán),也可在生物安全柜內(nèi)使150衛(wèi)生保健和醫(yī)學監(jiān)測

實驗室有責任通過實驗室主任來確保實驗室全體工作人員接受適當?shù)慕】当O(jiān)測。監(jiān)測的目的是監(jiān)控職業(yè)獲得性疾病。為達到這些目的,應進行如下工作:—根據(jù)需要提供主動或被動免疫—促進實驗室感染的早期檢測—應禁止高敏感人群(如孕婦)在高危險實驗室中工作—提供有效的個體防護裝備和方法衛(wèi)生保健和醫(yī)學監(jiān)測實驗室有責任通過實驗室主任來確保實驗室全151操作危險度1級微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南

歷史證據(jù)表明,這類微生物不太可能引起人類疾病或嚴重的動物疾病。但理想的做法是所有實驗室工作人員進行上崗前的體檢,并記錄其病史。疾病和實驗室意外事故應快速報告,所有工作人員都應意識到應用規(guī)范的實驗室操作技術的重要性。操作危險度1級微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南歷史證據(jù)表明152操作危險度2級微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南(1)必須有錄用前或上崗前的體檢。記錄個人病史,并建議進行一次臨床檢查,保留本底血清樣本。(2)實驗室管理人員要保留工作人員的疾病和缺勤紀錄,實驗室工作人員及其醫(yī)學顧問有責任通知實驗室主任所有因疾病而導致的缺勤。(3)育齡期婦女應知道某些微生物的職業(yè)暴露對未出生孩子的危害,如風疹病毒。保護胎兒的正確措施因婦女所接觸的微生物而異。操作危險度2級微生物的實驗室工作人員的監(jiān)測指南(1)必須有錄153廢物處理

廢物是實驗室中將丟棄的所有物品在實驗室內(nèi),廢物最終的處理方式與其污染清除的情況是緊密相關的。對于日常用品而言,很少有污染物需要真正清除出實驗室或銷毀。大多數(shù)的玻璃器皿、儀器以及實驗服都可以重復或循環(huán)使用。廢物處理的首要原則是所有感染性物質(zhì)必須在實驗室內(nèi)清除污染、高壓滅菌或焚燒。廢物處理廢物是實驗室中將丟棄的所有物品154被丟棄前應考慮以下主要問題:是否已采取規(guī)定程序?qū)@些物品進行了有效的清除污染或消毒?如果沒有,它們是否以規(guī)定的方式包裹,以便就地焚燒或運送到其他有焚燒能力的設施處進行處理?丟棄已清除污染的物品時,是否會對直接參與丟棄的人員,或在設施外可能接觸到丟棄物的人員造成任何潛在的生物學或其他方面的危害?被丟棄前應考慮以下主要問題:是否已采取規(guī)定程序?qū)@些物品進行155清除污染高壓滅菌是清除污染時的首選方法。需要清除污染并丟棄的物品應裝在容器(如可以高壓滅菌的塑料袋)中,并根據(jù)內(nèi)容物是否需要進行高壓滅菌和/或焚燒用顏色進行標記。其他可以除去和/或殺滅微生物的替代方法也可采用。清除污染高壓滅菌是清除污染時的首選方法。需要清除污染并丟棄的156消毒劑和化學試劑安全或操作手冊中應有針對不同的目的如何使用消毒劑的書面說明,以及每種消毒劑的生產(chǎn)廠家所推薦的稀釋度。生產(chǎn)商應提供相關文件。要確保每種消毒劑在實驗室內(nèi)具有其指明的

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