基因工程的原理和技術(shù)上課

怎樣能在大腸桿菌中生產(chǎn)出人的胰島素呢？基因工程的基本原理：讓人們感興趣的基因（目的基因）在宿主細胞中穩(wěn)定和高效表達。第二節(jié)

基因工程的原理和技術(shù)1、獲取目的基因。2、形成重組DNA分子。3、將重組DNA導入受體細胞。4、篩選含有目的基因的受體細胞。5、目的基因的表達。愛情五步曲：1、找準目標2、約會牽手3、進入殿堂4、神父作證5、愛情結(jié)晶基因工程的一般操作步驟基因工程基本操作步驟的演示：1.獲取目的基因⑴化學方法合成⑶從基因文庫獲得目的基因⑵用PCR技術(shù)擴增目的基因基因序列已知基因序列未知2.形成重組DNA分子⑴用一定的_________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個切口，露出____________。⑵用_____________切斷目的基因，使其產(chǎn)生_________________。⑶將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的______處，再加入適量___________，形成了一個重組

DNA分子。限制酶粘性末端同一種限制酶切口DNA連接酶相同的粘性末端質(zhì)粒含目的基因的DNA分子同一種限制酶處理（一般）一個切口兩個黏性末端兩個切口獲得目的基因DNA連接酶重組DNA分子（重組質(zhì)粒）過程:3.將重組DNA導入受體細胞將目的基因?qū)胛⑸锛毎鸆aCl2處理受體細胞（大腸桿菌），增大細胞壁的通透性。將目的基基因?qū)肴雱游锛毤毎@微注射射法（將基因因表達載載體提純純，用顯顯微儀注注射到受受精卵中中）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化法（表達載載體導入入農(nóng)桿菌菌，再讓讓農(nóng)桿菌菌感染植植物細胞胞）將目的基基因?qū)肴胫参锛毤毎r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化法基因槍法法花粉管通通道法將目的基基因?qū)肴胫参锛毤毎沫h(huán)素抗性基因氨芐青霉素抗性基因4.篩選含有有目的基基因的受受體細胞胞如何篩選選含有胰胰島素原基因的大腸腸桿菌呢呢？ABCD把每個大大腸桿菌菌分別放放在有氨芐青霉霉素的培培養(yǎng)基中中生長，，看能否否長出菌菌落，再作出判斷。。5.目的基因因的表達達無表達產(chǎn)物無表達產(chǎn)物有表達產(chǎn)物無表達產(chǎn)物細菌的檢檢測，將將每個受受體細胞胞單獨培培養(yǎng)形成成菌落，，檢測菌菌落中是是否有目目的基因因的表達達產(chǎn)物。。淘汰無無表達產(chǎn)產(chǎn)物的菌菌落，保保留有表表達產(chǎn)物物的進一一步培養(yǎng)養(yǎng)、研究究。1）以下說說法正確確的是（（））A、所有的的限制酶酶只能識識別一種種特定的的核苷酸酸序列B、質(zhì)粒是是基因工工程中唯唯一的運運載體C、運載體體必須具具備的條條件之一一是：具具有多個個限制酶酶切點，，以便與與外源基基因連接接D、基因控控制的性性狀都能能在后代代表現(xiàn)出出來C練習2）有關(guān)基因因工程的的敘述中中，錯誤誤的是（（））A、DNA連接酶將將黏性末末端的堿堿基對連連接起來來B、限制制性內(nèi)切切酶用于于目的基基因的獲獲得C、目的基基因須由由運載體體導入受受體細胞胞D、人工工合成目目的基因因不用限限制性內(nèi)內(nèi)切酶A練習3）有關(guān)基因因工程的的敘述正正確的是是（（））A、限制酶酶只在獲獲得目的的基因時時才用B、重組質(zhì)質(zhì)粒的形形成在細細胞內(nèi)完完成C、質(zhì)粒都都可作為為運載體體D、蛋白質(zhì)質(zhì)的結(jié)構(gòu)構(gòu)可為合合成目的的基因提提供資料料D練習4）基因工程程是在DNA分子水平平上進行行設計施施工的。。在基因因操作的的基本步步驟中，，不進行行堿基互互補配對對的步驟驟是（（））A、人工合合成目的的基因B、目的基基因與運運載體結(jié)結(jié)合C、將目的的基因?qū)胧荏w體細胞D、目的基基因的檢檢測和表表達C練習人工合成成基因的的方法反轉(zhuǎn)錄法法根據(jù)已知知的氨基基酸序列列合成DNA甲硫氨酸酸——苯丙氨酸酸——色氨酸蛋白質(zhì)：：信使RNAAUGUUUUGG或AUGUUCUGG基因或DNATACAAAACCATGTTTTGGTACAAAACCATGTTTTGG或利用PCR技術(shù)擴增增目的基基因DNA合成儀DNA合合成儀能自動進進行化學學合成的的儀器，能按設計計自動連連接脫氧核苷苷酸的設備。。人工合成成基因的的方法反轉(zhuǎn)錄法法根據(jù)已知知的氨基基酸序列列合成DNA甲硫氨酸酸——苯丙氨酸酸——色氨酸蛋白質(zhì)：：信使RNAAUGUUUUGG或AUGUUCUGG基因或DNATACAAAACCATGTTTTGGTACAAAACCATGTTTTGG或基因文庫庫：將含有某種種生物不不同基因因的許多多DNA片斷，導入受受體菌的群體體中儲存，各各個受體菌分分別含有這種種生物的不同同基因，稱為為基因文庫?；蛭膸斓臉?gòu)構(gòu)建：關(guān)于基因工程程的圖片：我國生產(chǎn)的部分基因

工程疫苗和藥物轉(zhuǎn)生長激素鯉鯉魚轉(zhuǎn)基因超級小小鼠我國生產(chǎn)的部部分基因工程程疫苗和藥物物對照抗蟲轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花和普通棉花果實耐貯藏，，在25℃溫度下，可貯貯藏40－50天，較對照延延長貯藏期20－30天。轉(zhuǎn)基因耐貯藏藏番茄和普通通番茄轉(zhuǎn)基因抗除草草劑玉米施用除草劑，，雜草被殺死死，轉(zhuǎn)基因抗抗除草劑的玉玉米不受影響響（右側(cè)為未未施用除草劑劑的對照）9、靜靜夜夜四四無無鄰鄰，，荒荒居居舊舊業(yè)業(yè)貧貧。。。。12月月-2212月月-22Wednesday,December28,202210、雨中黃黃葉樹，，燈下白白頭人。。。20:43:2920:43:2920:4312/28/20228:43:29PM11、以我我獨沈沈久，，愧君君相見見頻。。。12月月-2220:43:2920:43Dec-2228-Dec-2212、故人江海海別，幾度度隔山川。。。20:43:2920:43:2920:43Wednesday,December28,202213、乍見翻疑夢夢，相悲各問問年。。12月-2212月-2220:43:2920:43:29December28,202214、他他鄉(xiāng)鄉(xiāng)生生白白發(fā)發(fā)，，舊舊國國見見青青山山。。。。28十十二二月月20228:43:29下下午午20:43:2912月月-2215、比不不了得得就不不比，，得不不到的的就不不要。。。。十二月月228:43下下午午12月月-2220:43December28,202216、行動出成成果，工作作出財富。。。2022/12/2820:43:2920:43:2928December202217、做前，，能夠環(huán)環(huán)視四周周；做時時，你只只能或者者最好沿沿著以腳腳為起點點的射線線向前。。。8:43:29下午午8:43下午午20:43:2912月-229、沒有失敗，，只有暫時停停止成功！。。12月-2212月-22Wednesday,December28,202210、很多事情努努力了未必有有結(jié)果，但是是不努力卻什什么改變也沒沒有。。20:43:2920:43:2920:4312/28/20228:43:29PM11、成成功功就就是是日日復復一一日日那那一一點點點點小小小小努努力力的的積積累累。。。。12月月-2220:43:2920:43Dec-2228-Dec-2212、世間成成事，不不求其絕絕對圓滿滿，留一一份不足足，可得得無限完完美。。。20:43:2920:43:2920:43Wednesday,December28,202213、不知知香積積寺，，數(shù)里里入云云峰。。。12月月-2212月月-2220:43:2920:43:29December28,202214、意意志志堅堅強強的的人人能能把把世世界界放放在在手手中中像像泥泥塊塊一一樣樣任任意意揉揉捏捏。。28十十二二月月20228:43:29下下午午20:43:2912月月-2215、楚塞三湘接接，荊門九派派通。。。十二月228:43下下午12月-2220:43December28,202216、少年年十五五二十十時，，步行行奪得得胡馬馬騎。。。2022/12/2820:43:2920:43:2928December202217、空空山山新新雨雨后后，，天天氣氣晚晚來來秋秋。。。。8:43:29下下午午8:43下下午午20:43:2912月月-229、楊柳散散和風，，青山澹澹吾慮。。。12月-2212月-22Wednesday,December28,202210、閱讀一切切好書如同同和過去最最杰出的人人談話。20:43:2920:43:2920:4312/28/20228:43:29PM11、越是沒有有本領的就就越加自命命不凡。12月-2220:43:2920:43Dec-2228-Dec-2212、越是無能的的人，越喜歡歡挑剔別人的的錯兒。20:43:2920:43:2920:43Wednesday,December28,202213、知知人人者者智智，，自自知知者者明明。。勝勝人人者者有有力力，，自自勝勝者者強強。。12月月-2212月月-2220:43:2920:43:29December28,202214、意志堅堅強的人人能把世世界放在在手中像像泥塊一一樣任意意揉捏。。28十十二月20228:43:29下午午20:43:2912月-2215、最具挑戰(zhàn)戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)戰(zhàn)莫過于提提升自我。。。十二月228:43下下午12月-2220:43December28,202216、業(yè)業(yè)余余生生活活要要有有意意義義，，不不要要越越軌軌。。2022/12/2820:43:2920:43:2928D