T-SHZSAQS 00153-2022 新疆南疆棉田葉螨抗藥性檢測(cè) 技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSB30團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/SHZSAQS00153—2022新疆南疆棉田葉螨抗藥性檢測(cè)技術(shù)規(guī)程新疆南疆棉田葉螨抗藥性檢測(cè)技術(shù)規(guī)程2022-10-26發(fā)布 2022-10-26實(shí)施石河子市質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì) 發(fā)布T/SHZSAQS 00153—2022T/SHZSAQS 00153—2022II目 次前言 II112范引文件 13語(yǔ)定義 1死濃度 1藥性 1性數(shù) 1螨主 13.5溫80 14劑材料 14.12驗(yàn)劑 2驗(yàn)劑 25器備 26驗(yàn)驟 2度計(jì) 2劑制 2螨集飼養(yǎng) 3螨性定 37據(jù)計(jì)分析 3算法 3歸程致中度（LC50）的算法 48性平計(jì)與估 4斑螨朱葉和截葉對(duì)分蟲(chóng)螨劑敏基線 4性數(shù)計(jì)算 4藥水的估 4附錄A（料附）斑葉對(duì)分蟲(chóng)螨的敏性線 5附錄B（料附）砂葉對(duì)分蟲(chóng)螨的敏性線 6附錄C（料附）形葉對(duì)分蟲(chóng)螨的敏性線 7T/SHZSAQS 00153—2022T/SHZSAQS 00153—2022IIII前 言《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第本文件起草單位：塔里木大學(xué)。T/SHZSAQS 00153—2022T/SHZSAQS 00153—2022PAGEPAGE7新疆南疆棉田葉螨抗藥性檢測(cè)技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了新疆南疆棉田葉螨抗藥性檢測(cè)的術(shù)語(yǔ)與定義及試劑與材料、儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)步驟、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析、抗性水平的計(jì)算與評(píng)估等。適用于新疆南疆棉田葉螨抗藥性檢測(cè)。本文件無(wú)規(guī)范性引用文件。下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。藥劑殺死葉螨種群中一半個(gè)體所需要的濃度，稱為致死中濃度（Medianlethalconcentration：LC50），單位mg/L?？顾幮裕≧esistance）：昆蟲(chóng)具有忍受殺死正常種群大多數(shù)個(gè)體的藥量的能力在其種群中發(fā)展起來(lái)的現(xiàn)象?？顾幮砸话阌每剐员稊?shù)（Resistanceratio，RR）表示，常采用供試驗(yàn)種群的致死中濃度（LC50）與敏感種群的致死中濃度（LC50）的比值。葉螨寄主是指給葉螨提供食物和生活場(chǎng)所的植物。80吐溫80是一種表面活性劑和乳化劑，能幫助藥劑溶解在水中和促進(jìn)藥劑進(jìn)入葉螨體內(nèi)。葉螨：二斑葉螨、朱砂葉螨和截形葉螨。葉螨寄主：野外寄主為棉苗，室內(nèi)寄主為豇豆苗。殺蟲(chóng)殺螨劑原藥。吐溫80、丙酮，均為分析純。主要儀器設(shè)備見(jiàn)表1。表1主要儀器設(shè)備主要儀器設(shè)備規(guī)格電子天平精度0.1mg容量瓶20mL、500mL移液槍與槍頭1000μL、100μL離心管15mL毛筆零號(hào)培養(yǎng)皿9cm蟲(chóng)籠40×40×40cm，100目打孔器2×2cm噴霧塔Potter體視顯微鏡配制5mg/L、50mg/L和500mg/L三個(gè)濃度做預(yù)試驗(yàn)，確定藥劑的濃度范圍。然后配制5～7個(gè)濃度梯度的藥劑進(jìn)行葉螨抗性測(cè)定，并用丙酮與吐溫80水溶液混合液做對(duì)照。稱取20.0mg原藥，溶解到20mL丙酮中，配制成1000mg/L的母液；稱取0.5g吐溫80，溶解到500mL水中，配成1‰吐溫80水溶液。而后用1‰吐溫80水溶液稀釋母液。3～551000頭。將葉螨隔離飼養(yǎng)在室內(nèi)未接觸藥劑的豇豆苗上，并擴(kuò)大種群，飼養(yǎng)條件為：溫度26±1℃，相對(duì)濕度55%～75%，光照周期為14∶10。室內(nèi)飼養(yǎng)時(shí)間需控制在30天內(nèi)，以避免抗性衰退。首先，制作葉碟：在9cm2cm203：24首先，制作葉碟；其次，挑取50頭健康雌成螨置葉片上，產(chǎn)卵3h，移除雌成螨；6h后，噴施藥劑；6天后記錄卵總數(shù)和死亡數(shù)。葉螨死亡鑒別：6天后，未孵化的視為死亡。（1）5%～20%，（2）20%…………（1）式中：P1 （；K N …………………（2）式中：P2 表死率，位百；Pt 示理亡率單分（；P0 表對(duì)組亡率單分（（LC50）試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行計(jì)算，直接導(dǎo)入試驗(yàn)原始數(shù)據(jù)即可得出供試藥劑對(duì)二斑葉螨、朱砂葉螨和截形葉螨的LC50、95%置信限、斜率和卡方值等。二斑葉螨對(duì)部分殺蟲(chóng)殺螨劑的敏感基線見(jiàn)附錄A。8.1.2朱砂葉螨對(duì)部分殺蟲(chóng)殺螨劑的敏感基線見(jiàn)附錄B。8.1.3截形葉螨對(duì)部分殺蟲(chóng)殺螨劑的敏感基線見(jiàn)附錄C。供試種群的抗性倍數(shù)是根據(jù)供試種群的LC50和敏感種群的LC50按照公式（3）計(jì)算得出的?！?）式中：RR表示供試種群的抗藥性倍數(shù)。按照表2中抗藥性水平的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)供試種群的抗藥性水平作成評(píng)估。表2抗藥性水平的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)抗藥性水平抗藥性倍數(shù)（RR）敏感0＜RR≤5.0低水平抗藥性5.0＜RR≤10.0中等水平抗藥性10.0＜RR≤40.0高水平抗藥性40.0＜RR≤160.0極高水平抗藥性RR＞160.0附 錄 A 資性錄）二斑葉螨對(duì)部分殺蟲(chóng)殺螨劑的敏感性基線藥劑名稱斜率±標(biāo)準(zhǔn)誤置信限），mg/L丁氟螨酯3.16±0.971.28（0.83～1.97）甲氰菊酯3.41±0.51389.78（305.23～497.75）阿維菌素8.57±0.830.092（0.059～0.14）噠螨靈6.43±0.6957.48（47.27～69.90）乙唑螨腈4.81±0.384.18（3.19～5.48）聯(lián)苯肼酯3.27±0.7227.73（20.82～36.93）乙螨唑2.72±0.830.41（0.28～0.60）螺蟲(chóng)乙酯5.66±0.8110.47（8.07～13.58）附 錄 資性錄）朱砂葉螨對(duì)部分殺蟲(chóng)殺螨劑的敏感性基線藥劑名稱斜率±標(biāo)準(zhǔn)誤信限），mg/L丁氟螨酯2.37±0.672.54（2.31～2.79）甲氰菊酯4.99±0.94456.30（337.01～592.59）阿維菌素7.28±1.210.12（0.093～0.15）噠螨靈2.19±0.5430.26（23.73～38.60）乙唑螨腈2.55±0.333.57（2.03～6.27）聯(lián)苯肼酯6.31±0.8810.61（8.51～13.22）乙螨唑9.26±0.670.62（0.40～0.96）螺蟲(chóng)乙酯6.24±0.524.09（3.17～5.28）附 錄 C 資性錄） 藥劑名稱斜率±標(biāo)準(zhǔn)誤信限），mg/L丁氟螨酯1.80±0.150.66（0.48～0.91）阿維菌素1.290.42（0.28～0.64